检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2009年第3期20卷 436-438页

作者：赵海李艳朱虹军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院附属医院北京100071

血清学试验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。我们简要综述了结核菌素蛋白衍生物、抗原85复合体、38kDa磷酸盐转运蛋白、6kDa早期分泌性蛋白、10kDa培养滤液蛋白、免疫性蛋白MPT64、主要分泌性... 详细信息

血清学试验是结核诊断的重要依据。随着科学技术的进步,新的结核诊断用抗原不断被发现。我们简要综述了结核菌素蛋白衍生物、抗原85复合体、38kDa磷酸盐转运蛋白、6kDa早期分泌性蛋白、10kDa培养滤液蛋白、免疫性蛋白MPT64、主要分泌性免疫蛋白MPB70、表面脂蛋白MPB83等8种结核分枝杆菌重要抗原作为结核诊断用抗原的研究进展。

关键词：结核分枝杆菌诊断用抗原

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人免疫缺陷病毒Ⅰ型Vif蛋白的原核表达、纯化及单克隆抗体制备

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生物技术通讯 2009年第4期20卷 475-478页

作者：隋洪帅郭东星刘思扬鲍作义刘永健庄道民李韩平李敬云李林军事医学科学院微生物流行病研究所全军艾滋病检测中心病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:克隆、表达、纯化人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)Vif蛋白,制备其单克隆抗体。方法:提取感染了HIV的细胞基因组DNA,PCR扩增vif基因,插入表达载体pET32a,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得工程菌株,IPTG诱导蛋白表达,Western印迹鉴定目的蛋白,... 详细信息

目的:克隆、表达、纯化人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)Vif蛋白,制备其单克隆抗体。方法:提取感染了HIV的细胞基因组DNA,PCR扩增vif基因,插入表达载体pET32a,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得工程菌株,IPTG诱导蛋白表达,Western印迹鉴定目的蛋白,亲和层析纯化目的蛋白;免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体。结果:构建了Vif蛋白的原核表达载体vif-pET32a,并在大肠杆菌中获得高表达,目的蛋白以包涵体形式存在;纯化获得高纯度的重组Vif蛋白,蛋白浓度可达0.56mg/mL;建立了抗Vif蛋白单克隆抗体细胞株,制备了腹水,滴度可达1∶16×106,抗体纯化后保持了活性和特异性。结论:在原核表达系统中表达、纯化了重组Vif蛋白,制备了针对Vif蛋白的单克隆抗体,为研究Vif蛋白的功能和抗原性奠定了基础。

关键词：人免疫缺陷病毒Ⅰ型 Vif蛋白原核表达单克隆抗体

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人免疫缺陷病毒I型Vif蛋白的原核表达、纯化及单克隆抗体制备

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生物技术通讯 2009年第4期20卷 475-478页

作者：隋洪帅郭东星刘思扬鲍作义刘永健庄道民李韩平李敬云李林军事医学科学院微生物流行病研究所全军艾滋病检测中心病原微生物生物安全国家重点实验室　　北京　　（100071）

目的:克隆、表达、纯化人免疫缺陷病毒I型(HIV-1)vif蛋白,制备其单克隆抗体.方法:提取感染了HIV的细胞基因组DNA,PCR扩增vif基因,插入表达载体pET32a,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得工程菌株,IPTG诱导蛋白表达,Westem印迹鉴定目的蛋白,亲和... 详细信息

目的:克隆、表达、纯化人免疫缺陷病毒I型(HIV-1)vif蛋白,制备其单克隆抗体.方法:提取感染了HIV的细胞基因组DNA,PCR扩增vif基因,插入表达载体pET32a,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得工程菌株,IPTG诱导蛋白表达,Westem印迹鉴定目的蛋白,亲和层析纯化目的蛋白;免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体.结果:构建了Vif蛋白的原核表达载体vif-pET32a,并在大肠杆菌中获得高表达,目的蛋白以包涵体形武存在;纯化获得高纯度的重组Vif蛋白,蛋白浓度可达0.56mg/mL;建立了抗Vif蛋白单克隆抗体细胞株,制备了腹水,滴度可达1:16x106,抗体纯化后保持了活性和特异性.结论:在原核表达系统中表达、纯化了重组Vif蛋白,制备了针对Vif蛋白的单克隆抗体,为研究Vif蛋白的功能和抗原性奠定了基础.

