检索结果-内蒙古大学图书馆

过表达微小RNA miR-125b抑制肝癌细胞上皮-间质转换及促进细胞凋亡

中国生物化学与分子生物学报 2016年第6期32卷 656-664页

作者：张彪曾泉王海洋李思霆南雪何丽娟岳文周军年裴雪涛军事医学科学院野战输血研究所全军干细胞与再生医学重点实验室北京100850 军事医学科学院华南干细胞与再生医学研究中心广州510005

微小RNA 125b(miR-125b)在许多恶性肿瘤的增殖、分化和凋亡等过程中具有很重要的作用,但miR-125b是否涉及肝癌的上皮-间质转换过程(EMT)还有待进一步研究。本研究通过构建过表达miR-125b的肝癌稳转细胞株,初步检测miR-125b对于肝癌的EM... 详细信息

微小RNA 125b(miR-125b)在许多恶性肿瘤的增殖、分化和凋亡等过程中具有很重要的作用,但miR-125b是否涉及肝癌的上皮-间质转换过程(EMT)还有待进一步研究。本研究通过构建过表达miR-125b的肝癌稳转细胞株,初步检测miR-125b对于肝癌的EMT过程和相关的TGF-β信号通路的影响,以及对于肝癌细胞凋亡的影响。以慢病毒载体p HRS-1cla-EGFP构建过表达miR-125b的载体质粒(p HRS-1cla-miR125b-CMV-EGFP),并对上述载体进行NheⅠ、XbaⅠ双酶切和测序鉴定,鉴定正确后,在293T细胞中进行慢病毒包装,浓缩病毒后,对MHCC97-H进行慢病毒感染并采用流式分选GFP阳性的细胞。实时定量PCR检测表明肝癌细胞稳转株MHCC97-H-PHRSmiR-125b-EGFP的miR-125b表达量是空载体转染组的6倍。Western印迹检测发现,与空载体对照组相比,MHCC97-H-PHRS-miR-125b-EGFP细胞中间质细胞标志α-SMA表达显著下调,上皮细胞标志E-cadherin表达显著上调,同样的,用Western印迹检测也发现MHCC97-H-PHRS-miR-125b-EGFP细胞中TGF-β信号通路关键下游分子Smad2和Smad4的表达显著下调,细胞凋亡检测结果表明,与对照组相比,过表达miR-125b的稳转株凋亡率增加到19.66%,加入TGF-β1后,过表达miR-125b的稳转株凋亡率进一步增加到74.7%。同样的,在体内治疗实验中,我们采用商品化的体内核酸转染试剂,在皮下肿瘤组织中过表达miR-125b mimics,结果表明miR-125b的过表达与肿瘤组织的凋亡成正相关性(r=0.83463,P<0.01),且免疫组化结果也表明,miR-125b过表达后,E-cadherin表达显著上调,α-SMA及Smad2和Smad4的表达显著下调。上述结果表明,我们成功构建了过表达miR-125b的肝癌细胞稳转株,并成功建立了肿瘤组织中过表达miR-125b mimics的动物模型,在体内外均观察到过表达miR-125b后对肝癌细胞EMT过程的抑制作用和对细胞凋亡的促进作用。相关研究结果加深了我们对miR-125b在肝癌中抑制肝癌发展作用机制的理解,及其作为潜在的治疗肝癌的新靶点的重要性。

关键词：肝细胞癌 miR-125b 过表达细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

微小分子miR-125b新靶基因的鉴定及其功能初步研究

引用

生物技术通讯 2016年第2期27卷 147-152页

作者：王海洋曾泉张彪李思霆南雪何丽娟岳文周军年裴雪涛军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 军事医学科学院华南干细胞与再生医学研究中心广东广州510005

目的:利用生物信息学方法预测miR-125b的新靶基因,在肝癌细胞系中进行验证和结合位点的鉴定,为阐明miR-125b在肝癌发生发展中的作用和机制提供新线索。方法:Western印迹分析在肝癌细胞中过表达miR-125b后上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白... 详细信息

