检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2016年第1期32卷 26-31页

作者：刘然张桂林刘晓明李裕昌郑重孙响杨银辉新疆军区疾病预防控制中心乌鲁木齐830011 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

对新疆地区蜱传病毒类群进行调查,本研究利用Illumia深度测序技术对新疆全沟硬蜱体内的病毒小RNA分子进行筛查,从提取的蜱小RNA组份中共测得32 631条病毒特异性读序,77条读序与蜱传黄病毒基因组序列匹配,核苷酸数合计约占病毒基因组的3.... 详细信息

对新疆地区蜱传病毒类群进行调查,本研究利用Illumia深度测序技术对新疆全沟硬蜱体内的病毒小RNA分子进行筛查,从提取的蜱小RNA组份中共测得32 631条病毒特异性读序,77条读序与蜱传黄病毒基因组序列匹配,核苷酸数合计约占病毒基因组的3.8%~2.4%,其中32条读序与国内尚未发现的西伯利亚型蜱传脑炎病毒一致。为对上述结果进行确证,利用RT-PCR对此型病毒核酸进行检测,从蜱总RNA中分别扩增获得病毒包膜基因与基因组3′末端片段,测序比对表明上述片段序列与西伯利亚南部检出病毒高度近似,核苷酸与氨基酸似然率分别为97.2%~95.5%与99.4%~98.3%。综上所述,本研究利用基于深度测序的病毒筛查方法,首次从我国新疆蜱传脑炎疫源地检出西伯利亚型病毒,为下一步针对病毒的分离与流行病学调查提供了重要线索。

关键词：蜱传脑炎病毒西伯利亚型深度测序小RNA 新疆

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伞冠血蜱亚属小志及亨氏血蜱（Ixodoidea，Ixodidae）雌性标本重新描述

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寄生虫与医学昆虫学报 2016年第3期23卷 148-157页

作者：孙毅许荣满军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

伞冠血蜱亚属是血蜱中结构最复杂的类群之一，主要分布在热带非洲，东洋区以及古北区西南部。在我国已记载的46种血蜱中，其中3种属于伞冠血蜱亚属Rhipistoma。亨氏血蜱Haernaphysalis（R．）heinrichi Schulze曾被俄罗斯学者Kolonin... 详细信息

伞冠血蜱亚属是血蜱中结构最复杂的类群之一，主要分布在热带非洲，东洋区以及古北区西南部。在我国已记载的46种血蜱中，其中3种属于伞冠血蜱亚属Rhipistoma。亨氏血蜱Haernaphysalis（R．）heinrichi Schulze曾被俄罗斯学者Kolonin提及于中国分布，但标本及相关信息无从考究。在整理我国蜱类标本的过程中，从广西龙州地区重新发现该蜱种。本文对该蜱种雌性标本进行了重新描述，并在标本检视的基础上编写了该亚属的检索表以便应用。

关键词：血蜱属伞冠血蜱亚属亨氏血蜱分种检索表中国

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我国斑点热立克次体感染与免疫的实验研究

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中国人兽共患病学报 2016年第10期32卷 917-921页

作者：熊小路焦俊温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原生物生物安全国家重点实验室北京100071

研究证明黑龙江立克次体能够感染人血管内皮细胞和BALB/c小鼠,引起小鼠菌血症和器官损伤;全基因组序列分析发现黑龙江立克次体毒力相关基因。表面蛋白质组分析鉴定了黑龙江立克次体和立氏立克次体的表面蛋白,用表面蛋白免疫C3H/HeN小鼠... 详细信息

研究证明黑龙江立克次体能够感染人血管内皮细胞和BALB/c小鼠,引起小鼠菌血症和器官损伤;全基因组序列分析发现黑龙江立克次体毒力相关基因。表面蛋白质组分析鉴定了黑龙江立克次体和立氏立克次体的表面蛋白,用表面蛋白免疫C3H/HeN小鼠,发现某些表面蛋白为保护性抗原,并揭示这些保护性抗原均能够诱导抗原特异CD4+和CD8+T细胞增殖并产生和分泌IFN-γ和/或TNF-α,以及诱导高水平特异性IgG2a产生,在这些免疫因素的协同作用下使小鼠有效抵抗立克次体感染。用黑龙江立克次体感染Tim-3高表达或低表达人血管内皮细胞以及Tim-3高表达转基因小鼠,结果有力证明Tim-3高表达能够促进人血管内皮细胞和小鼠抵抗黑龙江立克次体感染。

