检索结果-内蒙古大学图书馆

重组肉毒神经毒素A轻链(BoNT/A LC)突变体的构建、表达与活性分析

生命科学研究 2011年第3期15卷 263-267页

作者：宋孚洋马臣杰高姗康琳王玉炯王景林宁夏大学生命科学学院中国宁夏回族自治区银川750021 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室中国北京100071

A型肉毒神经毒素的轻链(BoNT/A LC)是一种锌依赖性的金属内肽酶.通过X射线分析其结构并结合一些文献报道表明,轻链上的Arg362和Tyr365直接参与了酶的催化作用,而Glu350则处于其活性位点的中心位置.采用定点突变技术,对编码这3个关键性... 详细信息

A型肉毒神经毒素的轻链(BoNT/A LC)是一种锌依赖性的金属内肽酶.通过X射线分析其结构并结合一些文献报道表明,轻链上的Arg362和Tyr365直接参与了酶的催化作用,而Glu350则处于其活性位点的中心位置.采用定点突变技术,对编码这3个关键性的氨基酸位点的碱基进行突变(Arg362Ala、Tyr365Phe、Glu350Ala),获得了BoNT/A LC突变体.突变体蛋白与BoNT/A的底物蛋白SNAP-25进行切割反应,结果表明,未经突变的BoNT/A轻链蛋白能够特异性地识别SNAP-25蛋白上的Q197-R198位点,而突变体蛋白则完全无法识别该位点,不具有金属内肽酶活性,成功地去除了肉毒神经毒素的毒力,为下一步的全长肉毒神经毒素重组疫苗的研究打下了基础.

关键词：肉毒神经毒素轻链突变

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利用高通量测序快速检测疑似感染患者体内未知病原体

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生物信息学 2011年第4期9卷 303-306,313页

作者：李建彬庄璐安小平米志强范华昊李存陈斌刘玮鲍一丹罗征秀刘恩梅方祥童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 华南农业大学食品学院广州510642 重庆医科大学儿童医院重庆400012

采用第二代高通量测序技术从复杂的疑似感染患者组织标本中直接快速检测未知病原体。方法:取临床和实验室均不能确诊的病人血液和淋巴组织,进行病毒DNA和RNA的提取,直接用于第二代高通量测序,将测序结果用于生物信息学分析,与本地化的... 详细信息

采用第二代高通量测序技术从复杂的疑似感染患者组织标本中直接快速检测未知病原体。方法:取临床和实验室均不能确诊的病人血液和淋巴组织,进行病毒DNA和RNA的提取,直接用于第二代高通量测序,将测序结果用于生物信息学分析,与本地化的病毒核酸数据库进行比对,寻找潜在的病毒序列。结果:生物信息学分析显示,3901条序列reads与人内源性病毒K113同源;当使用K113特异性引物对经过DnaseI处理的患者和正常个体进行荧光定量RT-PCR时,发现在患者体内K113病毒基因的表达远远高于正常个体,提示该患者可能存在K113病毒的感染。结论:第二代高通量测序可能用于快速检测未知病原体。

关键词：高通量测序未知病原体检测内源性病毒K113

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河南某农村艾滋病患者劣势耐药毒株的进化及原发耐药研究

河南某农村艾滋病患者劣势耐药毒株的进化及原发耐药研究

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第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：李韩平郭伟朱新鹏王哲刘永健鲍作义李林庄道民刘思扬王铮王晓林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病源微生物生物安全国家重点实验室河南省疾病预防控制中心

目的了解河南省部分艾滋病患者抗病毒治疗效果及耐药发生情况,分析劣势耐药毒株在该人群本底存在情况。方法以河南某农村149名初始接受抗病毒治疗的艾滋病患者为研究对象,采用自建(In-house)基因型耐药检测方法分析抗病毒治疗失败患者HI... 详细信息

目的了解河南省部分艾滋病患者抗病毒治疗效果及耐药发生情况,分析劣势耐药毒株在该人群本底存在情况。方法以河南某农村149名初始接受抗病毒治疗的艾滋病患者为研究对象,采用自建(In-house)基因型耐药检测方法分析抗病毒治疗失败患者HIV-1耐药发生情况,对抗病毒治疗后产生耐药的病例采用等位基因特异性实时定量ASPCR(Allele-specific real-time PCR)方法检测其抗病毒治疗前样本劣势耐药毒株存在情况。结果抗病毒治疗后患者的HIV-1病毒载量显著下降(t=275,p=0.0001),但CD4+T淋巴细胞绝对数无明显变化(t=1.765168,p=0.0852)。抗病毒治疗失败患者中耐药的发生率为4.88%,ASPCR检测发现,在调查基线时,7例耐药患者全部存在劣势M184V突变、5例存在劣势K103N突变。结论河南省部分未治疗的艾滋病患者存在HIV-1原发性耐药毒株,劣势耐药突变可能发展为优势耐药毒株并影响抗病毒治疗的效果。

关键词：抗病毒治疗原发耐药 In-house ASPCR

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以流行性乙型脑炎疫苗株为基因骨架的登革热嵌合减毒活疫苗的研究

