检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学 2015年第3期39卷 165-168页

作者：尹惠琼王蕊朱凤宣王建国章金刚军事医学科学院野战输血研究所、国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室北京100850

目的建立血液制品病毒灭活/去除技术并应用于血液制品的病毒灭活/去除工艺验证。方法建立指示病毒库以及S/D处理法、低pH孵放法、干热法、巴氏消毒法、纳米膜过滤法等血液制品病毒灭活/去除技术,采用细胞病变法测定病毒滴度,Spearman和K... 详细信息

目的建立血液制品病毒灭活/去除技术并应用于血液制品的病毒灭活/去除工艺验证。方法建立指示病毒库以及S/D处理法、低pH孵放法、干热法、巴氏消毒法、纳米膜过滤法等血液制品病毒灭活/去除技术,采用细胞病变法测定病毒滴度,Spearman和Karber法计算病毒滴度,病毒滴度降低量(LRV)≥4判为有效,对企业的血液制品样品进行病毒灭活/去除验证。结果 S/D处理法和低pH孵放法可有效灭活有包膜指示病毒,干热法和巴氏消毒法可有效灭活有、无包膜指示病毒,纳米膜过滤法可在一定过滤量范围内去除PPV指示病毒。结论所建立的血液制品病毒灭活/去除技术可用于血液制品的病毒灭活/去除工艺验证,以提高血液制品的病毒安全性。

关键词：血液制品病毒灭活消毒

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异种移植的病毒安全性研究进展

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中国实验动物学报 2008年第6期16卷 463-469页

作者：马玉媛杨勇贤章金刚国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室军事医学科学院野战输血研究所北京100850

猪-人异种移植有望解决人源器官短缺的严重问题。然而,以前病毒(provirus)形式整合入猪基因组中的猪内源性反转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)难以去除,PERV有可能通过异种移植传播给人类,甚至产生新的病毒性疾病。本文回... 详细信息

猪-人异种移植有望解决人源器官短缺的严重问题。然而,以前病毒(provirus)形式整合入猪基因组中的猪内源性反转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)难以去除,PERV有可能通过异种移植传播给人类,甚至产生新的病毒性疾病。本文回顾了PERV与异种移植病毒安全性及我国特有小型猪中PERV的相关研究。

关键词：异种移植猪内源性反转录病毒中国特有小型猪

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人细小病毒B19三种基因型通用核酸检测体系的建立与评价

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军事医学 2015年第3期39卷 174-178页

作者：贾俊婷郭逸赵雄马玉媛章金刚军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室北京100850 陕西省血液中心西安710061

目的建立能同时检测人细小病毒B19（简称B19病毒）3种基因型的通用核酸检测（NAT）体系,并进行方法学评价。方法对B19病毒3种基因型代表毒株全序列进行比对,选取其保守区域（NS1区）设计B19病毒的通用引物和探针。为避免假阴性结果,... 详细信息

目的建立能同时检测人细小病毒B19（简称B19病毒）3种基因型的通用核酸检测（NAT）体系,并进行方法学评价。方法对B19病毒3种基因型代表毒株全序列进行比对,选取其保守区域（NS1区）设计B19病毒的通用引物和探针。为避免假阴性结果,在体系中引入竞争性噬菌体内标。将适宜浓度的内标添加到一系列梯度稀释的参考品质粒中,建立B19病毒实时荧光定量PCR（q PCR）标准曲线。对建立的B19病毒通用NAT体系分别进行敏感性、特异性、重复性等方法学评价。结果建立的B19病毒实时q PCR检测体系的标准曲线在1×109~1×10^3拷贝（copies）/μl模板浓度范围内相关性良好。方法学评价显示,体系的最低检测下限为10拷贝/μl;与其他血源传播病毒等无交叉反应;批内和批间实验重复性良好。结论建立了B19病毒3种基因型全检的通用NAT体系,不仅可用于B19病毒感染的诊断,还可用于血液和血液制品中B19病毒的NAT筛查,对于保障输血和血液制品的病毒安全性具有重要意义。

关键词：人细小病毒B19 TaqMan荧光定量PCR 核酸检测

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人巨细胞病毒包膜糖蛋白B线性B细胞抗原表位的预测

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军事医学 2015年第3期39卷 184-188页

作者：闫晶晶吕茂民赵雄尹惠琼章金刚广西医科大学南宁530021 军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室北京100850

