检索结果-内蒙古大学图书馆

新型便携式多功能空气微生物采样器的设计

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环境与健康杂志 2010年第12期27卷 1120-1121页

作者：李娜鹿建春李劲松何春雷王士水李金钟军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室国家生物防护装备工程技术研究中心北京100071 青岛众瑞智能仪器有限公司山东青岛266101

空气微生物采样器已经有100多年的研究历史,是开展空气微生物研究和监测的必要工具。国内外现有采样器种类、型号繁多,但是目前国内外所应用的各种空气微生物采样器都存在性能单一、功能独立、不易携带、操作复杂等缺点。

关键词：空气微生物采样器气体流量传感器微处理器

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表达萤光素酶的HIV药物筛选细胞模型的建立

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生物技术通讯 2010年第5期21卷 666-669页

作者：张昕安小平陈斌张宝中王盛刘大斌童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:构建基于萤光素酶的单次复制人免疫缺陷病毒(HIV)细胞模型,用于抗HIV药物的筛选。方法:构建含萤光素酶报告基因的假型慢病毒质粒,将疱疹性口炎病毒外膜糖蛋白(VSV-G)的表达质粒、HIV-1 Rev蛋白表达质粒、HIV Gag-Pol蛋白表达质粒... 详细信息

目的:构建基于萤光素酶的单次复制人免疫缺陷病毒(HIV)细胞模型,用于抗HIV药物的筛选。方法:构建含萤光素酶报告基因的假型慢病毒质粒,将疱疹性口炎病毒外膜糖蛋白(VSV-G)的表达质粒、HIV-1 Rev蛋白表达质粒、HIV Gag-Pol蛋白表达质粒和含萤光素酶报告基因的重组慢病毒质粒共转染HEK 293FT细胞,制备假型慢病毒;在假型慢病毒生产和再感染新鲜HEK 293FT细胞的过程中加入逆转录酶和蛋白酶抑制剂(如AZT),检测再感染的细胞中萤光素酶的表达水平,从而判断药物对HIV的抑制作用。结果:构建了含萤光素酶报告基因的重组慢病毒质粒pLenti-Luc;利用已知抗HIV药物AZT进行测试,发现HIV药物处理组细胞中萤光素酶活性远低于对照组。结论:建立了基于萤光素酶的HIV药物筛选细胞模型,该系统使用单次复制的报告病毒,具有良好的安全性,而使用萤光素酶基因作为报告基因使该系统具备极高的敏感性,该系统适合于进行高通量药物筛选。

关键词：人免疫缺陷病毒假型慢病毒单次复制药物筛选

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白纹伊蚊β-肌动蛋白实时定量PCR方法的建立与分析

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寄生虫与医学昆虫学报 2010年第4期17卷 224-227页

作者：阎婷赵彤言董言德李春晓军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

采用T-A克隆技术,在白纹伊蚊β-肌动蛋白的基因序列上设计引物,PCR扩增后将特异性产物连入T载体中,提取质粒,经测序分析验证后,测定浓度,稀释获得标准品,采用SYBR green法进行实时定量PCR,并绘制标准曲线,作为白纹伊蚊各种基因实时定量... 详细信息

采用T-A克隆技术,在白纹伊蚊β-肌动蛋白的基因序列上设计引物,PCR扩增后将特异性产物连入T载体中,提取质粒,经测序分析验证后,测定浓度,稀释获得标准品,采用SYBR green法进行实时定量PCR,并绘制标准曲线,作为白纹伊蚊各种基因实时定量PCR检测中的内参照物.结果表明：利用此标准品制备的标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系（斜率为-3.3287,R2=0.9980）;实时定量PCR熔解曲线分析表明,温度在83℃±0.5℃的PCR产物是白纹伊蚊肌动蛋白序列上的特异性产物,表明此标准品是白纹伊蚊肌动蛋白特异性的.本实验成功建立白纹伊蚊β-actin基因实时定量PCR方法,可作为内参照物运用于白纹伊蚊基因差异表达的研究.

关键词：白纹伊蚊肌动蛋白实时定量PCR 内参照物

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O1群和O139群霍乱弧菌主要抗原研究进展

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生物技术通讯 2010年第4期21卷 593-596页

作者：李建华朱虹军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

霍乱弧菌是引起人和动物烈性肠道传染病霍乱的病原体。在霍乱弧菌的200多个血清群中,只有O1群和O139群霍乱弧菌能引起霍乱。快速准确检测O1群和O139群霍乱弧菌是霍乱防治的关键。表面抗原在O1群和O139群霍乱弧菌检测中发挥着重要作用。... 详细信息

