检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学杂志 2021年第6期41卷 75-82页

作者：郑庆芳王东澍吕宇飞王恒樑刘先凯上海海洋大学食品学院上海201306 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

蜡样芽胞杆菌族(Bacillus cereus sensu lato)包括几个具有密切系统发育关系的芽胞杆菌物种,产生的毒素种类繁多,备受人们关注。质粒在菌株中的水平转移,会改变其表型、致病性和毒力,同时也带来分类的问题。通过综述几种蜡样芽胞杆菌毒... 详细信息

蜡样芽胞杆菌族(Bacillus cereus sensu lato)包括几个具有密切系统发育关系的芽胞杆菌物种,产生的毒素种类繁多,备受人们关注。质粒在菌株中的水平转移,会改变其表型、致病性和毒力,同时也带来分类的问题。通过综述几种蜡样芽胞杆菌毒素的结构特性、作用机制及其危害或生物应用,从质粒水平转移的角度介绍蜡样芽胞杆菌族成员错综复杂的关系。

关键词：蜡样芽胞杆菌族炭疽毒素肠毒素呕吐毒素 Cry毒素致病机制质粒水平转移

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炭疽芽胞杆菌sigB基因缺失株的构建与研究

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军事医学 2019年第1期43卷 57-62页

作者：顾梦恩陈蒙王东澍吕宇飞王恒樑刘先凯上海海洋大学食品学院上海201306 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建炭疽芽胞杆菌A16R株sigB基因缺失突变株,通过分析其表型,为后续的炭疽杆菌生命过程展开系统性研究奠定基础。方法采用同源重组技术以sigB为目标缺失基因,利用Golden-gate法构建含同源臂的打靶载体,结合基于I-SceⅠ酶驱动的芽胞... 详细信息

目的构建炭疽芽胞杆菌A16R株sigB基因缺失突变株,通过分析其表型,为后续的炭疽杆菌生命过程展开系统性研究奠定基础。方法采用同源重组技术以sigB为目标缺失基因,利用Golden-gate法构建含同源臂的打靶载体,结合基于I-SceⅠ酶驱动的芽胞菌高效敲除体系,筛选出炭疽杆菌sigB缺失突变株。通过生长曲线绘制、芽胞形成率测定、糖代谢能力比较,以及抗逆性实验等进行表型分析研究。结果成功构建了炭疽杆菌sigB缺失突变株,发现SigB对细菌生长能力、芽胞形成率和糖代谢能力均无显著影响。在抗逆性实验中,经不同浓度H2O2作用下,与野生株相比,sigB缺失突变株抑菌环无明显差异。经过48与55℃处理后,与A16R野生株比较,sigB缺失突变株菌落数减少,说明sigB缺失突变株抗热性减弱。结论成功获得了炭疽杆菌sigB基因缺失突变株。该研究表明SigB不影响芽胞形成,对细菌的抗热性有显著影响。

关键词：芽胞杆菌,炭疽 sigB 抗热性基因缺失

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宋内志贺氏菌1173质粒基因组及耐药基因转移机制

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微生物学报 2018年第3期58卷 467-475页

作者：张德福赵禹宗刘东冯娇张明曲道峰周冬生励建荣殷喆王丽渤海大学食品科学与工程学院辽宁省食品安全重点实验室生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁锦州121013 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 河南大学第一附属医院检验科河南开封475000 浙江工商大学食品与生物工程学院浙江杭州310018

【目的】研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla_(CTX-M-64)转移的机制。【方法】用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBL),用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移实验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其他细... 详细信息

【目的】研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla_(CTX-M-64)转移的机制。【方法】用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶(ESBL),用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移实验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其他细菌,并对接合子是否产ESBL和携带耐药基因进行检验,利用VITEK~?2检测1173和接合子的耐药谱,提取质粒进行高通量基因组测序,并对质粒序列进行生物信息学分析,以研究其耐药基因转移机制。【结果】1173是产ESBL的多药耐药宋内志贺氏菌,携带的耐药基因有bla _(CTX-M-64)和bla _(TEM),其中的bla _(CTX-M-64)可通过接合转移作用传递给受体菌EC600,并使接合子具有相应的耐药谱。经序列测定和生物信息学分析表明,介导bla _(CTX-M-64)水平转移的是ISEcp1-bla_(CTX-M-64)-Δorf477转座单元。【结论】质粒携带的bla_(CTX-M-64)介导1173对多类抗菌药物的耐药,ISEcp1-bla_(CTX-M-64)-Δorf477转座单元介导bla_(CTX-M-64)在细菌间的转移。