目的通过生物信息学方法分析人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)包膜糖蛋白B(glycoprotein B,g B)的结构及理化特性,预测g B的线性B细胞抗原表位。方法基于HCMV g B的序列,利用两种在线B细胞表位预测程序及DNAstar软件对g B进行... 详细信息

目的通过生物信息学方法分析人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)包膜糖蛋白B(glycoprotein B,g B)的结构及理化特性,预测g B的线性B细胞抗原表位。方法基于HCMV g B的序列,利用两种在线B细胞表位预测程序及DNAstar软件对g B进行预测;利用SWISS-MODEL服务器同源构建g B三级结构模型,进行进一步验证。结果与结论综合多项分析,预测得到HCMVg B的多个线性B细胞表位,为后续验证其优势中和表位,建立富含高效价中和抗体的原料血浆的筛选方法奠定了基础。

关键词：人巨细胞病毒糖蛋白B B细胞表位

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猪IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的TaqMan实时定量RT-PCR检测体系的建立

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中国预防兽医学报 2011年第4期33卷 285-288页

作者：马玉媛郭逸颜奇坡叶小丽张启模郑霖田克恭章金刚军事医学科学院野战输血研究所/国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室北京100850 中国动物疫病预防控制中心北京100094

为了解猪体内细胞免疫应答机制,本研究建立猪细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的TaqMan实时定量RT-PCR检测体系。以五指山小型猪cDNA为模板,扩增IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的基因保守区,构建相应的重组质粒,并将其作为标准品构建标准... 详细信息

为了解猪体内细胞免疫应答机制,本研究建立猪细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的TaqMan实时定量RT-PCR检测体系。以五指山小型猪cDNA为模板,扩增IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的基因保守区,构建相应的重组质粒,并将其作为标准品构建标准曲线。结果显示,各标准曲线的相关系数r值均大于0.990,扩增效率为90%～105%;该检测方法的敏感性较高,IL-4检测下限为1copies/μL,IL-2、IL-10及IFN-γ检测下限达为102copies/μL;重复性较好,批内重复试验与批间重复试验变异系数均小于5%。本研究为病毒感染后猪体内免疫应答等研究提供方法。

关键词：细胞因子实时定量RT-PCR 细胞免疫

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新型细小病毒PARV4的特性及其与人细小病毒B19的关系

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中国输血杂志 2014年第7期27卷 781-785页

作者：郭逸马玉媛段勇叶世辉章金刚陕西省血液中心陕西西安710061 军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室

新型细小病毒PARV4(Parvovirus 4,PARV4)为细小病毒家族中的单链线状DNA病毒。PARV4能在血液、肝、骨髓以及淋巴组织中检测到,而此病毒是否会致病至今尚未明确。PARV4与人细小病毒B19的生物学特性及理化特性十分类似。鉴于B19V对于血液... 详细信息

新型细小病毒PARV4(Parvovirus 4,PARV4)为细小病毒家族中的单链线状DNA病毒。PARV4能在血液、肝、骨髓以及淋巴组织中检测到,而此病毒是否会致病至今尚未明确。PARV4与人细小病毒B19的生物学特性及理化特性十分类似。鉴于B19V对于血液/血液制品安全性的重要性已经或正在引起人们的广泛重视并实施控制,PARV4也逐渐受到关注。本文在概述人细小病毒的基础上,对PARV4的理化学与生物学特性、PARV4的流行病学特性与致病性、PARV4与B19V及其他细小病毒的异同,以及PARV4在原料血浆中的污染状况等进行综述。

关键词：新型细小病毒PARV4 人细小病毒B19 病毒感染原料血浆

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原料血浆和凝血因子类产品中人细小病毒B19污染情况调查

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军事医学 2015年第3期39卷 169-173页

作者：贾俊婷马玉媛郭逸赵雄赵福广章金刚吉林农业大学生命科学学院长春130118 军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室北京100850

目的检测混合原料血浆和凝血因子类产品中人细小病毒B19(human parvovirus B19,B19病毒)核酸,分析我国原料血浆及凝血因子类产品中B19病毒的污染情况。方法针对B19病毒的保守区域NS1区合成引物及探针,采用Taq Man实时定量PCR法检测混合... 详细信息

