检索结果-内蒙古大学图书馆

中国科学：生命科学 2014年第2期44卷 175-184页

作者：李严严郝运伟姜颖贺福初军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京102206 清华大学生命科学学院北京100086

肝实质细胞和非实质细胞是肝脏功能的物质和结构基础.肝实质细胞是肝脏的主要细胞类型之一,承担和执行肝脏代谢、信号转导、解毒和稳态调节等多种功能.而非实质细胞也必不可少,主要包括星型细胞、肝窦内皮细胞、枯否细胞、自然杀伤细胞... 详细信息

肝实质细胞和非实质细胞是肝脏功能的物质和结构基础.肝实质细胞是肝脏的主要细胞类型之一,承担和执行肝脏代谢、信号转导、解毒和稳态调节等多种功能.而非实质细胞也必不可少,主要包括星型细胞、肝窦内皮细胞、枯否细胞、自然杀伤细胞和隐窝细胞等,具有物质和信号转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能.目前,有关肝脏生理功能和病理机制的研究主要集中在组织、细胞和差异分子的水平,单细胞的生理和病理功能研究也越来越深入,而肝脏细胞协作的研究比较少,系统性总结也鲜有报道.本文从肝脏细胞相互协作的角度,对肝脏的生理功能及病理机制进行探讨,为全面了解肝细胞生理功能及肝脏疾病的致病机理提供参考.

关键词：肝实质细胞非实质细胞肝细胞协作代谢调控

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微RNA与非酒精性脂肪性肝病

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中华肝脏病杂志 2014年第6期22卷 -页

作者：徐会王赫周福祥杨俊涛 430071 武汉大学中南医院放化疗科湖北省肿瘤医学临床研究中心湖北省肿瘤生物学行为重点实验室北京蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质药物国家工程研究中心

关键词：微RNAs 脂肪肝炎症脂质合成脂质分解

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溶菌酶活性测定方法的改进及其在重组人溶菌酶质量标准建立中的应用

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分析测试学报 2014年第8期33卷 917-921,927页

作者：宋纯艳张拓侯利平原剑黄亚娟韩治国刘曙晨甄蓓魏开华中南大学药学院湖南长沙410013 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京102206 北京正旦国际科技有限责任公司北京102206

获得一种趋于均相反应体系的比浊法,用于重组人溶菌酶活性的研究,并建立相关操作规程和质量标准.通过显微计数法进行底物菌液质控,改进酶与菌液的混合方式和最佳酶用量,采用“双直线法”优化反应计时区间,并精确测定重组人溶菌酶含量.... 详细信息

获得一种趋于均相反应体系的比浊法,用于重组人溶菌酶活性的研究,并建立相关操作规程和质量标准.通过显微计数法进行底物菌液质控,改进酶与菌液的混合方式和最佳酶用量,采用“双直线法”优化反应计时区间,并精确测定重组人溶菌酶含量.显微镜菌体计数法确定0.3 mg/mL底物菌液中菌体数保持在1.1 ×108个/mL左右;酶与菌液在样品池内经吸排法快速混合可趋近均相体系;酶的最佳用量为3μg;确定反应计时区间为0～60s;依据所制定的酶活性操作规程,确定重组人溶菌酶活性质量标准为45 000～ 65 000U/mg,日内、日间相对标准偏差均小于5％;优选Lowry法并精确测定蛋白含量为（1.0±0.1）mg/mL.改进后的方法稳定性得到明显提高,且操作简便、结果可靠,已被3家研究单位、企业验证并接受.建立的重组人溶菌酶活性和含量测定质量标准及操作规程具有实际参考价值.

关键词：重组人溶菌酶比浊法双直线法 Lowry法

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放线菌蛋白质组学研究进展

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生物工程学报 2014年第7期30卷 1044-1058页

作者：张瑶徐平李文均陶勇中国科学院微生物研究所北京100101 军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质药物国家工程研究中心北京102206 云南大学云南省微生物研究所西南微生物多样性教育部重点实验室云南昆明650091

蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,蛋白质组学旨在阐明生物体全部或部分蛋白质在生命活动中的作用和功能。随着组学理论基础和技术方法的逐渐成熟,蛋白质组学的研究被提高到了前所未有的高度。放线菌与人类的生产和生... 详细信息

蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,蛋白质组学旨在阐明生物体全部或部分蛋白质在生命活动中的作用和功能。随着组学理论基础和技术方法的逐渐成熟,蛋白质组学的研究被提高到了前所未有的高度。放线菌与人类的生产和生活关系极为紧密,是产生抗生素和酶制剂的主要来源。近130多年的放线菌系统学研究和2001年模式菌株的全基因组测序,为功能基因组研究奠定了基础。与先前的基因组学和转录组学相比,放线菌蛋白质组学能更直接、更准确地解释生命现象,得到了快速发展,并受到研究者的高度关注。近年来放线菌蛋白质组学的研究主要包括复杂形态分化和发育过程、非凡的环境适应能力、与植物共生固氮、代谢机理及特殊功能、病原放线菌致病性和筛查天然产物等几个方向,为进一步促进放线菌蛋白质组学发展奠定了基础。

关键词：放线菌蛋白质组学双向电泳质谱机理

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树突状细胞对Th17细胞分化的调节作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第2期30卷 216-219页

作者：杨造鹏唐丽北京大学生命科学学院北京100871 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京102206

树突状细胞(DC)作为最主要的抗原提呈细胞(APC),是连接先天免疫和继发免疫的桥梁。在病原微生物的刺激下,APC会将抗原提呈给T细胞,进而引起初始T细胞的活化并分化成为不同的效应细胞。Th17是CD4辅助性T细胞的一个亚群,在机体抗感染和自... 详细信息

树突状细胞(DC)作为最主要的抗原提呈细胞(APC),是连接先天免疫和继发免疫的桥梁。在病原微生物的刺激下,APC会将抗原提呈给T细胞,进而引起初始T细胞的活化并分化成为不同的效应细胞。Th17是CD4辅助性T细胞的一个亚群,在机体抗感染和自身免疫性疾病中发挥重要作用。Th17细胞的分化过程主要受来自APC(外源信号)和T细胞自身内源信号的调控,其中外源信号主要包括DC上的各类受体以及胞内的节点分子所介导的信号。本文主要概述了树突状细胞所介导的信号是如何影响Th17细胞的分化。

关键词：树突状细胞 Th17 分化

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一个中国遗传性血色病家系致病基因的突变分析

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遗传 2014年第11期36卷 1152-1158页

作者：李元丰张红星张海涛彭晓波白丽丽贺福初邱泽武周钢桥中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京102206 蛋白质药物国家工程研究中心北京102206 国家蛋白质科学中心(北京) 北京102206 中国人民解放军第三〇七医院中毒救治科北京100071

遗传性血色病(Hereditary hemochromatosis,HHC)是一种罕见的常染色体隐性遗传病。本课题组招募了一个HHC的近亲婚配家系,包括一名患HHC的先证者以及同一代的4名不患HHC的成员。通过对该HHC先证者进行全外显子组测序,在目前已知的与遗... 详细信息

遗传性血色病(Hereditary hemochromatosis,HHC)是一种罕见的常染色体隐性遗传病。本课题组招募了一个HHC的近亲婚配家系,包括一名患HHC的先证者以及同一代的4名不患HHC的成员。通过对该HHC先证者进行全外显子组测序,在目前已知的与遗传性血色病相关的5个基因(HAMP、HJV、TFR2、FPN和HFE)中,发现在铁调素调节蛋白(Hemojuvelin,HJV)的编码基因HJV上存在两个纯合突变(c.G18C和***962_963AA)。其中,前者能够引起HJV蛋白发生p.Q6H的改变,但该突变的危害性较小,可能与血色病的发病无关;后者能够引起HJV蛋白发生p.C321X的改变,从而翻译出缺失糖基磷脂肌醇锚定结构域的截短型HJV蛋白。除了HJV基因上的纯合突变外,该先证者还携带了其他12个纯合突变,但这些突变的危害性均不强且其所在基因的功能与铁代谢无关。本实验室内部测序数据显示,在一般中国人群中不存在p.C321X突变,提示HJV基因上的p.C321X纯合突变可能是该HHC患者的致病性突变。与此相一致的是,4名不患HHC的家系成员中该位点为野生型纯合子或杂合子,均非p.C321X纯合子。文章首次报道了HJV p.C321X纯合突变可导致HHC,该结果将有助于遗传性血色病的基因诊断和产前咨询。

关键词：遗传性血色病 HJV基因全外显子组测序

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中国人群白介素33基因单核苷酸多态性与脓毒症易感性及严重程度的关联研究

中国人群白介素33基因单核苷酸多态性与脓毒症易感性及严重程度的...

