检索结果-内蒙古大学图书馆

生命科学 2017年第8期29卷 722-731页

作者：陈杨王富强徐平军事医学科学院放射与辐射医学研究所国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室

泛素化修饰是真核细胞内广泛存在的一种修饰形式,受到该修饰的蛋白质分子遍及基因转录、蛋白质翻译、信号转导、细胞周期控制以及生长发育等几乎所有的生命活动过程,对生命体正常功能的发挥具有重要作用。泛素化修饰的失调会给生命体带... 详细信息

泛素化修饰是真核细胞内广泛存在的一种修饰形式,受到该修饰的蛋白质分子遍及基因转录、蛋白质翻译、信号转导、细胞周期控制以及生长发育等几乎所有的生命活动过程,对生命体正常功能的发挥具有重要作用。泛素化修饰的失调会给生命体带来一系列负面影响,严重者将导致疾病,甚至危及生命。泛素连接酶E3是泛素化修饰反应中底物特异性的直接决定者,其机制研究不仅可揭示蛋白质质量控制和生命活动功能的奥秘,也将为疾病关联失调蛋白的精准调控和精准医学实践提供技术支撑。现结合当前对泛素连接酶E3研究的最新进展,阐述泛素连接酶E3发挥作用时与不同类型泛素链之间的特异性关系,旨在为蛋白质功能调控的分子机制、药物研制和疾病诊治提供新思路。

关键词：泛素泛素连接酶泛素链特异性赖氨酸残基疾病

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基于蛋白质组学和近红外Ⅱ区成像的肝病靶向分子研究

基于蛋白质组学和近红外Ⅱ区成像的肝病靶向分子研究

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中国药理学会分析药理学专业委员会成立大会、第三届全国分析药理学学术大会暨贵州省药学会药学青年专业委员会成立大会

作者：洪学传徐平肖玉玲徐福春病毒学国家重点实验室武汉大学药学院军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心西藏大学医学院

目的:建立快速可靠的靶向分子研究体系,鉴定特异的肝病潜在治疗靶点,用于指导临床治疗。方法:建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果:通过蛋白质组鉴定到肝癌靶向分子微小染色体维持蛋白MCM... 详细信息

目的:建立快速可靠的靶向分子研究体系,鉴定特异的肝病潜在治疗靶点,用于指导临床治疗。方法:建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果:通过蛋白质组鉴定到肝癌靶向分子微小染色体维持蛋白MCM2在肝癌组织中显著上调(>5倍癌/癌旁),并且结合肝癌小鼠模型的近红外二区体内荧光成像发现MCM2

关键词：靶向分子

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通过NIR-Ⅱ成像和蛋白质组学分析鉴定潜在的肿瘤生物标志物

通过NIR-Ⅱ成像和蛋白质组学分析鉴定潜在的肿瘤生物标志物

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中国药理学会分析药理学专业委员会成立大会暨第三届全国分析药理学学术大会

作者：周晖杨靖肖玉玲徐平洪学传病毒学国家重点实验室武汉大学药学院武汉430072 病毒学国家重点实验室武汉大学药学院武汉430072 军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心北京军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心北京102206 病毒学国家重点实验室武汉大学药学院武汉430072 西藏大学医学院拉萨850000

目的：建立快速可靠的靶向分子研究体系，鉴定特异的肝病潜在治疗靶点，用于指导临床治疗。方法：建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果：微型染色体维持蛋白(MCM)是DNA 复制的重要组成部... 详细信息

目的：建立快速可靠的靶向分子研究体系，鉴定特异的肝病潜在治疗靶点，用于指导临床治疗。方法：建立蛋白质组结合近红外二区成像的差异表达蛋白筛选及体内活性验证的研究体系。结果：微型染色体维持蛋白(MCM)是DNA 复制的重要组成部分，可作为诊断癌症的新型生物标志物。

关键词：近红外二区肝癌 MC

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双反相色谱串联平行反应监测靶向定量蛋白质组方法的建立

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生物工程学报 2017年第11期33卷 1859-1868页

作者：李恺宋雷石文昊田喜凤华北理工大学基础医学院河北唐山063009 军事医学科学院放射与辐射医学研究所国家蛋白质科学中心·北京北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京102206 河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063000

近年来质谱技术的持续进步促进了靶向蛋白质组的发展,在多反应监测(Multiple reaction monitoring,MRM)靶向蛋白质组定量方法的基础上衍生出平行反应监测(Parallel reaction monitoring,PRM)技术。该技术靶向定量灵敏度和通量更高,重现... 详细信息

