检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科学：生命科学 2013年第5期43卷 397-403页

作者：王锡乐熊小路 Stephen Greaves John Stenos 温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 Australian Rickettsial Reference Laboratory Barwon Health Geelong HospitalGeelong VIC3220Australia

贝氏柯克斯体是Q热的病原菌.为了鉴定贝氏柯克斯体的免疫反应蛋白,本实验室研发了该病原体的亚基因组蛋白芯片.该芯片由101个贝氏柯克斯体的毒力相关重组蛋白构成,用于贝氏柯克斯体感染小鼠血清及Q热患者血清对这些蛋白质做血清学分析.... 详细信息

贝氏柯克斯体是Q热的病原菌.为了鉴定贝氏柯克斯体的免疫反应蛋白,本实验室研发了该病原体的亚基因组蛋白芯片.该芯片由101个贝氏柯克斯体的毒力相关重组蛋白构成,用于贝氏柯克斯体感染小鼠血清及Q热患者血清对这些蛋白质做血清学分析.小鼠血清鉴定出16个血清反应阳性蛋白,其中有7个蛋白能够与至少45%的Q热患者发生血清反应.值得注意的是,热休克蛋白B(HspB)与Q热患者和小鼠血清的反应最强,阳性率最高.本研究鉴定出7个主要Q热血清反应蛋白,这些蛋白,特别是HspB是Q热诊断试剂和亚单位疫苗研制的候选靶标.

关键词：贝氏柯克斯体蛋白芯片患者血清血清学反应热休克蛋白B

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丙型肝炎病毒体外培养细胞模型研究进展

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中华肝脏病杂志 2008年第10期16卷 799-800页

作者：王盘童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所十室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

由于丙型肝炎病毒（HCV）的高度变异性以及缺乏高效率的细胞培养体系，人们对HCV生活史的认识、对相关疫苗和特异性抗病毒药物的研究进展缓慢。寻找高效率的HCV体外细胞培养体系一直是HCV研究的重点，现就近年来在相关领域的研究进展作... 详细信息

由于丙型肝炎病毒（HCV）的高度变异性以及缺乏高效率的细胞培养体系，人们对HCV生活史的认识、对相关疫苗和特异性抗病毒药物的研究进展缓慢。寻找高效率的HCV体外细胞培养体系一直是HCV研究的重点，现就近年来在相关领域的研究进展作一综述。

关键词：肝炎病毒丙型细胞培养模型细胞

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布鲁杆菌基因工程疫苗免疫保护效率的初步观察

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中国地方病学杂志 2006年第1期25卷 46-49页

作者：高永辉张松乐曾政罗德炎张良艳董梅王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室免疫室北京100071

目的比较布鲁杆菌6种抗原表位所获得的基因工程疫苗的免疫保护效率。方法布鲁杆菌核糖体蛋白L7/L12、胞质蛋白P39、细胞表面蛋白BCSP31、二氧四氢喋啶合成酶BLS、16.5×103的外膜蛋白PAL和翻译起始因子IF3的基因片段与真核表达载体p... 详细信息

目的比较布鲁杆菌6种抗原表位所获得的基因工程疫苗的免疫保护效率。方法布鲁杆菌核糖体蛋白L7/L12、胞质蛋白P39、细胞表面蛋白BCSP31、二氧四氢喋啶合成酶BLS、16.5×103的外膜蛋白PAL和翻译起始因子IF3的基因片段与真核表达载体pcDNA3.1(+)构建的核酸疫苗及上述6条片段转入pET32a(+)后诱导表达的的重组蛋白免疫小鼠,3次免疫后进行攻毒实验,对其免疫保护效率进行初步观察。结果L7/L12和BLS的重组蛋白疫苗和核酸疫苗都产生了非常显著的保护作用,P39的核酸疫苗、IF3和BCSP31的重组蛋白疫苗也产生了非常显著的保护作用,其中L7/L12核酸疫苗的保护效率最高。结论初步认为布鲁杆菌的优势抗原表位所获得的基因工程疫苗可产生一定的抗布鲁杆菌作用,可作为未来布鲁杆菌新型疫苗的候选者,有进一步研究的价值。

