检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通讯 2016年第6期27卷 804-807页

作者：张传朋刘雄李涛王慧广西医科大学广西南宁530021 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌O157∶H7前噬菌体片段CP-933Y,进而构建CP-933Y缺失突变株。方法:以肠出血性大肠杆菌O157∶H7菌株为模板,加入酶切位点PCR扩增前噬菌体CP-933Y上、下游各600 bp的同源臂序列;酶切后分别连接到p... 详细信息

目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌O157∶H7前噬菌体片段CP-933Y,进而构建CP-933Y缺失突变株。方法:以肠出血性大肠杆菌O157∶H7菌株为模板,加入酶切位点PCR扩增前噬菌体CP-933Y上、下游各600 bp的同源臂序列;酶切后分别连接到p UC19-kan质粒的卡那霉素(包含FRT位点)抗性基因两侧,构建中间是卡那霉素抗性基因标记含有目的基因上、下游同源序列的线性片段;导入含有p KD46质粒的O157∶H7菌株中,利用Red编码的同源重组酶使该片段与目的基因上、下游发生同源重组,卡那霉素抗性基因置换菌株中CP-933Y前噬菌体片段,最后导入p CP20质粒去除卡那霉素抗性标记基因。结果:经PCR及测序验证,O157∶H7菌株中前噬菌体片段CP-933Y被敲除,敲除株与野生株具有相似的生长曲线。结论:构建了大肠杆菌O157∶H7前噬菌体CP-933Y缺失株,为进一步研究前噬菌体CP-933Y的功能奠定了基础。

关键词：肠出血性大肠杆菌前噬菌体 CP-933Y Red重组系统

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立克次体的感染与免疫研究

立克次体的感染与免疫研究

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21世纪第五届全国人兽共患病学术研讨会

作者：熊小路温博海军事医学科学院微生物流行病研究所病原生物生物安全国家重点实验室北京100071

本文对在中国分得的黑龙江立克次体和立克次体中毒力最强的立氏立克次体在感染与免疫方面开展了系列研究，指出段长松等采用眼眶静脉丛注射将黑龙江立克次体感染BALB/c小鼠，定量PCR检测感染小鼠血液和主要器官中立克次体数量。结果在... 详细信息

本文对在中国分得的黑龙江立克次体和立克次体中毒力最强的立氏立克次体在感染与免疫方面开展了系列研究，指出段长松等采用眼眶静脉丛注射将黑龙江立克次体感染BALB/c小鼠，定量PCR检测感染小鼠血液和主要器官中立克次体数量。结果在感染后第l天便可以检出少量立克次体，第3天立克次体量显著增长，第6天达到顶峰，第9天立克次体量显著下降。该结果证明黑龙江立克次体能够在BALB/c小鼠体内建立有效的感染。另外，黑龙江立克次体感染第6天，小鼠肺和脑组织中检出高水平的立克次体，说明立克次体扩散到了肺和脑这两个重要的器官，肺和脑损伤是立克次体感染致命的最重要原因，齐永等采用膜不通透的生物素标记黑龙江立克次体表面蛋白，并用链亲和素亲和层析分离生物素标记的表面蛋白，再将层析分离的表面蛋白做等电聚焦和SDS-PAGE双向电泳，最后用串联质谱对电泳分离的表面蛋白进行鉴定。鉴定出黑龙江立克次体的25种表面蛋白，T细胞免疫球蛋白和粘附分子—3(Tim-3)最初被认为是Thl细胞的特异性受体，它通过调节Thl细胞的功能，维持免疫平衡和免疫耐受。研究发现Tim-3也在人血管内皮细胞上表达。血管内皮细胞是立克次体感染最主要的靶细胞。

关键词：立克次体感染状况免疫机制

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在入境船舶上采获毛蠓属一新种(双翅目:蠓科)

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中国媒介生物学及控制杂志 2016年第1期27卷 44-45页

作者：聂维忠薄景信虞以新秦皇岛出入境检验检疫局河北秦皇岛066002 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