近年来质谱技术的持续进步促进了靶向蛋白质组的发展,在多反应监测(Multiple reaction monitoring,MRM)靶向蛋白质组定量方法的基础上衍生出平行反应监测(Parallel reaction monitoring,PRM)技术。该技术靶向定量灵敏度和通量更高,重现性也更好,但其对于高复杂性样本在定量速度和深度上均存在一定的局限性。改善PRM定量的色谱方法包括:色谱柱的优化,增加色谱柱内径、降低柱长;色谱洗脱条件的优化,提高液相洗脱流速、缩短洗脱时间;最终建立了一种简单高效的双反相色谱串联PRM靶向蛋白质组定量平台。该平台使用150μm内径和8 cm长的短色谱柱,在800 nL/min的高流速下和35 min有效洗脱梯度内,可实现对293T全细胞裂解液蛋白样本中多达400条低丰度肽段的快速定量。该研究优化了PRM靶向定量方法,将有利于PRM技术的推广,尤其为低丰度蛋白的精准定量提供了一种技术选择。

关键词：双反相色谱平行反应监测靶向定量

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基于温敏型材料的固定化酶的制备及其在蛋白质组快速分析中的应用

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分析化学 2016年第11期44卷 1692-1697页

作者：张倩郑斐秦伟捷钱小红军事医学科学院放射与辐射医学研究学所国家蛋白质科学研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心

蛋白质组学通过规模化鉴定、分析从细胞、组织或有机体中提取的蛋白质,从而获得蛋白表达、修饰、组成和定量的变化信息。在目前最为有效的"鸟枪法"蛋白质组学策略中,固定化酶试剂基质常用固相载体材料,该固定化酶试剂在酶解... 详细信息

蛋白质组学通过规模化鉴定、分析从细胞、组织或有机体中提取的蛋白质,从而获得蛋白表达、修饰、组成和定量的变化信息。在目前最为有效的"鸟枪法"蛋白质组学策略中,固定化酶试剂基质常用固相载体材料,该固定化酶试剂在酶解蛋白质时为异相体系,存在固液界面传质阻力和空间位阻,限制了酶解效率和样品处理通量。针对这一技术瓶颈,本研究利用温敏聚合物对外界温度变化的响应能力,制备了一种新型的基于可溶性温敏聚合物的固定化胰蛋白酶试剂。该固定化酶特有的温度敏感特性,使其具有"高温均相酶解,低温异相分离"的特色,且兼具酶切时间显著缩短、酶可重复利用的优势。BSA 1 min固定化酶解产物肽段的氨基酸序列覆盖率可达94%,高于传统溶液酶解12 h所得覆盖率为(74%)。进一步将该固定化酶试剂应用于HeLa细胞全蛋白质组的酶解,其酶解效果与相同条件下溶液酶解12 h相当。该固定化酶试剂对复杂蛋白质的快速、高效酶解充分证明其在蛋白质组学研究中的应用潜力。

关键词：固定化酶温度敏感型聚合物质谱鉴定蛋白质组学快速酶解

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DNA条形码技术及其在微生物资源鉴别保护中的应用研究

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微生物学杂志 2018年第4期38卷 77-83页

作者：施佳辉田飞唐蜀昆徐平军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心北京102206 大益集团微生物研发中心云南昆明650217 云南大学云南省微生物研究所云南昆明650091 河北大学生命科学学院河北保定071000

DNA条形码作为一种新型的物种鉴定、分类、鉴别和溯源方法,通过生物信息学分析将标准DNA片段进行分析比对实现。经过多年的发展,该技术现已成为物种鉴定和分类的研究热点。回顾十余年来DNA条形码技术的发展历程,介绍了这一技术的进展与... 详细信息

DNA条形码作为一种新型的物种鉴定、分类、鉴别和溯源方法,通过生物信息学分析将标准DNA片段进行分析比对实现。经过多年的发展,该技术现已成为物种鉴定和分类的研究热点。回顾十余年来DNA条形码技术的发展历程,介绍了这一技术的进展与成果,分析了该技术的优势及局限,并展望了DNA条形码的应用前景,为后续研究提供参考。

关键词： DNA条形码线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ 物种鉴定资源保护

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全柱成像毛细管等电聚焦电泳分析蛋白质药物电荷异质性

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分析测试学报 2017年第3期36卷 343-348页

作者：孟晓光甄里刘悦玫侯利平刘丹李斌欧阳伟民魏开华北京正旦国际科技有限责任公司北京102206 北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京) 北京102206 江汉大学护理与医学技术学院湖北武汉430056 北京绿绵科技有限公司北京100080 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

