检索结果-内蒙古大学图书馆

生命的化学 2008年第4期28卷 391-394页

作者：徐榕王清明军事医学科学院放射医学研究所基因组学与蛋白质组学研究室

细胞内抗体是指能够在细胞内特定区域特异性中和靶蛋白功能的抗体。内抗体技术是一种翻译后水平上抑制靶蛋白质功能的技术,已经成为一种功能基因组学研究的重要工具。本文综述了细胞内抗体转运和作用机制,分析了细胞内抗体技术和其他靶... 详细信息

细胞内抗体是指能够在细胞内特定区域特异性中和靶蛋白功能的抗体。内抗体技术是一种翻译后水平上抑制靶蛋白质功能的技术,已经成为一种功能基因组学研究的重要工具。本文综述了细胞内抗体转运和作用机制,分析了细胞内抗体技术和其他靶向敲除技术的优、缺点,以及细胞内抗体技术存在的问题及解决途径。

关键词：细胞内抗体(内抗体) 敲除基因治疗转运

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序列同源性分析软件Blast的WEB界面构建及其应用

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生物化学与生物物理进展 2001年第6期28卷 916-918页

作者：张成岗张利达欧阳曙光张启发贺福初军事医学科学院放射医学研究所基因组学与蛋白质组学研究室北京100850 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉430070

基于局域网 (Intranet)内的PC/Linux服务器 ,构建了序列同源性分析软件Blast的WEB界面 .局域网内的所有计算机均可通过WEB方式访问该服务器进行公共数据库和自建数据库的查询 ,具有保密、高效、免费的优点 ,能够满足实验室和研究院所的... 详细信息

基于局域网 (Intranet)内的PC/Linux服务器 ,构建了序列同源性分析软件Blast的WEB界面 .局域网内的所有计算机均可通过WEB方式访问该服务器进行公共数据库和自建数据库的查询 ,具有保密、高效、免费的优点 ,能够满足实验室和研究院所的大规模。

关键词：微机 Linux操作系统局域网 Blast软件 WEB界面生物信息学序列同源性分析软件

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BCR3/ABL2核酶的设计、构建及对K562细胞增殖与集落形成的抑制作用和凋亡诱导作用

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中国生物化学与分子生物学报 2000年第1期16卷 10-16页

作者：李满文贺福初军事医学科学院放射医学研究所基因组学与蛋白质组学研究室北京100850

利用计算机模拟设计合成了针对K562细胞致癌融合bcr3/abl2 mRNA的锤头状核酶.该核酶以融合点附近UUC为识别切割三联体,在核酶的3′端增加一段T7噬菌体终止子序列.用基因克隆结合体外转录的方法,肯定了核酶的体外切割活性.进而将核酶基... 详细信息

利用计算机模拟设计合成了针对K562细胞致癌融合bcr3/abl2 mRNA的锤头状核酶.该核酶以融合点附近UUC为识别切割三联体,在核酶的3′端增加一段T7噬菌体终止子序列.用基因克隆结合体外转录的方法,肯定了核酶的体外切割活性.进而将核酶基因克隆到pCEP4真核细胞高效表达载体上,利用脂质体LipofectinAMINE介导的转染技术将核酶与核酶基因导入靶细胞,从抑制靶细胞K562的增殖与集落形成及引起靶细胞凋亡等方面验证了核酶在细胞水平上对融合基因bcr3/abl2 mRNA的特异切割作用,并观察到了T7噬菌体终止子序列对核酶切割效率的增强影响.

关键词：锤头状核酶 bcr3/abl2 凋亡

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抗人LSECtin单克隆抗体的制备与初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第4期22卷 517-520页

作者：杜雪梅唐丽柳晓兰陈勇高建恩贺福初孙启鸿军事医学科学院放射与辐射医学研究所免疫学研究室北京100850 军事医学科学院放射与辐射医学研究所基因组学和蛋白质组学实验室北京100850 北京蛋白组研究中心抗体工程研究室北京102206

目的：制备抗肝脏、淋巴结窦内皮细胞C型凝集素（LSECtin）单克隆抗体（mAb），并进行特性鉴定。方法：采用原核表达的LSECtin免疫BALB／c小鼠，以间接ELISA法筛选分泌特异性mAb的杂交瘤细胞，采用蛋白印迹、间接免疫荧光、流式细胞术... 详细信息

