检索结果-内蒙古大学图书馆

一种蜱类保护性抗原蛋白——Subolesin

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第3期19卷 179-185页

作者：王欣孙毅军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 安徽医科大学合肥230032

Subolesin是一种进化上保守的蛋白，在蜱类传播病原中发挥重要作用。本文综述了subolesin对于蜱的繁殖、发育、病原感染与传播等几个方面的研究进展，并且评价其作为传播阻断疫苗，在监测蜱类叮咬并预防蜱传疾病中的应用前景。

关键词： Subolesin 传播阻断疫苗蜱

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肠出血性大肠杆菌毒力相关基因突变株的构建

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生物技术通讯 2012年第5期23卷 640-643页

作者：姜楠王琴李涛侯晓军肖乐房华丽罗森王慧军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 贵阳医学院贵阳550001

目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌O157∶H7的毒力基因espA、espB、espD,构建3株突变株。方法:以肠出血性大肠杆菌O157∶H7为模板,PCR扩增基因两翼的同源序列;将PCR产物插入pEASY-T1载体并测序,将测序正确的上、下游同源序列分... 详细信息

目的:利用Red重组系统敲除肠出血性大肠杆菌O157∶H7的毒力基因espA、espB、espD,构建3株突变株。方法:以肠出血性大肠杆菌O157∶H7为模板,PCR扩增基因两翼的同源序列;将PCR产物插入pEASY-T1载体并测序,将测序正确的上、下游同源序列分步酶切,构建于pUC19-kan质粒上,经PCR获得两端同源序列中间嵌合卡那霉素抗性基因标记的线性片段,利用质粒pKD46介导的重组技术,敲除espA、espB、espD基因,之后转入pCP20质粒以去除抗性标记,最后测定突变株及野生菌株的生长曲线。结果:敲除了肠出血性大肠杆菌O157∶H7的毒力基因espA、es pB、espD,获得3株突变株,突变株与野生株的生长曲线相近。结论:为进一步研究espA、espB、espD基因在肠出血性大肠杆菌O157∶H7致病过程中的作用奠定了基础。

关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7 Red重组系统 espA基因 espB基因 espD基因

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高级别生物安全实验室管理要点探讨

高级别生物安全实验室管理要点探讨

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中国微生物学会微生物生物安全专业委员会成立大会暨第一届学术研讨会

作者：于学东王贵杰军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

笔者结合实验室10余年成功运行管理经验，就高级别生物安全实验室管理控制要点主要从实验室生物安全管理组织体系、生物安全管理制度、设施安全、人员资质、人员防护与健康监测、卫生与废物处理、生物安全检查制度及学术交流等几方面进... 详细信息

笔者结合实验室10余年成功运行管理经验，就高级别生物安全实验室管理控制要点主要从实验室生物安全管理组织体系、生物安全管理制度、设施安全、人员资质、人员防护与健康监测、卫生与废物处理、生物安全检查制度及学术交流等几方面进行了阐述。并对高级别生物实验室管理人员资质要求、技术保障、交流合作等几方面做了分析。

关键词：生物实验室安全管理人力资源健康监测

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重组尿酸氧化酶发酵工艺优化

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生物技术通讯 2012年第2期23卷 207-210页

作者：杨秀旭刘树玲任军于长明李建民陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

目的:优化并获得重组尿酸氧化酶(rUOX)基因工程大肠杆菌BL21(DE3)/pET-32a-uox高密度发酵的工艺参数。方法:在三角摇瓶中进行培养条件的优化实验,分别考察了pH值、接种量、无机盐、碳源、诱导强度等对工程菌生长和重组蛋白表达的影响,... 详细信息

目的:优化并获得重组尿酸氧化酶(rUOX)基因工程大肠杆菌BL21(DE3)/pET-32a-uox高密度发酵的工艺参数。方法:在三角摇瓶中进行培养条件的优化实验,分别考察了pH值、接种量、无机盐、碳源、诱导强度等对工程菌生长和重组蛋白表达的影响,得到了优化的发酵条件;在此基础上放大至NBS BIOFLO 110 14 L发酵罐,通过对诱导时机的优化,利用分批补料发酵的方式,使rUOX在高密度培养的条件下得到高表达。结果:在优化的发酵条件下,菌体密度(D600nm)最终达到50以上,相当于20 g/L干重;可溶性rUOX占菌体总蛋白量的45%,其含量达到3.45 g/L。结论:为规模化制备重组黄曲霉尿酸氧化酶奠定了基础。