目的:利用生物信息学方法预测miR-125b的新靶基因,在肝癌细胞系中进行验证和结合位点的鉴定,为阐明miR-125b在肝癌发生发展中的作用和机制提供新线索。方法:Western印迹分析在肝癌细胞中过表达miR-125b后上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达情况;对肝癌患者肿瘤组织及癌旁组织的miR-125b表达差异进行实时定量PCR检测,同时对SNAIL1的表达情况进行免疫组化检测;用生物信息学方法预测miR-125b的新靶基因;利用双萤光素酶报告系统验证miR-125b在预测的新靶基因mRNA的3'非翻译区是否有直接结合位点;构建新靶基因的真核过表达载体,检测新靶基因过表达后对miR-125b表达水平的影响。结果:在肝癌细胞中过表达miR-125b可抑制细胞EMT过程,下调α平滑肌肌动蛋白、神经钙黏素的表达;miR-125b在肝癌患者肿瘤组织中的表达远低于癌旁组织,而SNAIL1作为调控EMT的主要转录因子之一,其在肿瘤组织中的入核比例明显高于癌旁组织;用TargetScan预测到snail1是miR-125b的潜在靶点之一,但双萤光素酶实验表明snail1并非miR-125b的直接靶基因。此外,我们意外发现在肝癌细胞中过表达SNAIL1可上调miR-125b的表达。结论:miR-125b可抑制肝癌EMT过程,但并非直接通过靶向snail1发挥作用,两者在肝癌细胞中存在着复杂的间接调控关系。

关键词： miR-125b snail1 肝细胞癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

miR-125b-Bcl-2-Rock Axis Dominates Erythroblast Enucleation

miR-125b-Bcl-2-Rock Axis Dominates Erythroblast Enucleation

引用

中国干细胞第七届年会

作者：房芳邹晓静曲洺逸陈冬丽陈琳范增曾泉周军年习佳飞岳文谢小燕裴雪涛中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室北京华南生物医药研究院华南干细胞与再生医学研究中心

Understanding the mechanism controlling erythrocyte enucleation may provide new insights into therapeutic approaches for related diseases and the generation of red blood cells(RBCs)in vitro might meet the deficiency in blood cell ***,the low erythrocyte enucleation rate remains the bottle neck of this *** are small RNA molecules binding to partially complementary sites in the 3'-UTR of target transcripts and repressing their *** have been shown as important regulators in stem cell commitment,cell proliferation and *** now,only a few miRNAs have been reported involved in erythroid differentiation,maturation,fetal globin genes expression and enucleation,including miR-15a,miR-16-1,miR-126,miR-144,miR-191,miR-451 and ***,it remains unclear how mammalian erythrocytes extrude their nucleus.

关键词： miR-125b erythroblas enucleation

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

两种培养条件对牙周膜干细胞生物学特性影响的对比研究

引用

中华老年口腔医学杂志 2016年第2期14卷 65-71页

作者：王飞翔贺慧霞刘嘉婧贾雅丽解放军总医院口腔科硕士生北京100853 军事医学科学院野战输血医学研究所干细胞与再生医学研究室北京100850

目的:对比无血清培养基和含血清培养基对原代培养、分离的人牙周膜干细胞(Human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)生物学特性的影响,为基于hPDLSCs的临床应用研究和药物试验奠定基础。方法:分别用含血清和无血清培养基培养分离... 详细信息

目的:对比无血清培养基和含血清培养基对原代培养、分离的人牙周膜干细胞(Human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)生物学特性的影响,为基于hPDLSCs的临床应用研究和药物试验奠定基础。方法:分别用含血清和无血清培养基培养分离hPDLSCs,倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞表型;免疫荧光染色、real-time PCR检测PDLSCs成骨、成脂分化诱导后相关特异性蛋白及基因表达。结果:采用无血清与含血清培养条件原代培养分离的h PDLSCs形态相似;但无血清培养基组细胞增殖力更强;两种培养条件培养的hPDLSCs表型相似,均表达CD105、CD44、CD166、CD73和CD90,不表达CD45、CD3、CD14、CD38、HLA-DR、CD31和CD34;且阳性表达vimentin、α-SMA和N-cadherin,阴性表达CK18和E-cadherin。无血清培养条件培养的hPDLSCs具有成骨、成脂潜能,且诱导效能强于含血清培养者。结论:无血清培养基能够在体外培养扩增hPDLSCs,并维持其干细胞特性。采用无血清培养条件培养hPDLSCs可能更适合其在细胞治疗和实验研究中应用。