关键词：布鲁杆菌菌苗基因疫苗,DNA 核酸

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A/California/07／2009亚型猪流感冷适应减毒疫苗株的拯救及免疫效果评价

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生物化学与生物物理进展 2010年第12期37卷 1289-1295页

作者：段跃强罗德炎邢丽杨鹏辉赵忠鹏贾卫红李培锋王希良军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 内蒙古农业大学兽医系呼和浩特010018

应用反向遗传学技术,选择冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60 ca(H2N2)型流感病毒的6个内部基因为骨架,与A/California/07/2009株流感病毒2个抗原基因HA、NA分别克隆到polⅠ-polⅡ转录表达载体pAD3000中,构建8个转录表达载体重... 详细信息

应用反向遗传学技术,选择冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60 ca(H2N2)型流感病毒的6个内部基因为骨架,与A/California/07/2009株流感病毒2个抗原基因HA、NA分别克隆到polⅠ-polⅡ转录表达载体pAD3000中,构建8个转录表达载体重组质粒,共转染Vero细胞,获得重配A/California/07/2009ca株流感病毒.重配病毒的TCID50为7.5,病毒传4代后其血凝素(HA)滴度稳定在1∶256,半数感染剂量EID50为8,鸡胚传20代,经RT-PCR鉴定未发现重组病毒基因突变,电镜观察重配病毒符合流感病毒的主要特征;蔗糖纯化的病毒经肌肉注射(灭活)及滴鼻(减毒活病毒)两种途径免疫BALB/c小鼠,结果显示:滴鼻免疫和肌肉注射都可以产生较高效价的血凝抑制(HI)抗体,肌肉注射组产生的HI抗体略高(P=0.044),但肌肉注射组检测不到高效价IgA抗体;滴鼻免疫组鼻冲洗液中可以检测到高效价的IgA抗体,同型病毒感染后,IL-1β、TNFα、IFN-α等前炎因子分泌较早,且高于肌肉注射组(P<0.05),可见,喷鼻减毒疫苗比灭活全病毒疫苗能更好地激发黏膜免疫反应.通过对小鼠各个器官病毒载量的检测发现,4天后鼻腔、气管、脑、肺、脾脏没有病毒存在,证明减毒活疫苗株在小鼠上是安全的.以上数据可以初步断定,重组病毒有作疫苗候选株的可能,而且喷鼻疫苗具有降低免疫剂量、同时激活体内体液免疫和细胞免疫的功能.

关键词：反向遗传学技术 A/California/07/2009亚型猪流感 8质粒拯救系统

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褐家鼠不同脏器中汉坦病毒自然感染的差异

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中国病毒学 2006年第2期21卷 136-141页

作者：江佳富吴晓明左曙青张泮河郭天宇曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为了解野外褐家鼠不同脏器中自然感染汉坦病毒状况和带毒量的差异,选取经检测鼠肺组织中HV-RNA并呈阳性的鼠个体20只,采用巢式RT-PCR检测这些个体心、肝、肺、脾和肾5种共85份脏器中的HV,对阳性标本重复扩增后直接测序,用DNASTAR软件对... 详细信息