霍乱弧菌是引起人和动物烈性肠道传染病霍乱的病原体。在霍乱弧菌的200多个血清群中,只有O1群和O139群霍乱弧菌能引起霍乱。快速准确检测O1群和O139群霍乱弧菌是霍乱防治的关键。表面抗原在O1群和O139群霍乱弧菌检测中发挥着重要作用。简要综述了O1群和O139群霍乱弧菌的脂多糖、霍乱肠毒素、外膜蛋白W、毒素共调菌毛和甘露糖敏感血凝素等5种主要抗原的研究进展。

关键词：霍乱弧菌主要抗原霍乱

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重组土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA的融合表达及抗原性分析

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生物技术通讯 2010年第1期21卷 32-34页

作者：何斌端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:探索一种大量表达功能性土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA的方法。方法:采用SignalP 3.0 Server进行信号肽预测,将土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA信号肽的基因序列(75bp)去除,将1107bp的核心序列克隆至原核表达载体pET32a,并在大肠杆菌BL21... 详细信息

目的:探索一种大量表达功能性土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA的方法。方法:采用SignalP 3.0 Server进行信号肽预测,将土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA信号肽的基因序列(75bp)去除,将1107bp的核心序列克隆至原核表达载体pET32a,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。结果:构建了pET32a-fopA载体,重组蛋白FopA表达量约占菌体总蛋白量60%,Western blot分析显示重组FopA蛋白有较好的抗原性。结论:获得了高效表达FopA的pET32a-fopA表达载体,为下一步土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA应用研究奠定了基础。

关键词：重组土拉弗朗西斯菌外膜蛋白FopA 融合表达抗原性

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基孔肯亚假病毒模型的建立及其在模拟检测中的应用

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生物技术通讯 2010年第5期21卷 641-645页

作者：刘大斌张昕安小平张宝中王盛周育森童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:构建含基孔肯亚病毒核酸序列的重组慢病毒载体,以之转染细胞以分泌含基孔肯亚病毒核酸序列的假病毒,利用该病毒建立基孔肯亚病毒的模拟检测方法。方法:人工合成基孔肯亚病毒部分保守性核酸序列,连入慢病毒载体,构建含基孔肯亚病毒... 详细信息

目的:构建含基孔肯亚病毒核酸序列的重组慢病毒载体,以之转染细胞以分泌含基孔肯亚病毒核酸序列的假病毒,利用该病毒建立基孔肯亚病毒的模拟检测方法。方法:人工合成基孔肯亚病毒部分保守性核酸序列,连入慢病毒载体,构建含基孔肯亚病毒核酸序列的重组慢病毒质粒pLenti-chik,该质粒连同辅助质粒pLP1、pLP2、pLP/VSVG共转染293FT细胞;72 h后收集上清,用特异引物进行荧光定量RT-PCR检测。结果:建立了一个仅能进行一次复制、高度安全的基孔肯亚假病毒模型;同时采用荧光定量RT-PCR建立了较灵敏的检测病毒分泌的方法。结论:假病毒可以模拟基孔肯亚病毒分泌,但较真病毒安全性更高;用荧光定量的方法可以很灵敏地检测病毒的分泌,为突发基孔肯亚病毒感染的检测做好准备。

关键词：基孔肯亚病毒假病毒检测实时荧光定量RT-PCR

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GENSCREENULTRA HIV抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒的敏感性评价

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中国艾滋病性病 2010年第4期16卷 341-343页

作者：鲍作义刘永健李韩平刘思扬庄道民李林耿海山李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的评价BIO-RAD公司开发研制的人类免疫缺陷病毒（HIV1＋2）抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒（GENSCREEN~ ULTRA HIVAg-Ab）,对不同来源样本检测的敏感性。方法以法国生物梅里埃公司生产的HIV1＋2抗原/抗体ELISA检测试剂为参比试剂,分别... 详细信息

目的评价BIO-RAD公司开发研制的人类免疫缺陷病毒（HIV1＋2）抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒（GENSCREEN~ ULTRA HIVAg-Ab）,对不同来源样本检测的敏感性。方法以法国生物梅里埃公司生产的HIV1＋2抗原/抗体ELISA检测试剂为参比试剂,分别使用评价试剂和参比试剂检测621例样本,分析两种试剂检测HIV抗原/抗体的敏感性。结果评价试剂和参比试剂检测502份HIV感染者/AIDS患者临床血浆标本均为阳性,符合率为100%,敏感性为100%。评价试剂和参比试剂检测92份HIV分离培养上清液,评价试剂检出89份阳性、参比试剂检出31份阳性,表明评价试剂检测HIV-1p24抗原的敏感性高于参比试剂。另外,又检测了27份HIV抗原系列稀释样本,计算出评价试剂检测HIV抗原的敏感性是参比试剂的4～8倍。结论评价试剂检测HIV抗体的效果与参比试剂相同,检测HIV-1p24抗原的敏感性高于参比试剂。

