检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验血液学杂志 2015年第6期23卷 1763-1768页

作者：张钦张斌陈虎军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科、军事医学科学院细胞与基因治疗中心北京100071

造血干细胞移植是治疗恶性血液病的有效措施,由于移植后免疫抑制剂的使用,机体免疫功能受到影响,病毒感染在造血干细胞移植后具有很高的发生率。EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染是移植后常见的病毒感染之一,其诱发的移植后淋巴细胞... 详细信息

造血干细胞移植是治疗恶性血液病的有效措施,由于移植后免疫抑制剂的使用,机体免疫功能受到影响,病毒感染在造血干细胞移植后具有很高的发生率。EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染是移植后常见的病毒感染之一,其诱发的移植后淋巴细胞增殖性疾病虽然发生率低,但疾病进展快,死亡率高。T淋巴细胞在机体抗病毒免疫中发挥着重要作用,基于病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的细胞免疫治疗显示了很好的安全性及有效性。本文回顾了近几年国内外细胞免疫疗法治疗EB病毒感染的最新进展,包括制备方法的改进、新分离方法的使用及第三方CTL的应用,并探讨EB病毒感染细胞免疫治疗的临床应用前景及存在的问题。

关键词： EB病毒造血干细胞移植移植后淋巴细胞增殖性疾病细胞免疫治疗

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利用动员的外周血造血干细胞建立人源化小鼠模型

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中国实验血液学杂志 2015年第6期23卷 1753-1757页

作者：许亚茹李欲航陈水平邹秉含张钦徐曼孔维霞盛红霞胡国亮廖丽张斌胡亮钉军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科北京100071 军事医学科学院附属医院细胞与基因治疗中心北京100071 军事医学科学院附属医院检验科北京100071

目的:观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的人外周血中CD34^+造血干细胞(HSC)在免疫缺陷NPG^(TM)(***-Prkdcscid II2rgtm1vst/vst)小鼠模型上造血重建的水平。方法:用免疫磁珠分选G-CSF动员人外周血CD34^+的造血干细胞,经骨髓腔移植到... 详细信息

目的:观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的人外周血中CD34^+造血干细胞(HSC)在免疫缺陷NPG^(TM)(***-Prkdcscid II2rgtm1vst/vst)小鼠模型上造血重建的水平。方法:用免疫磁珠分选G-CSF动员人外周血CD34^+的造血干细胞,经骨髓腔移植到亚致死剂量照射的NPG小鼠。移植后2、4周观察小鼠血象恢复情况;移植后4、6、8、10、12周用流式细胞仪动态监测小鼠外周血人源CD45^+、CD19^+细胞表达;12周后处死各组小鼠,检测骨髓、肝脏、脾脏中细胞表面CD45^+、CD19^+细胞表达;用PCR方法检测小鼠骨髓细胞人Alu基因的有无。结果:免疫磁珠分选人的CD34^+造血干细胞纯度可达96.3%;NPG小鼠经过照射后骨髓腔内有核细胞及巨核细胞数量均明显减少或消失,达到了清髓的效果;移植组小鼠4周外周血各系血细胞恢复到移植照射前水平;所有小鼠全部存活,移植组小鼠在4、6、8、10、12周均检测到人源CD45^+、CD19^+细胞;应用PCR方法检测移植组小鼠人Alu基因均为阳性。结论:经骨髓腔途径移植G-CSF动员的人外周血CD34^+干细胞至NPG小鼠,可以建立人鼠嵌合模型。

关键词： CD34^+干细胞人源化小鼠模型 NPG小鼠

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Th17细胞与移植物抗宿主病关系的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第10期29卷 1109-1112页

作者：李倩张斌陈虎军事医学科学院附属医院全军造血干细胞研究所军事医学科学院附属医院细胞与基因治疗中心

Th17细胞是一种新发现的不同于Th1、Th2的CD4+T细胞亚群,IL-17是其主要的效应分子,已被证实在多种自身免疫病和炎性疾病中发挥关键作用。移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植术后最主要和最严重的并发症之一,是供者T细胞介导的... 详细信息

