检索结果-内蒙古大学图书馆

重庆医学 2007年第9期36卷 806-808页

作者：杨丽平赵敬湘李露斯袁红峰刘大庆王蕴芳南雪白慈贤裴雪涛第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 军事医学科学院输血研究所干细胞与再生医学研究室北京100850

目的构建稳定表达萤火虫荧光素酶的9Lluc细胞。方法通过酶切方法获得表达萤火虫荧光素酶的目的基因片段,将其连接到慢病毒表达质粒pBPLV,构建慢病毒表达载体pBPLV-Luc;将pBPLV-Luc转染到9L胶质瘤细胞,构建稳定表达萤火虫荧光素酶的9Llu... 详细信息

目的构建稳定表达萤火虫荧光素酶的9Lluc细胞。方法通过酶切方法获得表达萤火虫荧光素酶的目的基因片段,将其连接到慢病毒表达质粒pBPLV,构建慢病毒表达载体pBPLV-Luc;将pBPLV-Luc转染到9L胶质瘤细胞,构建稳定表达萤火虫荧光素酶的9Lluc细胞并扩增培养。应用生物素荧光成像检测9Lluc细胞体内及体外表达。结果9Lluc细胞所释放的光子量均与细胞数量呈正相关。结论结果表明萤火虫荧光素酶已稳定转染入9Lluc细胞。

关键词：隧病毒载体荧光素酶生物素荧光成像

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9L／Wistar大鼠脑胶质肉瘤模型的建立

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中华神经医学杂志 2007年第3期6卷 270-273页

作者：杨丽平赵敬湘王蕴芳白慈贤袁红丰施双双闫舫李露斯裴雪涛第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 军事医学科学院输血研究所干细胞与再生医学研究室北京100850

目的建立稳定的9L／Wistar大鼠脑胶质肉瘤模型。方法构建稳定表达萤火虫荧光素酶PGL的9L细胞株9L^lvc，采用立体定向手术，在Wistar大鼠右侧尾状核接种DAPI荧光标记的9L^lvc细胞，分别于接种后第7，14，21天通过Xenogen活体动物体内成... 详细信息

目的建立稳定的9L／Wistar大鼠脑胶质肉瘤模型。方法构建稳定表达萤火虫荧光素酶PGL的9L细胞株9L^lvc，采用立体定向手术，在Wistar大鼠右侧尾状核接种DAPI荧光标记的9L^lvc细胞，分别于接种后第7，14，21天通过Xenogen活体动物体内成像系统检测肿瘤的生长情况，并断头取材，观察肿瘤的形态学变化，采用免疫组化的方法检测肿瘤细胞胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（Vemintin）的表达。结果大鼠接种9L^lvc细胞后成瘤率100％。活体成像显示细胞接种后第7天到第21天肿瘤呈逐渐增大趋势。组织切片结果显示肿瘤与周围脑组织边界较清楚，未见包膜；瘤内新生血管丰富，可见出血。肿瘤组织免疫组织化学GFAP及Vemintin蛋白染色阴性。结论该方法建立的大鼠脑胶质肉瘤模型稳定可靠，符合恶性胶质肉瘤的生物学特征．是理想的脑胶质肉瘤实验研究材料。

关键词： 9L细胞 Wistar大鼠脑胶质肉瘤动物模型活体检测

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Wnt 3a在神经干细胞向多巴胺能神经元分化过程中作用的研究

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生物化学与生物物理进展 2006年第10期33卷 971-977页

作者：韩姝师伟李艳华姚海雷谢小燕陈琳施双双白慈贤南雪闫舫王韫芳裴雪涛军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究室北京100850

Wnt信号在中枢神经系统发育过程中起重要的作用,控制着细胞的生长及分化.Wnt3a是Wnt家族的成员之一,对神经干细胞的增殖及分化有一定的调控作用.将重组Wnt3a腺病毒转入神经干细胞中,研究Wnt3a在定向诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化... 详细信息

Wnt信号在中枢神经系统发育过程中起重要的作用,控制着细胞的生长及分化.Wnt3a是Wnt家族的成员之一,对神经干细胞的增殖及分化有一定的调控作用.将重组Wnt3a腺病毒转入神经干细胞中,研究Wnt3a在定向诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化过程中的作用.将神经干细胞分为4组,对照组(不加任何诱导因子组)、抗坏血酸诱导组(AA组)、Wnt3a重组腺病毒诱导组(Wnt3a组)以及Wnt3a重组腺病毒加抗坏血酸诱导组(Wnt3a+AA组).结果显示,Wnt3a组细胞中的多巴胺能神经元前体细胞特异性标志Nurr1表达量显著增多,Wnt3a+AA组多巴胺能神经元明显多于AA组,酪氨酸羟化酶(TH)在mRNA水平上的表达是AA组的1.86倍.蛋白质印迹及免疫细胞化学染色显示,各诱导组均有TH的表达,Wnt3a组和AA组多巴胺能神经元阳性细胞数比例分别为(5.76±3.34)%和(37.42±2.54)%,与Wnt3a+AA组(73.96±2.61)%比较,差异有统计学意义(P<0.05).利用高效液相色谱法检测到诱导后的细胞可分泌多巴胺.结果表明,Wnt3a可促进神经干细胞向多巴胺能神经元前体细胞分化,再通过抗坏血酸的诱导作用,在体外可获得大量的多巴胺能神经元,这些神经元有分泌多巴胺的功能.

