检索结果-内蒙古大学图书馆

云南省2008-2009年HIV-1病毒株亚型分布

中华流行病学杂志 2012年第8期33卷 836-840页

作者：杨绍敏李惠琴陈立力李林刘永健钟敏李健健杨壁珲高丽樊移山李敬云云南省传染病专科医院艾滋病关爱中心HIV实验室昆明650301 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的了解云南省目前HIV-1流行株的基因型及其地区和人群分布。方法收集2008-2009年云南省15个地市788例HIV感染者／艾滋病患者（HIV／AIDS）的血浆标本和背景信息，采用RT-PCR法分别扩增HIV-1 gag、pol全长基因（1584bp和3147bp）及env... 详细信息

目的了解云南省目前HIV-1流行株的基因型及其地区和人群分布。方法收集2008-2009年云南省15个地市788例HIV感染者／艾滋病患者（HIV／AIDS）的血浆标本和背景信息，采用RT-PCR法分别扩增HIV-1 gag、pol全长基因（1584bp和3147bp）及env基因的C2V3片段（558bp），序列编辑后用Genotyping及Mega5．03软件工具确定病毒基因型，分析HIV-1株的地区和人群分布特征。结果788例标本获得1728条HIV-1基因序列，其中全长gag基因序列599条、全长pof基因序列564条、env基因C2V3区序列525条，确定617例基因亚型，构成比分别为CRF08_BC（50．2％）、CRF01_AE（25．0％）、未知重组（10．2％）、CRF07_BC（9．2％）、C亚型（2．9％）和B（B′）亚型（2．4％）。HIV-1株在云南省具有地域分布特征，可分为以临沧和昆明为代表的CRF08_BC为主的地区，以德宏和西双版纳为代表的CRF08_BC与CRF01_AE构成比相近的地区；未知重组型在云南省少数民族中所占比例（17．0％）显著高于汉族（6．7％）；异性性传播感染者和静脉注射吸毒感染者的CRF08_BC亚型均占总数的50．0％以上，但前者CRF01_AE的构成比占约30．0％，后者未知重组型和CRF07_BC的比例分别达到约15．0％。未知重组病毒株呈现两种重组模式，分别为B（B′）／C重组和以CRF01_AE为母株嵌入B（B′）和／或C片段重组，并以前者为主（74．6％）。结论云南省HIV-1株组成复杂，具有显著的地域、民族和传播途径相关的特征，并出现新型重组病毒株，应密切监测。

关键词：艾滋病毒1型基因型分子流行病学

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S/D法对人凝血因子Ⅷ产品中人免疫缺陷病毒灭活效果的研究

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中国消毒学杂志 2012年第8期29卷 677-678,681页

作者：刘思扬庄道民董如华白丽李韩平鲍作义李林刘永健王晓林李天一李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究S/D法对人凝血因子Ⅷ中污染的人免疫缺陷病毒灭活效果。方法采用细胞培养法,对S/D处理人凝血因子Ⅷ灭活HIV的效果进行了检测。结果在常温(25℃)条件下,在污染有HIV的人凝血因子Ⅷ种混入体积分数9%S/D灭活剂,作用60 min,HIV灭活... 详细信息

目的研究S/D法对人凝血因子Ⅷ中污染的人免疫缺陷病毒灭活效果。方法采用细胞培养法,对S/D处理人凝血因子Ⅷ灭活HIV的效果进行了检测。结果在常温(25℃)条件下,在污染有HIV的人凝血因子Ⅷ种混入体积分数9%S/D灭活剂,作用60 min,HIV灭活对数值为6.83。重复处理3批人凝血因子Ⅷ制品,对HIV均达到完全灭活,经细胞培养盲传三代,均未出现细胞病变。结论 S/D法能够完全灭活人凝血因子Ⅷ产品中污染的人免疫缺陷病毒,灭活效果可靠。

关键词：人凝血因子Ⅷ 人免疫缺陷病毒 S/D处理灭活效果

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结核分枝杆菌ESX-1分泌蛋白对巨噬细胞调控作用

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中国公共卫生 2012年第8期28卷 1117-1120页