为了解野外褐家鼠不同脏器中自然感染汉坦病毒状况和带毒量的差异,选取经检测鼠肺组织中HV-RNA并呈阳性的鼠个体20只,采用巢式RT-PCR检测这些个体心、肝、肺、脾和肾5种共85份脏器中的HV,对阳性标本重复扩增后直接测序,用DNASTAR软件对获得序列进行比较分析。另外,针对汉城型汉坦病毒株Z37-M片段全序列设计定量PCR特异性引物,采用SYBRGreen实时定量PCR法,检测上述85份不同脏器中HV带毒量情况与相对差异。结果显示:RT-PCR对除肺脏之外的其它脏器中HV-RNA的检出率较低(11/65),不同个体肺组织来源的HV-M片段变异较多,其中A→G碱基变异类型占1/3强。从11份除肺之外的脏器中扩增到的HV-M基因序列和其对应同一褐家鼠个体肺脏HV-M片段相比,其碱基差异不大;一肺脏来源的与该个体其他脏器来源的HV-M片段两个位点存在A→G差异,并分别导致两位置氨基酸差异。定量检测结果显示:褐家鼠不同脏器中HV-RNA检出率差异有统计学意义(χ2=16.10,P=0.003),总体阳性率大小为肺>肝>肾>心>脾;肺脏中病毒的分布比其他脏器更为普遍。带毒量也以肺脏中最高,其它脏器之间HV带毒量没有显著性差异(χ2=8.79,P=0.088)。这些结果说明:褐家鼠肺脏是HV侵犯与贮存的主要靶器官,HV基因在该器官中可能更易发生变异。这对进一步了解HV在宿主体内的贮存规律、传播及其在流行病学上的意义将有所裨益。

关键词：汉坦病毒褐家鼠实时定量PCR RT-PCR

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用DREAM技术纠正人工合成基因中的突变

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中国生物工程杂志 2007年第1期27卷 86-92页

作者：朱晓峰陈锦辉张昕安小平周育森童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的:介绍一种简便、有效的定点突变技术。方法:根据突变位点附近的DNA序列推导出氨基酸序列,再以此氨基酸序列进行逆翻译,这样在不改变氨基酸序列的前提下可以得到数目巨大的隐性突变(silent mutations),这些突变中包含大量的限制性内... 详细信息

目的:介绍一种简便、有效的定点突变技术。方法:根据突变位点附近的DNA序列推导出氨基酸序列,再以此氨基酸序列进行逆翻译,这样在不改变氨基酸序列的前提下可以得到数目巨大的隐性突变(silent mutations),这些突变中包含大量的限制性内切酶位点,选择合适的酶切位点,自酶切位点向两侧合成引物(其中仅一个引物含有突变),用这些引物扩增两侧DNA片段(其中仅一个片段含有突变),然后将这两个片段以相应的内切酶切割后融合即可完成定点突变。结果:用该方法成功地纠正了人工合成的可溶性组织因子基因中两个碱基的缺失,校正了阅读框架,获得了预期的目的基因。结论:该方法简便、有效,突变成功率高,适合于在一般分子生物学实验室使用;该方法能避免了因多轮PCR和合成长引物导致突变的可能性,可作为一种定点突变的替代方法。这种改进的PCR定点诱变技术我们称之为“设计限制酶辅助突变”(Designed Restriction Enzyme Assisted Mutagenesis,DREAM)。

关键词：定点突变聚合酶链反应设计限制酶辅助突变

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北京雾霾天大气颗粒物中微生物气溶胶的浓度及粒谱特征

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环境科学 2015年第9期36卷 3144-3149页

作者：胡凌飞张柯王洪宝李娜王洁杨文慧殷喆焦周光温占波李劲松军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院实验动物中心北京100071

于2013年1月8日~2013年2月4日雾霾频繁暴发期间,使用定量空气微生物采样器和气溶胶粒谱测试仪测试并比较了雾霾天和之后的清朗天气下细菌、真菌气溶胶浓度变化、粒谱分布及不同粒径大小颗粒物的数量浓度差异和粒谱分布特征.结果表明,采... 详细信息

于2013年1月8日~2013年2月4日雾霾频繁暴发期间,使用定量空气微生物采样器和气溶胶粒谱测试仪测试并比较了雾霾天和之后的清朗天气下细菌、真菌气溶胶浓度变化、粒谱分布及不同粒径大小颗粒物的数量浓度差异和粒谱分布特征.结果表明,采样周期内真菌气溶胶小于5μm的粒子(可吸入肺粒子)所占百分比显著高于细菌气溶胶小于5μm的粒子百分比.雾霾过后的晴朗天气下细菌、真菌气溶胶浓度高于雾霾天气时的浓度,而颗粒物浓度则相反.无论雾霾天或晴朗天微生物气溶胶的粒谱分布无显著差别,空气中的颗粒物以PM1.0占绝大多数.

