检索结果-内蒙古大学图书馆

异源物代谢的表观遗传学变异影响抗癫痫药3,4-DCPB药物代谢动力学表型个体差异

Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2023年第1期32卷 1-16页

作者：逯颖媛张梅尹胜菊董晓娜张志远程海旭屠鹏飞窦桂芳车永胜徐争辉徐枫王宪吕闯楼雅卿章国良北京大学医学部基础医学院药理学系北京100191 北京军区总医院药剂科北京100700 北京大学医学部药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191 军事医学科学院放射医学研究所药物代谢动力学研究室北京100850 中国医学科学院生物医学技术研究所北京100050 博奥晶典生物技术股份有限公司北京102206 北京大学医学部基础医学院生理与病理生理学系北京100191 美国阿克森特药物治疗股份有限公司药物代谢与药物代谢动力学(DMPK)实验室美国马萨诸塞(MA)02425

抗癫痫药物治疗是控制癫痫的主要方法,但由于个体间对药物处置的差异性,患者对目前治疗的反应性并不一致。本研究通过在健康志愿者中进行的临床Ⅰ期剂量递增试验,考察了遗传和表观遗传变异是否影响抗癫痫药物氯桂丁胺(3,4-DCPB)的药代... 详细信息

抗癫痫药物治疗是控制癫痫的主要方法,但由于个体间对药物处置的差异性,患者对目前治疗的反应性并不一致。本研究通过在健康志愿者中进行的临床Ⅰ期剂量递增试验,考察了遗传和表观遗传变异是否影响抗癫痫药物氯桂丁胺(3,4-DCPB)的药代动力学表型。采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定血浆中3,4-DCPB母药及其主要代谢物M1的浓度。通过基因分型和DNA甲基化水平分析细胞色素P4502D6(CYP2D6)、CYP2C9、CYP1A2、CYP2C19、CYP3A5、转运体ABCB1(C1236T)、核受体AhR、CAR和PXR的单核苷酸多态性(SNPs)。与野生型CYP2D6*1/*1纯合子(广泛代谢型,EMs)相比,变异等位基因CYP2D6*10携带者(中间代谢型,IMs)中,代谢产物M1与3,4-DCPB母药的药时曲线下面积(AUC0–t)的比值更低,血浆半衰期(t1/2)更久,DNA甲基化水平更高。这些数据表明胞嘧啶的丢失(CYP2D6*10,C>T)所诱导的表观基因突变可能解释3,4-DCPB基因型、表观基因型和药代动力学表型在个体差异之间的关系,为癫痫的个性化治疗提供新的思路。

关键词：药物代谢动力学抗癫痫药氯桂丁胺个体差异 DNA甲基化 CYP2D6*10携带者表突变临床Ⅰ期剂量递增试验

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Naa10基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对口腔鳞癌细胞生长的影响

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口腔医学研究 2017年第7期33卷 707-711页

作者：杨洋郑军徐江顾永清黄瑾王丹妮朱茂祥曾妍新疆石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室/医学院生化教研室新疆石河子832000 新疆石河子大学医学院第一附属医院口腔科新疆石河子832000 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的:构建人N-α-乙酰基转移酶10(N-α-acetyltransferase 10,Naa10)基因有效的慢病毒RNAi载体并转染人口腔鳞癌细胞SCC-15,研究其对口腔鳞癌细胞生长的影响。方法:根据人Naa10基因mRNA序列设计合成3个siRNA片段,转染人口腔鳞癌SCC-15... 详细信息

目的:构建人N-α-乙酰基转移酶10(N-α-acetyltransferase 10,Naa10)基因有效的慢病毒RNAi载体并转染人口腔鳞癌细胞SCC-15,研究其对口腔鳞癌细胞生长的影响。方法:根据人Naa10基因mRNA序列设计合成3个siRNA片段,转染人口腔鳞癌SCC-15细胞株并进行验证,将最有效的干扰序列克隆至pLV-shRNA载体上,测序正确后进行包装,测定病毒颗粒滴度后,将慢病毒感染SCC-15细胞以测定Naa10的表达情况,并通过生长曲线研究干扰Naa10对SCC-15细胞生长的影响。结果:3个靶点的siNaa10均能有效抑制Naa10基因的表达,其中2号靶点最为有效(P<0.005);重组RNAi质粒pLV-shNaa10经测序证实构建成功,pLV-shNaa10可在293T细胞中成功包装;测定病毒颗粒LV-shNaa10、LV-NC滴度分别为1.2×10~9 TU/mL和1.0×10~9 TU/mL;SCC-15细胞感染LV-shNaa10后,Naa10蛋白表达明显降低(P<0.005);干扰Naa10可促进人口腔鳞癌细胞SCC-15的生长。结论:成功构建了Naa10shRNA慢病毒表达载体,感染人口腔鳞癌细胞SCC-15后,有效抑制了内源性Naa10基因的表达,干扰Naa10可促进SCC-15细胞的生长。

