检索结果-内蒙古大学图书馆

色谱 2014年第2期32卷 107-116页

作者：翟睿焦丰龙林虹君郝斐然李佳斌颜辉李楠楠王欢欢金祖耀张养军钱小红北京工业大学生命科学与生物工程学院北京100022 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京102206

金属有机框架(metal-organic frameworks,MOFs)材料是一类由有机配体与金属中心经过自组装形成的具有可调节孔径的材料。与传统无机多孔材料相比,MOFs材料具有更大的比表面积,更高的孔隙率,结构及功能更加多样,因而已经被广泛应用于气... 详细信息

金属有机框架(metal-organic frameworks,MOFs)材料是一类由有机配体与金属中心经过自组装形成的具有可调节孔径的材料。与传统无机多孔材料相比,MOFs材料具有更大的比表面积,更高的孔隙率,结构及功能更加多样,因而已经被广泛应用于气体吸附与分离、传感器、药物缓释、催化反应等领域中。新兴材料的出现极大地促进了各个学科间的相互发展,本文综述了近年来MOFs材料的研究发展,包括MOFs材料自身的特点、国内外发展现状、应用领域以及复合MOFs材料的研究热点,并对今后的发展进行了展望。

关键词：金属有机框架配位聚合物多孔材料

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慢病毒载体介导RAB27A基因过表达对人HepG2肝癌细胞增殖的影响

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中国生物工程杂志 2014年第9期34卷 16-23页

作者：刘雪杰林巍然唐立春孙薇魏汉东姜颖安徽医科大学合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心北京102206

目的:构建RAB27A基因慢病毒表达载体,并研究RAB27A对人HepG2肝癌细胞增殖能力的影响。方法:以pEGFP-C1-RAB27A质粒为模板,PCR扩增出融合绿色荧光蛋白的RAB27A基因全长,酶切后插入穿梭载体pENTR/U6,再应用Gateway技术,基因重组到表达载体... 详细信息

目的:构建RAB27A基因慢病毒表达载体,并研究RAB27A对人HepG2肝癌细胞增殖能力的影响。方法:以pEGFP-C1-RAB27A质粒为模板,PCR扩增出融合绿色荧光蛋白的RAB27A基因全长,酶切后插入穿梭载体pENTR/U6,再应用Gateway技术,基因重组到表达载体pHAGEEF1α-puro-DEST上,构建得到重组慢病毒表达载体pHAGE-GFP-RAB27A-puro。测序鉴定序列正确后,将其与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G共转HEK-293T细胞进行慢病毒包装。收集并浓缩培养上清以获得慢病毒颗粒感染HepG2细胞。荧光显微镜下观察HEK-293T细胞和慢病毒感染HepG2细胞绿色荧光强度;Western blot检测稳定感染HepG2细胞株RAB27A蛋白表达水平;CCK8和平皿克隆形成实验检测稳定过表达RAB27A的HepG2细胞增殖活力的变化;流式细胞术检测稳定过表达RAB27A的HepG2细胞周期分布情况。结果:经双酶切及测序结果证实重组慢病毒表达载体构建正确;浓缩后病毒滴度较高;重组慢病毒感染HepG2细胞后,细胞外源RAB27A的蛋白表达水平显著上调,HepG2细胞的增殖活力和克隆形成能力受到明显抑制(P<0.01),S期细胞分布比例明显降低(P<0.01)。结论:RAB27A基因重组慢病毒表达载体构建成功,外源过表达RAB27A基因可显著抑制HepG2细胞增殖能力。RAB27A在肝细胞癌发生发展和迁移中扮演了重要角色。

关键词： RAB27A 慢病毒肝细胞癌细胞增殖

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超支化聚合物新材料富集糖肽方法的研究

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中国生物工程杂志 2014年第8期34卷 67-73页

作者：邓珊珊王明超曹琦琛白海红彭博应万涛蔡耘安徽医科大学合肥230032 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京102206