作者：屈野徐俊杰陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

近年来结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculo-sis,MTB）多重耐药性（multi-drug resistance,MDR）的不断出现以及艾滋病人群对MTB易感性的增加,导致患结核病的人数迅速增加,死亡率也在不断上升,大有死灰复燃的趋势,这促使科研工作者... 详细信息

近年来结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculo-sis,MTB）多重耐药性（multi-drug resistance,MDR）的不断出现以及艾滋病人群对MTB易感性的增加,导致患结核病的人数迅速增加,死亡率也在不断上升,大有死灰复燃的趋势,这促使科研工作者加速了新疫苗研制和新药物的开发,而与之相关的就是对关的就是对结核分枝杆菌致病机理和发病机制的深人研究提出了非常紧迫的要求。

关键词：结核分枝杆菌 ESX-1分泌蛋白巨噬细胞

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shRNA随机文库结合TK自杀基因筛选靶向HIV-1 LTR相关宿主因子

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中国生物工程杂志 2012年第9期32卷 48-54页

作者：李建彬米志强安小平谭莉陈斌王晓娜范华昊张文慧张博方祥童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 华南农业大学食品学院广州510642

构建shRNA随机文库与HIV-1 LTR启动胸苷激酶基因(TK基因)稳定表达的稳定细胞系HEK293/TK,将两者结合起来,筛选靶向HIV-1 LTR相关宿主因子。方法:通过化学合成含有19个随机脱氧核苷酸的发夹结构,将其退火补平后与合成的接头Linker连接进... 详细信息

构建shRNA随机文库与HIV-1 LTR启动胸苷激酶基因(TK基因)稳定表达的稳定细胞系HEK293/TK,将两者结合起来,筛选靶向HIV-1 LTR相关宿主因子。方法:通过化学合成含有19个随机脱氧核苷酸的发夹结构,将其退火补平后与合成的接头Linker连接进行PCR反应,将PCR产物酶切后置于慢病毒载体pLenti-U6启动子下游由此构建shRNA随机文库;利用重叠PCR将HIV-1 LTR片段和TK基因连接起来,连接产物经酶切后与pcDNA3.1载体连接;将连接正确的质粒转染HEK293细胞同时用G418加压筛选获得稳定细胞系HEK293/TK;将所获得的文库质粒包装成慢病毒后侵染所构建的HEK293/TK细胞系,通过加入药物GCV进行加压筛选获得存活细胞。结果:成功筛选到加药后存活下来的细胞,抽提细胞基因组,采用巢式PCR扩增目的干扰序列并用Western blot对干扰序列进行验证,鉴定获得一个克隆所表达的shRNA能对TK基因的表达起到抑制作用,通过测序分析获得其干扰序列,该序列很有可能针对HIV-1 LTR某宿主相关因子。结论:成功构建了一种筛选HIV-1 LTR相关宿主因子的方法,筛选所得序列可以定位到具体相关宿主因子,为靶向筛选抗HIV-1药物提供了重要手段。

关键词：慢病毒载体 shRNA随机文库人类免疫缺陷病毒(HIV-1) 末端重复序列(LTR) TK自杀基因

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妥洛特罗控释透皮贴剂的处方、工艺及其体外透皮吸收研究

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军事医学 2012年第1期36卷 44-48页

作者：李海晶张东娜唐玲杨柳窦媛媛王洪权广西医科大学南宁530021 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对脂溶性妥洛特罗贴剂的处方与制备工艺进行筛选和研究,获得一种有效控制药物透过的工艺方法。方法采用正交设计实验,考察聚异丁烯B50和PB1300与环烷烃油Naphsol 200(N200)等3种因素对妥洛特罗药物透过速率、贴剂持黏力及初黏力的影... 详细信息

目的对脂溶性妥洛特罗贴剂的处方与制备工艺进行筛选和研究,获得一种有效控制药物透过的工艺方法。方法采用正交设计实验,考察聚异丁烯B50和PB1300与环烷烃油Naphsol 200(N200)等3种因素对妥洛特罗药物透过速率、贴剂持黏力及初黏力的影响,确定最优处方;考察不同的涂布方法对妥洛特罗贴剂透皮速率的影响,得到最佳制备工艺。结果与结论以最优处方配比B50∶PB1300∶N200=1.5∶1∶1,确立了药胶用量比为2∶1的两层涂布法为最佳工艺方法。获得的贴剂黏性适宜,达到了匀速、稳态透皮的制剂学要求。

