检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：李霄金宁一孙丽丽李雪梅郑洪玲张珏军事医学科学院11所全军基因工程重点实验室

目的:构建表达新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)HN 基因的重组鸡痘病毒 vFVHN,探讨 vFVHN 对体外培养的人肝癌细胞 SMMC7721的抑制作用及其在小鼠荷肝癌模型体内的抑瘤效果。方法:以野生型鸡痘病毒(fowl poxvirus,FPV)282 E4株... 详细信息

目的:构建表达新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)HN 基因的重组鸡痘病毒 vFVHN,探讨 vFVHN 对体外培养的人肝癌细胞 SMMC7721的抑制作用及其在小鼠荷肝癌模型体内的抑瘤效果。方法:以野生型鸡痘病毒(fowl poxvirus,FPV)282 E4株为载体,构建表达新城疫病毒 HN 基因的重组鸡痘病毒 vFVHN。采用5-溴-2-脱氧尿苷(5-Bromo-2-deoxyribouridine,BrdU)加压法筛选重组体,并通过 RT-PCR 和 Western blot 等方法对其进行鉴定。采用噻唑蓝 (Methylthiazoletetrazolium,MTT)染色法检测 vFVHN 对人肝癌细胞 SMMC7721的杀伤率,并通过检测抑瘤率探讨其在 C57BL/6小鼠荷肝癌模型体内的抑瘤效果。结果:成功构建重组鸡痘病毒 vFVHN,其对 SMMC7721细胞的杀伤率为43.37%,对 C57BL/6小鼠肝癌肿瘤模型的抑瘤率为20.65%。结论:重组鸡痘病毒 vFVHN 可有效杀伤体外培养的人肝癌细胞 SMMC7721,并对 C57BL/6小鼠荷肝癌模型体内的实体肿瘤有一定抑制作用。

关键词：重组鸡痘病毒 HN 基因肝癌细胞 SMMC7721

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O型口蹄疫病毒O/LZ株拯救

O型口蹄疫病毒O/LZ株拯救

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：马鸣潇金宁一沈国顺刘慧娟霍晓伟金明兰郑敏鲁会军军事医学科学院11所全军基因工程重点实验室

本研究以本室构建的 O 型口蹄疫病毒 O/LZ 株全长 cDNA 为模板,使用 T7RNA 聚合酶系统在体外进行转录,得到病毒 RNA.用脂质体转染法将转录物 RNA 导入 BHK 细胞,可观察到典型的口蹄疫病毒致细胞病变效应.对收获的病毒分别用

关键词：口蹄疫病毒 RNA

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基因治疗用质粒DNA的制备工艺

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中国生物制品学杂志 2007年第6期20卷 450-453页

作者：李雪梅田明尧金宁一宋应今孙丽丽李霄郑洪玲吉林大学农学部长春130062 军事医学科学院全军基因工程重点实验室长春130062 吉林大学第二临床医院耳鼻咽喉科长春130041

目的探索基因治疗用质粒DNA的制备工艺。方法以CaCl2沉淀法去除大分子RNA,Q-Sepharose和SOURCE两步离子交换层析法去除染色体DNA、小分子RNA、蛋白质等杂质,并对各步骤样品进行检测。结果质粒pIRVP3HNIL18终产品的产量为1.638mg质粒DNA/... 详细信息

目的探索基因治疗用质粒DNA的制备工艺。方法以CaCl2沉淀法去除大分子RNA,Q-Sepharose和SOURCE两步离子交换层析法去除染色体DNA、小分子RNA、蛋白质等杂质,并对各步骤样品进行检测。结果质粒pIRVP3HNIL18终产品的产量为1.638mg质粒DNA/g细菌,纯度为1.839,相对回收率为12.55%,蛋白质含量为0.0028mg/ml,未检测到RNA和染色体DNA。结论此工艺可有效去除质粒DNA制备过程中产生的杂质,可应用于药剂水平质粒DNA的制备。