评价了cIEF-WCID检测多肽与蛋白质药物等电点的应用效果。测定标准多肽的等电点,验证了cIEF-WCID具有高的准确度和良好的重复性(相对标准偏差<0.50%)。人血红蛋白的4种主要异构体实现了基线分离;甘赖胰岛素的重复测试均只检出单一特... 详细信息

评价了cIEF-WCID检测多肽与蛋白质药物等电点的应用效果。测定标准多肽的等电点,验证了cIEF-WCID具有高的准确度和良好的重复性(相对标准偏差<0.50%)。人血红蛋白的4种主要异构体实现了基线分离;甘赖胰岛素的重复测试均只检出单一特征峰(p I 5.95±0.01);比较重组人生长激素原液和成品,等电点特征峰比例差异明显,且成品有新特征峰出现;对比进口及国产贝伐单抗,发现厂家1、3与原研药基本一致,厂家1的主成分迁移规律与原研药高度一致,厂家2的重链C末端K缺失、N末端焦谷氨酸环化或脱酰胺修饰影响了电荷异质性;通过考察尿素浓度、电解质范围和聚焦时间,优化了检测重组人促卵泡素等电点条件:2 mol/L尿素,两性电解质pH 2.5~5.0与pH 3.0~10.0按1∶1混合,聚焦电压1 000 V(1 min)~1 800 V(4 min)~2 200 V(1 min)。cIEF-WCID可快速、准确测定具有电荷异质性的蛋白类药物等电点,分辨率和重复性好,尤其是可以跟踪聚焦过程中样本的迁移特征,特别适合蛋白类药物复杂电荷异质性的检测。

关键词：全柱成像毛细管等电聚焦电泳电荷异质性重组蛋白质药物抗体药学研究

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MALDI-TOF质谱准内标法及其用于rhTPO复杂糖一致性研究

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分析测试学报 2017年第12期36卷 1458-1463页

作者：刘悦玫侯利平杨梅孟晓光魏开华安徽医科大学研究生院安徽合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 蛋白质药物国家工程研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京正旦国际科技有限责任公司北京102206

采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)准内标法准确测定重组人血小板生成素(rhTPO)仿制药和原研药中4类糖修饰的相对含量,并进行样本间和批间一致性比较。结合多种切糖酶逐步切除rhTPO的N-糖、唾液酸和O-糖;以牛血清白蛋... 详细信息

采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)准内标法准确测定重组人血小板生成素(rhTPO)仿制药和原研药中4类糖修饰的相对含量,并进行样本间和批间一致性比较。结合多种切糖酶逐步切除rhTPO的N-糖、唾液酸和O-糖;以牛血清白蛋白(BSA)为标准品,与样本非混合点靶;采用MALDI-TOF质谱准内标法检测,分别获得各样本完整含糖分子量及不同层次切糖后分子量;通过分子量差值计算4类糖修饰的相对含量;最后比较仿制药与原研药样本间和批间一致性。以BSA多电荷峰对rhTPO切糖前后的MALDI-TOF质谱测定值进行准内标法校正,BSA多电荷峰之间相对标准偏差(RSD)均≤0.075%,批间RSD为0.001%~0.004%,方法误差均<0.01%。rhTPO仿制药N-糖、O-糖唾液酸、O-糖和糖化糖的相对含量分别约为24.6%、2.9%、9.0%和5.1%,批间一致性良好,且总糖含量与文献值一致;rhTPO原研药N-糖、O-糖唾液酸、O-糖和糖化糖的相对含量分别约为25.6%、2.9%、7.9%和3.5%,总糖含量较文献值偏低。与rhTPO原研药相比,仿制药糖基化糖相对含量基本一致,糖化糖含量有差异。rhTPO糖化糖研究未见文献报道,其差异是不同厂家rhTPO之间差异的重要因素,主要由发酵工艺差异导致。

关键词：重组人血小板生成素(rhTPO) 基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 准内标法糖含量糖化

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不同溶质溶液对氢棒产氢速率的影响

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军事医学 2017年第10期41卷 835-840页

作者：张苗李志慧张成岗安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室全军军事认知与心理卫生研究中心北京100850