关键词：宋内志贺氏菌质粒多药耐药转座单元移动元件 blaCTX-M-64

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炭疽芽孢杆菌sigF缺失株的构建及其对芽孢形成的影响

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军事医学 2017年第3期41卷 199-204页

作者：洪一平王东澍吕宇飞陈蒙冯尔玲王恒樑卢瑛刘先凯上海海洋大学食品学院上海201306 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建炭疽芽孢杆菌sigF基因缺失株,以及缺失株的sigF回复株,分析缺失株、回复株表型特点并明确sigF基因对芽孢形成的影响,为后续研究提供基础。方法采用同源重组技术在炭疽菌A16D2(pXO1+pXO2^-)菌株sigF基因处插入大观霉素抗性基因,... 详细信息

目的构建炭疽芽孢杆菌sigF基因缺失株,以及缺失株的sigF回复株,分析缺失株、回复株表型特点并明确sigF基因对芽孢形成的影响,为后续研究提供基础。方法采用同源重组技术在炭疽菌A16D2(pXO1+pXO2^-)菌株sigF基因处插入大观霉素抗性基因,取代sigF基因,构建了sigF基因缺失突变株。通过构建回复株质粒并电转到sigF基因缺失株中,构建了sigF基因的回复株。通过生长曲线测定、糖代谢能力比较、显微镜观察芽孢形成及微流控实验实时观察细胞生长等方法分析突变株和回复株的特点。结果获得炭疽菌A16D2菌株sigF基因缺失突变株和相应的回复株。生长曲线测定表明,突变株较出发菌株在繁殖体阶段生长状态无明显差异;糖代谢实验表明,突变株与出发菌株在对碳水化合物的利用上差异不显著;显微镜观察显示,突变株丧失了形成芽孢的能力、回复株恢复了部分形成芽孢的能力;微流控实验观察显示,缺失株细胞保持在不对称分裂的状态,回复株能形成芽孢。结论成功获得了炭疽菌A16D2sigF基因缺失突变株。该研究证明sigF基因为炭疽菌形成芽孢所必需,但不是细胞生长所必需的因子。

关键词：芽孢杆菌,炭疽芽孢 sigF 突变株

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γ射线终末辐照对同种异体肌腱病毒灭活效果及生物力学性能影响的研究

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中国骨与关节杂志 2018年第5期7卷 389-393页

作者：赵彦涛刘思扬尹惠琼白玉龙韩丽伟胡先同朱加亮衷鸿宾解放军总医院第一附属医院骨科北京市骨科植入医疗器械工程技术研究中心北京100048 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事医学研究院卫生勤务与血液研究所北京100850

目的研究γ射线终末辐照灭菌对同种异体肌腱病毒灭活的效果及对肌腱生物力学性能的影响。方法采用细胞培养法,检测γ射线辐照(照射剂量25 kGy)灭活PRV、VSV、PPV、EMCV、HIV-1病毒的效果。取正常供体手部肌腱12根,直径4~5 mm,随机分为... 详细信息

目的研究γ射线终末辐照灭菌对同种异体肌腱病毒灭活的效果及对肌腱生物力学性能的影响。方法采用细胞培养法,检测γ射线辐照(照射剂量25 kGy)灭活PRV、VSV、PPV、EMCV、HIV-1病毒的效果。取正常供体手部肌腱12根,直径4~5 mm,随机分为实验组(辐照组)和对照组(新鲜不处理),进行病毒滴度检测,MTS力学试验机检测两组极限拉伸载荷。结果经过γ射线辐照可使污染在同种异体肌腱上的病毒滴度下降超过4 Log值,且盲传3代无病毒检出。辐照前后,同种异体肌腱极限拉伸载荷和组织结构差异无统计学意义(P>0.05)。结论终末辐照灭菌(照射剂量25 kGy)是同种异体肌腱病毒灭活的有效方法,可避免引入其它化学试剂,且该工艺不会影响肌腱的极限拉伸载荷和组织结构。

关键词：同种异体移植物病毒灭活灭菌生物力学现象

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幽门螺杆菌CagA蛋白及其致病机制的研究进展

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微生物学报 2016年第12期56卷 1821-1830页

作者：万秀坤刘纯杰军事医学科学院生物工程研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

幽门螺杆菌感染是导致从胃炎到胃癌等一系列胃相关疾病的主要病因,但具体的致病机制仍不是很清楚。细胞毒素相关蛋白A(cytotoxin-associated gene A,Cag A)是幽门螺杆菌编码的一种重要毒力因子,且作为细菌来源的唯一癌蛋白被大量研究。C... 详细信息