以流行性乙型脑炎疫苗株为基因骨架的登革热嵌合减毒活疫苗的研究

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第九届全国病毒学学术研讨会

作者：李晓峰秦鄂德秦成峰于学东李世华杨会强姜涛邓永强曹瑞源李玉华俞永新军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 成都生物制品研究所成都610023 中国食品药品检定研究院北京100050

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川西南地区小兽体表寄生虫调查报告

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寄生虫与医学昆虫学报 2011年第4期18卷 236-241页

作者：杨国华郭天宇吴厚永许荣满潘凤庚甘孜藏族自治州疾病预防控制中心四川康定626000 中国检验检疫科学研究院北京100123 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为了解川西南地区小兽体表寄生虫染虫情况及其种类和组成，1987～1988年总共捕获小兽33种1714只。从所有小兽体表共采获蚤类2157只。分别隶属于5科、26属、46种；蜱类308只，分隶于1科、2属、6种；革螨1909只，分别隶属于4科、13属、37... 详细信息

为了解川西南地区小兽体表寄生虫染虫情况及其种类和组成，1987～1988年总共捕获小兽33种1714只。从所有小兽体表共采获蚤类2157只。分别隶属于5科、26属、46种；蜱类308只，分隶于1科、2属、6种；革螨1909只，分别隶属于4科、13属、37种。厩真厉螨Eulaelapsstabularis、棕形额蚤Frontopsyllaspadix、特新蚤Neopsyllaspeeialis为大耳姬鼠Apodemuslatronum优势寄生虫种；棕形额蚤***、特新蚤***为高山姬鼠***优势寄生虫种；福建厉螨Laelapsfukienensis为社鼠Niviventerconfucianus优势寄生虫种；端凹栉眼蚤Ctenophthalmusdinormus为黑腹绒鼠Eothenomysmelanogaster优势寄生虫种；似方双蚤Amphipsyllaquadratoides和细钩盖蚤Citellophilussparsilis为松田鼠Pitymysirene优势寄牛由种。

关键词：外寄生虫蚤类蜱类革螨小型兽类

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广西首例HIV-1 G亚型毒株的发现和近似全长基因组序列分析

广西首例HIV-1 G亚型毒株的发现和近似全长基因组序列分析

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第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：李天一梁淑家陈立力刘伟刘永健王铮王晓林刘思扬李韩平庄道民鲍作义李敬云李林军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室全军艾滋病检测中心广西壮族自治区疾病预防控制中心

在我国广西地区收集1例感染了HIV-1毒株的病人外周血血浆,提取病毒RNA,利用逆转录巢式-PCR技术,分两段扩增病毒近似全长基因序列,对PCR产物进行核苷酸序列测定和分析,获得了8800bp长度的近似全长序列,利用MEGA软件进行系统进化分析,结... 详细信息

在我国广西地区收集1例感染了HIV-1毒株的病人外周血血浆,提取病毒RNA,利用逆转录巢式-PCR技术,分两段扩增病毒近似全长基因序列,对PCR产物进行核苷酸序列测定和分析,获得了8800bp长度的近似全长序列,利用MEGA软件进行系统进化分析,结果显示该毒株为G亚型毒株,系统发育分析结果显示该毒株与G亚型参考株成簇,Bootstrap值较高(99%);通过与世界上其他地区流行的G亚型毒株进行亲缘分析,发现该毒株与喀麦隆流行毒株关系较近,提示该毒株可能是由境外传入。这是广西地区发现的首例HIV-1G亚型毒株,也是国内报道的首例G亚型近似全长基因序列,该序列的测定和分析对于广西地区流行毒株监测具有重要意义。

关键词： G亚型,HIV-1 近似全长序列系统进化树分析

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峨嵋山发现蠓类二新种及一新纪录（双翅目：蠓科）

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寄生虫与医学昆虫学报 2011年第2期18卷 115-119页

作者：邓成玉廖忠友张有植莫东平虞以新成都军区疾病预防控制中心成都610025 成都军区峨眉疗养院四川峨眉614200 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

2010年9月中下旬在四川省峨眉县峨眉山（29．5°N，103．3°E）西南麓进行了挥网采集，获得蠓类2亚科10属11种，其中有2个新种：峨眉裸蠓（Atrichopogon emeiensis Deng，Liao et Yu ***．）和李江柱蠓（Stilobezzia lijiangi Y... 详细信息

2010年9月中下旬在四川省峨眉县峨眉山（29．5°N，103．3°E）西南麓进行了挥网采集，获得蠓类2亚科10属11种，其中有2个新种：峨眉裸蠓（Atrichopogon emeiensis Deng，Liao et Yu ***．）和李江柱蠓（Stilobezzia lijiangi Yu，Zhang et Mo，***．）；以及1种我国新纪录：柔软柱蠓（Stilobezzia robusta DasGupta et Wirth）。同时发现趋光蠛蠓（*** Yu et Liu）雄虫和泸定毛蠓（Dasyhelea ludingensis）的雌虫在黄昏时分参与雄性摇蚊的群舞团。本文描述新种模式标本都收藏于军事医学科学院微生物流行病研究所医学昆虫标水馆。