Th17细胞是一种新发现的不同于Th1、Th2的CD4+T细胞亚群,IL-17是其主要的效应分子,已被证实在多种自身免疫病和炎性疾病中发挥关键作用。移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植术后最主要和最严重的并发症之一,是供者T细胞介导的组织炎性损伤,CD4+T细胞是启动GVHD的关键。近年来关于Th17细胞在GVHD发生过程中发挥作用的研究得出了不一致的结论,深入研究Th17的作用将可能为GVHD的临床治疗提供新的路径。现就CD4+T细胞和Th17细胞与GVHD关联性的研究进展进行综述。

关键词：造血干细胞移植移植物抗宿主病 Th17细胞 CD4+T细胞

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重组腺病毒载体Ad5-hTRX-EGFP的构建及其表达

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中国实验血液学杂志 2012年第3期20卷 744-748页

作者：扈江伟王军徐曼苏永锋孔维霞盛红霞张斌陈虎军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科军事医学科学院附属医院细胞与基因治疗中心北京100071

本研究旨在构建并制备人硫氧还蛋白(hTRX)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因腺病毒载体Ad-hTRX-EGFP,感染HEK293细胞,为基因治疗提供实验基础。设计含有NotⅠ和EcoRⅤ酶切位点的引物,PCR扩增hTRX,将扩增产物连接到带有EGFP标记的pDC316-m... 详细信息

本研究旨在构建并制备人硫氧还蛋白(hTRX)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因腺病毒载体Ad-hTRX-EGFP,感染HEK293细胞,为基因治疗提供实验基础。设计含有NotⅠ和EcoRⅤ酶切位点的引物,PCR扩增hTRX,将扩增产物连接到带有EGFP标记的pDC316-mCMV穿梭质粒上,构建重组穿梭质粒pDC316-hTRX-EGFP,利用Lipofectamine2000脂质体的方法将AdMax腺病毒包装系统的骨架质粒pBHG lox_E1,3Cre和穿梭质粒pDC316-hTRX-EGFP共转染入HEK293细胞,进行同源重组,得到腺病毒重组质粒pAd-hTRX-EGFP,并在其中包装扩增病毒,用氯化铯高速梯度离心、纯化病毒,测定病毒颗粒数及滴度。采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定,用流式细胞仪测定感染HEK293细胞的效率,Western blot方法验证细胞表达hTRX蛋白。结果显示,重组腺病毒质粒经PCR和NotⅠ、EcoRⅤ酶切鉴定,证实含有hTRX基因,测序结果和设计片段的序列一致。重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达5.558×1010pfu/ml。病毒成功感染HEK293细胞,MOI=100时,感染效率达92.25%。经Western blot方法验证表明,感染后的HEK293细胞高表达hTRX蛋白。结论:应用细胞内同源重组方法成功构建了含hTRX基因的重组腺病毒载体,制备获得高滴度的病毒,能高效感染HEK293细胞并表达目的蛋白,为后续研究奠定了基础。

关键词：人硫氧还蛋白腺病毒载体增强型绿色荧光蛋白

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树突状细胞免疫治疗转移性肾细胞癌临床转化的现状

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中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第5期20卷 609-617页

作者：唐晓义刘婷张斌陈虎全军造血干细胞研究所军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科军事医学科学院细胞与基因治疗中心北京100071

树突状细胞(dendritic cell,DC)免疫治疗作为一种无严重毒性反应、前景广阔的主动免疫治疗策略,自从1998年以来,已经在转移性肾细胞癌(metastatic renal cell carcinoma,mRCC)的治疗中进行了广泛研究,并在2007年5月韩国FDA批准了一种称... 详细信息

树突状细胞(dendritic cell,DC)免疫治疗作为一种无严重毒性反应、前景广阔的主动免疫治疗策略,自从1998年以来,已经在转移性肾细胞癌(metastatic renal cell carcinoma,mRCC)的治疗中进行了广泛研究,并在2007年5月韩国FDA批准了一种称为CreaVax RCC的自体DC疫苗用于mRCC的治疗。目前已经有31项非随机对照的Ⅰ/Ⅱ期临床试验研究了DC免疫治疗用于mRCC患者的安全性和有效性,虽然这些试验结果已经证实DC免疫治疗的安全性和对一小部分mRCC患者的有效性,但这些临床试验在受试者选择、DC疫苗的标准化、免疫学终点和临床终点的选择和评价等方面难以统一标准,这导致DC免疫治疗疗效的发挥受限且不同试验结果无法进行直接比较;另外,所开展的试验均为非随机对照小样本临床研究。因此,期待临床试验设计方案的进一步优化,以客观评估DC免疫治疗对mRCC患者的临床治疗效果,并应在临床试验中加强对DC免疫治疗联合mRCC一线治疗方案疗效的评价,以进一步开发对mRCC更加有效的联合治疗策略。