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2015第十一届全国中西医结合灾害医学大会暨江苏省中西医结合学会第二届灾害医学学术会议

作者：张腾飞冯凯岳茂兴周钢桥王志富郑琦涵翟芸史卫海张红星安徽医科大学解放军306临床学院安徽医科大学解放军306临床学院解放军306医院特种医学实验中心解放军306医院特种医学实验中心军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室江苏大学附属常州市武进人民医院

目的:探讨白介素33(IL-33,interleukin-33)基因单核苷酸多态性(SNP,single nucleotide polymorphism)与脓毒症发生风险及疾病严重程度的关联性. 方法:采用病例-对照研究设计,标签SNP(tagging SNP,tagSNP)策略,应用美国Sequenom公司开发的MassARRAY时间飞行质谱技术完成对IL-33基因的标签SNPs分型.采用Logistic回归分析,校正性别、年龄、吸烟和饮酒、APACHEⅡ评分、慢性病状态和脓毒症病因等混杂因素的影响后,评价IL-33单核苷酸多态性与脓毒症的发生风险,以及脓毒症继发的严重脓毒症、脓毒症休克、死亡等表型的相关性. 结果:在所选的7个IL-33标签SNPs(rs1O118795,rs16924159,rs1891385,rs2210463,rs72614079,rs76864631,rs7849201)中,rs76864631不符合Hardy-Weinberg平衡定律,其余6个多态位点及单体型与脓毒症的发生风险和疾病的严重程度均无明显相关性. 结论:在中国人群,IL-33基因多态性在脓毒症的发生、发展和病程转归中可能不发挥重要作用.

关键词：脓毒症发病机制白介素33 基因多态性

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常见妇科肿瘤患者血清中唾液酸化糖蛋白标志物的筛选分析

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安徽医科大学学报 2014年第11期49卷 1689-1692页

作者：肖超强裴丽丽何为安徽医科大学军事医学科学院放射与辐射研究所合肥230032 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心与军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京102206

建立一个用于血清中唾液酸化蛋白通量化分析的策略,首先去除血清中高丰度的白蛋白和IgG蛋白,然后用黑接骨木凝集素(SNA)选择性地富集血清中的唾液酸化糖蛋白,通过同位素标记相对与绝对定量技术(iTRAQ)并结合纳升级液相色谱和串联质谱技... 详细信息

建立一个用于血清中唾液酸化蛋白通量化分析的策略,首先去除血清中高丰度的白蛋白和IgG蛋白,然后用黑接骨木凝集素(SNA)选择性地富集血清中的唾液酸化糖蛋白,通过同位素标记相对与绝对定量技术(iTRAQ)并结合纳升级液相色谱和串联质谱技术对蛋白进行分离鉴定。并将其应用于常见妇科肿瘤标志物的研究,共鉴定到169个糖蛋白,与健康对照组相比,乳腺癌病例组共鉴定到11个差异表达蛋白,宫颈癌病例组共鉴定到8个差异表达蛋白,卵巢癌病例组共鉴定到19个差异蛋白。

关键词：定量蛋白质组学唾液酸化糖蛋白质谱妇科肿瘤

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四氯化碳诱导小鼠肝脏纤维化的差异蛋白质组学

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生物工程学报 2014年第7期30卷 1105-1114页

作者：郭改改吴红星刘明伟丁琛秦钧杨晓明安徽医科大学病理生理学教研室安徽合肥230032 国家蛋白质组学重点实验室北京蛋白质组研究中心北京102206 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 浙江大学生命科学研究院杭州浙江310058

以四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl4)诱导小鼠肝组织纤维化为研究模型,发现并探讨纤维化肝组织与正常肝组织在蛋白质组水平上的差异。实验小鼠(C57 BL/6)随机分为两组,由橄榄油和四氯化碳诱导15周,并分别对这两组肝组织的全蛋白表达... 详细信息