关键词：人免疫缺陷病毒I型 Vif蛋白原核表达单克隆抗体

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1例早期HIV感染者体内病毒准种的各基因片段分析

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中国艾滋病性病 2009年第1期15卷 1-3,10页

作者：李林隋洪帅鲍作义刘永健刘思扬庄道民李韩平李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所全军艾滋病检测中心病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的比较1例早期艾滋病病毒(HIV)感染者体内病毒不同基因片段准种复杂度。方法使用套式聚合酶链反应(Nested-PCR),扩增HIV感染者外周血淋巴细胞中病毒的gag、pol、vif-vpr和env区的部分基因,通过克隆、测序方法观察该感染者体内病毒准... 详细信息

目的比较1例早期艾滋病病毒(HIV)感染者体内病毒不同基因片段准种复杂度。方法使用套式聚合酶链反应(Nested-PCR),扩增HIV感染者外周血淋巴细胞中病毒的gag、pol、vif-vpr和env区的部分基因,通过克隆、测序方法观察该感染者体内病毒准种分布情况,比较不同基因片段检测病毒准种的可靠性。结果不同基因片段检测病毒准种结果显示,该早期感染者体内的病毒不同基因片段显示的准种基因离散率不同,其中gag区显示出的病毒准种复杂度最高,反映为该区段病毒准种的基因离散率最高,为0·008;其他各区基因(pol、vif-vpr、env)的离散率依次为0·006、0·001、0·000。结论该HIV感染者体内病毒准种的基因中,gag区基因的突变率较高,提示Gag在机体感染HIV早期承受的免疫压力较高,因此在病毒准种研究中,gag区应该作为重要的基因区域。

关键词：艾滋病病毒准种 gag pol vif-vpr env

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用单基因组扩增法(SGA)分析艾滋病病人体内耐药毒株准种的分子进化

用单基因组扩增法(SGA)分析艾滋病病人体内耐药毒株准种的分子进化

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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：耿庆茂李韩平鲍作义刘永健李林庄道民刘思扬李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：利用单基因组扩增法(SGA)检测病毒准种的优势，分析一例长期接受逆转录酶抑制剂治疗、换用含蛋白酶抑制剂(IDV)治疗方案的患者体内IDV耐药的分子进化特点。方法：对病例在换药前后进行6次随访，对采集的血浆样本用SGA方法扩增... 详细信息

目的：利用单基因组扩增法(SGA)检测病毒准种的优势，分析一例长期接受逆转录酶抑制剂治疗、换用含蛋白酶抑制剂(IDV)治疗方案的患者体内IDV耐药的分子进化特点。方法：对病例在换药前后进行6次随访，对采集的血浆样本用SGA方法扩增pol区基因并测序，对准种中每一条序列均提交斯坦福大学的耐药数据库，进行基因型耐药分析，共得到蛋白酶(protease，PRO)全长序列149条，逆转录酶(RT)全长序列171条。结论：从耐药病毒准种的角度揭示了IDV耐药的发生发展规律、确定了一种新型耐药突变型、微量耐药突变毒株可逐渐进化为优势耐药种群。

关键词：艾滋病毒株耐药逆转录酶临床药理

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结核分枝杆菌VII型分泌系统研究进展

结核分枝杆菌VII型分泌系统研究进展

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第七次全国医学分子微生物学及生物技术研讨会

作者：李浩殷瑛徐俊杰陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

有研究表明结核分支杆菌的培养滤液中含有缺少传统信号序列的并且具有高度免疫性的蛋白，这表明在结核分支杆菌中可能存在一种新的蛋白分泌体系。最近这种分泌机制已经在结核分枝杆菌中已经得到证实，并将这种新发现的分泌体系命名为ESX... 详细信息

有研究表明结核分支杆菌的培养滤液中含有缺少传统信号序列的并且具有高度免疫性的蛋白，这表明在结核分支杆菌中可能存在一种新的蛋白分泌体系。最近这种分泌机制已经在结核分枝杆菌中已经得到证实，并将这种新发现的分泌体系命名为ESX/T7SS分泌系统即Ⅶ型分泌系统。本文阐述了ESX-1分泌系统的分子机制，并探讨了ESX-1、2、3、4、5五种ESX分泌系统的进化机理和进化顺序。

关键词：结核分枝杆菌 ESX-1分泌系统分子机制进化机理

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我国猪链球菌2型新基因的功能研究

我国猪链球菌2型新基因的功能研究

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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：骈亚亚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：构建猪链球菌2型89K毒力岛的5个突变株(05-SSU0910，05-SSU0946，05-SSU0948，05-SSU0973，05-SSU0969)和胞壁蛋白的4个突变株(05-SSU0272，05-SSU1083，05-SSU1664，05-SSU1815)，分析其活性。方法：以猪链球菌2型05ZYH33基因组为模板，扩增基因两侧约500bp左右的片段为同源臂，克隆到自杀载体pSET4S上构建基因敲除的载体，电转化05ZYH33野生株，筛选出基因敲除突变体△0910，△0946，△0948，△0969，△0973，△0272，△1083，△1664和△1815并对其功能进行了初步的研究。结论：成功构建了89K毒力岛的5个突变株和胞壁蛋白的4个突变株，并筛选出可能与毒力相关的几个基因。