该文报道了在秦皇岛港检疫锚地停泊的来自韩国的一艘入境船舶上捕获的输入性毛蠓一新种光阳毛蠓(Dasyhelea kwangyangi Nie,Yu et Bo ***.)。该新种阳茎中叶和阳基侧突与纳赤台毛蠓(Dasyhelea nachitai Yu et Liu,2005)近似,但其阳茎中... 详细信息

该文报道了在秦皇岛港检疫锚地停泊的来自韩国的一艘入境船舶上捕获的输入性毛蠓一新种光阳毛蠓(Dasyhelea kwangyangi Nie,Yu et Bo ***.)。该新种阳茎中叶和阳基侧突与纳赤台毛蠓(Dasyhelea nachitai Yu et Liu,2005)近似,但其阳茎中叶和阳基侧突端突均明显短于本新种。本新种尾器形态与Dasyhelea faciigera Kieffer,1924也很相似,但该种阳基侧突中突端部无缺裂与本新种鉴别。模式标本收藏于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标本馆(北京市丰台区东大街20号,100071)。

关键词：输入性活蠓毛蠓属新种

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动物气溶胶吸入暴露装置的研制

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中国医学装备 2016年第9期13卷 1-5页

作者：李劲松杨文慧何春雷李娜王洁胡凌飞李金忠张珂军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 青岛众瑞智能仪器有限公司山东青岛266101

目的:根据吸入药物治疗、疫苗气溶胶免疫和吸入毒理等研究及评价的需要,研制一种可进行包括药物、疫苗、微生物气溶胶、PM2.5粒子及纳米粒子等气溶胶动物吸入暴露的新装置。方法:根据小鼠、大鼠和豚鼠等实验动物的大小、呼吸量、一次实... 详细信息

目的:根据吸入药物治疗、疫苗气溶胶免疫和吸入毒理等研究及评价的需要,研制一种可进行包括药物、疫苗、微生物气溶胶、PM2.5粒子及纳米粒子等气溶胶动物吸入暴露的新装置。方法:根据小鼠、大鼠和豚鼠等实验动物的大小、呼吸量、一次实验的动物数量以及气溶胶均匀性要求,设计动物气溶胶吸入暴露系统;依据实验室生物安全和防护的要求,设计暴露装置的负压隔离防护系统;并对该装置进行性能测试验证。结果:经实验测试,该装置具有动物吸入暴露、防护功能,其性能达到了相关标准的要求。结论:动物气溶胶吸入暴露装置可进行动物气溶胶吸入暴露实验,具有对实验环境和人员的防护功能,以及对实验过程的压力、温湿度和含氧量实时监测的功能,适用于毒理、病原微生物和疫苗等气溶胶暴露研究的实验室。

关键词：气溶胶实验动物吸入暴露设备设计原理

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无针青霉素皮试法取代传统有针皮试的实验研究

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生物技术通讯 2016年第3期27卷 436-440页

作者：张良艳任天宇邢丽孙溢于姝王希良病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 江苏丞宇米特医疗器械有限公司江苏泰州225300

目的:开展无针青霉素皮试法与传统皮试方法的比较研究,为无针青霉素皮试法提供实验依据。方法:建立青霉素致敏豚鼠模型,并以无针和有针皮试法检测致敏豚鼠及对照豚鼠,比较其阳性检出率、假阳性率、漏检率和皮肤病理损伤评价等临床指标... 详细信息

目的:开展无针青霉素皮试法与传统皮试方法的比较研究,为无针青霉素皮试法提供实验依据。方法:建立青霉素致敏豚鼠模型,并以无针和有针皮试法检测致敏豚鼠及对照豚鼠,比较其阳性检出率、假阳性率、漏检率和皮肤病理损伤评价等临床指标。结果:无针及有针皮试法对豚鼠致敏模型的阳性检出率均为100%,无假阳性及漏检;且相较于传统有针皮试,无针皮试阳性结果更明显,造成的皮肤病理损伤更小。结论:无针青霉素皮试对过敏豚鼠检出精确,皮试阳性结果相比于传统有针注射更明显,并且无恐针情绪,造成法人皮肤病理损伤也更小,有望在临床上取代针头青霉素皮试法。