关键词：斑点热立克次体感染免疫保护性抗原

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BSL-2实验活动对室内环境生物污染的定量分析

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中国消毒学杂志 2016年第10期33卷 951-954,957页

作者：胡凌飞温占波李劲松王洁李娜张柯杨文慧殷喆军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的通过一系列生物安全实验室常见操作及发生意外情况产生的生物气溶胶污染进行定量研究,为实验室相关操作的风险评估和人员防护措施提供科学依据。方法用黏质沙雷菌和大肠杆菌(ATCC 13706)的噬菌体phi X-174代替有传染性的细菌、病毒... 详细信息

目的通过一系列生物安全实验室常见操作及发生意外情况产生的生物气溶胶污染进行定量研究,为实验室相关操作的风险评估和人员防护措施提供科学依据。方法用黏质沙雷菌和大肠杆菌(ATCC 13706)的噬菌体phi X-174代替有传染性的细菌、病毒,在生物安全负压室内进行多种实验操作和意外事故的模拟,通过安德森采样器定量采样法对产生的微生物气溶胶进行定量分析。结果各种实验操作中,黏质细菌产生的最大气溶胶风险是冷冻干燥粉掉落,最大浓度是11 696 cfu/m3;噬菌体产生的最大气溶胶风险是高浓度噬菌体液跌落,最大浓度是4 092 PFU/m3,产生的气溶胶粒子大部分都是可入肺即小于5μm的粒子。结论生物安全实验室内的各种实验操作和意外事故产生的气溶胶浓度差异较大,气溶胶颗粒多为可入肺粒子。定量的实验室风险研究可以更好的保障人员安全和对危险发生的应急处理。

关键词：微生物气溶胶气溶胶颗粒风险评估 BSL-2

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新型佐剂蛋白TFPR1在毕赤酵母系统中的表达及鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第4期36卷 294-299页

作者：宁秀哲寇志华孙维来朱青杨裔邱洪杰郭晶晶郭彦于虹周育森生命科学学院、温州医科大学检验医学院 325035 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1（ PR-1）功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生... 详细信息

目的：利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1（ PR-1）功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生型X33菌株,经甲醇诱导表达重组蛋白TFPR1,采用ELISA法筛选阳性菌株后,SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果重组表达质粒pPICZαA-TFPR1经双酶切和测序鉴定证明构建正确；重组蛋白以分泌形式表达,相对分子质量约16＆#215;103。结论利用巴斯德毕赤酵母表达系统成功表达TFPR1蛋白,为进一步研究其功能和作为佐剂的应用提供参考资料。

关键词：佐剂致病相关蛋白毕赤酵母系统分泌表达 Pathogenesis related protein 1 (PR-1)

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阴沟肠杆菌质粒pB557-NDM全序分析及耐药机制研究

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军事医学 2016年第12期40卷 964-968,973页

作者：李萍冯娇康琳辛文文高珊杨浩周冬生殷喆王景林安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对阴沟肠杆菌质粒pB557-NDM全序进行分析并研究其耐药机制。方法 PCR方法检测相关菌株耐药基因,改良Carba NP法检测碳青霉烯酶类型及其活性,接合转移实验验证质粒pB557-NDM是否具有可转移性,抗生素敏感实验检测相关菌株耐药谱,质粒... 详细信息