关键词： Wnt3a 神经干细胞分化多巴胺能神经元

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Fibulin-5的沉默机制与功能研究

Fibulin-5的沉默机制与功能研究

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第11次中国实验血液学会议

作者：岳文 Quanhong Sun Sanja Dacic Jill M.Siegfried Jian Yu Lin Zhang 军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室 University of Pittsburgh Cancer Institute University of Pittsburgh School of Medicine Pittsburgh PA 15213 USA University of Pittsburgh Cancer Institute University of Pittsburgh School of Medicine Pittsburgh PA 15213 USA University of Pittsburgh Cancer Institute University of Pittsburgh School of Medicine Pittsburgh PA 15213 USA University of Pittsburgh Cancer Institute University of Pittsburgh School of Medicine Pittsburgh PA 15213 USA University of Pittsburgh Cancer Institute University of Pittsburgh School of Medicine Pittsburgh PA 15213 USA

肿瘤的发生发展是包括原癌基因激活和抑癌基因失活等机制在内的复杂过程。基因与染色体突变等细胞遗传学的改变在肿瘤进程中起着十分重要的作用。除此之外,越来越多的研究表明肿瘤表观遗传学的改变,尤其是因启动子甲基化而导致的抑癌基... 详细信息

肿瘤的发生发展是包括原癌基因激活和抑癌基因失活等机制在内的复杂过程。基因与染色体突变等细胞遗传学的改变在肿瘤进程中起着十分重要的作用。除此之外,越来越多的研究表明肿瘤表观遗传学的改变,尤其是因启动子甲基化而导致的抑癌基因的沉默亦发挥着重要的作用。利

关键词：功能研究 Fibulin-5

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胎儿骨髓间充质干细胞中SSEA-4阳性表达细胞的分离和检测

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科学通报 2006年第11期51卷 1276-1280页

作者：刘大庆杨印祥高艳红袁红丰秦立蓬王韫芳南雪施双双岳文裴雪涛军事医学科学院野战输血研究所干细胞与再生医学研究中心北京100850

为了验证成体干细胞中全能性干细胞存在的可能性,以SSEA-4抗原为筛选标志,利用免疫磁珠筛选技术从胎儿来源的骨髓间充质干细胞(fetal mesenchymal stem cells,fMSCs)中筛选并培养得到SSEA-4表达阳性的fMSC-SSEA-4细胞,从形态学、生长曲... 详细信息

为了验证成体干细胞中全能性干细胞存在的可能性,以SSEA-4抗原为筛选标志,利用免疫磁珠筛选技术从胎儿来源的骨髓间充质干细胞(fetal mesenchymal stem cells,fMSCs)中筛选并培养得到SSEA-4表达阳性的fMSC-SSEA-4细胞,从形态学、生长曲线、表面标志及细胞周期、核型分析等方面检测其生物学性状,并通过Oct-4及SSEA-4抗体的表达及致瘤性等方面分析其全能性状．同时观察了fMSC-SSEA-4细胞的诱导分化能力．结果发现,fMSC-SSEA-4细胞的形态学表现、细胞周期和生长曲线检测与fMSCs无明显差异;fMSC-SSEA-4细胞Oct-4和SSEA-4抗体表达阳性,并且表现为正常的二倍体核型,无明显的致瘤性状．在不同的诱导条件下,fMSC-SSEA-4细胞可向成骨细胞、脂肪细胞和神经元样细胞分化．实验结果提示,fMSCs中存在有全能干细胞性状的一群细胞,从而为进一步深入研究和更好地应用fMSCs提供了理论依据．

关键词：胎儿骨髓间充质干细胞 SSEA-4抗原免疫磁珠筛选全能性生物学性状

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骨髓间充质干细胞亲和肽的筛选

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自然科学进展 2006年第11期16卷 1478-1481页

作者：赵敬湘杨丽平刘大庆秦立蓬王韫芳白慈贤南雪裴雪涛军事医学科学院输血研究所干细胞与再生医学研究室北京100850

采用噬菌体肽库技术,用分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞筛选噬菌体环七肽库,通过酶联免疫吸附实验挑选出亲和性强的克隆．测序分析相应的基因组成,推导多肽序列,获得骨髓间充质干细胞高亲和性多肽,并合成FITC标记的亲和肽(FITC-CSTNPKVL... 详细信息

采用噬菌体肽库技术,用分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞筛选噬菌体环七肽库,通过酶联免疫吸附实验挑选出亲和性强的克隆．测序分析相应的基因组成,推导多肽序列,获得骨髓间充质干细胞高亲和性多肽,并合成FITC标记的亲和肽(FITC-CSTNPKVLC),流式细胞仪检测结果显示,合成多肽对筛选细胞具有良好的亲和力。