关键词：尿酸氧化酶高密度培养优化

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山东临沂市手足口病传播时空特征分析

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中国公共卫生 2012年第1期28卷 121-122页

作者：孙大鹏姜宝法丁淑军王连森方立群曹务春王显军山东大学公共卫生学院卫生统计与流行病学研究所济南250012 山东省疾病预防控制中心山东省传染病预防控制重点实验室军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

手足口病（hand，foot，andmonthdisease，HFMD）是由多种肠道病毒引起的常见传染病，多发于〈5岁婴幼儿。可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹、溃疡，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。2007年山东省临沂地区... 详细信息

手足口病（hand，foot，andmonthdisease，HFMD）是由多种肠道病毒引起的常见传染病，多发于〈5岁婴幼儿。可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹、溃疡，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。2007年山东省临沂地区出现手足口病暴发流行，一些患儿出现严重并发症，引起社会广泛关注。为了解临沂市手足口病流行特点，本研究对临沂市2007—2010年的手足口病疫情资料进行了分析。结果报告如下。

关键词：手足口病时空分析趋势面模型

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中国血蜱属（蜱螨目：硬蜱科）研究：嗜鸟血蜱亚属Subgenus Ornithophysalis附一新记载种

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第1期19卷 50-56页

作者：孙毅魏川川许荣满刘晓军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 贵阳医学院贵阳550000 长治医学院长治046000

中国的血蜱属嗜鸟血蜱亚属已知有3种,即嗜鸟血蜱 Haemaphysalis （Ornithophilis） ornithophila Hoogstraal et Kohls,板齿鼠血蜱 Hae.（Or.） bandicota Hoogstraal et Kohls,钝刺血蜱 Hae.（Or.） doenitzi Warburton et Nuttall,加... 详细信息

关键词：血蜱属嗜鸟血蜱亚属检索表

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白纹伊蚊T7噬菌体展示cDNA文库的构建

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第2期19卷 78-83页

作者：冀霞赵瑞君刘美德赵彤言山西医科大学病原生物学教研室太原030001 军事医学科学院微生物流行病研究所/病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为筛选白纹伊蚊与相关蚊媒病毒相互作用的基因,本文构建了白纹伊蚊Aedes albopictusT7噬菌体展示eDNA文库,分离与纯化白纹伊蚊mRNA,所得mRNA经反转录合成双链cDNA后,在双链cDNA末端加上定向EcoRI/HindIn接头使其两端分别带EcoRI和Hind11... 详细信息

为筛选白纹伊蚊与相关蚊媒病毒相互作用的基因,本文构建了白纹伊蚊Aedes albopictusT7噬菌体展示eDNA文库,分离与纯化白纹伊蚊mRNA,所得mRNA经反转录合成双链cDNA后,在双链cDNA末端加上定向EcoRI/HindIn接头使其两端分别带EcoRI和Hind11I黏性末端;接着用MiniColumn纯化收集300bp以上的双链cDNA片段连接于T7 Select 10-3b载体;经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建1v7噬菌体展示cDNA文库。所建文库的库容量经测定为1.7×10'pfu/mL,扩增后文库滴度为2.5×10^(15)pfu/mL。对从原始文库中随机挑取的50个噬菌斑进行PCR鉴定,重组率为95%以上;阳性克隆片段长度分布在200－2000bp,其中有90%的插入片段大于300bp。本文所构建的白纹伊蚊T7噬菌体展示cDNA文库,满足cDNA文库的基本要求,可以用于筛选白纹伊蚊与相关蚊病毒相互作用的基因。

关键词：伊蚊属 DNA 互补细菌噬菌体T7 数据库文献型基因文库蚊科细菌噬菌体基因

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白纹伊蚊T7噬茵体展示cDNA文库的构建

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第2期19卷 78-83页

作者：冀霞赵瑞君刘美德赵彤言山西医科大学病原生物学教研室太原030001 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为筛选白纹伊蚊与相关蚊媒病毒相互作用的基因，本文构建了白纹伊蚊Aedes albopictusT7噬菌体展示eDNA文库，分离与纯化白纹伊蚊mRNA，所得mRNA经反转录合成双链cDNA后，在双链cDNA末端加上定向EcoRI／HindIn接头使其两端分别带EcoRI和H... 详细信息