目的对阴沟肠杆菌质粒pB557-NDM全序进行分析并研究其耐药机制。方法 PCR方法检测相关菌株耐药基因,改良Carba NP法检测碳青霉烯酶类型及其活性,接合转移实验验证质粒pB557-NDM是否具有可转移性,抗生素敏感实验检测相关菌株耐药谱,质粒全基因组测序分析其遗传结构、移动元件,对其耐药机制进行研究。结果阴沟肠杆菌B557产B类碳青霉烯酶,编码NDM的基因blaNDM位于质粒pB557-NDM上。pB557-NDM可通过接合转移方式进入受体菌EC600并表达相应的耐药谱。质粒pB557-NDM为大小141.65 kb的Inc A/C2型质粒,Gen Bank登录号为KX786648。该质粒共有2个外源插入区,分别为ISEcp1-blaCMY转座单元形成的blaCMY-6耐药区和ΔTn1696-In46-rmt C-ISKpn14-ΔTn125组成的blaNDM-1耐药区。结论质粒pB557-NDM介导阴沟肠杆菌B557多药耐药,blaNDM位于转座子ΔTn125中。

关键词：阴沟肠杆菌 pB557-NDM 碳青霉烯酶

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我国人群感染指环病毒的高通量测序分析

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中国病原生物学杂志 2016年第10期11卷 865-870页

作者：程实范航孙强裴广倩安小平米志强张湘莉兰黄勇童贻刚安徽医科大学军事医学科学院微生物流行病研究所安徽合肥230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的分析我国人群感染指环病毒的多样性,为研究指环病毒科的感染与不同疾病发生以及宿主免疫状态之间的关系提供基础资料。方法从33份血液标本中提取病毒核酸,使用多重置换扩增技术富集指环病毒核酸,然后使用Ion Torrent PGM平台进行高... 详细信息

目的分析我国人群感染指环病毒的多样性,为研究指环病毒科的感染与不同疾病发生以及宿主免疫状态之间的关系提供基础资料。方法从33份血液标本中提取病毒核酸,使用多重置换扩增技术富集指环病毒核酸,然后使用Ion Torrent PGM平台进行高通量测序,并进行生物信息学分析。结果共得到226个新的指环病毒序列,包括130条全序和96个ORF1。受检血液标本均检出包括TTV,TTMDV和TTMV等指环病毒;测序显示指环病毒中81.9%为TTV,48.5%的标本感染两个属以上的指环病毒。指环病毒ORF1至少81.13%发生变异,其中TTV属内也存在75.66%的变异,13.27%的序列在NCBI的核酸数据库中同源比对未成功。进化分析显示TTV基因3型又可分为3.1、3.2、3.3等3个亚型,以往命名的基因2型是基因3.3型的一个子分枝。新型TTV中51.9%属于基因3型。结论我国人群普遍感染指环病毒,以基因3型感染居多且基因组多样性高。

关键词：指环病毒多重置换扩增(MDA) 输血传播病毒(TTV) 进化

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猪链球菌溶血素(SLY)引起血小板聚集活性分析

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军事医学 2016年第1期40卷 40-44页

作者：张省委刘鹏徐茂凯尚学义郑玉玲袁媛姜永强军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院附属医院重症医学科北京100071

目的研究重组表达的2型猪链球菌溶血素(SLY)与血小板的相互作用,为临床猪链球菌感染的救治提供理论基础。方法镍柱亲和层析法纯化重组SLY蛋白,光密度法检测其溶血活性,再通过血小板聚集仪和扫描电子显微镜观察SLY蛋白与血小板的相互作用... 详细信息

目的研究重组表达的2型猪链球菌溶血素(SLY)与血小板的相互作用,为临床猪链球菌感染的救治提供理论基础。方法镍柱亲和层析法纯化重组SLY蛋白,光密度法检测其溶血活性,再通过血小板聚集仪和扫描电子显微镜观察SLY蛋白与血小板的相互作用,并研究抗血小板药物阿司匹林对SLY引起的血小板聚集的影响,通过比较野生株05ZYH33和sly基因突变株Δsly对小鼠体内血小板体积和数量的影响,推测SLY蛋白对体内血小板的影响。结果与结论重组SLY蛋白溶血活性为2000 HU,1μg/ml SLY蛋白可引起血小板高度聚集,5 mmol/L阿司匹林可显著抑制聚集,SLY蛋白可引起小鼠体内单个血小板体积增大和血小板数量减少。