关键词：质粒基因治疗制备工艺

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共表达O型口蹄疫病毒3C、P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒免疫原性研究

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中国生物工程杂志 2007年第8期27卷 25-28页

作者：刘慧娟金宁一马鸣潇金明兰沈国顺霍晓伟鲁会军金扩世李旭计越中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室长春130062 吉林大学畜牧兽医学院长春130062

目的:对筛选到的一株共表达O型口蹄疫病毒3C基因、P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18进行免疫原性研究。方法:分别用重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18、rFPV-P1-2A-3C和对照组282E4株FPV、PBS对小鼠进行... 详细信息

目的:对筛选到的一株共表达O型口蹄疫病毒3C基因、P1-2A基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18进行免疫原性研究。方法:分别用重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18、rFPV-P1-2A-3C和对照组282E4株FPV、PBS对小鼠进行免疫接种,并检测各免疫组的T淋巴细胞亚类数量、CTL杀伤活性及抗体效价。结果:重组鸡痘病毒疫苗组免疫小鼠T淋巴细胞亚类数量,CTL杀伤活性和抗体效价均显著高于对照组,且重组鸡痘病毒rFPV-3C-P1-2A-IL-18的小鼠T淋巴细胞亚类数量和CTL特异性杀伤活性与rFPV-P1-2A-3C相比,差异显著。结论:为开发新型FMDV疫苗奠定了实验免疫基础。

关键词：口蹄疫病毒重组鸡痘病毒免疫原性

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重组鸡痘病毒对豚鼠的生物安全性

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中国生物制品学杂志 2007年第6期20卷 422-425页

作者：金明兰金宁一鲁会军马鸣潇郑敏刘慧娟李旭计越霍小伟唐树勋吉林大学畜牧兽医学院长春130062 军事医学科学院十一所全军基因工程重点实验室长春130062 吉林省通化市畜牧兽医总站通化134001

目的检测重组鸡痘病毒在妊娠豚鼠及其子代豚鼠体内的安全性。方法重组鸡痘病毒以正常剂量和超大剂量同时免疫妊娠豚鼠和子代豚鼠,通过临床观察、病理组织学、PCR等方法,检测重组鸡痘病毒对妊娠豚鼠的毒性和子代豚鼠生长的影响以及子代... 详细信息

目的检测重组鸡痘病毒在妊娠豚鼠及其子代豚鼠体内的安全性。方法重组鸡痘病毒以正常剂量和超大剂量同时免疫妊娠豚鼠和子代豚鼠,通过临床观察、病理组织学、PCR等方法,检测重组鸡痘病毒对妊娠豚鼠的毒性和子代豚鼠生长的影响以及子代豚鼠的病毒DNA残留。结果临床观察和病理组织学检测表明在整个实验期间,免疫重组鸡痘病毒的妊娠豚鼠精神状态、饮水、采食等临床表现一切正常,未表现出临床症状和不良反应,未造成早产、流产、死胎、弱胎;用正常和超大剂量免疫重组鸡痘病毒的子代豚鼠均未出现任何临床症状,内脏器官未见明显的病理变化,且未检测到病毒DNA。结论构建的重组鸡痘病毒生物安全性好,对妊娠豚鼠和子代豚鼠无安全威胁。

关键词：重组鸡痘病毒生物安全性妊娠豚鼠子代

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口蹄疫感染与免疫动物鉴别诊断方法的建立

口蹄疫感染与免疫动物鉴别诊断方法的建立

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：鲁会军金宁一韩松郑敏王凯贾雷立李昌解放军军事医学科学院11所全军基因工程重点实验室

构建重组杆状病毒的转座质粒 pFastBac-3AB,再将该重组质粒转化 DH10 Bac 感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组杆粒 Bacmid-3AB:将 Bacmid-3AB 转染 Sf9细胞,获得重组杆状病毒。用重组杆