关键词：猪链球菌2型 89K毒力岛胞壁蛋白基因表达

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贝氏柯克斯体新桥株激活人树突状细胞的表型分析

贝氏柯克斯体新桥株激活人树突状细胞的表型分析

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全军免疫学第七届学术交流会暨免疫学新进展主题论坛

作者：王颖吴德平王锡乐尉雁温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的意义：树突状细胞(dendritic cell,DC)具有成熟与未成熟两种形态,前者是早期免疫应答强有力的抗原呈递细胞,后者能诱导免疫耐受。分析贝氏柯克斯体新桥株(Coxiella burnetii,Cb)、Cb脂多糖(LPS)、去除LPS的Cb等对DC的激活作用,探讨C... 详细信息

目的意义：树突状细胞(dendritic cell,DC)具有成熟与未成熟两种形态,前者是早期免疫应答强有力的抗原呈递细胞,后者能诱导免疫耐受。分析贝氏柯克斯体新桥株(Coxiella burnetii,Cb)、Cb脂多糖(LPS)、去除LPS的Cb等对DC的激活作用,探讨Cb逃逸宿主免疫清除机理。方法：本研究从健康成年人的外周血中分离单核细胞,加入GM-CSF和IL-4体外培养单核细胞成未成熟DC;分别用灭活Cb、Cb LPS、去LPS Cb刺激体外培养未成熟DC,大肠杆菌LPS作为阳性对照刺激因子;刺激后24h,用流式细胞仪检测DC表面分子(CD40,CD58,CD80,CD83,CD86)。结果：去LPS Cb刺激DC表面分子表达水平与大肠杆菌LPS刺激相近,显著强于未刺激DC,而灭活Cb、Cb LPS刺激DC的表面分子的表达为低水平。结论：贝氏柯克斯体表面LPS遮盖了贝氏柯克斯体激活DC所需的表面抗原分子,除去LPS后暴露的抗原分子与DC相互作用而有效刺激DC成熟、活化。表面LPS的存在有利于贝氏柯克斯体逃逸宿主的免疫清除。

关键词：贝氏柯克斯体树突状细胞单核细胞流式细胞分析

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鼠疫抗原LcrV在乳酸乳球菌中的表达与鉴定

鼠疫抗原LcrV在乳酸乳球菌中的表达与鉴定

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第七次全国医学分子微生物学及生物技术研讨会

作者：曹晓梅侯利华刘树玲付玲陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)是潜在的黏膜免疫保护性抗原的递送载体。以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)为载体，将鼠疫抗原LcrV基因导入乳酸乳球菌内，构建重组肠道微生态菌株，作为黏膜免疫疫苗的先期探索和尝试。 ... 详细信息

目的：乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)是潜在的黏膜免疫保护性抗原的递送载体。以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)为载体，将鼠疫抗原LcrV基因导入乳酸乳球菌内，构建重组肠道微生态菌株，作为黏膜免疫疫苗的先期探索和尝试。方法：采用酸诱导P170启动子，乳酸乳球菌本身的SP310mut2信号肽，将鼠疫杆菌LcrV抗原结构基因克隆到质粒pAMJ397上，电转化感受态乳酸乳球菌Lactococcus lactis PSM565。结果：经重组子PCR鉴定，SDS—PAGE检测，Western—blot鉴定，在Lactococcus lactis PSM565/pAMJ397-V培养基上清中获得了38kD的鼠疫抗原LcrV蛋白。

关键词：乳酸乳球菌鼠疫抗原 LcrV基因重组表达结构鉴定

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GENSCREEN(R) ULTRA HIV抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒敏感性评价

GENSCREEN(R) ULTRA HIV抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒敏感性评价

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第四届全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：鲍作义刘永健李韩平刘思扬庄道民李林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的：评价BIO-RAD公司开发研制的人类免疫缺陷病毒(HIV1+2)抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒(GENSCREEN(○R) ULTRA HIV Ag-Ab)对来源于不同样本检测的敏感性。方法：以法国生物梅里埃公司生产的HIV1+2抗原/抗体ELISA检测试剂为参比试... 详细信息

目的：评价BIO-RAD公司开发研制的人类免疫缺陷病毒(HIV1+2)抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒(GENSCREEN(○R) ULTRA HIV Ag-Ab)对来源于不同样本检测的敏感性。方法：以法国生物梅里埃公司生产的HIV1+2抗原/抗体ELISA检测试剂为参比试剂，分别使用参比试剂和评价试剂检测621例样本，分析参比试剂和评价试剂检测HIV抗原抗体的敏感性。结果：评价试剂和参比试剂检测502份HIV感染者/AIDS患者临床血浆标本均为阳性，符合率为100％，敏感性为100％。评价试剂和参比试剂检测92份HIV分离培养上清液，评价试剂检出 89份阳性、参比试剂检出31份阳性，表明评价试剂检测HIV-1 p24抗原的敏感性高于参比试剂。另外，又检测了27份HIV抗原系列稀释样本，计算出评价试剂检测HIV抗原的敏感性是参比试剂的4～8倍。结论：评价试剂检测HIV抗体的效果与参比试剂相同，检测HIV-1 p24抗原的敏感性高于参比试剂。

关键词：艾滋病免疫学检验抗原检测酶联免疫诊断试剂盒敏感性评价

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