检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2019年第5期39卷 931-935页

作者：王春张平平赵勇唐斌刘晓雷白雪李仕存刘明远王学林吉林大学动物医学学院人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所/病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 生物应急与临床POCT北京市重点实验室(BZ0329) 北京100071

基于上转发光免疫层析(UPT-LF)技术,旨在建立UPT-LF快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法。采用间接法制备UPT-LF试纸条,通过共价偶联使二抗山羊抗猪IgG和上转发光纳米颗粒(UCP)结合,并加入样品垫和被检血清结合,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白... 详细信息

基于上转发光免疫层析(UPT-LF)技术,旨在建立UPT-LF快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法。采用间接法制备UPT-LF试纸条,通过共价偶联使二抗山羊抗猪IgG和上转发光纳米颗粒(UCP)结合,并加入样品垫和被检血清结合,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因(WM5)表达的蛋白WM5为猪抗旋毛虫IgG特异性结合抗原,WM5(2 g/L)与兔抗山羊IgG(0.5 g/L)喷点于分析膜上作为UPT-LF试纸条检测带(T)与质控带(C),该试纸条命名为Tsp-UPT-LF。Tsp-UPT-LF通过对95份阴性血清检测,确定Tsp-UPT-LF的Cutoff值为0.099。Tsp-UPT-LF和ELISA分别对273份旋毛虫感染猪血清样本进行检测,总符合率为92.31%,一致性系数Kappa(K)值为0.837,表明两种方法具有高度一致性。Tsp-UPT-LF检测旋毛虫、猪囊虫、华支睾吸虫感染的猪血清Tsp-UPT-LF呈现对旋毛虫良好的特异性。Tsp-UPT-LF检测感染50 000条旋毛虫肌幼虫28 d猪血清为阳性,T/C值0.109,122 d阳性最强,T/C值为0.207,至425 d时阳性值有所下降,抗旋毛虫IgG阳性率为71.4%。本研究建立了基于UPT-LF技术快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法,为猪旋毛虫即时感染检测、确保食品安全提供了一种可参考的检测方法。

关键词：上转发光技术免疫层析旋毛虫即时检测食品安全

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microRNAs与流感病毒感染

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现代生物医学进展 2019年第5期19卷 965-968页

作者：张森户义李靖康晓平姜涛军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室病毒学专业实验室北京100071

MicroRNAs是一类数目庞大,而且可以广泛参与到生命活动各个进程的非编码RNA分子,在病毒感染宿主过程中存在着复杂的microRNAs与病毒的相互作用。流感病毒感染可以引起宿主microRNAs表达谱的明显变化,流感病毒能通过调控某些microRNAs的... 详细信息

MicroRNAs是一类数目庞大,而且可以广泛参与到生命活动各个进程的非编码RNA分子,在病毒感染宿主过程中存在着复杂的microRNAs与病毒的相互作用。流感病毒感染可以引起宿主microRNAs表达谱的明显变化,流感病毒能通过调控某些microRNAs的表达来实现免疫逃逸等增强其感染能力;同时,宿主也可以通过某些microRNAs的变化启动相应的抗流感病毒反应。本文主要针对流感病毒感染过程中宿主-病毒二者在microRNA水平的相互作用进行综述,以期更好的了解流感病毒的致病机制,为抗流感病毒的新药研制提供新的思路。

关键词：流感病毒 MicroRNAs 宿主细胞

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中国软蜱科:系统分类与图形检索

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第4期26卷 231-250页

作者：孙毅许荣满吴明宇军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071

中国的软蜱已记载2亚科4属14种,其中锐缘蜱亚科2属7种,钝缘蜱亚科2属7种,本文综合了最新的软蜱支序分类和分子系统学研究结果,对我国的软蜱科类群进行了系统分类厘定,并辅助可资鉴别分类的图形检索表,以期为蜱类及蜱传疾病监测与防治提... 详细信息

中国的软蜱已记载2亚科4属14种,其中锐缘蜱亚科2属7种,钝缘蜱亚科2属7种,本文综合了最新的软蜱支序分类和分子系统学研究结果,对我国的软蜱科类群进行了系统分类厘定,并辅助可资鉴别分类的图形检索表,以期为蜱类及蜱传疾病监测与防治提供技术基础。

关键词：软蜱科系统分类中国

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大气PM2.5对大鼠心肌细胞的毒性作用

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环境科学研究 2018年第9期31卷 1636-1644页