关键词： N-α-乙酰基转移酶10 慢病毒 RNA干扰口腔鳞癌

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信号传导及转录激活子3通路参与卷烟烟气凝集物诱导永生化人支气管上皮细胞的恶性转化

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中国药理学与毒理学杂志 2016年第11期30卷 1182-1191页

作者：袁娜娜李伟陈余清张佳秀洪磊蒋鹏周继红王效静朱茂祥潘秀颉杨陟华顾永清蚌埠医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科安徽呼吸系病临床基础省级实验室安徽蚌埠233004 阜阳市第二人民医院呼吸内科安徽阜阳236015 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233004 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的检测肺鳞癌组织、鳞状细胞不典型增生组织和癌旁组织中磷酸化信号传导及转录激活子3(p STAT3)蛋白的表达,比较其表达与吸烟的关系;探讨STAT3通路在烟草诱导细胞恶性转化过程中的作用。方法免疫组化法检测288例肺鳞癌组织、108例鳞... 详细信息

目的检测肺鳞癌组织、鳞状细胞不典型增生组织和癌旁组织中磷酸化信号传导及转录激活子3(p STAT3)蛋白的表达,比较其表达与吸烟的关系;探讨STAT3通路在烟草诱导细胞恶性转化过程中的作用。方法免疫组化法检测288例肺鳞癌组织、108例鳞状细胞不典型增生组织、112例癌旁组织中p STAT3蛋白的表达,比较其表达与吸烟的相关性。构建卷烟烟气凝集物(CSC)诱导第10,20,30,40,50,60及70代细胞(P10,P20,P30,P40,P50,P60及P70)永生化人支气管上皮细胞(BEP2D)恶性转化模型。从血清抗性及锚着独立性等方面对CSC诱导各代BEP2D细胞的恶性转化特征进行鉴定。Western蛋白印迹法检测CSC诱导各代BEP2D细胞中p STAT3的表达。MTT法和流式细胞术分别检测JSI-124 0.25~10μmol·L^(-1)对P70细胞存活及凋亡的影响。JSI-124处理CSC诱导P70 24 h后检测存活蛋白表达的变化。结果 p STAT3蛋白在肺鳞癌组织中表达高于鳞状细胞不典型增生和癌旁组织(P<0.05);p STAT3在目前吸烟者中的表达均高于曾经吸烟者和从不吸烟者(P<0.05),且随着吸烟指数增加两者表达水平逐渐升高(P<0.01)。随着转化代数的增高,细胞血清抗性增加,锚着独立性增强,P30细胞以后尤为明显。p STAT3在正常对照组和乙醇对照组中弱表达,且两者之间无显著性差异;CSC诱导的各组BEP2D细胞中,p STAT3的表达均显著高于正常对照组和乙醇对照组(P<0.05),并随细胞代数的增高而增高。JSI-124抑制P70细胞增殖、促进P70细胞凋亡呈浓度及时间依赖性。JSI-124 1μmol·L^(-1)作用P70细胞24 h后,存活蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 STAT3信号通过调控存活蛋白表达抑制细胞凋亡,参与烟草诱导永生化人支气管上皮细胞的恶性转化。

关键词：信号传导及转录激活子3 卷烟烟气凝集物永生化人支气管上皮细胞

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CHD4蛋白截短体融合蛋白的表达、纯化和鉴定

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西安交通大学学报（医学版） 2014年第1期35卷 12-15页

作者：徐涛张金莉曾妍王攀郎慧芳万传君顾永清军事医学科学院放射与辐射医学研究所放射毒理与辐射危害评价研究室北京100850 石河子大学医学院生化教研室新疆石河子832000 南通大学附属医学院消化科实验室江苏南通226000 驻马店卫生学校微生物免疫教研室河南驻马店463000

目的构建CHD4/Mi-2β基因的截短体原核表达重组质粒,在大肠杆菌中诱导表达并对GST融合蛋白进行纯化和初步鉴定。方法采用PCR方法扩增CHD4/Mi-2β的染色质调节区(CHD4-C)、解螺旋酶模序(CHD4-H)及DNA结合区(CHD4-D)基因片段,将目的基因... 详细信息