目的比较氢棒在不同溶质溶液中的产氢速率,并明确溶液中氢和含氧量的相关性以及氢与氧化还原电位的关系。方法采用含有金属镁的氢棒与水反应产氢的方法制备富氢溶液,具体分为:NaCl、Na_2SO_3、Na_2SO_4、CH_3COOH和CH_3COONa溶液组,分... 详细信息

目的比较氢棒在不同溶质溶液中的产氢速率,并明确溶液中氢和含氧量的相关性以及氢与氧化还原电位的关系。方法采用含有金属镁的氢棒与水反应产氢的方法制备富氢溶液,具体分为:NaCl、Na_2SO_3、Na_2SO_4、CH_3COOH和CH_3COONa溶液组,分别配制0%、0.2%、0.9%和3%的不同浓度上述溶液,并依次分别在0、2、4、6、8、10h后测定各溶液的含氢量、含氧量、氧化还原电位和pH值。结果在制备时间相同时,NaCl溶液浓度越高其产氢速率越高。溶液中氢气与氧气的含量呈显著负相关(R^2=0.9306),含氢量越高含氧量越低;溶液中随含氢量的增加氧化还原电位逐渐降低,而pH值则逐渐升高。在不同溶质溶液中,氢棒的产氢速率顺序为Na_2SO_3>NaCl>Na_2SO_4(P<0.05或P<0.01)。在乙酸溶液中,与钠盐溶液相比,其氢棒的产氢速率显著高于钠盐溶液(P<0.05),含氢量随时间延长而逐渐增加;氧浓度显著低于钠盐溶液(P<0.05),含氧量随时间增加逐渐减少。结论溶液中溶质的种类和浓度以及溶液的含氧量和酸碱度对氢棒的产氢速率具有显著影响,提示可通过调整溶液中溶质的种类和浓度,制备所需要的不同氢浓度含量的富氢溶液,为氢棒制氢在临床以及日常生活中的应用提供参考依据。

关键词：氢棒溶质溶液产氢速率含氢量含氧量氢浓度氧化还原

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L-半胱氨酸衍生化氮化碳富集材料的研究及糖肽富集中的应用

L-半胱氨酸衍生化氮化碳富集材料的研究及糖肽富集中的应用

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第三届全国质谱分析学术报告会

作者：井红宇张勇钱小红应万涛蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所

糖蛋白质组学研究对低丰度糖蛋白或糖肽的富集分析要求日益提高,相关的分离富集材料和技术应运而生,发展高灵敏度、高特异性的富集材料的尤为重要。目前已经报道的富集材料主要以常规的二氧化硅、二氧化钛和磁性四氧化三铁为基底材料,... 详细信息

糖蛋白质组学研究对低丰度糖蛋白或糖肽的富集分析要求日益提高,相关的分离富集材料和技术应运而生,发展高灵敏度、高特异性的富集材料的尤为重要。目前已经报道的富集材料主要以常规的二氧化硅、二氧化钛和磁性四氧化三铁为基底材料,在其表面衍生官能团进行选择性富集。这类材料因其基底材料表面官能团较少,对糖肽和非糖肽的整体吸附效果有所限制,特异性富集也因此会受到限制。近年来,纳米二维平面材料在能源制备、电化学、光学、催化、生物成像和生物制药等各个领域都有优异的表现[1],例如C3N4的表面所带的正电荷对细胞表面的负电荷有很强的静电吸引力,且C3N4本身没有毒性,具有良好的生物相容性[2],其本身二维的平面片层结构具有很好的分散性,这些优异的性能通过改性和延伸可以进一步应用于各种生物领域。我们以g-C3N4为基底材料,经过进一步改性和修饰,在其表面沉积纳米金颗粒,通过L-半胱氨酸的巯基与Au之间形成稳定的共价键而结合在材料表面,通过SEM、FTIR以及XPS等表征手段分析得出以g-C3N4为基底的L-半胱氨酸修饰材料已经成功合成。g-C3N4作为基底材料在水相和有机相中均具有良好的分散性,在沉积修饰过程中并未改变C3N4的二维平面结构,这些性质均可以增大材料与目标富集物的接触面积,提高材料的富集效率。g-C3N4表面所带氨基和L-半胱氨酸所具有的氨基具有更好的亲水性,材料具有优良的吸附作用和优异的特异性。通过酶切IgG肽段富集实验和人血实际样本富集与质谱分析,均证明L-半胱氨酸衍生化氮化碳材料具有优秀的糖肽富集回收率和选择性。

关键词：糖肽富集串联质谱亲水富集氮化碳

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