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异肽键稳定的MERS-CoV融合蛋白S2亚基N端重复序列三股α螺旋的构建

高等学校化学学报 2016年第9期37卷 1643-1648页

作者：郑汐梁国栋王潮刘克良军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

通过在天然N肽的氨基端引入可以诱导螺旋三聚体形成的人工多肽序列,并通过酰基转移反应在上述嵌合肽所形成的三股α螺旋间引入异肽键,构建了中东呼吸综合征病毒(MERS-Co V)的N-trimer模型,为MERS-Co V融合抑制剂的设计奠定了基础.

关键词：中东呼吸综合征病毒融合蛋白多肽异肽键

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重组人促红细胞生成素-α DNA适配体的活性高级结构特征

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高等学校化学学报 2018年第1期39卷 48-53页

作者：贺小琴何军林徐华郭磊谢剑炜抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

针对重组人促红细胞生成素-α(EPO-α)的最短适配体序列In27,使用表面等离子体共振、圆二色光谱及荧光光谱等多种技术,研究和明确了In27的活性与构型间的关系.结果表明,阳离子Na+的存在及其浓度是影响In27产生特异性亲和识别的关键因素;... 详细信息

针对重组人促红细胞生成素-α(EPO-α)的最短适配体序列In27,使用表面等离子体共振、圆二色光谱及荧光光谱等多种技术,研究和明确了In27的活性与构型间的关系.结果表明,阳离子Na+的存在及其浓度是影响In27产生特异性亲和识别的关键因素;在Na+诱导下In27形成了平行/反平行的混合G四链体(GQ)构型;荧光探针硫磺素T(Th T)能特异性结合该混合构型,EPO-α的加入可与Th T形成竞争,从而便于利用Th T创建活性EPO-α的"光开关"型检测探针.

关键词：表面等离子体共振圆二色光谱荧光探针 G-四链体 Na+

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新型可用于荧光标记的α-氰基丙烯酸酯单体的合成及在小鼠活体成像中的应用

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高等学校化学学报 2016年第6期37卷 1168-1174页

作者：张涛汤永嘉徐亮刘克良军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

设计合成了新型含有荧光基团的α-氰基丙烯酸酯单体,并与其它α-氰基丙烯酸酯单体共聚,得到产生荧光的聚氰基丙烯酸酯材料.将其包埋在小鼠背部肌肉层,可获得良好的荧光成像效果.通过对荧光强度的监测,初步研究了聚氰基丙烯酸酯材料中的... 详细信息

设计合成了新型含有荧光基团的α-氰基丙烯酸酯单体,并与其它α-氰基丙烯酸酯单体共聚,得到产生荧光的聚氰基丙烯酸酯材料.将其包埋在小鼠背部肌肉层,可获得良好的荧光成像效果.通过对荧光强度的监测,初步研究了聚氰基丙烯酸酯材料中的侧链酯基在小鼠体内的降解情况.单体合成是以蒽合氰基丙烯酸和4,4'-二甲氧基三苯基-氨基己醇为原料,得到蒽合氰基丙烯酸(4,4'-二甲氧基三苯基-氨基己醇)酯,脱保护后再将异硫氰酸荧光素以化学键合的方式标记在末端氨基上,脱蒽还原烯双键后,得到可用于荧光标记的α-氰基丙烯酸(异硫氰酸荧光素-氨基己醇)酯单体.反应中间体及单体结构采用核磁共振氢谱和质谱进行表征.该单体及其高聚物均可在激发光(488 nm)和发射光(525 nm)条件下观察到明显荧光.

关键词： α-氰基丙烯酸酯异硫氰酸荧光素活体荧光成像

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异肽键交联的N肽类HIV-1融合抑制剂的设计、合成及活性评价

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高等学校化学学报 2016年第5期37卷 881-885页

作者：李雪来文庆姜喜凤王潮刘克良军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

报道了一种通过在HIV-1 gp41 NHR区域的多肽(N肽)之间引入异肽键稳定N3螺旋的新方法;以天然N肽序列N38为模板,采用此方法设计合成了一系列异肽键交联的N38三股α螺旋结构.该结构具有极强的热稳定性和纳摩尔水平抑制HIV-1包膜糖蛋白(Env... 详细信息

报道了一种通过在HIV-1 gp41 NHR区域的多肽(N肽)之间引入异肽键稳定N3螺旋的新方法;以天然N肽序列N38为模板,采用此方法设计合成了一系列异肽键交联的N38三股α螺旋结构.该结构具有极强的热稳定性和纳摩尔水平抑制HIV-1包膜糖蛋白(Env)介导的细胞融合活性.

