检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年第4期37卷 453-457页

作者：周洁李春晓兰策介高剑刘钦梅孙爱娟赵彤言安徽医科大学合肥230000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071 浙江省疾病预防控制中心杭州310051 苏州市疾病预防控制中心苏州215004

目的了解淡色库蚊与骚扰库蚊触角中差异性表达的嗅觉基因,为揭示二者遗传分化特征提供参考依据。方法分别设置淡色库蚊吸血前、后,骚扰库蚊吸血前、后等4个实验组。每组共设4个生物学重复样品,每个样品取20只蚊虫触角。采用TRIzol法提... 详细信息

目的了解淡色库蚊与骚扰库蚊触角中差异性表达的嗅觉基因,为揭示二者遗传分化特征提供参考依据。方法分别设置淡色库蚊吸血前、后,骚扰库蚊吸血前、后等4个实验组。每组共设4个生物学重复样品,每个样品取20只蚊虫触角。采用TRIzol法提取各组样品总RNA,采用NEBNext Ultra^TMRNA■文库构建试剂盒构建文库。对转录组基因进行测序,通过FPKM值差异性分析,筛选淡色库蚊与骚扰库蚊分别在吸血前、后表达差异显著的嗅觉基因,并进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证。结果淡色库蚊吸血前、后触角转录组共注释了50个气味结合蛋白(OBP)和31个气味受体(OR)基因,骚扰库蚊吸血前、后触角转录组共注释T36个OBP和12个OR。淡色库蚊吸血后较吸血前显著上调的OBP有4个,无显著下调的OBP。骚扰库蚊吸血后较吸血前显著上调和下调的OBP分别有3个。淡色库蚊吸血后较吸血前无显著上调的OR,显著下调的OR有3个。骚扰库蚊吸血后较吸血前无显著上调的OR,显著下调的OR有1个。qRT-PCR验证结果显示,淡色库蚊吸血后OBP17显著上调;骚扰库蚊吸血后OBP31、OBP44表达量显著上调,其中OBP44与测序结果一致,OBP31与测序结果相反。吸血前,骚扰库蚊0BP17显著高于淡色库蚊;吸血后,骚扰库蚊0BP31、OBP44显著高于淡色库蚊,OBP99a显著低于淡色库蚊。骚扰库蚊吸血后0R31、OR65、CPIJ001069表达量均显著上调,其中OR65和CPU001069表达量显著高于淡色库蚊(P<0.05)。淡色库蚊吸血后无显著变化的OR基因。结论淡色库蚊与骚扰库蚊的嗅觉基因OBP和OR表现出了进化分化,OBP17、0BP44可能参与调控骚扰库蚊吸血后行为。0R31、OR65、CPIJ001069可能参与调控骚扰库蚊吸血后行为。

关键词：淡色库蚊骚扰库蚊高通量分析技术嗅觉基因

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寨卡病毒与Ⅰ型干扰素反应相互作用研究进展

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科学通报 2018年第5期63卷 495-501页

作者：纪雪赵慧黄星耀李晓峰秦成峰广西医科大学研究生院南宁530021 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是一种主要通过蚊虫传播的RNA病毒,可引起新生儿小头畸形和成人格林-巴利综合征等严重疾病.目前,ZIKV已扩散至全球70多个国家和地区,对全球公众健康产生严重威胁.研究发现,ZIKV感染可激活包括Ⅰ型干扰素信号... 详细信息

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是一种主要通过蚊虫传播的RNA病毒,可引起新生儿小头畸形和成人格林-巴利综合征等严重疾病.目前,ZIKV已扩散至全球70多个国家和地区,对全球公众健康产生严重威胁.研究发现,ZIKV感染可激活包括Ⅰ型干扰素信号通路等在内的一系列抗病毒天然免疫反应,亦可通过多种机制阻断宿主的干扰素反应,借此逃避宿主天然免疫的监控.深入了解ZIKV与宿主干扰素反应相互作用不仅有助于研究ZIKV的致病机制,对开发ZIKV疫苗和研制抗ZIKV药物同样具有重要意义.本文就相关领域研究进展作一简要综述.