目的:将自合成的超支化聚合物固定到氨基硅球上形成一种新型的糖肽富集材料,用于糖肽的高效分离与富集。方法:阴离子开环聚合法合成的超支化聚缩水甘油,经高碘酸氧化成为超支化聚甘油醛(hyperbranched polyglycerol-aldehydes,HPG-ALD)... 详细信息

目的:将自合成的超支化聚合物固定到氨基硅球上形成一种新型的糖肽富集材料,用于糖肽的高效分离与富集。方法:阴离子开环聚合法合成的超支化聚缩水甘油,经高碘酸氧化成为超支化聚甘油醛(hyperbranched polyglycerol-aldehydes,HPG-ALD)后固定于氨基硅球上,再用己二酸二酰肼修饰得到的酰肼材料应用于糖肽富集。结果:经扫描电镜(Scanning Electron Microscope,SEM)、热重分析(thermogravimetric analysis,TGA)等手段证明材料被成功合成。同时,使用制备成功的新材料来富集标准糖蛋白和糖肽都获得了良好的富集效果。结论:实验证明超支化缩水甘油酰肼材料(hyperpolymer-assisted hydrazide functionalized microspheres,HHMs)可用于低丰度糖蛋白/糖肽的富集。

关键词： HHMs 糖肽富集

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复杂疾病的遗传易感基因区域的精细定位

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遗传 2014年第1期36卷 2-10页

作者：宋庆峰张红星马亦龙周钢桥广西医科大学附属肿瘤医院介入治疗科南宁530021 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组学研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京102206 蛋白质药物国家工程研究中心北京102206 国家蛋白质科学中心(北京) 北京102206

以单核苷酸多态性(Single-nucleotide polymorphism,SNP)为遗传标记,采用全基因组关联研究(Genome-wide association studies,GWAS)的策略,已经在660多种疾病(或性状)中发现了3800多个遗传易感基因区域。但是,其中最显著关联的遗传变异... 详细信息

以单核苷酸多态性(Single-nucleotide polymorphism,SNP)为遗传标记,采用全基因组关联研究(Genome-wide association studies,GWAS)的策略,已经在660多种疾病(或性状)中发现了3800多个遗传易感基因区域。但是,其中最显著关联的遗传变异或致病性的遗传变异位点及其生物学功能并不完全清楚。这些位点的鉴定有助于阐明复杂疾病的生物学机制,以及发现新的疾病标记物。后GWAS时代的主要任务之一就是通过精细定位研究找到复杂疾病易感基因区域内最显著关联的易感位点或致病性的易感位点并阐明其生物学功能。针对常见变异,可通过推断或重测序增加SNP密度,寻找最显著关联的SNP位点,并通过功能元件分析、表达数量性状位点(Expression quantitative trait locus,eQTL)分析和单体型分析等方法寻找功能性的SNP位点和易感基因。针对罕见变异,则可采用重测序、罕见单体型分析、家系分析和负荷检验等方法进行精细定位。文章对这些策略和所面临的问题进行了综述。

关键词：全基因组关联研究精细定位遗传易感性单核苷酸多态性

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哺乳动物卵母细胞及早期胚胎蛋白质组学研究进展

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生物工程学报 2014年第7期30卷 1018-1025页

作者：陈凌声徐平石德顺李湘萍亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室广西大学广西南宁530005 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京102206 国家蛋白质科学中心(北京) 北京102206

雌性生殖细胞发育是动物繁殖的基石,哺乳动物卵母细胞和早期胚胎在其生长发育过程中有许多独特的现象和规律,涉及一系列蛋白质合成/降解和磷酸化等状态的动态改变。对卵母细胞分裂、成熟调控机理以及植入前胚胎发育规律的研究是发育生... 详细信息

