检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2019年第6期35卷 855-863页

作者：鲁福娜王文玲张雅薇童贻刚刘科芳黄保英沈晓玲谭文杰内蒙古医科大学基础医学院微生物教研室呼和浩特010110 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫健委生物安全重点实验室北京102206 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 澳门大学健康研究院中国澳门特别行政区999078

流感小鼠适应毒株及感染模型是研究流感病毒致病机理、评价抗流感病毒药物和疫苗效果的重要工具。为建立甲型流感病毒X31(H3N2)的鼠肺适应毒株,并探讨其在小鼠适应过程中毒力增强的分子机制,本研究将X31在BALB/c小鼠肺组织中连续传代,... 详细信息

流感小鼠适应毒株及感染模型是研究流感病毒致病机理、评价抗流感病毒药物和疫苗效果的重要工具。为建立甲型流感病毒X31(H3N2)的鼠肺适应毒株,并探讨其在小鼠适应过程中毒力增强的分子机制,本研究将X31在BALB/c小鼠肺组织中连续传代,通过观察病毒滴度测定、感染小鼠症状变化、体重改变和致死力等指标,发现X31经过鼠肺连续传代10次以后,病毒毒力逐渐增强,与原代病毒相比,鼠肺中病毒滴度提高10倍,半数致死量(50%lethal dose,LD50)提高大于1 000倍。确定获得高致病力的鼠肺适应毒株(Mouse adapted X31,X31MA);对X31MA毒株全基因组测序发现,血凝素(Hemagglutinin,HA)基因出现3个有义突变(P221H、V309I、K411T),聚合酶碱性蛋白2(Basic protein 2,PB2)基因出现1个有义突变(M483T)。结果表明,通过在小鼠肺组织中连续传代X31(H3N2)致病力增强,其HA和PB2蛋白中四个适应性突变位点可能与流感病毒X31MA毒力增加相关。本研究为流感疫苗评价及致病机制研究提供了重要技术支持。

关键词：甲型流感病毒流感病毒重配株X31(H3N2) 鼠肺适应突变位点致病力

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Q热疫苗研究

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中国人兽共患病学报 2018年第2期34卷 171-174,181页

作者：熊小路焦俊温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原生物生物安全国家重点实验室北京100071

Q热(Q fever)为一种世界性分布的重要人兽共患病,疫苗接种是预防Q热的最有效手段。专性细胞内寄生的贝氏柯克斯体是Q热的病原体,灭活I相贝氏柯克斯体Q热疫苗(WCV)免疫保护效能几乎为100%,但是其免疫副反应强。氯仿-甲醇提取贝氏柯克斯体... 详细信息

Q热(Q fever)为一种世界性分布的重要人兽共患病,疫苗接种是预防Q热的最有效手段。专性细胞内寄生的贝氏柯克斯体是Q热的病原体,灭活I相贝氏柯克斯体Q热疫苗(WCV)免疫保护效能几乎为100%,但是其免疫副反应强。氯仿-甲醇提取贝氏柯克斯体(CMR)和三氯醋酸提取贝氏柯克斯体可溶性抗原(TCA)Q热疫苗保留灭活Q热疫苗的免疫保护效能,且免疫副反应显著减轻。但CMR和TCA Q热疫苗均需要用鸡胚大量培养贝氏柯克斯体,需要在高等级生物防护实验室采用复杂步骤提取、纯化贝氏柯克斯体,这些使Q热疫苗的生产成本高、批量生产难。近十年来,国内外Q热疫苗研究着力于分子疫苗,并已经由研究贝氏柯克斯体保护性抗原转移到筛选能诱导特异性细胞免疫应答的CD4+和CD8+T细胞表位上,以期望T细胞表位在机体内高效表达,诱导机体产生良好的抗Q热保护性免疫应答。

关键词： Q热疫苗贝氏柯克斯体保护性抗原 T细胞表位

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寨卡病毒可作为溶瘤病毒特异杀伤胶质瘤干细胞

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中国科学：生命科学 2018年第10期48卷 1126-1127页

作者：陈奇秦成峰军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室.北京100071

胶质母细胞瘤（glioblastoma）是一种恶性程度最高的原发性脑肿瘤．由于肿瘤生长快、侵袭性强，常规手术、放疗、化疗等治疗后复发率极高，预后差，绝大多数患者生存期中位数低于两年．胶质母细胞瘤的成因复杂，最新研究显示胶质瘤干细... 详细信息

胶质母细胞瘤（glioblastoma）是一种恶性程度最高的原发性脑肿瘤．由于肿瘤生长快、侵袭性强，常规手术、放疗、化疗等治疗后复发率极高，预后差，绝大多数患者生存期中位数低于两年．胶质母细胞瘤的成因复杂，最新研究显示胶质瘤干细胞（glioblastomastemcells，GSCsl可能在其中发挥了关键作用．胶质瘤干细胞是一群具备无限增殖、自我更新和多向分化等类干细胞潜能的细胞，不仅参与促进肿瘤血管生成，而且能够抵抗放化疗的杀瘤作用．以胶质瘤干细胞为靶标的新型疗法成为当前研究的热点之一．