关键词：重组杆状病毒表达蛋白鉴别诊断 ELISA

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猪繁殖与呼吸综合征病毒CC-1株全基因序列测定及全长cDNA克隆构建

猪繁殖与呼吸综合征病毒CC-1株全基因序列测定及全长cDNA克隆构建

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：李红文金宁一沈国顺全军基因工程重点实验室中国军事医学科学院

本研究利用 RT-PCR 方法扩增出覆盖 PRRSV 长春分离株(CC-1)全长基因组的6个片段,分别克隆入 pMD18-T 载体进行序列测定。结果显示 PRRSV CC-1株基因组除 poly(A)外全长15411bp(Genbank 登录号:EF153486)。序列分析显示

关键词：全基因序列猪繁殖与呼吸综合征病毒

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长春地区戊型肝炎病毒在动物群中的流行病学研究

长春地区戊型肝炎病毒在动物群中的流行病学研究

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：朱光泽刘铁梅孙中锋屈勇刚王铁峰金宁一中国军事医学科学院全军基因工程重点实验室

为探讨长春地区戊型肝炎病毒(HEV)在动物群中的感染情况及戊型肝炎病毒系统进化关系,应用抗-HEV 抗体试剂盒检测猪、牛、羊、鹿、鸡、马血清中的抗体;对部分血清用逆转录聚合酶链式反应的方法(RT-PCR)检测 HEV RNA,并对 PCR

关键词：戊型肝炎病毒长春地区抗体阳性动物群 HEV 流行病学研究

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DNA疫苗在寄生虫疾病防治中的应用

DNA疫苗在寄生虫疾病防治中的应用

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：申振维金宁一金洪涛李昌军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室

寄生虫所致疾病种类多、分布广、危害大。但是由于寄生虫本身以及生活史复杂,在宿主与寄生虫相互关系的进化过程中,寄生虫形成的免疫逃避以及对寄生虫生物学研究领域投入不足等原因,使得临床上很少有针对重要的寄生人体和动物的寄生虫... 详细信息

寄生虫所致疾病种类多、分布广、危害大。但是由于寄生虫本身以及生活史复杂,在宿主与寄生虫相互关系的进化过程中,寄生虫形成的免疫逃避以及对寄生虫生物学研究领域投入不足等原因,使得临床上很少有针对重要的寄生人体和动物的寄生虫的预防及治疗性疫苗。作为继减毒疫苗、基因工程疫苗之后的第三代疫苗,DNA疫苗大大推动了寄生虫疫苗的发展。DNA疫苗是在上个世纪90年代发展起来的,Wolff等偶然发现在小鼠肌肉组织内

关键词：疫苗接种利什曼原虫 CSP 寄生虫病寄生虫疾病弓形虫 DNA

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重组病毒载体癌症疫苗研究进展

重组病毒载体癌症疫苗研究进展

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：郑洪玲军事医学科学院军事兽医研究所全军基因工程重点实验室

迄今为止,癌症疫苗已在三期试验中显示出有效性。而且,单克隆抗体介导的治疗(如赫赛汀)为临床试验提供了证据,即靶向抗肿瘤相关抗原的免疫应答有治疗肿瘤的潜力。过去癌症疫苗试验的失败由多种因素造成,包括肿瘤抗原选择不恰当,使用未... 详细信息

迄今为止,癌症疫苗已在三期试验中显示出有效性。而且,单克隆抗体介导的治疗(如赫赛汀)为临床试验提供了证据,即靶向抗肿瘤相关抗原的免疫应答有治疗肿瘤的潜力。过去癌症疫苗试验的失败由多种因素造成,包括肿瘤抗原选择不恰当,使用未优化的抗原传递系统,疫苗免疫程序或患者人群选择不恰当等。这些因素中任何一个改变都有可能导致免疫

关键词：重组病毒载体痘病毒载体肿瘤相关抗原病毒载体疫苗免疫应答

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