关键词： ZIKV Ⅰ型干扰素 JAK—STAT信号通路免疫逃逸

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表达CTLA4抗体的重组流感病毒构建及溶瘤效果研究

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免疫学杂志 2019年第5期35卷 444-450页

作者：董锁花王立朋程晋霞杨晓岚孙芳段跃强王希良包金风杨鹏辉内蒙古医科大学基础医学院中国人民解放军66400部队医院普通外科军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所/病原微生物与生物安全国家重点实验室解放军总医院第五医学中心

目的拯救表达免疫检查点CTLA4抗体的重组流感病毒,全面鉴定并体内外实验评价其溶瘤效果。方法利用流感病毒反向遗传学(reverse genetics,RG)技术,以A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,分别在PR8病毒PB1和PA基因片段插入免疫检查点CTLA4抗... 详细信息

目的拯救表达免疫检查点CTLA4抗体的重组流感病毒,全面鉴定并体内外实验评价其溶瘤效果。方法利用流感病毒反向遗传学(reverse genetics,RG)技术,以A/Puerto Rico/8/34(PR8)为载体,分别在PR8病毒PB1和PA基因片段插入免疫检查点CTLA4抗体的重链和轻链构建重组质粒pFlu-CTLA4-PB1、pFlu-CTLA4-PA,与PR8病毒的其余6个质粒pHW191-PB2、pHW194-HA、pHW195-NP、pHW196-NA、pHW197-M、pHW198-NS共转染COS-Ⅰ和MDCK细胞,经拯救、筛选、鉴定获得重组溶瘤流感病毒,命名为rFlu-muCTLA4。通过血凝试验、EID_(50)、PCR等方法全面鉴定;ELISA测定anti-CTLA4抗体含量;3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulphophenyl)-2H-tetrazolium 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5(MTS)细胞活力测定重组病毒对小鼠肝癌H22细胞的杀伤效果;利用小鼠肝癌模型,评价重组病毒在体内对肿瘤的抑制效果。结果 rFlu-muCTLA4的血凝效价为2~9～2^(10),且能够在鸡胚中稳定传代;EID_(50)为10^(-8)EID_(50)/ml;重组病毒的PB1、PA片段与预期大小一致;重组病毒接种鸡胚培养2 d可检测到anti-CTLA4抗体,4天达到高峰值。MTS结果显示,rFlu-muCTLA4能特异性杀伤H22细胞活力,呈现剂量依赖性。动物实验表明,重组病毒能显著减小小鼠肝癌肿瘤体积,提高动物存活率并延长存活时间。结论表达免疫检查点CTLA4抗体的重组流感病毒rFlu-muCTLA4在体内外能靶向杀伤肝癌细胞,有望为溶瘤病毒靶向治疗肝癌提供新的思路。

关键词：溶瘤病毒免疫检查点抑制剂细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4

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1株高毒力型肺炎克雷伯菌临床分离株毒力及耐药性分析

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传染病信息 2020年第3期33卷 220-224页

作者：王灿高明明李璞媛苑鑫牛文凯刘慧莹方云米志强柏长青安徽医科大学附属阜阳医院呼吸内科 236000 中国人民解放军总医院第五医学中心呼吸与危重症医学科北京100071 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对1株临床分离的高毒力型肺炎克雷伯菌菌株进行毒力基因及耐药基因分析,为临床复杂肺炎克雷伯菌感染的诊断及抗生素使用提供参考。方法首先使用PCR方法对该菌株进行血清学分型、毒力基因和耐药基因检测,然后利用二代和三代高通量测... 详细信息

目的对1株临床分离的高毒力型肺炎克雷伯菌菌株进行毒力基因及耐药基因分析,为临床复杂肺炎克雷伯菌感染的诊断及抗生素使用提供参考。方法首先使用PCR方法对该菌株进行血清学分型、毒力基因和耐药基因检测,然后利用二代和三代高通量测序平台对该菌株进行全基因组测序和序列拼接,应用生物信息学方法全面分析该菌株毒力基因及耐药基因。结果该菌株血清型为K1型,采用PCR方法发现该菌株携带wabG、uge、kfuBC、aerobactin、rmpA、magA和fimH 7个毒力基因及超广谱β-内酰胺酶耐药基因(基因型为SHV型)。高通量测序进一步发现该菌株的基因组还携带clbB、iroC和rffG 3个毒力基因。结论该肺炎克雷伯菌临床分离株血清型为K1,除了携带喹诺酮类和β-内酰胺类耐药基因外,还含有多种毒力基因,增加了治疗难度。全面分析感染菌株携带的毒力基因和耐药基因,有针对性地选择抗生素,可提高抗感染治疗的效率,减少并发症的发生。

关键词：肺炎克雷伯菌全基因组测序毒力基因耐药基因血清型

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上转发光免疫层析技术快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体方法的建立

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中国兽医学报 2019年第5期39卷 931-935页

作者：王春张平平赵勇唐斌刘晓雷白雪李仕存刘明远王学林吉林大学动物医学学院人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所/病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 生物应急与临床POCT北京市重点实验室(BZ0329) 北京100071