关键词：人类免疫缺陷病毒抗体抗原 GENSCREENULTRA HIV Ag-Ab诊断试剂盒敏感性

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西尼罗病毒一步实时RT-PCR检测准确度评价

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解放军医学杂志 2010年第6期35卷 683-686页

作者：孙后超徐鸣明邓永强何丰冯裕星胡子成秦鄂德谢鹏秦成峰重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的了解已建立的一步实时RT-PCR对西尼罗病毒感染细胞和组织的灵敏度及其对国内常见的黄病毒属病毒的特异性,为西尼罗病毒感染的实验室检测和流行病学调查奠定基础。方法使用VectorNTISuite8软件比较探针与西尼罗病毒不同系毒株之间的... 详细信息

目的了解已建立的一步实时RT-PCR对西尼罗病毒感染细胞和组织的灵敏度及其对国内常见的黄病毒属病毒的特异性,为西尼罗病毒感染的实验室检测和流行病学调查奠定基础。方法使用VectorNTISuite8软件比较探针与西尼罗病毒不同系毒株之间的同源性。采用西尼罗病毒感染的Vero细胞培养上清和BALB/c小鼠脑组织样本评价一步实时RT-PCR法的灵敏度,同时用国内常见的黄病毒属病毒评价其特异性。结果此一步实时RT-PCR法可用于西尼罗病毒1系多数毒株的检测,灵敏度高,对西尼罗病毒的最低检出浓度为5.75×10-2pfu/ml;与黄病毒属乙型脑炎、登革热、蜱传脑炎以及甲病毒属东部马脑炎等虫媒病毒均未出现交叉反应。结论西尼罗病毒一步实时RT-PCR法具有灵敏度高、特异性强的特点,适用于西尼罗病毒感染细胞和组织的早期检测及流行病学调查。

关键词：西尼罗病毒逆转录聚合酶链反应分子探针技术敏感性与特异性

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苏丹瓦乌地区蚊媒密度监测及其影响因素分析

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寄生虫与医学昆虫学报 2010年第1期17卷 24-28页

作者：孙毅朱紫雯军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

为明确任务区蚊媒种类、密度及其与环境因素的关系，笔者采用人诱法和容器指数法对苏丹瓦乌地区蚊媒的成虫和幼虫开展了密度监测。结果表明，在瓦乌维和任务区，主要蚊种为淡色库蚊、冈比亚按蚊和阿拉伯按蚊，由旱季进入雨季，蚊虫组成... 详细信息

为明确任务区蚊媒种类、密度及其与环境因素的关系，笔者采用人诱法和容器指数法对苏丹瓦乌地区蚊媒的成虫和幼虫开展了密度监测。结果表明，在瓦乌维和任务区，主要蚊种为淡色库蚊、冈比亚按蚊和阿拉伯按蚊，由旱季进入雨季，蚊虫组成由单一的淡色库蚊变化为3种蚊虫共存的状态。其中阿拉伯按蚊偏好于干燥环境，而冈比亚按蚊则选择湿润环境。同时研究发现，按蚊幼虫选择弱酸性、低盐度、较清澈的积水孳生，水藻和植物有利于其孳生繁衍。库蚊则选择酸性、较浑浊的积水进行孳生。按蚊幼虫的孳生特点和成虫的活动生态特点，为开展任务区疟疾防治工作提供了基础资料和技术支持。

关键词：瓦乌冈比亚库蚊阿拉伯库蚊环境因素疟疾防治

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鼠疫抗原LcrV在乳酸乳球菌中的表达与鉴定

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中国微生态学杂志 2010年第5期22卷 385-388页

作者：曹晓梅张虎成李曼刘树玲侯利华付玲陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)为载体,将鼠疫抗原LcrV基因导入乳酸乳球菌内,构建重组肠道微生态菌株,作为黏膜免疫疫苗的先期探索和尝试。方法采用酸诱导P170启动子,乳酸乳球菌本身的SP310mut2信号肽,将鼠疫杆菌LcrV抗原结构基... 详细信息

目的以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)为载体,将鼠疫抗原LcrV基因导入乳酸乳球菌内,构建重组肠道微生态菌株,作为黏膜免疫疫苗的先期探索和尝试。方法采用酸诱导P170启动子,乳酸乳球菌本身的SP310mut2信号肽,将鼠疫杆菌LcrV抗原结构基因克隆到质粒pAM J397上,电转化感受态Lactococcus lactis PSM565。结果经重组子PCR鉴定,SDS-PAGE检测,W estern-b lot鉴定,在Lactococcus lactisPSM565/pAM J397-V培养基上清中获得了38 kD的鼠疫抗原LcrV蛋白。结论在乳酸乳球菌中成功表达了鼠疫V抗原,为下一步鼠疫黏膜疫苗的研制打下基础。

关键词：乳酸乳球菌鼠疫抗原LcrV 黏膜免疫载体

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