检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2002年第6期18卷 546-548页

作者：赵梅兰曹晓哲王德文刘杰谷庆阳军事医学科学院放射医学研究所八室北京100850

目的　研究电磁脉冲 (EMP)辐射对小鼠成纤维细胞系 (NIH/ 3T3)凋亡的影响 ,并探讨EMP对生物体损伤的可能机制。方法　利用场强为 6 0kV/m的EMP照射细胞后 ,采用细胞计数、MTT比色法、流式细胞术及免疫组化染色等方法 ,分别观察EMP对HIN/... 详细信息

目的　研究电磁脉冲 (EMP)辐射对小鼠成纤维细胞系 (NIH/ 3T3)凋亡的影响 ,并探讨EMP对生物体损伤的可能机制。方法　利用场强为 6 0kV/m的EMP照射细胞后 ,采用细胞计数、MTT比色法、流式细胞术及免疫组化染色等方法 ,分别观察EMP对HIN/ 3T3细胞的活力、凋亡以及Bcl 2和 p5 3蛋白表达等的影响。对免疫组化染色阳性的细胞 ,在高倍镜下用CMIAS II图像 -分析系统进行图像分析 ,所有数据均经SPSS8.0软件进行分析。结果　EMP可明显抑制NIH/ 3T3细胞的增殖与活力 (P <0 .0 5 ) ;非贴壁细胞率在辐射后明显增加 ,6h达高峰 (33.9% ) ,并可诱导细胞明显凋亡 ,6h达高峰 (15 .0 7% )。图像分析结果表明 ,EMP辐射后 ,有不同程度的Bcl 2蛋白表达的下调及 p5 3蛋白表达的上调 (P <0 .0 5 )。结论　EMP可诱导NIH/ 3T3细胞凋亡及Bcl 2及p5 3蛋白异常表达 ,提示Bcl 2及p5 3可能参与了NIH/

关键词：小鼠成纤维细胞电磁辐射 Bcl-2 p53 3T3细胞细胞凋亡

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RKIP介导的ERK通路在电磁辐射致海马神经元损伤中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第7期24卷 660-662,667页

作者：左红艳王德文彭瑞云王水明高亚兵张志毅肖凤君军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验病理学研究室北京100850 军事医学科学院国家生物医学分析中心北京100850

目的:研究电磁辐射对原代培养海马神经元Raf激酶抑制蛋白(RKIP)和磷酸化ERK表达的影响,应用MEK的抑制剂U0126探讨RKIP介导的ERK通路在辐射损伤中的作用。方法:体外培养原代海马神经元,采用X-HPM、S-HPM及EMP作为辐射源,分别建立3种电磁... 详细信息

目的:研究电磁辐射对原代培养海马神经元Raf激酶抑制蛋白(RKIP)和磷酸化ERK表达的影响,应用MEK的抑制剂U0126探讨RKIP介导的ERK通路在辐射损伤中的作用。方法:体外培养原代海马神经元,采用X-HPM、S-HPM及EMP作为辐射源,分别建立3种电磁辐射细胞模型。通过免疫荧光标记、激光扫描共聚焦显微镜检测RKIP和磷酸化ERK的表达;利用AnnexinV-PI双标记、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡与坏死率。结果:三种电磁辐射后海马神经元RKIP表达均减少,磷酸化ERK表达均增加,且胞核移位发生,辐射组间均未见明显差异;U0126预处理组较单纯辐射组神经元的凋亡与坏死率明显降低,但仍高于假辐射组。结论:RKIP介导的ERK通路过度激活是电磁辐射致海马神经元凋亡与坏死的重要机制之一,U0126对电磁辐射损伤具有一定防护作用。

关键词：电磁辐射海马神经元 RKIP ERK 原代培养

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核酸药物生物分析技术及药动学评价相关法规要求

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中国新药杂志 2015年第24期24卷 2787-2792页

