转移是肿瘤致死的一个重要因素,其发生需要多基因参与、多步骤调控,相关基因及其作用机制的发现对肿瘤转移的预防与治疗具有重要意义。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)是一种非组蛋白染色质结合蛋白,在DNA复制、修...
详细信息
转移是肿瘤致死的一个重要因素,其发生需要多基因参与、多步骤调控,相关基因及其作用机制的发现对肿瘤转移的预防与治疗具有重要意义。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)是一种非组蛋白染色质结合蛋白,在DNA复制、修复、重组和基因转录中起重要作用,在细胞损伤和炎症发生时释放至胞外参与信号转导,调节细胞的生长和分化等。近年研究表明,HMGB1在多种肿瘤细胞和组织中高表达,增强肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,促进肿瘤的发生、发展,提示HMGB1有可能成为治疗和预防肿瘤转移的靶标。现就HMGB1在肿瘤转移中的作用及其机制的研究进展作一综述。
目的为了探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因与慢性乙型肝炎及肝癌发生的关系,构建HBV X基因(hep-atitis B virus X gene,HBx)真核表达载体及其肝癌(HCC)细胞系HepG2瞬转模型,并检测HBx对HepG2细胞表型的影响。方法以pCMV-HBx为模板,PCR法扩增...
详细信息
目的为了探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因与慢性乙型肝炎及肝癌发生的关系,构建HBV X基因(hep-atitis B virus X gene,HBx)真核表达载体及其肝癌(HCC)细胞系HepG2瞬转模型,并检测HBx对HepG2细胞表型的影响。方法以pCMV-HBx为模板,PCR法扩增HBx基因编码区全长序列,将其克隆至pcDNA3.1-Flag真核表达载体中,构建重组真核表达载体pcDNA3.1-Flag-HBx,转染至HepG2细胞;Western印迹法检测细胞中HBx蛋白的表达水平;5-溴尿苷(5-溴脱氧尿嘧啶核苷,5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)标记法检测转染HBx后细胞DNA合成变化;细胞周期检测试剂盒(CycleTESTTMPLUS DNA Reagent Kit)检测转染HBx后细胞周期的变化;AnnexinⅤ-APC/7-AAD法检测转染HBx后细胞凋亡情况。结果重组真核表达载体pcDNA3.1-Flag-HBx经双酶切和测序证明构建正确,转染该载体的HepG2细胞可检测到HBx蛋白的表达;与转染空质粒pcDNA3.1-Flag的细胞相比,细胞增殖能力增强,而细胞凋亡比率下降。结论成功构建了HBx基因真核表达载体,并研究了HBx对细胞表型的影响,为进一步探索HBx参与HBV引发HCC的分子机制奠定了基础。
暂无评论