检索结果-内蒙古大学图书馆

第八届北京实验动物科学国际论坛

作者：马玉媛赵雄范瑞贾俊婷王延琳吕茂民冯书堂章金刚国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室军事医学科学院野战输血研究所北京盖兰德生物科技有限公司中国农科院北京畜牧兽医研究所

临床上同种供体移植物的严重短缺使猪源组织/器官异种移植研究的重要性日益凸显.猪内源性反转录病毒(PERV)是猪→人异种移植、猪源生物活性材料中最受关注的病原体,其潜在的病原安全性问题不容忽视.本课题组在国家多项基金的资助下,围... 详细信息

临床上同种供体移植物的严重短缺使猪源组织/器官异种移植研究的重要性日益凸显.猪内源性反转录病毒(PERV)是猪→人异种移植、猪源生物活性材料中最受关注的病原体,其潜在的病原安全性问题不容忽视.本课题组在国家多项基金的资助下,围绕五指山猪近交系等中国特有小型猪来源的PERV开展了系统性的研究工作,建立了PERV的研究平台,对其有了较为全面深入的了解.

关键词：异种移植物五指山猪近交系内源性反转录病毒品种选育

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溶剂/去污剂处理法对人凝血因子Ⅷ中指示病毒灭活效果的验证研究

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国际生物制品学杂志 2014年第5期37卷 248-250页

作者：尹惠琼邓靖夏志明肖春桥王蕊陈云华章金刚军事医学科学院野战输血研究所血液生物制品研究室、国家生物医学分析中心生物活性物质病毒安全检测实验室北京100850 贵州泰邦生物制品有限公司研发部贵阳550025

人凝血因子Ⅷ（humancoagulationfactorⅧ，FⅧ）等血液制品在和平／战争时期的急创伤救治及特定疾病防治中发挥重要作用，但其病毒安全性不容忽视，对血液制品进行有效的病毒灭活可明显降低因输注血液制品而传播病毒性疾病的风险，并... 详细信息

人凝血因子Ⅷ（humancoagulationfactorⅧ，FⅧ）等血液制品在和平／战争时期的急创伤救治及特定疾病防治中发挥重要作用，但其病毒安全性不容忽视，对血液制品进行有效的病毒灭活可明显降低因输注血液制品而传播病毒性疾病的风险，并保证血液制品的病毒安全性。为尽可能降低血液制品的病毒传播风险，国内、外颁布了相关指导原则，对制品的病毒灭活／去除作出了具体要求。

关键词：因子Ⅷ 病毒灭活溶剂/去污剂

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干热法对人凝血因子Ⅷ中指示病毒的灭活效果验证研究

干热法对人凝血因子Ⅷ中指示病毒的灭活效果验证研究

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全国第三届血液制品学术交流会

作者：邓靖尹惠琼胡吉军肖春桥王蕊袁靖章金刚陈云华贵州泰邦生物制品有限公司贵阳 550025 军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心生物活性物质病毒安全检测实验室北京100850

目的:研究100℃,30分钟加热法对人凝血因子Ⅷ制品中指示病毒的灭活效果. 方法:采用细胞感染法,并以猪细小病毒(PPV)、脑心肌炎病毒(EMCV)作为指示病毒,对三批人凝血因子Ⅷ半成品样品进行病毒灭活效果验证.结果:三批人凝血因子Ⅷ样品经10... 详细信息

目的:研究100℃,30分钟加热法对人凝血因子Ⅷ制品中指示病毒的灭活效果. 方法:采用细胞感染法,并以猪细小病毒(PPV)、脑心肌炎病毒(EMCV)作为指示病毒,对三批人凝血因子Ⅷ半成品样品进行病毒灭活效果验证.结果:三批人凝血因子Ⅷ样品经100℃,加热处理30分钟后,均无可以检测到的PPV和EMCV病毒,可使病毒滴度下降4个Log以上.对病毒滴度阴性的样品,取其最低稀释倍数孔上清,接种敏感细胞,盲传3代均无可观察到细胞病变.结论:100℃,30分钟加热法对人凝血因子Ⅷ半成品中指示病毒PPV和EMCV具有良好的灭活效果.

关键词：人凝血因子Ⅷ制品指示病毒干热法灭活效果

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一对用于BTV群NS1基因通用检测的独特引物

一对用于BTV群NS1基因通用检测的独特引物

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第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：尹惠琼张改平张红章金刚军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒检测实验室北京 100850 河南省农科院动物免疫学重点实验室郑州 450002

目前蓝舌病病毒(BTV)已发现25个血清型。对BTV进行快速、可靠的群特异性检测极为重要,因此本研究设计了适用于BTV群特异性检测的一对独特引物,并进行了评价。利用DNAstar软件对不同血清型BTV保守基因VP7及NS1分别进行序列比对,发现NS1... 详细信息

目前蓝舌病病毒(BTV)已发现25个血清型。对BTV进行快速、可靠的群特异性检测极为重要,因此本研究设计了适用于BTV群特异性检测的一对独特引物,并进行了评价。利用DNAstar软件对不同血清型BTV保守基因VP7及NS1分别进行序列比对,发现NS1基因的5'端为最保守片段,针对BTV保守基因的保守片段设计了一对通用型引物。Blast软件分析引物与GenBank发表的病毒基因的同源性,显示引物特异性较好;利用8个不同血清型BTV标准毒株进行RT-PCR检测,证实该引物能有效检测不同血清型BTV;通过BTV1-12和EHDV1-4进行检测,证实该引物具有较好的检测特异性;通过制备的含特检序列的质粒标准品P121进行检测,显示该引物检测的敏感性为10<'5>copies,重复检测CV％为0;对模拟血清样品进行检测,结果均为阳性。所设计的特异性引物可用于不同血清型BTVNS1基因的通用型检测。