作者：焦周光胡凌飞李娜张柯温占波李劲松军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071 北京慧荣和科技有限公司北京101102

为评估大气PM_(2.5)及其不同组分对心肌细胞H9C2的毒性作用,探讨PM_(2.5)对心血管系统产生毒性作用的关键组分,将前期采集并制备的PM_(2.5)完全颗粒物、PM_(2.5)水溶性组分、PM_(2.5)脂溶性组分和PM_(2.5)单纯颗粒物以不同质量浓度对H9C... 详细信息

为评估大气PM_(2.5)及其不同组分对心肌细胞H9C2的毒性作用,探讨PM_(2.5)对心血管系统产生毒性作用的关键组分,将前期采集并制备的PM_(2.5)完全颗粒物、PM_(2.5)水溶性组分、PM_(2.5)脂溶性组分和PM_(2.5)单纯颗粒物以不同质量浓度对H9C2细胞染毒.用MTS法在染毒6、10、24、48、72 h后测定细胞活力;根据细胞活力测定结果,选用较低染毒浓度(10μg/m L),用相关试剂盒测定染毒24 h后胞内和上清液中LDH(乳酸脱氢酶)和SOD(超氧化物歧化酶)活力,ELISA及RT-q PCR法测定炎性因子IL-6和TNF-α表达量,AP位点计数法测定细胞DNA损伤情况.结果表明:颗粒物成分(PM_(2.5)完全颗粒物和PM_(2.5)单纯颗粒物)对H9C2细胞表现出强烈的生长抑制作用,50μg/m L及以上染毒浓度组在染毒时间≥24 h时细胞可能已经全部死亡,而可溶性成分(PM_(2.5)水溶性组分和PM_(2.5)脂溶性组分)对H9C2细胞生长表现为极弱或无生长抑制作用,仅400μg/m L的PM_(2.5)脂溶性组分始终对细胞生长表现出抑制作用;各组分样本都在一定程度上造成了H9C2细胞损伤,降低了胞内LDH和SOD活性;PM_(2.5)完全颗粒物和PM_(2.5)脂溶性组分在造成炎性损伤方面的作用较为明显.研究显示,颗粒物组分对H9C2细胞致死作用显著,相对而言,PM_(2.5)完全颗粒物表现出的毒性作用最强且最全面.

关键词： PM2.5 心肌细胞细胞活力炎性因子

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寨卡病毒可作为溶瘤病毒特异杀伤胶质瘤干细胞

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中国科学：生命科学 2018年第10期48卷 1126-1127页

作者：陈奇秦成峰军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室.北京100071

胶质母细胞瘤（glioblastoma）是一种恶性程度最高的原发性脑肿瘤．由于肿瘤生长快、侵袭性强，常规手术、放疗、化疗等治疗后复发率极高，预后差，绝大多数患者生存期中位数低于两年．胶质母细胞瘤的成因复杂，最新研究显示胶质瘤干细... 详细信息

胶质母细胞瘤（glioblastoma）是一种恶性程度最高的原发性脑肿瘤．由于肿瘤生长快、侵袭性强，常规手术、放疗、化疗等治疗后复发率极高，预后差，绝大多数患者生存期中位数低于两年．胶质母细胞瘤的成因复杂，最新研究显示胶质瘤干细胞（glioblastomastemcells，GSCsl可能在其中发挥了关键作用．胶质瘤干细胞是一群具备无限增殖、自我更新和多向分化等类干细胞潜能的细胞，不仅参与促进肿瘤血管生成，而且能够抵抗放化疗的杀瘤作用．以胶质瘤干细胞为靶标的新型疗法成为当前研究的热点之一．

关键词：干细胞胶质瘤病毒杀伤肿瘤血管生成肿瘤生长多向分化自我更新

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甲型流感病毒X31(H3N2)小鼠适应后毒力增强与HA及PB2突变相关

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病毒学报 2019年第6期35卷 855-863页

作者：鲁福娜王文玲张雅薇童贻刚刘科芳黄保英沈晓玲谭文杰内蒙古医科大学基础医学院微生物教研室呼和浩特010110 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫健委生物安全重点实验室北京102206 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 澳门大学健康研究院中国澳门特别行政区999078