关键词：人免疫缺陷病毒Ⅰ型融合抑制剂 N端重复序列卷曲螺旋

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二维液相色谱在药物和毒物分析中的应用进展

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分析化学 2014年第12期42卷 1851-1858页

作者：萧伟斌蹇阳李桦军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药和毒理学国家重点实验室

生物样品中药物、毒物及内源性物质的定性与定量分析在生命科学和药物研发中发挥重要作用。生物样品的基质复杂,干扰物多,待测物浓度与内源性物质相比明显偏低,且样品取样量少,因此要求生物分析方法的特异性强、灵敏度高、重现性好。二... 详细信息

生物样品中药物、毒物及内源性物质的定性与定量分析在生命科学和药物研发中发挥重要作用。生物样品的基质复杂,干扰物多,待测物浓度与内源性物质相比明显偏低,且样品取样量少,因此要求生物分析方法的特异性强、灵敏度高、重现性好。二维液相色谱技术具有峰容量大、显著降低复杂样品的基质效应和残留现象,及可以实现样品分析的自动化等特点,已成为生物样品分离分析的有力工具,在环境、食品和药物分析中得到广泛应用。本文在简要介绍了二维液相色谱原理装置基础上,对其在生物样品中药物、毒物和内源性物质分析中的应用进展进行了综述。

关键词：在线二维液相色谱在线固相萃取药物代谢生物分析评述

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高分辨质谱-非信息依赖数据采集-后靶向筛查策略在不明原因食物中毒鉴定中的应用

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分析化学 2018年第2期46卷 157-164页

作者：张美娟陈佳林缨张雅姣郭磊徐斌谢剑炜军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF MS/MS）技术,建立了高分辨质谱-非信息依赖数据采集-后靶向筛查策略（HRMS-DIA-Post targeted screening strategy）,并成功应用于不明原因食物中毒患者呕吐物及粪便样本中的有... 详细信息

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF MS/MS）技术,建立了高分辨质谱-非信息依赖数据采集-后靶向筛查策略（HRMS-DIA-Post targeted screening strategy）,并成功应用于不明原因食物中毒患者呕吐物及粪便样本中的有毒化合物筛查鉴定。样品经溶剂提取与净化后,采用5 mmol/L甲酸铵-水（A）和0.1%甲酸-乙腈（B）作为流动相,在反相色谱柱上进行梯度洗脱。采用MSE模式对样品进行质谱（ESI+）全信息采集,经UNIFI筛查软件进行谱峰识别、谱库检索等数据分析,初筛出疑似有毒化合物α-茄碱,随后结合其化合物特征及体内代谢行为,采用后靶向筛查策略在两种样品中均鉴定出相关化合物（包括水解产物及代谢产物等）,如α-卡茄碱与其水解产物β-卡茄碱、γ-茄碱/卡茄碱以及共同代谢产物茄啶。采用单点校正法测得两种样品中α-茄碱含量均约为0.1 mg/kg,采用峰面积归一化法得到两种样品中龙葵素类似物总量分别约为0.5 mg/kg与0.6 mg/kg。本研究建立的高分辨质谱快速筛查策略可为不明原因食物中毒的未知毒物快速筛查鉴定提供有效的技术手段。

关键词：后靶向筛查未知有毒化合物高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱生物医学样品龙葵素

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基于有孔壳层隔绝纳米粒子增强拉曼光谱的芥子气现场检测新方法

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分析化学 2014年第10期42卷 1465-1470页

作者：高敬吴剑峰高海月郭磊谢剑炜军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室

基于有孔壳层隔绝纳米粒子增强拉曼光谱技术,建立了一种快速便捷、高灵敏的芥子气及其相关物现场检测新方法。加入0.1 mol/L MgSO4可诱导纳米粒子有效团聚,形成多"热点"的拉曼散射,实现低至10μg/L芥子气的便携式拉曼光谱快... 详细信息

基于有孔壳层隔绝纳米粒子增强拉曼光谱技术,建立了一种快速便捷、高灵敏的芥子气及其相关物现场检测新方法。加入0.1 mol/L MgSO4可诱导纳米粒子有效团聚,形成多"热点"的拉曼散射,实现低至10μg/L芥子气的便携式拉曼光谱快速检测,线性范围为10;000μg/L,分析增强因子约为1.1×106。本方法法直接应用于环境水样中微量芥子气的快速检测,回收率介于88%;14%之间。芥子气相关物（如2-氯乙基乙基硫醚、硫二甘醇、芥子亚砜和芥子砜）可得到有效区分。

关键词：壳层隔绝纳米粒子增强拉曼光谱芥子气现场检测

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二乙烯砜-谷胱甘肽系列加合物的制备及其与体外DNA加合反应活性

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中国药理学与毒理学杂志 2017年第5期31卷 422-428页

作者：吕姗姗徐斌高中才赵玉梅张雅姣徐华吴剑峰谢剑炜军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室

目的合成制备芥子气（SM）的重要氧化代谢产物二乙烯砜（DVS）的谷胱甘肽（GSH）加合物,并研究其体外与DNA的加合反应活性。方法以SM为起始原料,通过两步氧化反应制备芥子亚砜（SMO）和芥子砜（SMO;）,在碱性条件下通过"脱氯"... 详细信息