目的：制备抗肝脏、淋巴结窦内皮细胞C型凝集素（LSECtin）单克隆抗体（mAb），并进行特性鉴定。方法：采用原核表达的LSECtin免疫BALB／c小鼠，以间接ELISA法筛选分泌特异性mAb的杂交瘤细胞，采用蛋白印迹、间接免疫荧光、流式细胞术和免疫组化染色法鉴定mAb的特异性。结果：共获得8株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株。mAb的Ig亚类均为IgG，效价达1：10^6-1：10^7。这些mAb均可识别转染3T3细胞膜上的人LSECtin，6株mAb可特异识别肝脏窦内皮细胞。结论：成功地制备8株抗LSECtin的mAb，经免疫印迹、流式细胞术和免疫组化染色检测，这些mAb的特异性良好，为研究LSECtin的功能提供了有力的试剂。

关键词： LSECtin 单克隆抗体肝窦内皮细胞

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新型人转录因子hBKLF对K562细胞增殖、分化及血红蛋白合成作用的研究

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中国实验血液学杂志 2006年第6期14卷 1083-1088页

作者：王茫桔马晓芸石永进武淑兰贺福初北京大学第一医院血液科北京100034 军事医学科学院放射医学研究所基因组学和蛋白质组学研究室北京100850

孕22周的胎肝是胎儿的主要造血器官,其中含有大量与造血相关的调控因子。人碱性Krüppel样因子(humanbasicKrüppel-likefactor,hBKLF)是本研究室从这一时期胎肝cDNA文库中新克隆的转录因子。对其C端的结构分析发现,它含有3个... 详细信息

孕22周的胎肝是胎儿的主要造血器官,其中含有大量与造血相关的调控因子。人碱性Krüppel样因子(humanbasicKrüppel-likefactor,hBKLF)是本研究室从这一时期胎肝cDNA文库中新克隆的转录因子。对其C端的结构分析发现,它含有3个特征性C2H2锌指结构,因此属于KLF转录因子家族。前期的表达谱研究工作显示,hBKLF在成人外周血白细胞、骨髓和胎肝中表达量高,在红系中有表达,这提示它可能与造血相关。本研究以K562细胞为模型,研究hBKLF与造血细胞增殖、分化及血红蛋白合成的关系。构建hBKLF正义及反义真核表达载体,转染K562细胞,经G418筛选4周,得到稳定细胞株;用RT-PCR、Westernblot方法测定转染后K562细胞hBKLF表达水平的变化;以转染空质粒的K562细胞为对照组,在显微镜下直接观察转染正义质粒和反义质粒的两组细胞形态的改变;用MTT法比较增殖速率的变化;用甲基纤维素半固体培养法比较集落形成率的差别;用苯息丁法观察氯高铁血红素(hemin)诱导K562细胞分化后血红蛋白合成水平的差异。结果表明正义质粒和反义质粒经NcoI酶切鉴定构建正确。转染正义质粒的K562细胞(正义组)中hBKLF的mRNA及蛋白质表达水平增加,转染反义质粒的K562细胞(反义组)中hBKLF的mRNA水平降低。增殖活性在反义组、正义组、对照组分别为1.335±0.022、1.067±0.010、1.118±0.014,反义组K562细胞的增殖速率加快,正义组细胞增殖速率减慢(P<0.001)。细胞形态在各组间无明显区别。集落形成率在反义组、正义组、对照组分别为148±13、136±10、141±10,各组间无显著差异(P>0.05)。3组细胞血红蛋白合成水平在hemin诱导后均升高,诱导后血红蛋白升高倍数在对照组、反义组、正义组分别为9.064±1.637、14.360±2.185、4.820±0.404,反义组K562细胞合成血红蛋白能力增加,正义组合成血红蛋白能力下降(P<0.05)。结论hBKLF可以抑制K562细胞的增殖,对血红蛋白合成有负调控作用。

关键词： hBKLF 血红蛋白 K562 细胞增殖细胞分化

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TLR4基因多态性在中国人群中的初步研究

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中华医学遗传学杂志 2005年第1期22卷 99-101页