关键词：反刍动物传染病蓝舌病病毒特异性检测 NS1基因 RT-PCR检测特异性引物

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猪内源性反转录病毒囊膜基因env真核表达质粒的构建及鉴定

猪内源性反转录病毒囊膜基因env真核表达质粒的构建及鉴定

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2011东莞第二届国际小型猪学术论坛暨大型实验动物生物医药研究应用研讨会

作者：叶小丽吕茂民颜奇坡郭逸吴健敏田克恭马玉媛章金刚军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室北京 100850 广西兽医研究所广西南宁 530001 中国动物疫病预防控制中心北京 100094

目的：构建猪内源性反转录病毒(Porcine endogenousretrovirus,PERV)囊膜基因绷v的真核表达质粒pHCMV-env并加以鉴定,为研究PERV的细胞嗜性和宿主范围奠定基础。方法：用RT-PCR方法扩增五指山猪(WuZhiShanminiatuer Digs,WZS)来源PERV的env基因,将其插入pGEM-TEasy载体中,构建重组质粒pGEM-T-env,酶切鉴定正确后,将pGEM.T-env与pHCMV-VSV-G表达质粒同时经EcoR I酶切消化后连接,构建重组表达质粒pHCMV-env,并进行酶切、测序鉴定;将鉴定正确的无内毒素的质粒pHCMV-env,转染HEK293T细胞,采用PCR、RT-PCR检测转染后env基因的整合和转录情况。结果：成功扩增得到五指山猪来源PERV的env基因,并构建pHCMV—env真核表达质粒,转染HEK293T细胞系后鉴定该细胞系中有目的基因的整合和转录。结论：成功构建了真核表达质粒pHCMV-env,并且在HEK293T细胞中能够整合并转录,为深入研究PERV的细胞嗜性合宿主范围奠定了基础。

关键词：猪内源性反转录病毒 env基因真核表达质粒质粒构建质粒鉴定

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嗜人性PERV感染性克隆感染人源细胞后Stathmin蛋白表达差异分析

嗜人性PERV感染性克隆感染人源细胞后Stathmin蛋白表达差异分析

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第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：颜奇坡马玉媛吕茂民叶小丽郑霖吴健敏田克恭章金刚军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒安全检测实验室解放军第519医院检验科广西壮族自治区兽医研究所中国动物疫病预防控制中心

目的分析嗜人性猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retroviruses,PERV)感染的人源细胞中Stathmin蛋白的差异表达情况,探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的分子效应。方法嗜人性PERV感染性克隆感染HEK293细胞,采用PCR、实时定量... 详细信息

目的分析嗜人性猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retroviruses,PERV)感染的人源细胞中Stathmin蛋白的差异表达情况,探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的分子效应。方法嗜人性PERV感染性克隆感染HEK293细胞,采用PCR、实时定量RT-PCR、免疫荧光分析确认PERV感染后,实时定量RT-PCR和免疫印迹法分析Stathmin蛋白表达差异。结果嗜人性PERV感染性克降成功感染HEK293细胞,实时定量RT-PCR和免疫印迹法检测结果表月,PERV感染后Stathmin蛋白与对照相比表达上调。结论嗜人性PERV感染HEK293细胞后Stathmin表达上调,该研究结果为深入研究嗜人性PERV与人源细胞的相互作用及PERV感染后的分子效应等提供了线索,也提示了PERV感染后可能会对细胞的生长、生理功能等造成影响,甚至存在潜在的致病性。

关键词： PERV Stathmin 表达差异

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利用TaqMan荧光探针技术实时定量检测蓝舌病病毒群

利用TaqMan荧光探针技术实时定量检测蓝舌病病毒群

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第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会

作者：尹惠琼花群义张改平张红陈苏红王升启章金刚军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心病毒检测实验室北京 100850 深圳出入境检验检疫局深圳 518001 河南省农科院动物免疫学重点安验室郑州 450002 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京 100850

蓝舌病是一种重要的反刍动物传染病,一旦爆发将对国际贸易和社会经济造成极其严重的损失。本研究建立了一种新型的蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)荧光定量检测技术,可实现对不同血清型BTV NS1基因的快速、可靠检测。利用该技术对随... 详细信息

蓝舌病是一种重要的反刍动物传染病,一旦爆发将对国际贸易和社会经济造成极其严重的损失。本研究建立了一种新型的蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)荧光定量检测技术,可实现对不同血清型BTV NS1基因的快速、可靠检测。利用该技术对随机抽取的8个不同血清型BTV毒株进行检测以验证该方法的有效性;利用所构建的质粒参考品P120(含待检序列)及病毒参考品对该技术进行特异性、敏感性、重复性评价;对模拟血清样品进行检测以验证该方法对样品检测的有效性。结果显示,该技术可有效检出不同血清型BTV毒株;特异性良好,与鹿流行性出血热病毒(Epizootic hemorrhagicdisease virus, EHDV) 1-4型无交叉反应;P120标准品的检测灵敏度为10<'3> copies, BTV1的检测灵敏度为1 CCID<,50>;P120、BTV1重复检测CV值均为0;能有效检出不同病毒含量的血清模拟样品。本研究利用TaqMan荧光探针所建立的BTV实时荧光定量PCR检测技术特异性、敏感性、重复性均较好,可作为不同血清型BTV的通用快速检测方法。

关键词：反刍动物传染病蓝舌病病毒 TaqMan荧光探针 PCR检测定量检测

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