关键词：妥洛特罗透皮贴剂处方工艺研究

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登革病毒抗体依赖性感染增强作用的研究进展

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军事医学 2012年第1期36卷 73-76页

作者：宋克玉李晓峰江振友秦成峰暨南大学医学院微生物与免疫学教研室广州510632 病原微生物生物安全国家重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

抗体依赖性感染增强作用(antibody-dependent enhancement,ADE)在登革病毒的致病机制中发挥重要作用。在存在亚中和浓度抗体的条件下,登革病毒可通过Fc受体或补体受体等途径进入靶细胞,进而导致ADE的发生。ADE的发生受病毒和宿主一系列... 详细信息

抗体依赖性感染增强作用(antibody-dependent enhancement,ADE)在登革病毒的致病机制中发挥重要作用。在存在亚中和浓度抗体的条件下,登革病毒可通过Fc受体或补体受体等途径进入靶细胞,进而导致ADE的发生。ADE的发生受病毒和宿主一系列复杂因素的调节,直接影响患者的临床表现和病情进展,对其作用机制的研究有助于加深对登革出血热发病机制的认识,对登革热疫苗以及治疗性抗体的研发具有重要意义。本文综述了登革病毒ADE的研究进展。

关键词：登革病毒抗体依赖性感染增强疫苗抗体

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猪溶血素突变体的构建及活性评价

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第6期28卷 580-582页

作者：任志强郑玉玲甘淑珍律清宇郝淮杰姜永强宗浩四川师范大学生命科学学院四川成都610101 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101

目的:构建无溶血活性的猪溶血素突变体,并对制备蛋白进行功能评价。方法:根据猪溶素的晶体结构,采用定点突变分别将其353位脯氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸和缬氨酸。重组表达的突变体蛋白采用镍柱亲和层析进行柱上复性后,评价纯化蛋白的溶... 详细信息

目的:构建无溶血活性的猪溶血素突变体,并对制备蛋白进行功能评价。方法:根据猪溶素的晶体结构,采用定点突变分别将其353位脯氨酸突变为丙氨酸、亮氨酸和缬氨酸。重组表达的突变体蛋白采用镍柱亲和层析进行柱上复性后,评价纯化蛋白的溶血活性和免疫原性。结果:获得三种猪溶素突变体,SLY(P353A),SLY(P353L)和SLY(P353V)。溶血试证明SLY(P353V)无溶血活性,蛋白质免疫印迹和动物实验显示SLY(P353V)具有免疫原性。结论:猪溶素突变体SLY(P353V)无溶血活性,有免疫原性。

关键词：猪溶血素定点突变猪链球菌

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多种食源性致病菌的基因芯片检测技术

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解放军医学杂志 2012年第8期37卷 765-769页

作者：高兴曲险峰孙伟李华宇辛文文高姗康琳王景林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室解放军63850部队防疫检验及环境监测所

目的探讨随机PCR结合基因芯片技术用于多种食源性致病菌筛查检测的可行性。方法利用Clustal X和Oligo 6.0软件设计探针,进行生物信息学比对验证特异性,探针末端修饰后合成并制备基因芯片。使用锚定随机引物扩增细菌基因组DNA,偶联荧光... 详细信息

目的探讨随机PCR结合基因芯片技术用于多种食源性致病菌筛查检测的可行性。方法利用Clustal X和Oligo 6.0软件设计探针,进行生物信息学比对验证特异性,探针末端修饰后合成并制备基因芯片。使用锚定随机引物扩增细菌基因组DNA,偶联荧光染料的扩增产物与芯片杂交后扫描检测。对随机PCR及杂交反应等一系列检测条件进行优化。选取16种病原细菌进行芯片特异性验证,使用4种食源性致病菌DNA进行芯片灵敏度检测及重复性评价,制备细菌DNA混合样本和痢疾志贺菌模拟水污染样本对芯片检测效能进行初步考核。结果 9种食源性致病菌获得阳性结果,基因组DNA检测灵敏度102～103pg/μl,芯片重复性变异系数(CV)值<15%,混合样本检测与预期结果一致,最低可检测水样本中痢疾志贺菌的最低浓度为3.54×105cfu/ml。结论初步建立的基于随机引物PCR的基因芯片技术进行多种食源性致病菌检测的方法,为病原细菌高通量筛查检测提供了一种新的思路。