关键词：蠓蠓科新种新纪录

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2009年临沂市手足口病流行特征及重症病例危险因素分析

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中国病原生物学杂志 2011年第2期6卷 108-110页

作者：孙大鹏王显军方立群姜宝法曹务春山东大学公共卫生学院/卫生统计与流行病学研究所山东济南250012 山东省疾病预防控制中心军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的了解2009年山东省临沂市手足口病流行病学特征。方法应用描述流行病学方法对临沂市2009年手足口病患者的三间分布进行分析,并运用Logistic回归分析方法研究手足口病重症病例的流行特征及危险因素。结果临沂市手足口病以4~7月份为发... 详细信息

目的了解2009年山东省临沂市手足口病流行病学特征。方法应用描述流行病学方法对临沂市2009年手足口病患者的三间分布进行分析,并运用Logistic回归分析方法研究手足口病重症病例的流行特征及危险因素。结果临沂市手足口病以4~7月份为发病高峰期,发病率以人口密度最高的临沂市市区最高,男、女重症发病率分别为1.54/万和1.01/万;3岁以下儿童占重症发病总数的比例为86.99%;散居儿童占重症发病人数比例为95.91%。多因素非条件Logistic回归分析结果显示,手足口病患者出现以下几种情况则提示其可能发展为重症患者的风险增加：患者就医时间的延长（OR=1.101,P=0.005）,出现发热（OR=2.021,P=0.025）,外周血白细胞计数增高（OR=1.058,P〈0.01）和淋巴细胞比例增高（OR=1.008,P=0.019）;患者年龄越大则发生重症的风险越小（OR=0.841,P〈0.01）。结论重症病例发生的危险人群主要为1~2岁的散居儿童;发热、外周血白细胞水平升高和淋巴细胞比例增高等症状和体征是重症发生前期症状;及时就医对于防止重症的发生有重要意义。

关键词：手足口病流行特征重症病例危险因素

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利用siRNA高通量测序技术筛查蚊子体内携带的RNA病毒

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生物信息学 2011年第3期9卷 189-191页

作者：陈斌龚正达张丽云朱大强李存江晓芳安小平米志强范华昊何后军陈禹保童贻刚刘玮军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 云南省地方病防治所大理671000 江西农业大学动物科技学院南昌330045 北京市计算中心计算生物学研究室北京100021

昆虫可以利用小干扰RNA(siRNA)机制干扰体内RNA病毒的增殖,从而获得对该病毒的免疫能力。通过第二代测序技术对蚊子的小RNA进行高通量测序,再通过生物信息学方法寻找其中的RNA病毒序列,发现在我国云南地区的白纹伊蚊和致倦库蚊体内存在M... 详细信息

昆虫可以利用小干扰RNA(siRNA)机制干扰体内RNA病毒的增殖,从而获得对该病毒的免疫能力。通过第二代测序技术对蚊子的小RNA进行高通量测序,再通过生物信息学方法寻找其中的RNA病毒序列,发现在我国云南地区的白纹伊蚊和致倦库蚊体内存在Marayo,Omsk hemorrhagic fever和Ilheus等RNA病毒的基因片段。至此建立了发现媒介昆虫体内携带病毒的一种新方法,可用于媒介昆虫携带RNA病毒的本底调查。

关键词：高通量测序小干扰RNA 病毒白纹伊蚊致倦库蚊

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西尼罗病毒NSl蛋白特异性单克隆抗体的制备与鉴定

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中国免疫学杂志 2011年第6期27卷 529-532页

作者：马健男杨涛徐青元孙恩成林燕刘霓红杨银辉李文京步志高吴东来中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室哈尔滨150001 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物炎全国家重点实验室北京100071 中国动物疫病预防控制中心北京100125

目的：制备针对西尼罗病毒NSl蛋白的特异性单克隆抗体。方法：以原核表达的重组NSI蛋白为免疫原，免疫BALB／c小鼠并通过常规杂交瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2／O细胞进行融合。以真核表达的重组NSl蛋白为检测用抗原，建立间接ELISA... 详细信息

目的：制备针对西尼罗病毒NSl蛋白的特异性单克隆抗体。方法：以原核表达的重组NSI蛋白为免疫原，免疫BALB／c小鼠并通过常规杂交瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2／O细胞进行融合。以真核表达的重组NSl蛋白为检测用抗原，建立间接ELISA检测方法筛选分泌NSl蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。并利用Western blot和IFA试验对所获得的单克隆抗体进行鉴定。结果：共获得了2株稳定分泌NSl蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为WN-1CIO和WN-3D10，其亚类鉴定分别属于IgG2z和IgG1o这2株单克隆抗体均能与西尼罗病毒NSl蛋白和病毒抗原发生特异性反应，而与日本脑炎病毒无交叉反应。结论：本实验成功制备出针对西尼罗病毒NSI蛋白的特异性单克隆抗体，为我国建立西尼罗病毒与日本脑炎病毒的血清学鉴别诊断方法奠定了基础。

关键词：西尼罗病毒 NSl蛋白单克隆抗体

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