关键词：无针青霉素皮试试验无针注射青霉素致敏豚鼠模型阳性检出率皮肤病理损伤评价

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扎伊尔型、苏丹型埃博拉病毒TaqMan探针实时定量PCR核酸检测方法的建立

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国际药学研究杂志 2015年第1期42卷 80-84页

作者：贾佳康晓平李裕昌吴晓燕张雨张雪松霍耐凡冉鑫杨银辉军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的建立针对扎伊尔型(ZEBOV)及苏丹型埃博拉病毒(SEBOV)特异、灵敏和快速的Taq Man探针实时定量PCR核酸检测方法。方法选用世界卫生组织(WHO)参比实验室所使用的引物和探针序列,建立针对扎伊尔型及苏丹型埃博拉病毒的NP基因序列保守区... 详细信息

目的建立针对扎伊尔型(ZEBOV)及苏丹型埃博拉病毒(SEBOV)特异、灵敏和快速的Taq Man探针实时定量PCR核酸检测方法。方法选用世界卫生组织(WHO)参比实验室所使用的引物和探针序列,建立针对扎伊尔型及苏丹型埃博拉病毒的NP基因序列保守区的Taq Man探针实时定量PCR核酸检测方法,验证检测方法的灵敏性、特异性和稳定性,并与常规PCR检测方法进行比较。结果所建立的实时定量PCR方法可用于ZEBOV及SEBOV的特异性检测,较传统PCR方法反应快捷、灵敏,分别可达:ZEBOV 34拷贝/反应、SEBOV 24拷贝/反应;具有良好的特异性、稳定性和可重复性。结论建立了ZEBOV及SEBOV Taq Man探针实时定量PCR核酸检测方法,该方法可有望用于埃博拉病毒(EBOV)的实验室、临床及现场核酸检测。

关键词：埃博拉病毒,扎伊尔型埃博拉病毒,苏丹型 TaqMan探针实时定量PCR 核酸检测

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基于氨基酸的抗垢涂层及森林脑炎快速诊断

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化学传感器 2016年第1期36卷 48-55页

作者：王卓霄王汉奇程昉孙澹逸康晓平杨银辉大连理工大学制药科学与技术学院辽宁大连116024 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

待检样品中蛋白质的非特异性吸附是传感器检测临床血清亟待解决的问题。该文提出了一种在传感器表面制备抗蛋白质非特异性吸附涂层的方法,以二乙烯基砜(DVS)作为偶联剂,将天然氨基酸分子键合在经3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)修饰的传感... 详细信息

待检样品中蛋白质的非特异性吸附是传感器检测临床血清亟待解决的问题。该文提出了一种在传感器表面制备抗蛋白质非特异性吸附涂层的方法,以二乙烯基砜(DVS)作为偶联剂,将天然氨基酸分子键合在经3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)修饰的传感器表面,制备出一类新型抗垢涂层。通过蛋白吸附实验对多种氨基酸进行了筛选,并结合接触角的变化对键合条件进行了优化,并采用X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)表征了制备的涂层。结果表明,使用赖氨酸(50 mmol/L)在p H9.5的条件下制备的抗垢涂层具有最优的抗蛋白非特异性吸附能力。该文采用该方法在生物膜干涉传感器(Biolayer Interferometry,BLI)表面制备了抗垢涂层,并以森林脑炎为例,对森林脑炎患者血清进行检测,得到测量结果与临床ELISA检测结果相吻合,表明该文所建立的方法可以应用于血清样品的快速定量检测。该文构建的基于天然氨基酸的抗垢涂层,制备简单,成本低廉,而且容易实现抗垢与特异性临床诊断的双功能,具有临床应用潜力。

关键词：表面抗垢乙烯基砜化学天然氨基酸 APTES 森林脑炎

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埃博拉病毒核酸快速检测技术应用及展望

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国际药学研究杂志 2015年第1期42卷 76-79,4页