雌性生殖细胞发育是动物繁殖的基石,哺乳动物卵母细胞和早期胚胎在其生长发育过程中有许多独特的现象和规律,涉及一系列蛋白质合成/降解和磷酸化等状态的动态改变。对卵母细胞分裂、成熟调控机理以及植入前胚胎发育规律的研究是发育生物学领域的一项重要课题。蛋白质组学是以细胞或组织内全部的蛋白质为研究对象,系统鉴定、定量蛋白质并研究这些蛋白质功能的科学。随着蛋白质分离、鉴定技术的快速发展,蛋白质组学为卵母细胞发生、分化、成熟以及质量控制等相关研究提供了新的方法和内容,如在蛋白质定量、修饰、定位和相互作用等方面提供其他组学技术不可获得的重要信息。这些信息将有助于揭示哺乳动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育的分子机制,对于进一步完善卵母细胞的体外成熟培养体系,提高胚胎体外生产、体细胞克隆和转基因动物生产效率具有重要意义。

关键词：蛋白质组学哺乳动物卵母细胞植入前胚胎发育生发泡期减数分裂

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中国人群白介素33基因单核苷酸多态性与脓毒症易感性及严重程度的关联研究

中国人群白介素33基因单核苷酸多态性与脓毒症易感性及严重程度的...

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2015第十一届全国中西医结合灾害医学大会、江苏省中西医结合学会第二届灾害医学学术会议、中华卫生应急电子杂志第二届编委会会议暨2015江苏国际医疗器械科技博览会

作者：张腾飞冯凯岳茂兴周钢桥王志富郑琦涵翟芸史卫海张红星安徽医科大学解放军306临床学院解放军306医院特种医学实验中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室江苏大学附属常州市武进人民医院

目的:探讨白介素33(IL-33,interleukin-33)基因单核苷酸多态性(SNP,single nucleotidepo]ymorphism)与脓毒症发生风险及疾病严重程度的关联性。方法:采用病例-对照研究设计,标签SNP(tagging SNP,tagSNP)策略,应用美国Sequenom公司开发的MassARRAY时间飞行质谱技术完成对IL-33基因的标签SNPs分型。采用Logistic回归分析,校正性别、年龄、吸烟和饮酒、APACHEⅡ评分、慢性病状态和脓毒症病因等混杂因素的影响后,评价IL-33单核苷酸多态性与脓毒症的发生风险,以及脓毒症继发的严重脓毒症、脓毒症休克、死亡等表型的相关性。结果:在所选的7个IL-33标签SNPs(rs10118795,rs16924159,rs1891385,rs2210463,rs72614079,rs76864631,rs7849201)中,rs76864631不符合Hardy-Weinberg平衡定律,其余6个多态位点及单体型与脓毒症的发生风险和疾病的严重程度均无明显相关性。结论:在中国人群,IL-33基因多态性在脓毒症的发生、发展和病程转归中可能不发挥重要作用。

关键词：白介素严重程度基因单核苷酸多态性严重脓毒症多器官功能障碍综合征关联研究易感性中国人群

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肝脏细胞在生物活性物质代谢调控中的协作作用

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中国科学：生命科学 2014年第2期44卷 175-184页

作者：李严严郝运伟姜颖贺福初军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京102206 清华大学生命科学学院北京100086

肝实质细胞和非实质细胞是肝脏功能的物质和结构基础.肝实质细胞是肝脏的主要细胞类型之一,承担和执行肝脏代谢、信号转导、解毒和稳态调节等多种功能.而非实质细胞也必不可少,主要包括星型细胞、肝窦内皮细胞、枯否细胞、自然杀伤细胞... 详细信息

肝实质细胞和非实质细胞是肝脏功能的物质和结构基础.肝实质细胞是肝脏的主要细胞类型之一,承担和执行肝脏代谢、信号转导、解毒和稳态调节等多种功能.而非实质细胞也必不可少,主要包括星型细胞、肝窦内皮细胞、枯否细胞、自然杀伤细胞和隐窝细胞等,具有物质和信号转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能.目前,有关肝脏生理功能和病理机制的研究主要集中在组织、细胞和差异分子的水平,单细胞的生理和病理功能研究也越来越深入,而肝脏细胞协作的研究比较少,系统性总结也鲜有报道.本文从肝脏细胞相互协作的角度,对肝脏的生理功能及病理机制进行探讨,为全面了解肝细胞生理功能及肝脏疾病的致病机理提供参考.