作者：冯凯周钢桥翟芸朱佩芳王正国贺福初蒋建新 400042 重庆第三军医大学大坪医院野战外科研究所中国军事医学科学院放射医学研究所基因组学和蛋白质组学研究室国家人类基因组北方研究中心

目的检测中国人Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)基因调控区和编码区的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),寻找 TLR4基因的遗传标记.方法采用直接测序的方法检测基因的5'区、编码区、部分内含子区和3&#... 详细信息

目的检测中国人Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)基因调控区和编码区的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),寻找 TLR4基因的遗传标记.方法采用直接测序的方法检测基因的5'区、编码区、部分内含子区和3'区,以确定中国人群中 TLR4基因SNP的位置和类型,并用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性对重庆汉族样本进行了抽样调查.结果在4.98kb的测序范围内,发现5个新的SNP,3个位于5'区,2个位于3'非翻译区.在重庆地区汉族样本中,两个高频分布SNP的等位基因频率分别是0.266和0.404.结论在 TLR4基因新发现的两个高频多态性位点在我国人群中比较常见,可以作为关联分析的遗传标记.

关键词： Toll样受体4 脂多糖单核苷酸多态性

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GSTM1基因编码区SNP位点T1270533G与鼻咽癌的相关性

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南方医科大学学报 2009年第1期29卷 36-39页

作者：何英周钢桥李欣董晓佳姚开泰南方医科大学南方医院耳鼻咽喉科广东广州510515 中国军事医学科学院放射医学研究所基因组学和蛋白质组学研究室北京100850 国家人类基因组北方研究中心北京100176 南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组学与蛋白质组学重点实验室临床部广东广州510515

目的通过筛查GSTM1基因SNPs位点,研究该基因编码区单核苷酸多态位点T1270533G与鼻咽癌易感性和临床表型的关系。方法用PCR方法对中国人群27个个体DNA标本进行扩增、纯化及测序,从中获得GSTM1编码区、调控区和侧翼区及部分内含子区SNP位... 详细信息

目的通过筛查GSTM1基因SNPs位点,研究该基因编码区单核苷酸多态位点T1270533G与鼻咽癌易感性和临床表型的关系。方法用PCR方法对中国人群27个个体DNA标本进行扩增、纯化及测序,从中获得GSTM1编码区、调控区和侧翼区及部分内含子区SNP位点,所获数据进行LD分析。选择编码区多态性位点T1270533G(该位点在中国人群罕见等位基因频率为22.2%),用tetra-Primer ARMS-PCR结合测序方法对鼻咽癌患者和对照人群进行相关性分析。结果通过测序共获取29个SNPs;其中13个SNPs位点之间均呈高度连锁不平衡;编码区多态性位点T1270533G的变异与鼻咽癌临床表型之间无明显关联(RR=0.170,95%CI=0.95-0.306 for homozygoteTT)。结论编码区多态位点T1270533G虽然发生了碱基顛换,产生了错义突变,导致了氨基酸的改变,但并没有影响其解毒功能。该位点在鼻咽癌患者和对照人群中等位基因型频率差别很小,与中国广东地区鼻咽癌易感性无明显关联。

关键词： GSTM1基因单核苷酸多态性连锁不平衡基因分型

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RPLC-SDS-PAGE整体蛋白质分离结合纳升毛细管液相色谱-串联质谱联用技术的研究及应用

RPLC-SDS-PAGE整体蛋白质分离结合纳升毛细管液相色谱-串联质谱联...

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第十五次全国色谱学术报告会

＜正＞蛋白质组学研究中技术平台的建立是目前分析化学面临的巨人挑战。其难点主要包括两个方面:一方面是复杂生物样品的分离:另一方面是生物质谱的检测灵敏度。而最关键的因素是蛋白质混合物和多肽混合物的高效分离。目前对整体蛋白质... 详细信息