关键词：骨髓间充质干细胞噬菌体肽库测序分析

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自体骨髓干细胞移植治疗糖尿病下肢动脉硬化闭塞症

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中国综合临床 2006年第11期22卷 1050-1051页

作者：李伟娟俞芳刘阁玲王韫芳南雪项岫秀裴雪涛河北省唐山工人医院内分泌一科 063000 军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室

糖尿病下肢动脉硬化闭塞症是糖尿病患者常见的大血管并发症之一.促进血管新生是近年来发展起来的一项新技术[1],动物实验表明自体骨髓单个核细胞植入缺血的肢体可促进局部的血管生成.我科于2005年3月至12月,完成了15例糖尿病下肢动脉闭... 详细信息

糖尿病下肢动脉硬化闭塞症是糖尿病患者常见的大血管并发症之一.促进血管新生是近年来发展起来的一项新技术[1],动物实验表明自体骨髓单个核细胞植入缺血的肢体可促进局部的血管生成.我科于2005年3月至12月,完成了15例糖尿病下肢动脉闭塞症患者的干细胞移植,取得了较好的效果,现报告如下。

关键词：糖尿病骨髓干细胞移植下肢动脉闭塞症

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体外诱导人骨髓间充质干细胞定向肝细胞分化

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军医进修学院学报 2006年第3期27卷 230-232页

作者：梁峰王韫芳岳慧敏南雪施双双闫舫李荣裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 解放军总医院普通外科研究所北京100853

目的:研究人骨髓间充质干细胞向肝细胞的诱导分化,为肝组织工程提供理想的细胞来源。方法:以肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4对种植于基底膜基质中的人骨髓间充质干细胞进行三维立体诱导培养,在培养后不同时间,分别进行形态观察、... 详细信息

目的:研究人骨髓间充质干细胞向肝细胞的诱导分化,为肝组织工程提供理想的细胞来源。方法:以肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4对种植于基底膜基质中的人骨髓间充质干细胞进行三维立体诱导培养,在培养后不同时间,分别进行形态观察、AFP、Alb的免疫组化荧光染色及靛青绿的摄取与排泌试验。结果:该条件下诱导后的人骨髓间充质干细胞生成肝细胞样细胞,阳性表达肝细胞特有表面标志AFP、Alb,并具备肝细胞特有的摄取与排泌靛青绿的活性功能。结论:肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子4及基底膜基质可能在体外人骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的过程中提供适宜的微环境并起重要作用,这为间充质干细胞在肝组织工程中的应用提供了理论与技术上的支持。

关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞肝细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子2

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成体干细胞及其在再生医学中的应用

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生命科学 2006年第4期18卷 328-332页

作者：习佳飞王韫芳裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室

成体干细胞研究的最主要目的就是有朝一日将其应用于临床疾病的治疗。随着对成体干细胞可塑性研究的不断深入和临床应用研究的不断扩展,人们对成体干细胞最终走向临床应用抱有越来越大的希望。本文就成体干细胞的可塑性及其在四种疾病... 详细信息

成体干细胞研究的最主要目的就是有朝一日将其应用于临床疾病的治疗。随着对成体干细胞可塑性研究的不断深入和临床应用研究的不断扩展,人们对成体干细胞最终走向临床应用抱有越来越大的希望。本文就成体干细胞的可塑性及其在四种疾病中应用的基础研究进行探讨。

关键词：成体干细胞可塑性细胞治疗

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大鼠骨髓来源的c-met^+β_2m^-细胞向肝细胞样细胞诱导分化的实验研究

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自然科学进展 2006年第1期16卷 32-39页

作者：南雪王韫芳尉承泽梁峰张锐岳慧敏岳文裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 中国人民解放军307医院外一科北京100039

为了观察大鼠骨髓来源的c-met+β2m-细胞在体内外是否可定向诱导分化为肝细胞样细胞,将雄性F344大鼠的c-met+β2m-细胞通过肝门静脉移植入由丙烯醇诱导损伤的F344雌鼠体内,观察移植细胞在受鼠肝内整合、增殖、分化、成熟以及损伤后的修... 详细信息

为了观察大鼠骨髓来源的c-met+β2m-细胞在体内外是否可定向诱导分化为肝细胞样细胞,将雄性F344大鼠的c-met+β2m-细胞通过肝门静脉移植入由丙烯醇诱导损伤的F344雌鼠体内,观察移植细胞在受鼠肝内整合、增殖、分化、成熟以及损伤后的修复作用;通过模拟丙烯醇肝损伤大鼠体内微环境,将c-met+β2m-细胞与损伤肝细胞共培养,观察了c-met+β2m-细胞的形态变化,并检测了肝细胞特异性蛋白的表达和肝细胞特异性功能的变化．结果表明,大鼠 c-met+β2m-细胞在体内外均可以分化为成熟的有功能的肝细胞,提示微环境在成体干细胞定向诱导分化中起决定性作用,这为骨髓成体干细胞移植治疗各种原因引发的肝功能障碍提供了新的途径．

关键词：移植诱导分化微环境

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