作者：付洁宋海峰军事医学科学院放射与辐射医学研究所药理与毒理实验室

基因治疗策略在肿瘤、感染等重大疾病的治疗中占有比重日益增大。大量的寡核苷酸药物和核酸疫苗等核酸类药物进入药物研发、临床试验阶段,并已开始批准上市。鉴于该类药物的复杂多样性、与内源物质难以区分以及给药剂量极低等特点,本文... 详细信息

基因治疗策略在肿瘤、感染等重大疾病的治疗中占有比重日益增大。大量的寡核苷酸药物和核酸疫苗等核酸类药物进入药物研发、临床试验阶段,并已开始批准上市。鉴于该类药物的复杂多样性、与内源物质难以区分以及给药剂量极低等特点,本文总结了该类核酸类药物研究中常用的生物分析方法以及与体内药动学相关的科学问题;并对非临床与临床研究中该类药物生物分析相关的法规要求进行综述,旨在为国内的核酸药物非临床与临床研究中的药动学评价工作提供纲领性、指导性建议。

关键词：基因治疗核酸药物药动学生物分析法规

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正常和放射复合伤口血管再生中VEGF基因的表达及其意义

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第5期17卷 410-412页

作者：彭瑞云高亚兵熊呈琦秦全红王德文军事医学科学院放射医学研究所八室北京100850

目的研究ＶＥＧＦ基因在正常和放射复合伤口愈合中的表达及意义，探讨其在血管再生中的作用。方法将４８只Ｗｉｓｔａｒ二级大鼠背部皮肤造成圆形伤口后，以２５Ｇｙ６０Ｃｏ γ射线局部照射，于伤后２、５、１０、１５、２ ... 详细信息

目的研究ＶＥＧＦ基因在正常和放射复合伤口愈合中的表达及意义，探讨其在血管再生中的作用。方法将４８只Ｗｉｓｔａｒ二级大鼠背部皮肤造成圆形伤口后，以２５Ｇｙ６０Ｃｏ γ射线局部照射，于伤后２、５、１０、１５、２１和２８ｄ活杀取材，采用免疫组织化学、原位杂交和原位ＰＣＲ等方法，研究ＶＥＧＦ基因的表达及意义。结果单纯创伤组于伤后２ｄ，新生血管内皮细胞浆内ＶＥＧＦ的表达呈强阳性；５ｄ时毛细血管数明显增多，其内皮细胞胞浆内ＶＥＧＦ表达呈阳性；而于１０ｄ后，ＶＥＧＦ的表达逐渐减少。创伤＋照射组则于伤后５ｄ，ＶＥＧＦ的表达在血管内皮细胞胞浆内呈弱阳性，１０ｄ时阳性，１５ｄ后则呈弱阳性。原位杂交显示，ＶＥＧＦｍＲＮＡ于单纯创伤组伤后２～５ｄ及创伤＋照射组伤后５～１０ｄ，血管内皮细胞浆内阳性。原位反转录ＰＣＲ则显示，ＶＥＧＦｍＲＮＡ于单纯创伤组伤后２～１５ｄ及创伤＋照射组伤后５～２８ｄ，呈阳性反应。结论内源性ＶＥＧＦ基因的表达参与创伤愈合中血管再生过程。辐射使血管内皮细胞中ＶＥＧＦ的表达减少。原位反转录ＰＣＲ方法较原位杂交能客观地反映内源性ＶＥＧＦ基因的表达情况。

关键词：伤口愈合血管再生 VEGF 免疫组织化学原位反转录PCR

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基于PC/Linux的核酸序列分析系统的构建及其应用

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生物化学与生物物理进展 2001年第2期28卷 263-266页

作者：张成岗欧阳曙光张绍文瞿祥虎鱼咏涛周钢桥吴松锋贺福初军事医学科学院放射医学研究所基因组学与蛋白质组学研究室北京 100850

基于PC机和Linux操作系统, 利用Phred/Phrap/Consed软件和Blast软件, 构建了核酸序列大规模自动分析系统. 该套系统可自动完成从测序峰图向核酸序列的转化、载体序列去除、序列自动拼接、重复序列鉴定以及序列的相似性分析, 可加速对大... 详细信息

基于PC机和Linux操作系统, 利用Phred/Phrap/Consed软件和Blast软件, 构建了核酸序列大规模自动分析系统. 该套系统可自动完成从测序峰图向核酸序列的转化、载体序列去除、序列自动拼接、重复序列鉴定以及序列的相似性分析, 可加速对大规模测序数据的分析和利用.