＜正＞蛋白质组学研究中技术平台的建立是目前分析化学面临的巨人挑战。其难点主要包括两个方面:一方面是复杂生物样品的分离:另一方面是生物质谱的检测灵敏度。而最关键的因素是蛋白质混合物和多肽混合物的高效分离。目前对整体蛋白质分离所采用的主要手段是色谱方法、凝胶电泳以及它们的有效组合。由于只采用一维色谱技术或多维色谱技术的分离效率无法与两维凝胶电泳媲美,而两维凝胶电泳又对高分子量、强疏水性和等电点过高或过低的蛋白质存在歧视性,因此如何扬长避短,发挥两类高效分离方法的优势成了目前蛋白质组学研究中需要探索的问题之一．本工作就是结合了色谱和凝胶电泳方法的优点,即反相色谱（RPLC）可以克服两维凝胶电泳方法中第一维等电聚焦存在的缺陷,并具有高的分离效率, 结合十二烷基硫酸纳一聚丙烯凝胶电泳（SDS-PAGE）兼容性好的优势,组成RPLC-SDS-PAGE 多维分离技术,对国际人类蛋白质组织（HUPO）提供的法国人肝脏组织样品提取的蛋白质混合物进行了分离,并通过胶上酶切和进一步对多肽混合物的纳升级毛细管液相色谱-串联质谱联用分析,获得了法国人肝脏组织的蛋白质表达谱,为规模化研究人肝脏蛋白质组奠定了基础。

关键词：蛋白质组学反相液相色谱 SDS-PAGE 液-质联用

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谷胱甘肽硫转移酶M1基因编码区多态性与中国南方人群鼻咽癌易感性的关系(英文)

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癌症 2009年第1期28卷 6-10页

作者：何英周钢桥李欣董晓佳柴先奇姚开泰南方医科大学南方医院耳鼻咽喉科广东广州510515 中国军事医学科学院放射医学研究所基因组学和蛋白质组学研究室北京100850 国家人类基因组北方研究中心北京100176 南方医科大学肿瘤研究所/教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白质组学重点实验室临床部广东广州510515

背景与目的:研究发现谷胱甘肽硫转移酶M1(glutathione S-tranferase M1,GSTM1)基因缺失可使患鼻咽癌的危险性增加。本研究旨在通过对GSTM1基因编码区单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的研究,来评估其与中国南方人... 详细信息

背景与目的:研究发现谷胱甘肽硫转移酶M1(glutathione S-tranferase M1,GSTM1)基因缺失可使患鼻咽癌的危险性增加。本研究旨在通过对GSTM1基因编码区单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)位点的研究,来评估其与中国南方人群鼻咽癌遗传易感性的关系。方法:239例鼻咽癌患者和286例健康人群入组该实验。其中225例鼻咽癌患者及273例对照的实验结果用于统计学分析。在GSTM1基因外显子区、内含子和外显子交界区设计引物,用PCR产物直接测序(测序总长度4739bp),从中获得SNP位点。选择编码区多态位点T1270533G和C1256088C,用tetra-PrimerARMS-PCR和测序方法进行病例-对照研究。结果:通过测序共获取29个SNPs编码区。T1270533G和C1256088C位点氨基酸的密码子分别发生了碱基顛换,产生了错义突变。对225例鼻咽癌患者和273例健康人群分型结果表明T1270533G位点的变异与鼻咽癌临床表型之间无明显关联(OR=0.170,纯合子TT95%CI=0.95-0.306)。C1256088C位点缺失率在鼻咽癌人群中为45%(45/100),在对照人群中为42%(42/100)。结论:编码区T1270533G位点的多态性并没有影响该基因的解毒功能。该位点与中国南方人群鼻咽癌遗传易感性无明显关联。本组多态性位点C1256088C缺失率高。

关键词：鼻咽肿瘤遗传易感性 GSTMl基因谷胱甘肽硫转移酶多态性

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基因组学与人类疾病

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遗传 2011年第8期33卷 807-808页

作者：周钢桥张学中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室基因组学与蛋白质组学研究室北京100850 中国医学科学院基础医学研究所&北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室医学遗传学系北京100730

近年来,以高密度基因芯片和高通量测序为核心的基因组学技术迅速发展,已广泛应用到生物医学的各个领域并取得突出进展,使我们对于疾病的分子与遗传学基础的认识达到了一个新的水平。

关键词：基因组学技术人类疾病高密度基因芯片遗传学基础生物医学高通量领域并测序

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