关键词：雾霾细菌气溶胶真菌气溶胶粒径分布颗粒物

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DNA数据存储技术原理及其研究进展

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生物化学与生物物理进展 2021年第5期48卷 494-504页

作者：滕越杨姗李金玉崔玉军刘芮存王升启病原微生物生物安全国家重点实验室军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

信息生产与数据存储能力之间的差距日益扩大,急需分子数据存储等高密度持久性信息保存替代方案,基于脱氧核糖核酸(DNA)的数据存储因在信息保留时间、物理密度和体积编码容量等方面优于多数传统存储介质,而广受关注.本文概述了DNA数据存... 详细信息

信息生产与数据存储能力之间的差距日益扩大,急需分子数据存储等高密度持久性信息保存替代方案,基于脱氧核糖核酸(DNA)的数据存储因在信息保留时间、物理密度和体积编码容量等方面优于多数传统存储介质,而广受关注.本文概述了DNA数据存储技术的基本原理,总结了体外DNA存储数据库与体内分子存储器系统的研究进展,讨论了基于DNA分子的数据存储系统所涉及的各种影响因素以及面临的挑战.

关键词： DNA 数据存储细胞存储器核酸数据库分子计算机

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用基因组DNA剪接技术克隆SIgA相关基因

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中国生物工程杂志 2008年第6期28卷 1-6页

作者：张宝中安小平张昕刘大斌单云竹周育森童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的:克隆分泌型IgA(SIgA)相关基因——J链基因(IgJ)、多聚免疫球蛋白受体基因(pIgR)和IgA重链恒定区基因(IGHA),为进一步构建SIgA真核表达质粒奠定基础。方法:采用"基因组DNA剪接"技术,根据已发表的IgJ、pIgR和IGHA的核苷酸... 详细信息

目的:克隆分泌型IgA(SIgA)相关基因——J链基因(IgJ)、多聚免疫球蛋白受体基因(pIgR)和IgA重链恒定区基因(IGHA),为进一步构建SIgA真核表达质粒奠定基础。方法:采用"基因组DNA剪接"技术,根据已发表的IgJ、pIgR和IGHA的核苷酸序列,通过计算机软件分别设计各个基因片段外显子的优化引物,从人外周血基因组DNA中直接扩增各基因的外显子序列;然后人工设计融合相邻外显子的融合引物,采用重叠PCR技术,把各基因片段的外显子串联起来形成全长编码序列,完成基因组DNA的体外剪接。扩增的PCR产物纯化后克隆到pGEM-T Easy Vector中,通过DNA测序对阳性克隆进行分析鉴定。结果:PCR扩增的IgJ、pIgR和IGHA基因与预期大小一致;测序结果表明实验获得的上述基因与GenBank中的目标基因序列完全一致。结论:通过基因组DNA剪接技术成功克隆人类SIgA3个相关基因,提示此技术是合成多外显子cDNA的有效手段。

关键词：分泌型IgA 基因组DNA剪接重叠延伸聚合酶链式反应

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鼠疫耶尔森氏菌的进化研究:从系统发育学到系统发育基因组学

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中国科学:生命科学 2013年第1期43卷 23-30页

作者：崔玉军宋亚军杨瑞馥军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

20世纪90年代末起,基因组学在细菌研究中应用越来越广泛,尤其在进化领域,取得了一系列革命性的发现.本文以鼠疫耶尔森氏菌进化研究为例,介绍了从利用基因组中少数特定片段(等位基因)多态性进行分析的传统系统发育学,到基于大量菌株全基... 详细信息

20世纪90年代末起,基因组学在细菌研究中应用越来越广泛,尤其在进化领域,取得了一系列革命性的发现.本文以鼠疫耶尔森氏菌进化研究为例,介绍了从利用基因组中少数特定片段(等位基因)多态性进行分析的传统系统发育学,到基于大量菌株全基因组序列进行系统发育基因组学的研究发展历程,回顾讨论了基因组学技术的进步为鼠疫菌进化研究领域带来的成果.

关键词：鼠疫菌进化基因组学系统发育学系统发育基因组学

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