目的构建CHD4/Mi-2β基因的截短体原核表达重组质粒,在大肠杆菌中诱导表达并对GST融合蛋白进行纯化和初步鉴定。方法采用PCR方法扩增CHD4/Mi-2β的染色质调节区(CHD4-C)、解螺旋酶模序(CHD4-H)及DNA结合区(CHD4-D)基因片段,将目的基因片段插入原核表达载体pGEX-5T构建带GST标签的重组质粒,阳性克隆行DNA序列测定。IPTG诱导GST-CHD4-C、GST-CHD4-D和GST-CHD4-H原核表达,谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白,并对融合蛋白Western blot鉴定。结果构建了3个CHD4/Mi-2β基因的截短体重组质粒;IPTG诱导显示,GST-CHD4-C、GST-CHD4-D和GST-CHD4-H融合蛋白主要以可溶性蛋白形式在细胞裂解液上清中表达,表达产物的相对分子质量分别为130、110、90ku。谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白,纯化产物的纯度最高可达94.5%。Western blot证实各融合蛋白与抗GST单克隆抗体发生特异性结合反应,分子质量与估计值相符,提示为GST融合表达的CHD4/Mi-2β截短体蛋白。结论成功纯化了较高纯度的GST-CHD4-C、GST-CHD4-D和GST-CHD4-H融合蛋白,为进一步研究CHD4蛋白在染色质重塑中的作用奠定了实验基础。

关键词： CHD4 Mi-2β pGEX ST 融合蛋白蛋白表达纯化

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复杂电磁环境作业人员对电磁相关知识的认识情况分析

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军事医学 2014年第1期38卷 57-61页

作者：张艳春晁晓会耿德军贺金龙彭燕吴永红李志慧高艳李雨张成岗军事医学科学院放射与辐射医学研究所全军军事认知与心理卫生研究中心蛋白质组学国家重点实验室中国人民解放军63880部队第二军医大学海医系放射医学教研室

目的采用问卷调查方式了解复杂电磁环境部队作业人员对电磁辐射防护的认识,为研发相应的防护措施提供参考。方法随机选取某部98名复杂电磁环境作业人员为研究对象,采用调查问卷了解其对电磁辐射及其防护相关知识的认识情况。结果共收回... 详细信息

目的采用问卷调查方式了解复杂电磁环境部队作业人员对电磁辐射防护的认识,为研发相应的防护措施提供参考。方法随机选取某部98名复杂电磁环境作业人员为研究对象,采用调查问卷了解其对电磁辐射及其防护相关知识的认识情况。结果共收回有效问卷94份,结果分析显示,调查对象对电磁辐射与电离辐射的区别、危害和防护等都具有一定程度的了解,但还需进一步加强专业培训。同时,对电磁辐射的危害程度及防护方法的了解不足,而随着调查对象文化程度的增加,对于电磁辐射危害与防护的了解更为全面和正确。结论通过问卷调查发现电磁辐射防护知识在作业人员中相对比较匮乏,提示应进一步加强电磁辐射相关知识的宣传教育。

关键词：电磁辐射复杂电磁环境防护调查问卷

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四氯化碳诱导小鼠肝脏纤维化的差异蛋白质组学

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生物工程学报 2014年第7期30卷 1105-1114页

作者：郭改改吴红星刘明伟丁琛秦钧杨晓明安徽医科大学病理生理学教研室安徽合肥230032 国家蛋白质组学重点实验室北京蛋白质组研究中心北京102206 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 浙江大学生命科学研究院杭州浙江310058

以四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl4)诱导小鼠肝组织纤维化为研究模型,发现并探讨纤维化肝组织与正常肝组织在蛋白质组水平上的差异。实验小鼠(C57 BL/6)随机分为两组,由橄榄油和四氯化碳诱导15周,并分别对这两组肝组织的全蛋白表达... 详细信息

以四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl4)诱导小鼠肝组织纤维化为研究模型,发现并探讨纤维化肝组织与正常肝组织在蛋白质组水平上的差异。实验小鼠(C57 BL/6)随机分为两组,由橄榄油和四氯化碳诱导15周,并分别对这两组肝组织的全蛋白表达谱进行质谱检测,应用GO(Gene Ontology)功能分类分析和KEGG(Kyoto Enyoolpedia of Genes and Genomes)信号通路的富集分析方法对鉴定到的全蛋白表达谱进行差异表达分析。在对照组和实验组中,我们分别鉴定到17 382和20 486条特异性肽段,图谱平均利用率大于50%,共计鉴定到蛋白4 991种(蛋白特异性肽段个数至少为1),其中差异表达蛋白有2 135种(差异倍数大于或等于2),表达上调蛋白1 264种,下调蛋白871种。纤维化肝脏组织中与细胞外基质组成(Extracellular matrix organization)、细胞骨架组成(Cytoskeleton organization)、有机磷酸代谢(Organophosphate metabolic process)、细胞定位(Cellular localization)和细胞组分调节(Regulation of cellular component organization)相关蛋白的表达是上调的;另外,与小分子代谢(Small molecule metabolic process)、蛋白质转运(Protein transport)和有机氮化合物的代谢(Organonitrogen compound metabolic process),以及四吡咯的合成过程(Tetrapyrrole biosynthetic process)有关蛋白的表达是下调的。信号通路富集分析结果表明,纤维化与VEGF和T细胞受体信号调节通路密切相关。结果提示,纤维化的形成不仅是一个复杂的信号转导过程,更是一个炎症与免疫相互促成的结果;增强肝实质细胞的存活,降低相关信号的传递及接收都有可能对纤维化的发生和发展起到抑制效果。