关键词：树突状细胞转移性肾细胞癌免疫治疗临床试验

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体外连续传代培养脐带间充质干细胞染色体核型的稳定性

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军事医学 2012年第8期36卷 599-602页

作者：王军徐曼盛宏霞孔维霞扈江伟廖丽汤永永宁红梅张斌陈虎军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科军事医学科学院细胞与基因治疗中心北京10007

目的分析不同代次人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)的染色体核型,初步评价UC-MSCs在体外连续传代培养过程中染色体结构的稳定性。方法采用胶原酶消化法分离UC-MSCs,贴壁培养传代,通过细胞形态、免疫... 详细信息

目的分析不同代次人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)的染色体核型,初步评价UC-MSCs在体外连续传代培养过程中染色体结构的稳定性。方法采用胶原酶消化法分离UC-MSCs,贴壁培养传代,通过细胞形态、免疫表型及多向分化潜能等生物学特性进行鉴定,利用G显带分析第3、5、7代细胞的染色体核型。结果染色体核型分析显示,第3、5、7代UC-MSCs为正常二倍体核型,G显带未见染色体结构异常。UC-MSCs呈成纤维样形态生长,高表达CD73、CD90、CD105,不表达CD34、CD45、CD40、CD80、CD86、CD154、HLA-DR;在特定的体外诱导条件下可以向骨、脂肪、软骨分化。结论 UC-MSCs在体外连续传代培养7代以内染色体结构稳定,为临床应用UC-MSCs的安全性提供了遗传学方面的实验依据。

关键词：间充质干细胞脐带核型细胞增殖连续传代

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海洛因依赖对T淋巴细胞核仁区酸性非组蛋白表达分析

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中国免疫学杂志 2000年第7期16卷 361-363页

作者：张婧杨征刘广贤陈高明李抒茨薇娜乔建辉林育松裴素秋李春海北京解放军307医院细胞与基因治疗中心军事医学科学院附属医院北京100039

目的：观察海洛因依赖者外周血T淋巴细胞核仁形成区（NORs）酸性非组蛋白（Ag-NORs）表达及与解毒有关的胎盘型谷胱甘肽S-转移酶（CST-π）表达，分析海洛因依赖对T细胞代谢乃至功能的影响。方法：利用北京开隆公司提供的KL型免疫图象... 详细信息

目的：观察海洛因依赖者外周血T淋巴细胞核仁形成区（NORs）酸性非组蛋白（Ag-NORs）表达及与解毒有关的胎盘型谷胱甘肽S-转移酶（CST-π）表达，分析海洛因依赖对T细胞代谢乃至功能的影响。方法：利用北京开隆公司提供的KL型免疫图象分析系统检测T细胞Ag-NORs；通过定量PCR技术分析病人外周血GST-π。表达。结果：72例海洛因依赖者外周血T淋巴细胞Ag-NORs检测平均值6．78％±0.50％（％±S），其中33例进行了GST-π表达分析，与正常人比较海洛因依赖者外周血GST-π表达明显增高，且Ag－NORs与GST-π表达呈明显负相关。结论：海洛因依赖者外周血T淋巴细胞Ag-NORs明显降低，表明其免疫细胞功能受到明显抑制。Ag-NORs降低的幅度明显小于肿瘤患者，说明海洛因依赖对T细胞的抑制可能在途径或机理上有别于肿瘤抑制因子对免疫细胞的抑制。GST-π表达增高，提示机体损伤修复机理加强。CST-π表达与Ag-NORs呈密切负相关，进一步证实海洛因依赖患者免疫功能损伤与修复对立调节的加强。