流感小鼠适应毒株及感染模型是研究流感病毒致病机理、评价抗流感病毒药物和疫苗效果的重要工具。为建立甲型流感病毒X31(H3N2)的鼠肺适应毒株,并探讨其在小鼠适应过程中毒力增强的分子机制,本研究将X31在BALB/c小鼠肺组织中连续传代,... 详细信息

流感小鼠适应毒株及感染模型是研究流感病毒致病机理、评价抗流感病毒药物和疫苗效果的重要工具。为建立甲型流感病毒X31(H3N2)的鼠肺适应毒株,并探讨其在小鼠适应过程中毒力增强的分子机制,本研究将X31在BALB/c小鼠肺组织中连续传代,通过观察病毒滴度测定、感染小鼠症状变化、体重改变和致死力等指标,发现X31经过鼠肺连续传代10次以后,病毒毒力逐渐增强,与原代病毒相比,鼠肺中病毒滴度提高10倍,半数致死量(50%lethal dose,LD50)提高大于1 000倍。确定获得高致病力的鼠肺适应毒株(Mouse adapted X31,X31MA);对X31MA毒株全基因组测序发现,血凝素(Hemagglutinin,HA)基因出现3个有义突变(P221H、V309I、K411T),聚合酶碱性蛋白2(Basic protein 2,PB2)基因出现1个有义突变(M483T)。结果表明,通过在小鼠肺组织中连续传代X31(H3N2)致病力增强,其HA和PB2蛋白中四个适应性突变位点可能与流感病毒X31MA毒力增加相关。本研究为流感疫苗评价及致病机制研究提供了重要技术支持。

关键词：甲型流感病毒流感病毒重配株X31(H3N2) 鼠肺适应突变位点致病力

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LAMP技术在感染乙脑病毒致倦库蚊混合样本检测中的应用

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第1期26卷 36-40页

作者：郭晓霞高剑李春晓邢丹董言德赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071

为建立媒介蚊虫自然感染种群样本携带病原体快速灵敏的检测技术,本研究将实验室经口感染乙脑病毒的致倦库蚊阳性样品和未感染乙脑病毒的阴性样品按一定比例混合成混合样本,分别采用环介导等温扩增技术(Loop Mediated Isothermal Amplifi... 详细信息

为建立媒介蚊虫自然感染种群样本携带病原体快速灵敏的检测技术,本研究将实验室经口感染乙脑病毒的致倦库蚊阳性样品和未感染乙脑病毒的阴性样品按一定比例混合成混合样本,分别采用环介导等温扩增技术(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)和实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time Fluorescent Quantitative PCR,qPCR)检测方法,对感染乙脑病毒的致倦库蚊混合样本进行检测。结果显示:当阳性样本在混合样本中所占比例为0.01%时,LAMP仍然可检测到病原体;定量PCR的最低检出比例是阳性样本在混合样本中所占0.14%以上。通过进一步优化反应体系各组分的浓度、反应时间和温度,建立了灵敏性高的LAMP扩增方法。

关键词： LAMP 乙脑病毒混合样本

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基于CRISPR/Cas9技术的miR-374a低表达细胞系的构建及鉴定

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蚌埠医学院学报 2019年第5期44卷 561-565页

作者：谢柱李崇慧方军陈佳唯李浩寇志华李军锋周育森军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所国家病原微生物生物安全重点实验室北京100071 蚌埠医学院生命科学学院安徽蚌埠233030

目的:运用CRISPR/Cas9技术构建miR-374a低表达细胞系。方法:设计针对miR-374a成熟体gRNA,合成DNA,插入pSpCas9(BB)-2A-Puro,将鉴定正确的载体转染入肺癌细胞系A549细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的细胞;PCR方法扩增,序列测定分析细胞基因组... 详细信息

目的:运用CRISPR/Cas9技术构建miR-374a低表达细胞系。方法:设计针对miR-374a成熟体gRNA,合成DNA,插入pSpCas9(BB)-2A-Puro,将鉴定正确的载体转染入肺癌细胞系A549细胞,使用嘌呤霉素筛选转染的细胞;PCR方法扩增,序列测定分析细胞基因组中靶位点区域序列;定量PCR方法检测转染细胞中miR-374a及其靶基因TGFA的表达情况;细胞增殖实验检测miR-374a基因编辑对细胞生长情况的影响。结果:构建了靶向miR-374a成熟体基因序列的基因编辑载体,转染细胞经过加压筛选,序列分析结果提示靶向位点的基因发生了缺失或插入突变;定量PCR结果显示,转染基因编辑载体的细胞miR-374a表达水平较对照细胞明显下降(P<0.01),而靶基因TGFA表达则明显上升(P<0.05);细胞增殖实验显示miR-374a低表达的细胞增殖能力发生了明显改变(P<0.05~P<0.01)。结论:成功构建了miR-374a低表达细胞系,为后续研究该分子的功能提供了基础。