关键词：牙周膜干细胞培养基无血清体外培养

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牙髓、牙周膜及脐带间充质干细胞三系分化能力的体外比较研究

引用

口腔颌面修复学杂志 2016年第3期17卷 129-134页

作者：王飞翔贺慧霞贾雅丽刘嘉婧蔡洪桢张绍清解放军总医院口腔科硕士生北京100853 军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室助理研究员北京100850

目的:比较牙髓、牙周膜和脐带三种不同来源间充质干细胞的(Mesenchymal stem cells,MSCs)三系分化潜能。方法:培养分离人脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)、牙髓干细胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)和牙周膜干细胞(Per iodontal ligament stem cells,PDLSCs);倒置显微镜观察细胞形态,体外诱导这3种MSCs向成骨、成脂和成软骨方向分化,通过茜素红染色、油红O染色、阿尔辛蓝染色分别鉴定细胞成骨、成脂和成软骨分化能力,进一步实时荧光定量PCR检测比较3种细胞成骨相关基因OCN和RUNX2及成脂相关基因PPAR-γ的表达水平。结果:这3种MSCs细胞形态略有不同,三者均可向成骨、成脂和成软骨方向分化,但其分化潜能有所差异,DPSCs成骨和成脂向分化能力强,UCMSCs则更适于成脂和成软骨向分化,而PDLSCs成软骨向分化较具优势。结论:DPSCs,PDLSCs和UCMSCs三系分化潜能不同,本研究为干细胞临床转化中选择理想细胞来源提供实验依据。

关键词：脐带牙髓干细胞牙周膜干细胞分化比较分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牙周膜干细胞对阿尔茨海默病细胞模型治疗作用的研究

牙周膜干细胞对阿尔茨海默病细胞模型治疗作用的研究

引用

第十一次全国老年口腔医学学术年会

作者：王飞翔贺慧霞岳文贾雅丽解放军总医院口腔医学研究所军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室

研究背景：AD 是一种复杂的多因素引起的、多发于老年人的神经退行性疾病，其中Tau 蛋白过度磷酸化引起的神经原纤维缠结是其主要的病理特点。从牙周膜中分离出的PDLSCs 由于其神经嵴起源、来源广泛、容易获得等优点，在AD 治疗方面独... 详细信息

研究背景：AD 是一种复杂的多因素引起的、多发于老年人的神经退行性疾病，其中Tau 蛋白过度磷酸化引起的神经原纤维缠结是其主要的病理特点。从牙周膜中分离出的PDLSCs 由于其神经嵴起源、来源广泛、容易获得等优点，在AD 治疗方面独具优势，但目前还未见PDLSCs 对AD 治疗作用的研究报道。

关键词：牙周膜干细胞阿尔茨海默病冈田酸细胞模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牙周膜干细胞对阿尔茨海默病细胞模型治疗作用的研究

牙周膜干细胞对阿尔茨海默病细胞模型治疗作用的研究

引用

2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会

作者：王飞翔贺慧霞岳文解放军总医院口腔医学研究所厦门大学附属第一医院口腔科解放军总医院口腔科军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室