作者：贾佳康晓平杨银辉军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

埃博拉病毒（EBOV）是引起人类及哺乳动物高致死性出血热的病原体,2013～2014年已引起了严重的西非埃博拉出血热。快速检测确证病原对于防止疾病的进一步扩散至关重要。目前,实时荧光定量PCR技术及环介导等温扩增技术（LAMP）已经应用于... 详细信息

埃博拉病毒（EBOV）是引起人类及哺乳动物高致死性出血热的病原体,2013～2014年已引起了严重的西非埃博拉出血热。快速检测确证病原对于防止疾病的进一步扩散至关重要。目前,实时荧光定量PCR技术及环介导等温扩增技术（LAMP）已经应用于EBOV的核酸快速检测,依赖核酸序列的扩增技术（NASBA）及重组聚合酶扩增技术（RPA）有望成为EBOV新型核酸快速现场检测技术。本文对几种核酸快速检测方法进行综述。

关键词：核酸检测埃博拉病毒,扎伊尔型埃博拉出血热

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贝氏柯克斯体穿梭载体构建及转化方法建立

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生物技术通讯 2016年第5期27卷 625-628页

作者：罗声栋卢姗姗胡燕王涛于永慧冯乐孙志会宋立华病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 解放军第302医院临床研究管理中心北京100039

目的:基于大肠杆菌质粒pMMB207,构建贝氏柯克斯体穿梭载体,建立贝氏柯克斯体转化系统。方法:利用PCR分别扩增eGFP基因、Kan^R抗性基因、贝氏柯克斯体组成型表达启动子P311和P1169等4段序列,然后用融合PCR技术将4段序列融合为P311-eGFP-P... 详细信息

目的:基于大肠杆菌质粒pMMB207,构建贝氏柯克斯体穿梭载体,建立贝氏柯克斯体转化系统。方法:利用PCR分别扩增eGFP基因、Kan^R抗性基因、贝氏柯克斯体组成型表达启动子P311和P1169等4段序列,然后用融合PCR技术将4段序列融合为P311-eGFP-P1169-Kan^R串联序列,经KpnⅠ和XhoⅠ酶切后,连接至经同样双酶切的pMMB207骨架上,构建穿梭载体p207-GK;将穿梭载体电转化至贝氏柯克斯体,用ACCM-2培养基进行传代培养或感染BGM细胞;利用倒置荧光显微镜观察eGFP基因的表达,传代至eGFP基因高表达时,用半固体平板培养法克隆分纯贝氏柯克斯体转化株。结果:构建了贝氏柯克斯体穿梭载体,获得了稳定表达eGFP的贝氏柯克斯体转化株,并完成了克隆分纯。结论:建立了完整的贝氏柯克斯体转化系统,为后续用遗传学方法研究贝氏柯克斯体奠定了基础。

关键词：贝氏柯克斯体 Q热穿梭载体转化 RSF1010质粒

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昌吉州吸血蠓的调查研究

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中华卫生杀虫药械 2016年第1期22卷 77-78页

作者：陈联宏朱明福阿依肯虞以新昌吉州疾病预防控制中心新疆昌吉831100 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的掌握昌吉地区吸血蠓的种群组成及其地理分布。方法采用网捕法、灯诱法采集蠓。结果昌吉地区吸血蠓2属13种,基本查清了昌吉州吸血蠓的分布及优势种的数量、动态,对人、畜的危害,阐明了它们在时间、空间、地理上的分布状况及危害程度... 详细信息

目的掌握昌吉地区吸血蠓的种群组成及其地理分布。方法采用网捕法、灯诱法采集蠓。结果昌吉地区吸血蠓2属13种,基本查清了昌吉州吸血蠓的分布及优势种的数量、动态,对人、畜的危害,阐明了它们在时间、空间、地理上的分布状况及危害程度。结论此次调查为我国进行蠓类的研究及蠓媒病的防治提供了基础资料。

关键词：吸血蠓种类分布分布状况

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