关键词：核仁形成区 T淋巴细胞 GST-π 海洛因依赖

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肾透明细胞癌组织中树突状细胞与微血管密度之间的关系

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第2期30卷 191-194页

作者：张亮麦海星王亚林赵立陈立军张斌安徽医科大学解放军307医院临床学院军事医学科学院附属医院泌尿外科军事医学科学院细胞与基因治疗中心北京100071

目的探讨树突状细胞(DC)的数量及成熟情况与肾透明细胞癌微血管密度(MVD)的相关性。方法收集解放军307医院2010-07/2013-01期间手术的30例肾透明细胞癌患者术后癌组织及癌旁标本,通过免疫组化检测石蜡切片中DC特异性标志CD11c、DC成熟标... 详细信息

目的探讨树突状细胞(DC)的数量及成熟情况与肾透明细胞癌微血管密度(MVD)的相关性。方法收集解放军307医院2010-07/2013-01期间手术的30例肾透明细胞癌患者术后癌组织及癌旁标本,通过免疫组化检测石蜡切片中DC特异性标志CD11c、DC成熟标志MHC-Ⅱ和MVD标志CD34的表达情况并进行分析。结果 30例肾透明细胞癌患者中,癌组织中CD11c阳性率和MVD分别为(93.08±66.14)‰和26.31±11.05个明显高于癌旁组织(25.91±12.29)‰和12.78±5.49个,癌组织中MHC-Ⅱ阳性率为(9.65±3.61)‰明显低于癌旁组织(17.60±6.26)‰。MVD与MHC-Ⅱ阳性率成负相关关系,而与CD11c则无明显相关性。癌组织中各指标的表达与患者性别、年龄、TNM分期之间未见明显相关性。结论肾透明细胞癌癌组织中的血管密度、DC含量高于癌旁组织,而成熟DC含量低于癌旁组织,肿瘤微血管密度与DC成熟度之间存在负相关关系。

关键词：肾透明细胞癌树突状细胞肿瘤微血管免疫组化

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自然杀伤细胞预防急性移植物抗宿主病相关研究进展

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中国实用内科杂志 2015年第11期35卷 957-960页

作者：万露露张斌胡亮钉军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科细胞与基因治疗中心北京100071

造血干细胞移植（HSCT）是治疗血液系统恶性肿瘤的主要方法,而急性移植物抗宿主病（a GVHD）是制约HSCT成功的关键因素。研究发现,供者来源的自然杀伤（NK）细胞在发挥抗肿瘤效应的同时,可能存在抗a GVHD作用,为预防a GVHD的发生带来了... 详细信息

造血干细胞移植（HSCT）是治疗血液系统恶性肿瘤的主要方法,而急性移植物抗宿主病（a GVHD）是制约HSCT成功的关键因素。研究发现,供者来源的自然杀伤（NK）细胞在发挥抗肿瘤效应的同时,可能存在抗a GVHD作用,为预防a GVHD的发生带来了新的希望[1]。但由于HSCT后重建的NK细胞处于功能不成熟阶段,不表达或弱表达NK细胞免疫球蛋白受体（KIR）、Ly49D等受体,

关键词：自然杀伤细胞急性移植物抗宿主病杀伤细胞免疫球蛋白受体

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造血干细胞移植后巨细胞病毒感染及其防治

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中国实用内科杂志 2015年第11期35卷 953-956页

作者：许亚茹张斌胡亮钉军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科细胞与基因治疗中心北京100071

人巨细胞病毒（HCMV）在自然界中广泛存在,发展中国家人群感染率明显高于发达国家,中国人的感染率高达90%以上。随着年龄的增加其感染率也增加[1]。大多数健康人原发感染HCMV后常无症状,但免疫力低下者如造血干细胞移植（HSCT）、艾滋... 详细信息

人巨细胞病毒（HCMV）在自然界中广泛存在,发展中国家人群感染率明显高于发达国家,中国人的感染率高达90%以上。随着年龄的增加其感染率也增加[1]。大多数健康人原发感染HCMV后常无症状,但免疫力低下者如造血干细胞移植（HSCT）、艾滋病、实体器官移植等会出现HCMV原发感染或再激活,病死率较高。HSCT是治愈血液系统恶性肿瘤的有效方法,

关键词：人巨细胞病毒造血干细胞移植

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