关键词：食源性致病菌寡核苷酸序列分析随机扩增多态DNA技术

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Luminex液相芯片技术检测6种虫媒病毒方法的建立

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解放军医学杂志 2012年第5期37卷 459-463页

作者：范丽李裕昌康晓平林方魏婧靖杨银辉熊正英陕西师范大学体育学院西安710062 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的建立森林脑炎病毒(TBEV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)、辛得比斯病毒(SINV)、西尼罗病毒(WNV)、东部马脑炎病毒(EEEV)、登革热病毒(DENV) 6种虫媒病毒的液相芯片检测技术,并对该方法进行评价。方法制备6种虫媒病毒的特异性单克隆抗体,... 详细信息

目的建立森林脑炎病毒(TBEV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)、辛得比斯病毒(SINV)、西尼罗病毒(WNV)、东部马脑炎病毒(EEEV)、登革热病毒(DENV) 6种虫媒病毒的液相芯片检测技术,并对该方法进行评价。方法制备6种虫媒病毒的特异性单克隆抗体,检测抗体标记生物素,捕获抗体偶联荧光聚苯乙烯微球,建立双抗体夹心的液相芯片检测技术,利用Luminex 200分析系统对6种虫媒病毒分别进行单一、多重液相芯片检测。结果将平均荧光强度的判定阈值定为背景对照的2倍可对上述6种虫媒病毒进行有效鉴定。多批次实验均能对6种单一病毒样本和混合病毒样本进行准确鉴定,未出现交叉反应,批次间变异系数(CV)均小于7%,表明该方法的稳定性和特异性均较好。同时对该方法的敏感性进行鉴定,结果表明检测TBEV、WNV、JEV、SINV、EEEV、DENV的敏感性分别达到25.00、781.25、781.25、390.63、781.25、1562.5pfu/ml。该方法与ELISA相比具有灵敏性高、重复性好、节省样本和时间等优点,特异性相当。结论通过制备特异性单克隆抗体,成功建立了可同时检测6种虫媒病毒的液相芯片检测技术平台。该平台对于病原体的检测具有较好的应用前景。

关键词：芯片分析技术虫媒病毒敏感性与特异性

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大流行甲型H1N1流感病毒变异株的小鼠感染实验研究

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军事医学 2012年第7期36卷 508-511页

作者：刘志辉姜涛刘娟年庆功秦鄂德冉多良秦成峰新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对甲型H1N1流感病毒变异株的小鼠感染特征进行观察。方法经过体外鸡胚/MDCK细胞传代和筛选,获得1株甲型H1N1流感病毒变异株(vCA07);使用不同剂量流感病毒滴鼻感染BALB/c小鼠后,计算半数致死量和半数感染量,观察小鼠感染后的体质量... 详细信息

目的对甲型H1N1流感病毒变异株的小鼠感染特征进行观察。方法经过体外鸡胚/MDCK细胞传代和筛选,获得1株甲型H1N1流感病毒变异株(vCA07);使用不同剂量流感病毒滴鼻感染BALB/c小鼠后,计算半数致死量和半数感染量,观察小鼠感染后的体质量变化、肺部病毒增殖、肺部组织病理变化等。结果与野生型毒株相比,甲型H1N1流感病毒变异株对BALB/c小鼠的致病性显著提高,其可在小鼠肺组织中高效增殖,并导致显著的病理损伤。结论甲型H1N1流感病毒变异株感染特征得以明确,为进一步建立高致病性甲型H1N1流感病毒的小鼠感染模型以及大流行甲型H1N1流感病毒致病机制的研究奠定了基础。

关键词：甲型H1N1流感病毒动物模型突变

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