关键词：四氯化碳肝脏组织纤维化蛋白质组学

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复方丹参滴丸对大鼠肝细胞色素P450酶的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2013年第4期27卷 678-684页

作者：胡东华王宇光陈志武马增春梁乾德肖成荣谭洪玲汤响林李桦沈国林张伯礼高月安徽医科大学药理学教研室安徽合肥230032 军事医学科学院放射医学研究所药理毒理研究室北京100850 军事医学科学院毒物药物研究所药物代谢研究室北京100850 天津中医药大学现代中药国家重点实验室天津300193

目的观察复方丹参滴丸及其单味药对大鼠肝细胞色素P450酶(CYP)主要亚型的影响。方法 SD大鼠分别ig给予复方丹参滴丸0.3258 ***-1,丹参0.27 ***-1,三七0.0528 ***-1和冰片0.003 ***-1,每天1次,连续28 d,取大鼠肝微粒体,与CYP1A2,CYP2B6,C... 详细信息

目的观察复方丹参滴丸及其单味药对大鼠肝细胞色素P450酶(CYP)主要亚型的影响。方法 SD大鼠分别ig给予复方丹参滴丸0.3258 ***-1,丹参0.27 ***-1,三七0.0528 ***-1和冰片0.003 ***-1,每天1次,连续28 d,取大鼠肝微粒体,与CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13,CYP2D2和CYP3A1特异性底物探针共孵育,用高效液相色谱-质谱联用仪(HPLC-MS/MS)测定底物的代谢产物,分析CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13,CYP2D2和CYP3A1酶活性,同时用PCR方法检测cyp1a2,cyp2b1/2,cyp2c11,cyp2e1和cyp3a1 mRNA表达的变化。结果与正常对照组相比,苯巴比妥(阳性对照)对CYP2D2和CYP3A1活性有明显抑制作用,对CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12和CYP2C13有明显诱导作用(P<0.05,P<0.01);复方丹参滴丸对CYP1A2和CYP2B6活性有明显抑制作用,对CYP2D2有诱导作用(P<0.05);丹参对CYP1A2和CYP2B6活性有明显抑制作用(P<0.05);三七对CYP1A2,CYP2B6,CYP2C13和CYP2D2活性有明显抑制作用(P<0.05);冰片明显抑制CYP1A2,CYP2B6,CYP2C12,CYP2C13和CYP2D2活性(P<0.01),且抑制强度高于复方丹参滴丸。与正常对照组相比,苯巴比妥对cyp1a2和cyp2b1/2 mRNA水平有明显诱导作用(P<0.05);复方丹参滴丸、丹参和三七对cyp1a2,cyp2b1/2,cyp2c11,cyp2e1和cyp3a1 mRNA水平无明显影响;冰片对cyp1a2,cyp2b1/2和cyp2c11 mRNA水平有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01)。结论复方丹参滴丸中各单味药对CYP酶的影响强于全方对CYP酶的影响,其中以冰片对药物代谢酶的影响最为显著。

关键词：复方丹参滴丸丹参三七冰片细胞色素P450酶系统

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游离脂肪酸诱导小鼠肝实质细胞体外脂肪化并加速细胞凋亡

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肝脏 2013年第5期18卷 306-309页

作者：晏贤春胡彬王赫杨俊涛第四军医大学遗传与发育教研室西安710032 蛋白质组学国家重点实验室北京蛋白质组研究中心国家蛋白质科学中心(北京)军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质药物国家工程研究中心

目的建立小鼠非酒精性脂肪肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)体外细胞模型,为进一步体外药物高通量的筛选以及深入探讨NAFLD发生发展的分子机制奠定基础。方法胶原酶灌注分离并培养小鼠原代肝实质细胞,随后给予不同浓度的... 详细信息