幽门螺杆菌感染是导致从胃炎到胃癌等一系列胃相关疾病的主要病因,但具体的致病机制仍不是很清楚。细胞毒素相关蛋白A(cytotoxin-associated gene A,Cag A)是幽门螺杆菌编码的一种重要毒力因子,且作为细菌来源的唯一癌蛋白被大量研究。Cag A蛋白是由幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统介导并注入宿主胃上皮细胞内,一旦进入细胞,Cag A能够与多个分子发生相互作用,扰乱细胞正常的信号通路,引起细胞病变和转化,而动物实验也证明了Cag A蛋白的致癌特点。本文重点对Cag A蛋白的序列特征,转位方式及致病机制等方面的最新进展进行了综述,希望能进一步阐释Cag A介导的幽门螺杆菌的致病机制,为以后的研究提供一定的方向和指导。

关键词：细胞毒素相关蛋白A Ⅳ型分泌系统信号通路致病机制

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添加扩增内标的PCR方法快速检测食品中的阪崎克罗诺杆菌

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食品工业科技 2017年第2期38卷 49-52,58页

作者：张德福赵禹宗张明仪淑敏赵文竹汤轶伟李春励建荣渤海大学食品科学与工程学院、辽宁省食品安全重点实验室、生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁锦州121013 军事医学科学院微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 渤海大学数理学院辽宁锦州121013

为了解决常规PCR方法检测阪崎克罗诺杆菌时因检测过程中环境和食品理化因素的影响而导致的假阴性结果的产生,本研究以细菌16S rRNA基因为扩增内标对照,以阪崎克罗诺杆菌特异性基因grx B为靶基因设计了一对特异性引物,并通过优化PCR反应... 详细信息

为了解决常规PCR方法检测阪崎克罗诺杆菌时因检测过程中环境和食品理化因素的影响而导致的假阴性结果的产生,本研究以细菌16S rRNA基因为扩增内标对照,以阪崎克罗诺杆菌特异性基因grx B为靶基因设计了一对特异性引物,并通过优化PCR反应条件,最终建立了一种添加扩增内标的阪崎克罗诺杆菌PCR检测方法,可以指示PCR过程中因存在DNA聚合酶抑制剂而导致的假阴性结果。通过对20种细菌进行PCR检测显示,该方法对阪崎克罗诺杆菌具有良好的特异性。灵敏度实验结果表明,该检测方法对阪崎克罗诺菌纯DNA模板的检测灵敏度为2.15×102fg/μL,对阪崎克罗诺杆菌纯培养物的检测灵敏度为9.4×103CFU/m L。对人工污染婴幼儿奶粉的检测结果显示,阪崎克罗诺杆菌接种量为0.94 CFU/g的婴幼儿奶粉样品经过8 h增菌培养后,即可检出。食品样品检测结果表明,不添加扩增内标的PCR检测方法中出现的假阴性结果可被本方法检出。该检测方法特异性强、灵敏度较高,能消除阪崎克罗诺杆菌常规PCR检测方法中可能出现的假阴性结果,适用于婴幼儿配方乳粉、乳制品等食品中阪崎克罗诺杆菌的快速检测。

关键词：阪崎克罗诺杆菌扩增内标假阴性 PCR检测

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北京大气PM_(2.5)对A549细胞炎性因子及DNA损伤的毒性

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中国环境科学 2016年第5期36卷 1579-1588页

作者：焦周光付绪磊温占波李劲松李娜张柯王洁胡凌飞军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 渤海大学食品科学与工程学院辽宁锦州121013

为探讨大气PM_(2.5)及其不同组分对人肺上皮细胞A549的毒性作用及其剂量-反应关系,将前期采集的PM_(2.5)颗粒物用不同方法进一步制备PM_(2.5)水溶性组分、PM_(2.5)脂溶性组分和PM_(2.5)单纯颗粒物,将制备的PM_(2.5)颗粒物及其组分以不... 详细信息