关键词：干细胞胶质瘤病毒杀伤肿瘤血管生成肿瘤生长多向分化自我更新

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LAMP技术在感染乙脑病毒致倦库蚊混合样本检测中的应用

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第1期26卷 36-40页

作者：郭晓霞高剑李春晓邢丹董言德赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071

为建立媒介蚊虫自然感染种群样本携带病原体快速灵敏的检测技术,本研究将实验室经口感染乙脑病毒的致倦库蚊阳性样品和未感染乙脑病毒的阴性样品按一定比例混合成混合样本,分别采用环介导等温扩增技术(Loop Mediated Isothermal Amplifi... 详细信息

为建立媒介蚊虫自然感染种群样本携带病原体快速灵敏的检测技术,本研究将实验室经口感染乙脑病毒的致倦库蚊阳性样品和未感染乙脑病毒的阴性样品按一定比例混合成混合样本,分别采用环介导等温扩增技术(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time Fluorescent Quantitative PCR,qPCR)检测方法,对感染乙脑病毒的致倦库蚊混合样本进行检测。结果显示:当阳性样本在混合样本中所占比例为0.01%时,LAMP仍然可检测到病原体;定量PCR的最低检出比例是阳性样本在混合样本中所占0.14%以上。通过进一步优化反应体系各组分的浓度、反应时间和温度,建立了灵敏性高的LAMP扩增方法。

关键词： LAMP 乙脑病毒混合样本

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基于原代小脑颗粒细胞的A型肉毒毒素活性分析法的建立

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军事医学 2018年第1期42卷 57-59页

作者：王建新李崭何志利黄洁李涛王慧军事科学院军事医学研究微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的分离、培养SD大鼠原代小脑颗粒细胞,用于评价A型肉毒毒素活性。方法将出生后6~8 d的SD大鼠小脑颗粒细胞培养5~7 d后用A型肉毒毒素处理,采用免疫荧光法进行检测并评价毒素的活性,Western印迹法分析毒素活性与剂量关系。结果与结论成... 详细信息

目的分离、培养SD大鼠原代小脑颗粒细胞,用于评价A型肉毒毒素活性。方法将出生后6~8 d的SD大鼠小脑颗粒细胞培养5~7 d后用A型肉毒毒素处理,采用免疫荧光法进行检测并评价毒素的活性,Western印迹法分析毒素活性与剂量关系。结果与结论成功培养了大鼠小脑颗粒细胞,并在原代神经细胞水平建立了A型肉毒毒素活性分析法,测定了毒素活性剂量关系,为进一步解析肉毒毒素作用的生化机制提供了技术手段。

关键词： A型肉毒毒素原代小脑颗粒细胞活性分析

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淡色库蚊中溴氰菊酯和生物丙烯菊酯抗性发展与击倒抗性基因频率之间的关系（英文）

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第3期26卷 151-157页

作者：宋锋林李春晓董言德赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071 大连海关辽宁大连116001

使用溴氰菊酯和生物丙烯菊酯对采自北京的淡色库蚊蚊株进行抗药性筛选,筛选时,4龄幼虫被置于LC 50浓度值的水体中饲养。经过7代的不间断筛选,蚊虫对溴氰菊酯和生物丙烯菊酯的抗性倍数分别上升了12.9倍和4.8倍,对应敏感株,抗性倍数分别为... 详细信息

使用溴氰菊酯和生物丙烯菊酯对采自北京的淡色库蚊蚊株进行抗药性筛选,筛选时,4龄幼虫被置于LC 50浓度值的水体中饲养。经过7代的不间断筛选,蚊虫对溴氰菊酯和生物丙烯菊酯的抗性倍数分别上升了12.9倍和4.8倍,对应敏感株,抗性倍数分别为217.8倍和41.6倍。PCR检测结果显示,kdr抗性基因的频率在逐代上升。F 7代时,溴氰菊酯筛选株和生物丙烯菊酯筛选株的kdr抗性基因频率已分别上升至98.96%和97.87%。结果表明,Phe1014的抗性纯合子频率和抗性杂合子频率均与LC 50值之间具有显著相关性。本文证明了高浓度的拟除虫菊酯杀虫剂筛选会使Phe1014突变频率快速的上升。

关键词：淡色库蚊溴氰菊酯生物丙烯菊酯杀虫剂抗药性击倒抗性

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云南省边境地区卵形硬蜱中中华基因型伯氏疏螺旋体的检出和鉴定

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中国媒介生物学及控制杂志 2019年第5期30卷 519-523页

作者：段兴德何志海高子厚蒋宝贵龚正达张云邵宗体江佳富孙毅刘洪波姚明国王帆杜春红云南省地方病防治所医学动物昆虫防制科云南大理671000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对云南省耿马傣族佤族自治县(耿马县)采集的蜱进行伯氏疏螺旋体分子生物学检测,为当地莱姆病的调查提供参考。方法对2016年4月在云南省耿马县采集的游离蜱单只进行DNA提取后,采用巢式PCR扩增伯氏疏螺旋体5S^23S rRNA间隔区作为初筛... 详细信息