关键词：肝实质细胞非实质细胞肝细胞协作代谢调控

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微RNA与非酒精性脂肪性肝病

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中华肝脏病杂志 2014年第6期22卷 -页

作者：徐会王赫周福祥杨俊涛 430071 武汉大学中南医院放化疗科湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北省肿瘤生物学行为重点实验室北京蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质药物国家工程研究中心

关键词：微RNAs 脂肪肝炎症脂质合成脂质分解

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溶菌酶活性测定方法的改进及其在重组人溶菌酶质量标准建立中的应用

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分析测试学报 2014年第8期33卷 917-921,927页

作者：宋纯艳张拓侯利平原剑黄亚娟韩治国刘曙晨甄蓓魏开华中南大学药学院湖南长沙410013 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京102206 北京正旦国际科技有限责任公司北京102206

获得一种趋于均相反应体系的比浊法,用于重组人溶菌酶活性的研究,并建立相关操作规程和质量标准.通过显微计数法进行底物菌液质控,改进酶与菌液的混合方式和最佳酶用量,采用“双直线法”优化反应计时区间,并精确测定重组人溶菌酶含量.... 详细信息

获得一种趋于均相反应体系的比浊法,用于重组人溶菌酶活性的研究,并建立相关操作规程和质量标准.通过显微计数法进行底物菌液质控,改进酶与菌液的混合方式和最佳酶用量,采用“双直线法”优化反应计时区间,并精确测定重组人溶菌酶含量.显微镜菌体计数法确定0.3 mg/mL底物菌液中菌体数保持在1.1 ×108个/mL左右;酶与菌液在样品池内经吸排法快速混合可趋近均相体系;酶的最佳用量为3μg;确定反应计时区间为0～60s;依据所制定的酶活性操作规程,确定重组人溶菌酶活性质量标准为45 000～ 65 000U/mg,日内、日间相对标准偏差均小于5％;优选Lowry法并精确测定蛋白含量为（1.0±0.1）mg/mL.改进后的方法稳定性得到明显提高,且操作简便、结果可靠,已被3家研究单位、企业验证并接受.建立的重组人溶菌酶活性和含量测定质量标准及操作规程具有实际参考价值.

关键词：重组人溶菌酶比浊法双直线法 Lowry法

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放线菌蛋白质组学研究进展

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生物工程学报 2014年第7期30卷 1044-1058页

作者：张瑶徐平李文均陶勇中国科学院微生物研究所北京100101 军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心北京102206 云南大学云南省微生物研究所西南微生物多样性教育部重点实验室云南昆明650091

蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,蛋白质组学旨在阐明生物体全部或部分蛋白质在生命活动中的作用和功能。随着组学理论基础和技术方法的逐渐成熟,蛋白质组学的研究被提高到了前所未有的高度。放线菌与人类的生产和生... 详细信息

蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,蛋白质组学旨在阐明生物体全部或部分蛋白质在生命活动中的作用和功能。随着组学理论基础和技术方法的逐渐成熟,蛋白质组学的研究被提高到了前所未有的高度。放线菌与人类的生产和生活关系极为紧密,是产生抗生素和酶制剂的主要来源。近130多年的放线菌系统学研究和2001年模式菌株的全基因组测序,为功能基因组研究奠定了基础。与先前的基因组学和转录组学相比,放线菌蛋白质组学能更直接、更准确地解释生命现象,得到了快速发展,并受到研究者的高度关注。近年来放线菌蛋白质组学的研究主要包括复杂形态分化和发育过程、非凡的环境适应能力、与植物共生固氮、代谢机理及特殊功能、病原放线菌致病性和筛查天然产物等几个方向,为进一步促进放线菌蛋白质组学发展奠定了基础。

关键词：放线菌蛋白质组学双向电泳质谱机理

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