关键词： PC机 Linux操作系统 Phred/Phrap/Consed软件 Blast软件,生物信息学大规模测序

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人孤儿受体GPR81分子克隆、组织分布及表达工程细胞株的建立

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生物工程学报 2006年第3期22卷 408-412页

作者：吴芳明黄火高胡明高月刘永学军事医学科学院放射医学研究所药理毒理室海军总医院北京100037

采用PCR技术分别从人全血基因组DNA及引产胚胎肾组织cDNA中扩增得到gpr81的全长cDNA序列(1041bp),运用生物信息学手段绘制该基因的分子进化树,显示该基因的氨基酸序列与烟酸受体同源性最高;然后,采用RT-PCR法分析该基因表达的组织分布,... 详细信息

采用PCR技术分别从人全血基因组DNA及引产胚胎肾组织cDNA中扩增得到gpr81的全长cDNA序列(1041bp),运用生物信息学手段绘制该基因的分子进化树,显示该基因的氨基酸序列与烟酸受体同源性最高;然后,采用RT-PCR法分析该基因表达的组织分布,组织表达谱显示该基因在多种组织均有表达,以心脏及肝脏组织为最高;利用分子克隆手段构建含6×组氨酸(His)标签蛋白的真核表达载体pcDNA3·1(-)/his-myc-A-gpr81,通过脂质体介导,将该重组质粒转染CHO-K1细胞,RT-PCR证实该基因已整合入CHO-K1细胞的基因组中,Western-blot表明GPR81在CHO-GPR81工程细胞株中有表达。组织表达谱的检测和工程细胞株的建立为进一步研究该受体的生物学功能奠定了基础。

关键词：孤儿G蛋白偶联受体,GPR81,组织分布,工程细胞株

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RNAi抑制MCF7细胞Lon基因后的生物学效应

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南方医科大学学报 2007年第6期27卷 870-874页

作者：薛霞朱运峰毛建平军事医学科学院附属医院肿瘤分子生物学实验室北京100071 军事医学科学院放射医学研究所北京100850

目的通过构建Lon基因表达下调的哺乳动物细胞模型,观察Lon基因对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法设计针对Lon蛋白酶基因的小干扰RNA(siRNA),构建pSilencer U6 2.1-Lon真核表达载体,并用脂质体法转染人乳腺癌细胞MCF7。RT-PCR法检测Lon... 详细信息

目的通过构建Lon基因表达下调的哺乳动物细胞模型,观察Lon基因对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法设计针对Lon蛋白酶基因的小干扰RNA(siRNA),构建pSilencer U6 2.1-Lon真核表达载体,并用脂质体法转染人乳腺癌细胞MCF7。RT-PCR法检测Lon基因下调的水平,通过采用高温、紫外线照射、顺铂处理,观察Lon基因下调后细胞敏感性的变化(MTT法);流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡的作用。结果RT-PCR显示重组质粒pSilencer U6 2.1-Lon转染MCF7细胞后,Lon基因明显下调,RT-PCR未见扩增目的条带,细胞培养结果显示细胞增殖能力明显减弱。MTT结果显示,pSilencer U6 2.1-Lon转染的MCF7细胞经紫外线照射和顺铂处理后,增殖能力明显下降,与空载体转染组和未转染组相比有显著差异(P<0.05)。加热应激实验显示,41℃处理后,RNA干扰转染组(pSilencer U6 2.1-Lon)与空载体转染组(pSilencer U6 2.1)、未转染组相比有显著性差异(P<0.05)。而在43℃和45℃时,3组之间均无显著性差异(P>0.05)。流式细胞术检测pSilencer U6 2.1-Lon质粒组细胞凋亡率为(22.47±3.15)%,相对于空载体转染组的(2.3±0.9)%和无质粒转染组的(1.14±0.79)%有明显提高,而空载体转染组和无质粒转染组相比无明显差异。结论RNAi能有效下调Lon蛋白的表达。Lon基因的下调可抑制乳腺癌细胞MCF7的增殖,诱导细胞凋亡,并可增加MCF7细胞对紫外线和顺铂的敏感性。