以四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl4)诱导小鼠肝组织纤维化为研究模型,发现并探讨纤维化肝组织与正常肝组织在蛋白质组水平上的差异。实验小鼠(C57 BL/6)随机分为两组,由橄榄油和四氯化碳诱导15周,并分别对这两组肝组织的全蛋白表达谱进行质谱检测,应用GO(Gene Ontology)功能分类分析和KEGG(Kyoto Enyoolpedia of Genes and Genomes)信号通路的富集分析方法对鉴定到的全蛋白表达谱进行差异表达分析。在对照组和实验组中,我们分别鉴定到17 382和20 486条特异性肽段,图谱平均利用率大于50%,共计鉴定到蛋白4 991种(蛋白特异性肽段个数至少为1),其中差异表达蛋白有2 135种(差异倍数大于或等于2),表达上调蛋白1 264种,下调蛋白871种。纤维化肝脏组织中与细胞外基质组成(Extracellular matrix organization)、细胞骨架组成(Cytoskeleton organization)、有机磷酸代谢(Organophosphate metabolic process)、细胞定位(Cellular localization)和细胞组分调节(Regulation of cellular component organization)相关蛋白的表达是上调的;另外,与小分子代谢(Small molecule metabolic process)、蛋白质转运(Protein transport)和有机氮化合物的代谢(Organonitrogen compound metabolic process),以及四吡咯的合成过程(Tetrapyrrole biosynthetic process)有关蛋白的表达是下调的。信号通路富集分析结果表明,纤维化与VEGF和T细胞受体信号调节通路密切相关。结果提示,纤维化的形成不仅是一个复杂的信号转导过程,更是一个炎症与免疫相互促成的结果;增强肝实质细胞的存活,降低相关信号的传递及接收都有可能对纤维化的发生和发展起到抑制效果。

关键词：四氯化碳肝脏组织纤维化蛋白质组学

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不同转移潜能的肝癌细胞系定量磷酸化蛋白质组学研究

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安徽医科大学学报 2014年第11期49卷 1595-1599页

作者：衣泰龙田苗苗翟琳辉徐忠伟杨晓明徐平安徽医科大学研究生院合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京102206

目的研究具有不同侵袭转移能力的肝癌细胞系的磷酸化蛋白质组的动态变化。方法首先用含有重稳定同位素标记的精氨酸和赖氨酸的培养基对MHCC97-L进行重稳定同位素标记氨基酸的细胞培养(SILAC);用含有轻稳定同位素标记的精氨酸和赖氨酸的... 详细信息

目的研究具有不同侵袭转移能力的肝癌细胞系的磷酸化蛋白质组的动态变化。方法首先用含有重稳定同位素标记的精氨酸和赖氨酸的培养基对MHCC97-L进行重稳定同位素标记氨基酸的细胞培养(SILAC);用含有轻稳定同位素标记的精氨酸和赖氨酸的培养基对MHCC97-H进行SILAC标记。将完成标记的两种肝癌细胞系的蛋白质按照1∶1混合,并用trypsin进行溶液消化;对消化得到的肽段进行除盐,并通过固相金属离子亲和色谱(IMAC)的方法进行磷酸化肽段的富集。磷酸化肽段通过质谱进行检测,并通过MaxQuant进行鉴定和定量。最后通过Z检验进行统计学分析,并对差异调控的磷酸化肽对应的蛋白质进行基因本体(GO)分析和STRING网络分析。结果最终鉴定了918个磷酸化肽段,其中806个磷酸化肽段的磷酸化位点可以定位和定量。通过Z检验,共得到了91个磷酸化修饰水平发生变化的肽段,对应25个磷酸化蛋白质。通过对这25个蛋白质进行GO分析发现,细胞骨架重塑过程中的蛋白质在MHCC97-L和MHCC97-H中磷酸化修饰形式严重失调。通过STRING分析发现,NES和PRKCA处于网络的重要节点位置。结论细胞骨架重塑这一生物学过程与肝癌侵袭转移能力密切相关;参与细胞骨架重塑的NES蛋白和参与MAPK信号通路和黏合斑信号通路的PRKCA蛋白磷酸化修饰水平的变化是影响低转移潜能MHCC97-L细胞向高转移潜能细胞MHCC97-H变化的重要调控机制。

关键词：定量磷酸化蛋白质组学 SILAC 固相金属离子亲和色谱肝细胞癌侵袭转移

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