关键词：微小RNA-374a 转化生长因子 CRISPR/CAS9技术细胞增殖

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淡色库蚊中溴氰菊酯和生物丙烯菊酯抗性发展与击倒抗性基因频率之间的关系（英文）

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第3期26卷 151-157页

作者：宋锋林李春晓董言德赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071 大连海关辽宁大连116001

使用溴氰菊酯和生物丙烯菊酯对采自北京的淡色库蚊蚊株进行抗药性筛选,筛选时,4龄幼虫被置于LC 50浓度值的水体中饲养。经过7代的不间断筛选,蚊虫对溴氰菊酯和生物丙烯菊酯的抗性倍数分别上升了12.9倍和4.8倍,对应敏感株,抗性倍数分别为... 详细信息

使用溴氰菊酯和生物丙烯菊酯对采自北京的淡色库蚊蚊株进行抗药性筛选,筛选时,4龄幼虫被置于LC 50浓度值的水体中饲养。经过7代的不间断筛选,蚊虫对溴氰菊酯和生物丙烯菊酯的抗性倍数分别上升了12.9倍和4.8倍,对应敏感株,抗性倍数分别为217.8倍和41.6倍。PCR检测结果显示,kdr抗性基因的频率在逐代上升。F 7代时,溴氰菊酯筛选株和生物丙烯菊酯筛选株的kdr抗性基因频率已分别上升至98.96%和97.87%。结果表明,Phe1014的抗性纯合子频率和抗性杂合子频率均与LC 50值之间具有显著相关性。本文证明了高浓度的拟除虫菊酯杀虫剂筛选会使Phe1014突变频率快速的上升。

关键词：淡色库蚊溴氰菊酯生物丙烯菊酯杀虫剂抗药性击倒抗性

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云南省边境地区卵形硬蜱中中华基因型伯氏疏螺旋体的检出和鉴定

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中国媒介生物学及控制杂志 2019年第5期30卷 519-523页

作者：段兴德何志海高子厚蒋宝贵龚正达张云邵宗体江佳富孙毅刘洪波姚明国王帆杜春红云南省地方病防治所医学动物昆虫防制科云南大理671000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对云南省耿马傣族佤族自治县(耿马县)采集的蜱进行伯氏疏螺旋体分子生物学检测,为当地莱姆病的调查提供参考。方法对2016年4月在云南省耿马县采集的游离蜱单只进行DNA提取后,采用巢式PCR扩增伯氏疏螺旋体5S^23S rRNA间隔区作为初筛... 详细信息

目的对云南省耿马傣族佤族自治县(耿马县)采集的蜱进行伯氏疏螺旋体分子生物学检测,为当地莱姆病的调查提供参考。方法对2016年4月在云南省耿马县采集的游离蜱单只进行DNA提取后,采用巢式PCR扩增伯氏疏螺旋体5S^23S rRNA间隔区作为初筛实验,阳性者进一步检测16S rRNA和FLA鞭毛蛋白基因确证。结果 3种蜱共94只,检出阳性14只,阳性率为14.89%。阳性蜱均为卵形硬蜱,不同性别间差异无统计学意义(χ~2=0.746,P=0.388)。锐跗硬蜱和金泽革蜱均未检出阳性。检出的伯氏疏螺旋体3个目的基因片段序列均与中华基因型伯氏疏螺旋体同源性达98%~99%,构建的系统发育树显示,与我国四川、安徽省检出的中华基因型伯氏疏螺旋体聚在一个分支上;与日本疏螺旋体接近,而阿弗西尼疏螺旋体、狭义伯氏疏螺旋体、法雷斯疏螺旋体等基因型聚在外围。结论耿马县采集的卵形硬蜱携带中华基因型伯氏疏螺旋体,其宿主和媒介的种类、分布及其对人的致病性等,值得进一步调查研究。

关键词：卵形硬蜱伯氏疏螺旋体中华基因型伯氏疏螺旋体

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