为探讨大气PM_(2.5)及其不同组分对人肺上皮细胞A549的毒性作用及其剂量-反应关系,将前期采集的PM_(2.5)颗粒物用不同方法进一步制备PM_(2.5)水溶性组分、PM_(2.5)脂溶性组分和PM_(2.5)单纯颗粒物,将制备的PM_(2.5)颗粒物及其组分以不同浓度(10,50,100,200,400μg/m L)对A549细胞染毒,用MTS法分别在染毒6,10,24,48,72h后测定细胞活力,染毒24h后用ELISA及RT-QPCR法测定炎性因子IL-6和TNF-α表达量,AP位点计数法测定细胞DNA损伤情况.结果表明:除PM_(2.5)水溶性组分外,其余染毒样本高浓度染毒时始终对细胞生长表现出抑制作用,其中低浓度染毒时可在较短时间对细胞生长表现出抑制作用,染毒时间较长时抑制作用减弱或消失,PM_(2.5)水溶性组分对细胞生长抑制作用并不显著;除PM_(2.5)水溶性组分外,其余染毒样本都显著升高了IL-6m RNA的相对表达量和IL-6蛋白的分泌,除PM_(2.5)脂溶性组分外,其余染毒样本都显著升高了TNF-αm RNA的相对表达量;除PM_(2.5)水溶性组分外,其余染毒样本都显著提高了DNA碱基缺失程度.总的来说,PM_(2.5)水溶性组分在抑制细胞活力、造成炎性损伤及DNA损伤方面作用相对较小,而PM_(2.5)所产生的毒性作用并不仅限于其所吸附的复杂成分,其中作为载体的固体核心颗粒对机体可能造成的毒性作用也不容忽视.

关键词： PM2.5 组分 A549 细胞活力炎性因子 DNA损伤

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减毒炭疽芽胞杆菌inhA基因缺失突变株的构建及鉴定

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黑龙江畜牧兽医 2016年第3期 190-193,289,290页

作者：姚雪晶赵芳坤魏颖陶好霞袁盛凌刘纯杰杨百亮王艳春天津农学院动物科学与动物医学学院天津300384 军事医学科学院生物工程研究所/病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

炭疽（anthrax）是一种人畜共患的急性烈性传染病,其病原菌是炭疽芽胞杆菌（Bacillus anthracis）,属于革兰氏阳性菌。炭疽病是世界公认的五大人畜共患病之一,由于炭疽芽胞杆菌感染具有致病力强、传染途径多、潜伏期短、发病快、病死率... 详细信息

炭疽（anthrax）是一种人畜共患的急性烈性传染病,其病原菌是炭疽芽胞杆菌（Bacillus anthracis）,属于革兰氏阳性菌。炭疽病是世界公认的五大人畜共患病之一,由于炭疽芽胞杆菌感染具有致病力强、传染途径多、潜伏期短、发病快、病死率高等特点,对人类健康和社会稳定造成极大的威胁。因此,对炭疽芽胞杆菌的研究一直是生命科学领域的热点。

关键词：炭疽芽胞杆菌 inhA 缺失突变株同源臂感受态细胞基因片段重组菌人畜共患病基因敲除烈性传染病

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宋内志贺氏菌1173质粒基因组分析及耐药基因转移机制研究

宋内志贺氏菌1173质粒基因组分析及耐药基因转移机制研究

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中国食品科学技术学会第十四届年会暨第九届中美食品业高层论坛

作者：张德福赵禹宗安慧冯娇张明曲道峰周冬生殷喆励建荣渤海大学食品科学与工程学院辽宁省食品安全重点实验室生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室浙江工商大学食品与生物工程学院

目的:研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla转移的机制。方法:用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）,用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移试验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其它细菌,并对接合子是... 详细信息

目的:研究质粒介导宋内志贺氏菌1173耐药基因bla转移的机制。方法:用双纸片协同扩散法验证1173是否产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）,用PCR扩增鉴定其携带的耐药基因,接合转移试验检验其耐药质粒是否可通过接合转移给其它细菌,并对接合子是否产ESBL和携带的耐药基因进行检验,利用VIFEK2检测1173和接合子的耐药谱,提取质粒进行高通量基因组测序,并对质粒序列进行生物信息学分析,以研究其耐药基因转移机制。结果:1173是产ESBEL的多药耐药宋内志贺氏菌,携带的耐药基因有bla和bla,其中的blabla可通过接合转移作用传递给受体菌EC600,并使接合子具有相应的耐药谱。经序列测定和生物信息学分析表明,介导bla水平转移的是ISEcp1-bla-△orf477转座单元。结论:质粒携带的bla介导1173对多类抗菌药物的耐药,ISEcp1-bla-△orf477转座单元介导bla在细菌间的转移。

关键词：宋内志贺氏菌质粒多药耐药转座单元移动元件 blaCTX-M-64

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