关键词： 2型猪链球菌猪链球菌溶血素血小板聚集阿司匹林血小板减少

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流感疫苗株为载体的重组HAdV疫苗候选株构建及免疫效果

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免疫学杂志 2016年第12期32卷 1073-1077页

作者：高雅倩高雅倩段跃强邢丽杨鹏辉王希良安徽医科大学 230032 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 100071

目的以冷适应、减毒流感活疫苗株为载体,构建并拯救喷鼻重组HAd V疫苗候选株,并评价其免疫效果,为腺病毒候选疫苗研制提供实验数据。方法应用反向遗传学技术,以冷适应、减毒流感活疫苗A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)株为骨架,与季节性流感病... 详细信息

目的以冷适应、减毒流感活疫苗株为载体,构建并拯救喷鼻重组HAd V疫苗候选株,并评价其免疫效果,为腺病毒候选疫苗研制提供实验数据。方法应用反向遗传学技术,以冷适应、减毒流感活疫苗A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)株为骨架,与季节性流感病毒A/California/07/209疫苗株的血凝素(haemagglutination,HA)及插入HAd V六邻体蛋白抗优势原表位的2个重复序列经改造的神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因构建流感病毒八质粒系统,转染COS-1/MDCK细胞筛选疫苗候选株并鉴定;制备的候选疫苗株滴鼻免疫Balb/c小鼠,通过中和抗体、s Ig A黏膜抗体及细胞因子的测定评价其免疫原性,并用野生HAd V-7病毒株攻击评价免疫保护效果。结果成功拯救获得重组HAd V疫苗候选株,命名为rg Flu/HAd V-Ca,其形态符合流感病毒典型特征,可有效表达HAd V病毒Hexon优势表位,且具有冷适应、减毒表型。小鼠免疫后可产生针对HAd V-7及H1N1流感病毒的特异性中和抗体,肺鼻灌洗液中可检测到针对HAd V-7中和抗体s Ig A抗体,并可检测到脾淋巴细胞分泌HAd V-7特异性细胞因子IFN-γ、IL-4;攻毒实验显示,rg Flu/HAd V-Ca疫苗候选株可有效降低小鼠肺病毒载量。结论重组冷适应、减毒HAd V活疫苗株rg Flu/HAd V-Ca具有良好的免疫效果,为腺病毒候选疫苗的研制提供了新思路。

关键词：腺病毒冷适应、减毒活疫苗六邻体抗原表位免疫效果

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副溶血弧菌calR的基因敲除株与回补株构建

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军事医学 2016年第5期40卷 374-378页

作者：侯书宁孟彦言朱文君张凌宇周冬生张义全黄新祥江苏大学医学院江苏镇江212013 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建副溶血弧菌calR的基因突变株和回补株,为研究CalR的功能奠定基础。方法 PCR扩增calR基因的同源臂融合片段,并直接克隆入自杀质粒p DS132中。通过接合转移的方式将重组自杀质粒转入副溶血弧菌RIMD2210633株(WT)中,利用同源重组... 详细信息

目的构建副溶血弧菌calR的基因突变株和回补株,为研究CalR的功能奠定基础。方法 PCR扩增calR基因的同源臂融合片段,并直接克隆入自杀质粒p DS132中。通过接合转移的方式将重组自杀质粒转入副溶血弧菌RIMD2210633株(WT)中,利用同源重组的方法替换原始calR基因以构建calR无痕突变株(ΔcalR)。PCR扩增calR的基因序列,并将其直接克隆入p BAD33质粒中,构建回补质粒。将回补质粒转入到ΔcalR中,即得回补株(ΔcalR/calR∷p BAD33)。将vop N的启动子区克隆入p HRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建Lac Z重组质粒,并将该重组质粒分别转入WT/p BAD33、ΔcalR/p BAD33和ΔcalR/calR∷p BAD33中,通过测定并比较3株菌中β-半乳糖苷酶活性的差异来判定CalR对vop N的调控关系。结果与结论 Lac Z结果表明,CalR负调控vop N的转录,且回补株的回补效果良好,表明成功构建了副溶血弧菌calR基因的突变株和回补株,为后续对CalR的功能研究打下了基础。

关键词：副溶血弧菌 calR 突变株回补株

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