为筛选白纹伊蚊与相关蚊媒病毒相互作用的基因，本文构建了白纹伊蚊Aedes albopictusT7噬菌体展示eDNA文库，分离与纯化白纹伊蚊mRNA，所得mRNA经反转录合成双链cDNA后，在双链cDNA末端加上定向EcoRI／HindIn接头使其两端分别带EcoRI和Hind11I黏性末端；接着用MiniColumn纯化收集300bp以上的双链cDNA片段连接于T7 Select 10—3b载体；经体外包装后，以BLT5403为受体菌构建1v7噬菌体展示cDNA文库。所建文库的库容量经测定为1．7×10’pfu／mL，扩增后文库滴度为2．5×10^（15）pfu／mL。对从原始文库中随机挑取的50个噬菌斑进行PCR鉴定，重组率为95％以上；阳性克隆片段长度分布在200～2000bp，其中有90％的插入片段大于300bp。本文所构建的白纹伊蚊T7噬菌体展示cDNA文库，满足cDNA文库的基本要求，可以用于筛选白纹伊蚊与相关蚊病毒相互作用的基因。

关键词：白纹伊蚊蚊媒病毒 T7噬菌体 cDNA展示文库

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三种商业化二氯苯醚菊酯杀虫剂剂型对致倦库蚊的灭效评估

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寄生虫与医学昆虫学报 2012年第1期19卷 19-24页

作者： A. O. J. Amoo 薛瑞德 Whitney A. Qualls 汪中明赵彤言 Anastasia Mosquito Control District 500 Old Beach Road St. Augustine FL 32080 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为评价二氯苯醚菊酯3种不同的商业剂型对致倦库蚊的杀灭效果,本文采用室内药膜法、野外现场挂笼实验评价了3种杀虫剂剂型超低容量喷雾的杀灭效果.结果表明,这3种剂型均对野外现场致倦库蚊有杀灭毒性,其中Aqua-Kontrol和AqualuerTM 在... 详细信息

为评价二氯苯醚菊酯3种不同的商业剂型对致倦库蚊的杀灭效果,本文采用室内药膜法、野外现场挂笼实验评价了3种杀虫剂剂型超低容量喷雾的杀灭效果.结果表明,这3种剂型均对野外现场致倦库蚊有杀灭毒性,其中Aqua-Kontrol和AqualuerTM 在1 h内致死率均大于80%.室内药效测定表明,3种药剂均对致倦库蚊有良好灭效,其中水性列喜镇的80%致倦库蚊致死时间要显著大于另2种药剂.

关键词：水性列喜镇超低容量喷雾杀虫剂生物测定二氯苯醚菊酯

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人免疫缺陷病毒假病毒药物筛选模型的构建及其应用

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生物技术通讯 2012年第4期23卷 481-484页

作者：李建彬陈斌米志强安小平李存刘大斌王晓娜范华昊方祥童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 华南农业大学食品学院广东广州510642

目的:构建人免疫缺陷病毒(HIV)假病毒模型,用多种HIV逆转录酶和蛋白酶抑制剂作用于该模型,以检测其是否能有效用于HIV抑制药物的筛选。方法:通过载体改造获得最终慢病毒载体puc18-NL4-3-LUC-stop,其中含有萤光素酶基因,将该载体与包膜质... 详细信息

目的:构建人免疫缺陷病毒(HIV)假病毒模型,用多种HIV逆转录酶和蛋白酶抑制剂作用于该模型,以检测其是否能有效用于HIV抑制药物的筛选。方法:通过载体改造获得最终慢病毒载体puc18-NL4-3-LUC-stop,其中含有萤光素酶基因,将该载体与包膜质粒VSV-G共转染293FT细胞,包装产生HIV假病毒,在假病毒包装和病毒感染293FT细胞的过程中加入蛋白酶和逆转录酶抑制剂,通过检测感染细胞中萤光素酶的表达来检测该模型的有效性,并利用此模型检测药物的抗病毒效果。结果:将HIV逆转录酶和蛋白酶抑制剂作用于该假病毒模型时发现萤光素酶的表达得到很大程度的抑制。结论:建立了HIV假病毒药物筛选模型,该模型以萤光素酶基因作为报告基因,快速灵敏,在抗HIV药物筛选中有一定的应用价值。

关键词：人免疫缺陷病毒慢病毒载体假病毒人免疫缺陷病毒抑制剂药物筛选

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