目的对云南省耿马傣族佤族自治县(耿马县)采集的蜱进行伯氏疏螺旋体分子生物学检测,为当地莱姆病的调查提供参考。方法对2016年4月在云南省耿马县采集的游离蜱单只进行DNA提取后,采用巢式PCR扩增伯氏疏螺旋体5S^23S rRNA间隔区作为初筛实验,阳性者进一步检测16S rRNA和FLA鞭毛蛋白基因确证。结果 3种蜱共94只,检出阳性14只,阳性率为14.89%。阳性蜱均为卵形硬蜱,不同性别间差异无统计学意义(χ~2=0.746,P=0.388)。锐跗硬蜱和金泽革蜱均未检出阳性。检出的伯氏疏螺旋体3个目的基因片段序列均与中华基因型伯氏疏螺旋体同源性达98%~99%,构建的系统发育树显示,与我国四川、安徽省检出的中华基因型伯氏疏螺旋体聚在一个分支上;与日本疏螺旋体接近,而阿弗西尼疏螺旋体、狭义伯氏疏螺旋体、法雷斯疏螺旋体等基因型聚在外围。结论耿马县采集的卵形硬蜱携带中华基因型伯氏疏螺旋体,其宿主和媒介的种类、分布及其对人的致病性等,值得进一步调查研究。

关键词：卵形硬蜱伯氏疏螺旋体中华基因型伯氏疏螺旋体

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检测4种血流感染病原体的靶向序列富集与测序相结合技术方法评价

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军事医学 2018年第1期42卷 53-56页

作者：李倩刘鹏张彦张超黄文华郑玉玲王洪权姜永强军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的应用Ampliseq技术,建立可同时检测金黄色葡萄球菌(***)、表皮葡萄球菌(***)、肺炎克雷伯菌(***)、单核细胞增生李斯特菌(***)4种常见血流感染病原体的目标片段特异性富集结合二代测序的方法,为准确、快速检测血流感染提供有效的依... 详细信息

目的应用Ampliseq技术,建立可同时检测金黄色葡萄球菌(***)、表皮葡萄球菌(***)、肺炎克雷伯菌(***)、单核细胞增生李斯特菌(***)4种常见血流感染病原体的目标片段特异性富集结合二代测序的方法,为准确、快速检测血流感染提供有效的依据。方法构建模拟临床样本评价该法的最低检出限(LOD),与实际掺入菌量比较,评价其灵敏度和特异性。结果与结论 Ampliseq法的灵敏度为95.38%,特异性为95.45%,Kappa值为0.839~1.000,LOD均可达到101数量级CFU/ml。该法可在15 h内在同一反应体系内快速检测4种常见血流感染病原体,灵敏度和特异性均较好。

关键词：血流感染 Ampliseq 二代测序目标序列富集

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田鼠型鼠疫菌血液存活能力的改变对豚鼠毒力的影响

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军事医学 2018年第7期42卷 545-549页

作者：纪宇欣周亚洲李璐杨瑞馥王效义军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因。方法通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血... 详细信息

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因。方法通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血清共孵育,分别测定了鼠疫菌在活性血清和补体失活血清中的存活能力。结果田鼠型鼠疫菌在小鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力明显高于在豚鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力。在小鼠和豚鼠血清中鼠疫菌存活能力明显高于在两种动物补体灭活血清中的存活能力。结论布氏田鼠型鼠疫菌在豚鼠血液中的存活能力下降导致了其对豚鼠低毒。在同一种动物血清中,灭活补体不仅不能使鼠疫菌血清存活能力提高反而使血清存活能力降低。

关键词：布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌小鼠豚鼠血清补体

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上海口岸截获的粉蝇属DNA条形码鉴定及系统发育研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第1期26卷 41-46页

作者：杜鹃邓耀华张子龙赵彤言李深伟田桢干上海国际旅行卫生保健中心上海200335 上海浦东国际机场海关上海201202 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

使用传统形态学分类方法进行干制标本的物种鉴定通常比较困难。本文按照《国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定操作规程》对上海口岸截获的粉蝇属干制标本进行DNA条形码研究。经BOLD System v4比对,结果显示所得序列分别属于5个种:粗野粉... 详细信息

使用传统形态学分类方法进行干制标本的物种鉴定通常比较困难。本文按照《国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定操作规程》对上海口岸截获的粉蝇属干制标本进行DNA条形码研究。经BOLD System v4比对,结果显示所得序列分别属于5个种:粗野粉蝇Pollenia rudis、伪粗野粉蝇***、游荡粉蝇***、匈牙利粉蝇***和Pollenia sp.。引入1条COⅠ序列作为外群对全部序列构建系统发育树(NJ树),结果显示不同物种各自聚为一支。因此,COⅠ条形码技术可以弥补传统形态学分类方法的不足,提高蝇类干制标本鉴定的成功率。

关键词： COⅠ基因 DNA条形码粉蝇属国境口岸

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