基于上转发光免疫层析(UPT-LF)技术,旨在建立UPT-LF快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法。采用间接法制备UPT-LF试纸条,通过共价偶联使二抗山羊抗猪IgG和上转发光纳米颗粒(UCP)结合,并加入样品垫和被检血清结合,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白... 详细信息

基于上转发光免疫层析(UPT-LF)技术,旨在建立UPT-LF快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法。采用间接法制备UPT-LF试纸条,通过共价偶联使二抗山羊抗猪IgG和上转发光纳米颗粒(UCP)结合,并加入样品垫和被检血清结合,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因(WM5)表达的蛋白WM5为猪抗旋毛虫IgG特异性结合抗原,WM5(2 g/L)与兔抗山羊IgG(0.5 g/L)喷点于分析膜上作为UPT-LF试纸条检测带(T)与质控带(C),该试纸条命名为Tsp-UPT-LF。Tsp-UPT-LF通过对95份阴性血清检测,确定Tsp-UPT-LF的Cutoff值为0.099。Tsp-UPT-LF和ELISA分别对273份旋毛虫感染猪血清样本进行检测,总符合率为92.31%,一致性系数Kappa(K)值为0.837,表明两种方法具有高度一致性。Tsp-UPT-LF检测旋毛虫、猪囊虫、华支睾吸虫感染的猪血清Tsp-UPT-LF呈现对旋毛虫良好的特异性。Tsp-UPT-LF检测感染50 000条旋毛虫肌幼虫28 d猪血清为阳性,T/C值0.109,122 d阳性最强,T/C值为0.207,至425 d时阳性值有所下降,抗旋毛虫IgG阳性率为71.4%。本研究建立了基于UPT-LF技术快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法,为猪旋毛虫即时感染检测、确保食品安全提供了一种可参考的检测方法。

关键词：上转发光技术免疫层析旋毛虫即时检测食品安全

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利用线粒体COI基因重建伊蚊族(双翅目:蚊科)的系统发育关系

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第2期26卷 69-79页

作者：王刚李春晓郭晓霞赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 杭州海关杭州310007

本研究利用线粒体细胞色素氧化酶亚单位Ⅰ(COI基因)片段对伊蚊族117个蚊种进行了系统发育关系的研究。分别使用简约法、似然法以及贝叶斯法重建了系统发育树,并用Shimodaira-Hasegawa检验法从3个系统发育树中选择出最佳基因树。与近年... 详细信息

本研究利用线粒体细胞色素氧化酶亚单位Ⅰ(COI基因)片段对伊蚊族117个蚊种进行了系统发育关系的研究。分别使用简约法、似然法以及贝叶斯法重建了系统发育树,并用Shimodaira-Hasegawa检验法从3个系统发育树中选择出最佳基因树。与近年来根据形态特征对伊蚊族重新分类的研究相比,本研究中的结果显示,支持伊蚊族新分类研究结果中的阿蚊属阿蚊亚属、Bothaella属、Collessius属Alloeomyia亚属、领蚊属Jarnellius属,骚扰蚊属Culicelsa和Woodius亚属、’Ochlerotatus’、覆蚊属Heteraspidion亚属的单系群地位。然而,并不支持阿蚊属、Downsiomyia属、Hulecoeteomyia属、骚扰蚊属Rusticoidus亚属、Phagomyia属、Psorophora属和覆蚊属的单系群地位。另外,分子数据显示骚扰蚊属中的部分成员较为原始,并且Ochlerotatus theobaldi显示出与其他所有蚊种的姐妹群关系;骚扰蚊属和覆蚊属为并系群。

关键词：蚊虫伊蚊族系统发育分类线粒体COI基因

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大肠杆菌hfq和rne-710基因的双质粒无痕敲除技术

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生物工程学报 2018年第4期34卷 602-612页

作者：王净吕瑞辰韩延平杨瑞馥河北北方学院动物科技学院河北张家口075131 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段。以大肠杆菌K-12 MG1655基因组hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δrne-710∷Spe菌株,通过融合PCR方法分别构建缺失hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)的融合片段并... 详细信息

基因敲除技术是了解基因功能的重要技术手段。以大肠杆菌K-12 MG1655基因组hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)基因为模型,首先构建Δhfq∷Spe和Δrne-710∷Spe菌株,通过融合PCR方法分别构建缺失hfq(309 bp)和rne-710(1056 bp)的融合片段并连接至辅助质粒,缺失hfq和rne-710的片段经重组分别替换壮观霉素抗性盒,得到无痕敲除株Δhfq和Δrne-710。双质粒无痕敲除和融合PCR方法相结合为大片段基因缺失开辟了新的途径。