关键词： RNA干扰 Lon基因细胞凋亡

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低强度激光对细胞增殖作用的研究进展

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中华物理医学与康复杂志 2001年第4期23卷 246-248页

作者：陈虹霞高光煌钱焕文军事医学科学院放射医学研究所激光医学研究室北京100850

自从60年代梅曼发明第一台激光器后,激光就在医学领域中得到了广泛的应用.最初因激光具有高亮度、高方向性等特点用于手术治疗或非手术治疗,这主要是利用激光的热、光化学、机械、电磁作用,其功率密度是较高的.而辐射量或辐射度较低的激... 详细信息

自从60年代梅曼发明第一台激光器后,激光就在医学领域中得到了广泛的应用.最初因激光具有高亮度、高方向性等特点用于手术治疗或非手术治疗,这主要是利用激光的热、光化学、机械、电磁作用,其功率密度是较高的.而辐射量或辐射度较低的激光,因不引起生物组织产生最小可检测的急性损伤而又有刺激或抑制的作用,称之为生物刺激作用[1].国内外学者已对低强度激光从整体、细胞、分子等水平进行了大量的研究,目前大多数人的观点是低强度激光被细胞的光接受体吸收后,促进了细胞的新陈代谢,提高了基因的表达,使酶的活性增强,作用之一就表现为促进细胞的增殖.

关键词：低强度激光细胞增殖激光疗法

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电磁辐射对中枢神经系统递质和受体的影响

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解放军预防医学杂志 2004年第3期22卷 224-226页

作者：李玉红王德文彭瑞云军事医学科学院放射医学研究所实验病理研究室北京100850

电磁辐射污染给人类带来的危害已引起越来越多的关注 ,尤其是电磁辐射对学习记忆的影响已成为热点研究领域。多种神经递质、调质以及受体间相互协调作用直接或间接参加学习记忆过程。

关键词：电磁辐射神经递质受体

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核酸杂交酶联桥接分析系统定量分析寡核苷酸

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分析化学 2012年第4期40卷 503-509页

作者：孙云娟付洁王清清周磊董立厚欧伦高新宋海峰军事医学科学院放射与辐射医学研究所药理毒理研究室药代动力学重点实验室

建立了基于核酸杂交及连接酶和核酸内切酶的酶联桥接分析(ELBA)系统,用于生物基质中反义寡核苷酸(ODN)药物的定量分析。对ELBA系统中的亲和素包被、俘获探针/检测探针浓度、T4DNA连接酶及S1核酸酶用量、碱性磷酸酶底物反应时间等条件进... 详细信息

建立了基于核酸杂交及连接酶和核酸内切酶的酶联桥接分析(ELBA)系统,用于生物基质中反义寡核苷酸(ODN)药物的定量分析。对ELBA系统中的亲和素包被、俘获探针/检测探针浓度、T4DNA连接酶及S1核酸酶用量、碱性磷酸酶底物反应时间等条件进行了优化,确定使用中性亲和素包被的酶标板,俘获探针与检测探针浓度比为2∶3,S1酶为40U/孔,显色15min为最优条件,并考察了生物基质效应和稀释效应对方法的影响,建立了猕猴血浆中反义寡核苷酸的定量方法,并进行方法学确证,方法学定量范围为0.10～6.25nmol/L。本方法成功应用于反义硫代寡核苷酸药物在低剂量(1mg/kg)静脉滴注后的药代动力学研究,成为生物基质中寡核苷酸类药物定量分析的有效手段。

关键词：寡核苷酸药代动力学定量核酸杂交酶联桥接分析系统

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