目的:研究人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,h PDLSCs)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)体外细胞模型治疗的作用。材料和方法:原代培养分离、细胞表型鉴定PDLSCs。同时,采用20 nmol/L冈田酸(Okadaic acid,OA)损伤人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系24h,建立AD细胞模型。在此基础上,将PDLSCs与AD模型细胞Transwell共培养24h进行治疗。通过倒置相差显微镜观察细胞形态、CCK-8检测细胞活性、免疫荧光染色、激光共聚焦检测细胞凋亡和细胞骨架蛋白变化、透射电镜分析微管超微结构以及western blot检测细胞Tau蛋白磷酸化水平,对建立的AD细胞模型和PDLSCs对损伤模型的修复作用进行鉴定和评估。结果:成功培养分离出PDLSCs,表达间充质干细胞表面标志分子CD166、CD44、CD29、CD73、CD90、CD105、STRO-1。20nmol/L OA损伤SH-SY5Y细胞24h可成功建立AD细胞模型。将PDLSCs与AD模型细胞共培养24h,倒置显微镜见OA损伤的细胞形态逐渐恢复,回缩的树突重新伸长;树突长度、细胞活性及细胞凋亡检测均显示治疗组与模型组结果有显著性差异,且与未损伤对照组结果无统计学差异。激光共聚焦见:模型组树突退缩消失,治疗组树突粗壮较长,近似对照组;模型组凋亡细胞多见,核碎裂呈不规则碎块或条索状,高亮显色,而治疗组凋亡细胞少见,核形态圆而规则,显色均匀,类似对照组;进一步α-tubulin、F-actin特染观察微管、微丝结构:见模型组细胞变圆、树突退缩,微管塌陷疏松,而治疗组恢复神经细胞样形态,树突细长,微丝致密规则,微管纤维变粗,形似对照组;透射电镜显示:模型组经OA损伤后的细胞胞质内微管结构不清,少见,胞浆内有较多空泡样形成;治疗组胞浆内微管纤维成束排列,结构逐渐恢复变长、连续、变粗,分布密集,结构清晰,与正常对照组相似。Western blot进一步检测Tau蛋白:结果显示模型组细胞经OA损伤后的SH-SY5Y细胞磷酸化Tau蛋白Ser 396位点的表达明显增高;与PDLSCs共培养24h,治疗组其磷酸化Tau蛋白Ser 396位点的表达降低。结论:本研究在细胞、分子水平首次证实了PDLSCs对AD模型细胞形态、结构和功能的修复作用,其机理与Tau蛋白的磷酸化密切相关,表明PDLSCs有望成为AD细胞治疗极有前景的细胞来源。

关键词：牙周膜干细胞治疗阿尔茨海默病冈田酸细胞模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

林蛙皮胶原蛋白的提取及其生物学特征分析

引用

生物技术通讯 2015年第6期26卷 745-750页

作者：南雪单紫筠张迦南贾茜媛龙冬莹岳文裴雪涛军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 军事医学科学院华南干细胞与再生医学研究中心广东广州510005

目的：建立林蛙皮胶原蛋白低温提取及纯化方法,保证胶原蛋白的活性,并对其生物学特性进行初步探讨。方法：采用低温酸酶提取结合的方法提取林蛙皮中的胶原蛋白,并对提取过程中过氧化氢的加入量进行考察;对纯化的胶原蛋白进行含量、相对... 详细信息

目的：建立林蛙皮胶原蛋白低温提取及纯化方法,保证胶原蛋白的活性,并对其生物学特性进行初步探讨。方法：采用低温酸酶提取结合的方法提取林蛙皮中的胶原蛋白,并对提取过程中过氧化氢的加入量进行考察;对纯化的胶原蛋白进行含量、相对分子质量分布等定性及定量检测,同时观察其对间充质干细胞增殖情况的影响。结果：在4℃经脱色脱脂处理（过氧化氢浓度为0.025%）后,用0.5 mol/L的醋酸提取48 h,沉淀再分别用0.67%、1.34%、2%的胃蛋白酶提取,在此工艺条件下,酸溶性胶原蛋白（ASC）的提取率为8.77%±0.44%,纯度为75.83%±3.78%;酶溶性胶原蛋白（PSC）的提取率为30.69%±0.83%,纯度为66.39%±1.79%。紫外扫描图谱表明提取物具有胶原蛋白的特征吸收。SDS-PAGE分析表明所得ASC与PSC均由2条α1链与1条α2链组成,为保持了三股螺旋结构特征的Ⅰ型胶原蛋白。对细胞生长影响的实验表明,ASC与PSC在0.05~20 mg/m L浓度范围对间充质干细胞的生长无抑制作用,并且在某些浓度下具有促进干细胞增殖的作用。结论：低温酸酶法可高效提取林蛙皮粉中的胶原蛋白,提取的胶原蛋白具有良好的生物学活性,本方法及提取的胶原蛋白在组织工程等领域具有良好的应用前景。