目的合成制备芥子气（SM）的重要氧化代谢产物二乙烯砜（DVS）的谷胱甘肽（GSH）加合物,并研究其体外与DNA的加合反应活性。方法以SM为起始原料,通过两步氧化反应制备芥子亚砜（SMO）和芥子砜（SMO;）,在碱性条件下通过"脱氯"反应合成并纯化获得DVS,进而采用制备液相色谱纯化获得了DVS-GSH单加合物及其与鸟嘌呤或腺嘌呤形成的2种DVS双加合物,并通过超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）技术研究DVS-GSH与体外DNA的加合反应活性。核磁共振谱和高分辨质谱鉴定DVS加合物表征和结构。结果在水溶液中DVS与GSH的反应活性显著高于SM,且生成的DVS-GSH单加合物也具有较强的反应活性,可与DNA的腺嘌呤和鸟嘌呤生成系列新的加合物,且与腺嘌呤加合物的丰度高于与鸟嘌呤加合物。结论 SM的氧化代谢产物DVS的二相代谢产物（DVS-GSH）与DNA体外仍具有较强的加合反应活性,其对DNA的损伤效应值得关注。

关键词：二乙烯砜谷胱甘肽加合物 DNA加合物

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基于壳层隔绝纳米粒子和在线裂解-吹扫捕集的血液氰化物表面增强拉曼光谱快速检测方法

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分析化学 2017年第5期45卷 627-632页

作者：朱颖洁郭磊刘易龚莹邱泽武吴剑峰谢剑炜军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学科学院附属医院中毒救治科

建立了一种快速、简便的基于壳层隔绝纳米粒子和在线裂解捕集技术的血液氰化物表面增强拉曼光谱（SERS）检测方法。构建了新型在线裂解-吹扫捕集装置,通过浓H;SO;酸化,将全血中结合态氰化物裂解,并转化为挥发性的HCN气体,经N;吹扫至碱... 详细信息

建立了一种快速、简便的基于壳层隔绝纳米粒子和在线裂解捕集技术的血液氰化物表面增强拉曼光谱（SERS）检测方法。构建了新型在线裂解-吹扫捕集装置,通过浓H;SO;酸化,将全血中结合态氰化物裂解,并转化为挥发性的HCN气体,经N;吹扫至碱液中形成NaCN,实现了中毒血液中氰化物的高效裂解与捕集;在强碱性条件下,以壳层隔绝金纳米粒子为基底,极大地削弱了氰化物的溶金效应,使得检测信号稳定,存在时间由普通金纳米粒子的5 min提高至1 h;方法检出限达10μg/L,线性范围为100;000μg/L。将此方法应用于氰化物染毒大鼠及真实氰化物中毒患者全血的快速检测,为氰化物中毒快速检测提供了一种灵敏、特异、可靠的新方法。

关键词：壳层隔绝纳米粒子氰化物中毒血液样品在线裂解-吹扫捕集表面增强拉曼光谱

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同位素稀释气相色谱-质谱联用法监测芥子气染毒家兔尿液中的硫二甘醇

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分析化学 2014年第7期42卷 980-984页

作者：聂志勇张雅姣吴弼东闫珑冯建林刘勤谢剑炜抗毒药物与毒理学国家重点实验室军事医学科学院毒物药物研究所毒物分析实验室

以硫二甘醇（TDG）的八氘代同位素（TDG-d8）为内标,采用自制Florisil固相萃取（SPE）柱提取尿样中的TDG,用五氟苯甲酰氯（PFBZ）衍生化后,再经SPE净化富集,通过考察优化两步固相萃取（SPE）等前处理步骤,建立了尿液中TDG的高灵敏同位... 详细信息

以硫二甘醇（TDG）的八氘代同位素（TDG-d8）为内标,采用自制Florisil固相萃取（SPE）柱提取尿样中的TDG,用五氟苯甲酰氯（PFBZ）衍生化后,再经SPE净化富集,通过考察优化两步固相萃取（SPE）等前处理步骤,建立了尿液中TDG的高灵敏同位素稀释-负化学电离-气相色谱/质谱（ID-NCI-GC/MS）分析方法。研究了家兔皮肤芥子气（HD）染毒（0.02;.15 LD50）后,尿液中TDG随时间变化的时效关系及其与HD染毒剂量间的量效关系。结果显示,本方法的检出限为0.1μg/L,定量限为0.3μg/L;家兔染毒后尿液中TDG含量迅速升高,然后又快速减少,并呈现二次释放的特点;各剂量组在第1日内TDG排出量最多,且随着中毒剂量增高,尿液中高含量的TDG维持时间延长。因而,尿液中TDG的异常升高可以作为HD暴露的重要特征指标。

关键词：生物标志物硫二甘醇固相萃取芥子气气相色谱-质谱联用

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