关键词：大肠杆菌 hfq rne-710 双质粒无痕敲除融合PCR Ⅰ-Sce Ⅰ内切酶

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microRNAs与流感病毒感染

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现代生物医学进展 2019年第5期19卷 965-968页

作者：张森户义李靖康晓平姜涛军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室病毒学专业实验室北京100071

MicroRNAs是一类数目庞大,而且可以广泛参与到生命活动各个进程的非编码RNA分子,在病毒感染宿主过程中存在着复杂的microRNAs与病毒的相互作用。流感病毒感染可以引起宿主microRNAs表达谱的明显变化,流感病毒能通过调控某些microRNAs的... 详细信息

MicroRNAs是一类数目庞大,而且可以广泛参与到生命活动各个进程的非编码RNA分子,在病毒感染宿主过程中存在着复杂的microRNAs与病毒的相互作用。流感病毒感染可以引起宿主microRNAs表达谱的明显变化,流感病毒能通过调控某些microRNAs的表达来实现免疫逃逸等增强其感染能力;同时,宿主也可以通过某些microRNAs的变化启动相应的抗流感病毒反应。本文主要针对流感病毒感染过程中宿主-病毒二者在microRNA水平的相互作用进行综述,以期更好的了解流感病毒的致病机制,为抗流感病毒的新药研制提供新的思路。

关键词：流感病毒 MicroRNAs 宿主细胞

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中国软蜱科:系统分类与图形检索

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第4期26卷 231-250页

作者：孙毅许荣满吴明宇军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071

中国的软蜱已记载2亚科4属14种,其中锐缘蜱亚科2属7种,钝缘蜱亚科2属7种,本文综合了最新的软蜱支序分类和分子系统学研究结果,对我国的软蜱科类群进行了系统分类厘定,并辅助可资鉴别分类的图形检索表,以期为蜱类及蜱传疾病监测与防治提... 详细信息

中国的软蜱已记载2亚科4属14种,其中锐缘蜱亚科2属7种,钝缘蜱亚科2属7种,本文综合了最新的软蜱支序分类和分子系统学研究结果,对我国的软蜱科类群进行了系统分类厘定,并辅助可资鉴别分类的图形检索表,以期为蜱类及蜱传疾病监测与防治提供技术基础。

关键词：软蜱科系统分类中国

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大气PM2.5对大鼠心肌细胞的毒性作用

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环境科学研究 2018年第9期31卷 1636-1644页

作者：焦周光胡凌飞李娜张柯温占波李劲松军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 北京慧荣和科技有限公司北京101102

为评估大气PM_(2.5)及其不同组分对心肌细胞H9C2的毒性作用,探讨PM_(2.5)对心血管系统产生毒性作用的关键组分,将前期采集并制备的PM_(2.5)完全颗粒物、PM_(2.5)水溶性组分、PM_(2.5)脂溶性组分和PM_(2.5)单纯颗粒物以不同质量浓度对H9C... 详细信息

为评估大气PM_(2.5)及其不同组分对心肌细胞H9C2的毒性作用,探讨PM_(2.5)对心血管系统产生毒性作用的关键组分,将前期采集并制备的PM_(2.5)完全颗粒物、PM_(2.5)水溶性组分、PM_(2.5)脂溶性组分和PM_(2.5)单纯颗粒物以不同质量浓度对H9C2细胞染毒.用MTS法在染毒6、10、24、48、72 h后测定细胞活力;根据细胞活力测定结果,选用较低染毒浓度(10μg/m L),用相关试剂盒测定染毒24 h后胞内和上清液中LDH(乳酸脱氢酶)和SOD(超氧化物歧化酶)活力,ELISA及RT-q PCR法测定炎性因子IL-6和TNF-α表达量,AP位点计数法测定细胞DNA损伤情况.结果表明:颗粒物成分(PM_(2.5)完全颗粒物和PM_(2.5)单纯颗粒物)对H9C2细胞表现出强烈的生长抑制作用,50μg/m L及以上染毒浓度组在染毒时间≥24 h时细胞可能已经全部死亡,而可溶性成分(PM_(2.5)水溶性组分和PM_(2.5)脂溶性组分)对H9C2细胞生长表现为极弱或无生长抑制作用,仅400μg/m L的PM_(2.5)脂溶性组分始终对细胞生长表现出抑制作用;各组分样本都在一定程度上造成了H9C2细胞损伤,降低了胞内LDH和SOD活性;PM_(2.5)完全颗粒物和PM_(2.5)脂溶性组分在造成炎性损伤方面的作用较为明显.研究显示,颗粒物组分对H9C2细胞致死作用显著,相对而言,PM_(2.5)完全颗粒物表现出的毒性作用最强且最全面.

关键词： PM2.5 心肌细胞细胞活力炎性因子

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