关键词：林蛙皮胶原蛋白提取低温生物学特性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小分子化合物Me6TREN促进小鼠骨髓中造血干/祖细胞的增殖

引用

生物技术通讯 2015年第6期26卷 759-762页

作者：杨舒张静王思涵范增王静雪韩毅田宇何丽娟陈琳岳文李艳华裴雪涛广西医科大学广西南宁530021 军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 军事医学科学院华南干细胞与再生医学研究中心广东广州510005

目的:探讨小分子化合物Me6TREN对小鼠骨髓中造血干/祖细胞的增殖作用。方法:采用细胞计数、细胞集落形成能力检测、流式细胞术检测细胞表面标志等实验技术,观察Me6TREN对小鼠骨髓细胞的影响。结果:皮下注射Me6TREN 12 h后,Me6TREN组的... 详细信息

目的:探讨小分子化合物Me6TREN对小鼠骨髓中造血干/祖细胞的增殖作用。方法:采用细胞计数、细胞集落形成能力检测、流式细胞术检测细胞表面标志等实验技术,观察Me6TREN对小鼠骨髓细胞的影响。结果:皮下注射Me6TREN 12 h后,Me6TREN组的集落形成能力、造血干/祖细胞表面标志lin-Sca-1+c-Kit+的比例均明显高于对照组;在体外分离培养的小鼠骨髓单个核细胞,4 d后Me6TREN组细胞的集落形成能力及造血干/祖细胞的增殖能力均高于对照组。结论:Me6TREN对小鼠骨髓造血干/祖细胞有一定的促增殖作用。

关键词：造血干/祖细胞扩增小分子化合物Me6TREN

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

牙周膜干细胞对阿尔茨海默病细胞模型治疗作用的研究

牙周膜干细胞对阿尔茨海默病细胞模型治疗作用的研究

引用

第十次全国老年口腔医学学术年会

作者：王飞翔贺慧霞岳文贾雅丽解放军总医院口腔医学研究所军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室

研究背景:AD是一种复杂的多因素引起的、多发于老年人的神经退行性疾病,其中Tau蛋白过度磷酸化引起的神经原纤维缠结是其主要的病理特点。从牙周膜中分离出的PDLSCs由于其神经嵴起源、来源广泛、容易获得等优点,在AD治疗方面独具优势,... 详细信息

研究背景:AD是一种复杂的多因素引起的、多发于老年人的神经退行性疾病,其中Tau蛋白过度磷酸化引起的神经原纤维缠结是其主要的病理特点。从牙周膜中分离出的PDLSCs由于其神经嵴起源、来源广泛、容易获得等优点,在AD治疗方面独具优势,但目前还未见PDLSCs对AD治疗作用的研究报道。材料和方法:通过细胞培养、免疫荧光、CCK-8、流式细胞分析、激光共聚焦、透射电镜分析及western blot等研究方法和手段,首先原代培养、分离并鉴定PDLSCs,与此同时用OA损伤SH-SY5Y细胞系建立AD体外细胞模型。基于此,本文采用Transwell的方式,研究PDLSCs对AD细胞模型的治疗作用。结果:经PDLSCs共培养治疗后,模型损伤的细胞形态逐渐恢复,回缩的树突重新伸长,细胞活性增高,凋亡减少,同时细胞骨架结构恢复正常,细胞Tau蛋白的磷酸化水平降低。结论:PDLSCs对OA诱导的AD细胞模型具有显著修复作用。这为PDLSCs应用于临床AD治疗提供重要的科学依据,同时为AD干细胞治疗提供新的种子细胞。

关键词：牙周膜干细胞阿尔茨海默病冈田酸细胞模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：