目的建立小鼠非酒精性脂肪肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)体外细胞模型,为进一步体外药物高通量的筛选以及深入探讨NAFLD发生发展的分子机制奠定基础。方法胶原酶灌注分离并培养小鼠原代肝实质细胞,随后给予不同浓度的游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)刺激,进行油红染色以及三酰甘油测定;通过MTS法以及流式细胞术分析游离脂肪酸对肝实质细胞增殖以及细胞凋亡的影响,使用Western印迹法检测肝实质细胞内的MAPK相关信号通路的变化,实时定量PCR检测细胞中bim与fas的表达。结果肝实质细胞内的脂质累积程度随加入的FFA浓度上升而呈明显增加(P<0.05);肝实质细胞的细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡明显增加,肝实质细胞内JNK信号通路随刺激时间延长强度增加,ERK信号通路随刺激时间延长强度减弱,细胞内bim和fas的表达量上升。结论成功建立了非酒精性脂肪肝病的体外细胞模型,能够很好地模拟体内肝实质细胞内脂肪累积以及细胞凋亡现象。

关键词：非酒精性脂肪性肝病体外模型肝实质细胞

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恐怖袭击应急医学救援的回顾与思考

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解放军医学杂志 2012年第3期37卷 177-180页

作者：王德文刘耀蒋敏铭军事医学科学院放射医学研究所实验病理研究室北京100850 医学情报研究所北京公安部第二研究所 100038

"9·11"事件后10年来的反恐斗争再次充分表明,恐怖主义是当前的全球性问题和国际公害,反恐应急救援同样是涉及世界各国安危和切身利益的重大课题。本文介绍了当前国际恐怖活动的新特点,提出了恐怖袭击应急医学救援对策的... 详细信息

"9·11"事件后10年来的反恐斗争再次充分表明,恐怖主义是当前的全球性问题和国际公害,反恐应急救援同样是涉及世界各国安危和切身利益的重大课题。本文介绍了当前国际恐怖活动的新特点,提出了恐怖袭击应急医学救援对策的进一步思考和待开展的研究内容。后者包括:进一步完善高效的医疗救援指挥机构;完善各种医疗救援应急预案;完善不同类型恐怖袭击的救援体系和救援基地;进一步提高全民反恐意识,重视心理灾害预防及其对策;进一步开展恐怖袭击应急医学救援的基础研究,如恐怖袭击致伤的新伤类新特点研究、恐怖袭击应激心理效应的病理生理学及防治研究,以及恐怖袭击现场的高效救治措施和新型装备研究等。

关键词：恐怖袭击医学救援

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Myosin VI在人体不同癌组织中的差异表达及意义

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中国病理生理杂志 2012年第6期28卷 969-973页

作者：虞红珍祝敏王豫徐勤枝周平坤安徽医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室安徽合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的:检测肌球蛋白VI(myosin VI)在人体不同癌组织中的表达差异及其临床意义,探讨myosinVI在肿瘤转移中的机制。方法:以19种人体不同癌组织及10种人肿瘤细胞株制成的cDNA多肿瘤谱阵列芯片(cancer profiling arrayⅡ)为研究材料,采用Nort... 详细信息

目的:检测肌球蛋白VI(myosin VI)在人体不同癌组织中的表达差异及其临床意义,探讨myosinVI在肿瘤转移中的机制。方法:以19种人体不同癌组织及10种人肿瘤细胞株制成的cDNA多肿瘤谱阵列芯片(cancer profiling arrayⅡ)为研究材料,采用Northern杂交方法分析myosin VI的表达;根据阳性结果收集临床不同病理分级卵巢上皮肿瘤组织制成组织芯片,免疫组化法检测myosin VI的表达,以验证芯片结果的可靠性。结果:19种人体不同癌组织及10种人肿瘤细胞株均表达myosin VI,其中卵巢癌和结肠癌组织高表达myosin VI,与正常配对卵巢和结肠组织表达丰度差异显著(P<0.01);免疫组化方法证实myosin VI在卵巢癌组织的表达率为100%(52/52),交界性上皮肿瘤表达率为81.3%(13/16),癌旁及囊腺瘤的表达率为10.4%(5/48),差异有统计学意义(P<0.05);且癌旁及囊腺瘤、交界性卵巢肿瘤和卵巢癌中myosin VI的表达呈逐渐增强趋势。结论:Myosin VI在人体不同癌组织特别是卵巢癌与配对的正常组织相比其mRNA和蛋白水平均异常高表达,提示myosin VI与恶性肿瘤特别是卵巢癌的发生、发展密切相关。

关键词： cDNA肿瘤谱阵列芯片肌球蛋白VI 卵巢肿廇

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