目的检测混合原料血浆和凝血因子类产品中人细小病毒B19(human parvovirus B19,B19病毒)核酸,分析我国原料血浆及凝血因子类产品中B19病毒的污染情况。方法针对B19病毒的保守区域NS1区合成引物及探针,采用Taq Man实时定量PCR法检测混合原料血浆和4类凝血因子类产品中B19病毒核酸。结果混合原料血浆的B19病毒核酸的阳性率为59.49%(116/195),最高浓度可达1.35×1010拷贝/ml。因子Ⅷ、凝血酶、纤维蛋白原以及凝血酶原复合物的阳性率分别为93.55%(29/31)、100%(10/10)、85.71%(6/7)和88.89%(8/9)。结论我国混合原料血浆与凝血因子类产品中B19病毒的污染率较高,有必要进行原料血浆的B19病毒筛查,对于保障血液制品的病毒安全性具有重要意义。

关键词：人细小病毒B19 血浆凝血因子类产品 TaqMan荧光定量PCR

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蓝舌病毒群特异性RT-PCR检测技术及其应用

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中国动物检疫 2008年第7期25卷 28-29页

作者：尹惠琼张燕霞孙宇张兰兰孙卫华杨姝李晓成章金刚军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室北京100850 中国动物卫生与流行病学中心青岛266032

目的:建立一种适于蓝舌病毒(BTV)群特异性基因检测的RT-PCR方法。方法:根据本实验室设计的一对BTVNS1基因通用型检测引物建立BTV群特异性RT-PCR检测技术;对不同血清型BTV及鹿流行性出血热病毒(EHDV)进行检测,验证其特异性;同时,利用该... 详细信息

目的:建立一种适于蓝舌病毒(BTV)群特异性基因检测的RT-PCR方法。方法:根据本实验室设计的一对BTVNS1基因通用型检测引物建立BTV群特异性RT-PCR检测技术;对不同血清型BTV及鹿流行性出血热病毒(EHDV)进行检测,验证其特异性;同时,利用该方法检测血清模拟样品及抗病毒血清样品。结果:所设计的检测方法特异性好,与EHDV无交叉反应,可检测至少17个血清型BTV,并能有效检出不同病毒浓度的模拟样品及不同型的血清样品。结论:建立的RT-PCR方法可用于BTV群的特异性通用检测。

关键词：蓝舌病毒 BTV RT—PCR

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检测人细小病毒4的TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立与评价

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中国输血杂志 2010年第10期23卷 782-785页

作者：郭逸马玉媛张启模赵雄陈创夫章金刚石河子大学生命科学学院新疆石河子832000 军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室

目的检测血液和原料血浆中人细小病毒4(Parvovirus 4,Parv4)的污染情况,建立Parv4的TaqMan实时荧光定量PCR检测体系。方法将全基因合成的标准品质粒纯化后制备为阳性标准品,从而构建标准曲线并建立检测体系,然后对该检测体系进行方法学... 详细信息

目的检测血液和原料血浆中人细小病毒4(Parvovirus 4,Parv4)的污染情况,建立Parv4的TaqMan实时荧光定量PCR检测体系。方法将全基因合成的标准品质粒纯化后制备为阳性标准品,从而构建标准曲线并建立检测体系,然后对该检测体系进行方法学评价。结果成功建立了Parv4的检测体系,其标准曲线的相关系数r=0.9997。方法学评价显示,该检测体系的灵敏度达10copies/μl;重复性好,批内重复和批间重复的变异系数均小于2%;特异性良好,以水貂肠炎病毒(MEV)和猪细小病毒(PPV)的核酸样品为模板进行检测时结果为阴性。结论本研究建立的基于TaqMan探针的Parv4荧光定量PCR检测方法可以很好地定量检测血液、原料血浆及血液制品中的Parv4,对于保障输血安全及血液制品的病毒安全性具有重要意义。

关键词：人细小病毒4 血液原料血浆荧光定量PCR

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反转录病毒基因治疗载体及其安全性评价

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生物技术通讯 2007年第6期18卷 1013-1015页

作者：徐述马玉媛吕茂民史利军章金刚军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室

反转录病毒载体是目前基因治疗中应用最广泛的基因运载工具之一,具有能稳定整合入宿主细胞、持久表达目的基因、感染细胞范围广、基因容量较大等优点,但其生物安全性还存在争议。在简要介绍反转录基因治疗病毒载体的基础上,对反转录病... 详细信息

反转录病毒载体是目前基因治疗中应用最广泛的基因运载工具之一,具有能稳定整合入宿主细胞、持久表达目的基因、感染细胞范围广、基因容量较大等优点,但其生物安全性还存在争议。在简要介绍反转录基因治疗病毒载体的基础上,对反转录病毒载体中外源目的基因的表达调控及反转录病毒载体的安全性评价进行了综述。

关键词：基因治疗反转录病毒载体基因表达调控安全性评价

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