检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2020年第8期36卷 678-684页

作者：姚明国江佳富高子厚贾娜汤丽何志海张青张云王帆杜春红云南省地方病防治所大理671000 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的了解云南省西北部地区家畜无形体感染状况,为人无形体病的防控提供科学依据。方法在云南省西北部地区15个县市采集部分家畜血液样本进行DNA提取,PCR扩增无形体16S rRNA基因片段;测定扩得基因片段DNA序列并对其做同源性比对,以确定... 详细信息

目的了解云南省西北部地区家畜无形体感染状况,为人无形体病的防控提供科学依据。方法在云南省西北部地区15个县市采集部分家畜血液样本进行DNA提取,PCR扩增无形体16S rRNA基因片段;测定扩得基因片段DNA序列并对其做同源性比对,以确定无形体种类。结果共采集1791头牛、羊、犬、马、驴的血样,PCR扩增阳性503份,其中牛、羊和犬的阳性率分别为41.08%(228/555)、38.10%(240/630)、6.29%(35/556)。测定PCR扩增16S rRNA基因片段序列,序列同源性分析显示73株序列(14.51%)属嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum),226株序列(44.93%)属绵羊无形体(***),137株序列(27.24%)属边缘无形体(***),48株序列(9.54%)属血小板无形体(***),16株序列(3.18%)属牛无形体(***),3株序列(0.60%)属山羊无形体(***)。其中牛样本检出6种无形体,以边缘无形体为主;羊样本检出5种无形体,以绵羊无形体为主,未检测到山羊无形体;犬样本仅检出嗜吞噬细胞无形体。在15个县市中有12个县市的家畜样本检出无形体基因,盈江县阳性率最高(95.65%),主要是边缘无形体。对人致病的嗜吞噬细胞无形体基因分别从牛(30份)、羊(8份)、犬(35份)样本检出,对人致病的山羊无形体从3份牛样本检出,这2种人兽共患病原体感染的家畜主要分布于滇西北的德钦和香格里拉地区。结论云南省西北部地区部分县(市)无形体感染的家畜主要是牛、羊,其次是犬,无形体种类丰富,需加强当地人无形体病的防控。

关键词：云南省西北部地区家畜无形体 16S rRNA基因

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两个来自非脱羧勒克菌的MDR质粒耐药机制研究

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军事医学 2021年第4期45卷 256-261,271页

作者：陈方舟蒋晓圆罗新华殷喆王岩周冬生赵月峨吴家红贵州医科大学基础医学院现代病原生物学特色重点实验室贵阳550025 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探究2个来自非脱羧勒克菌的多药耐药(MDR)质粒p707804-CTXM和pP12375-CTXM的耐药机制。方法采用16S rDNA基因扩增初步鉴定菌种,得到测序数据后进行平均核苷酸一致性(ANI)比对最终核定菌种;全自动细菌鉴定及药敏分析系统检测细菌的MI... 详细信息

目的探究2个来自非脱羧勒克菌的多药耐药(MDR)质粒p707804-CTXM和pP12375-CTXM的耐药机制。方法采用16S rDNA基因扩增初步鉴定菌种,得到测序数据后进行平均核苷酸一致性(ANI)比对最终核定菌种;全自动细菌鉴定及药敏分析系统检测细菌的MIC值;随后进行全基因组测序,获得细菌的全基因组序列,通过RAST、BLASTP/BLASTN、ResFinder和ISfinder等进行精细注释及比较基因组学分析确定耐药基因所在基因环境,阐明耐药移动元件的进化与传播历程。结果非脱羧勒克菌150707804和P12375分别携带质粒p707804-CTXM和pP12375-CTXM,均编码超广谱β-内酰胺酶(ESBL)。这两个质粒均只包含一个MDR区,p707804-CTXM含有β-内酰胺类、氨基糖苷类、氯霉素类、利福平类和磺胺类耐药基因,pP12375-CTXM含有除利福平类以外的上述所有耐药基因。p707804-CTXM的MDR区为新型转座子Tn6810,为Tn1696衍生物,由新型整合子In1684插入至Tn1696骨架而产生。blaCTX-M-3位于ISEcp1介导的转座元件Tn6502(ISEcp1-blaCTX-M-3-orf4 77)中;pP12375-CTXM的MDR区插入在orf531中,由Tn6322、ISKpn25、IS1R、In609、IS26和ΔISPa38构成,blaCTX-M-9由ISCR介导,位于In609的3’-CS下游。结论 p707804-CTXM和pP12375-CTXM均携带多种耐药基因,介导相应菌株的多药耐药。其中blaCTX-M由ISEcp1-blaCTX-M-orf477或ISCR介导并插入至整合子或转座子内。该研究中,p707804-CTXM是非脱羧勒克菌中携带blaCTX-M-3的首个测序质粒。

关键词：非脱羧勒克菌多药耐药移动元件超广谱β-内酰胺酶 blaCTX-M

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蚊虫驱避剂筛选用嗅觉风洞的研制与性能验证

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军事医学 2021年第3期45卷 218-222,233页

作者：谷真毓高赫廷杨巧江邢丹赵彤言赵腾李春晓安徽医科大学合肥230000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071

目的研制蚊虫嗅觉风洞并通过实验验证其性能,用于驱避剂筛选和评价。方法采用低成本、模块化的方案,设计并研制一套蚊虫嗅觉风洞,通过不同温度、湿度、风速等环境因素的调试,确定实验关键因素;通过埃及伊蚊、致倦库蚊对4种商用驱避剂涂... 详细信息

目的研制蚊虫嗅觉风洞并通过实验验证其性能,用于驱避剂筛选和评价。方法采用低成本、模块化的方案,设计并研制一套蚊虫嗅觉风洞,通过不同温度、湿度、风速等环境因素的调试,确定实验关键因素;通过埃及伊蚊、致倦库蚊对4种商用驱避剂涂抹人手臂和小鼠的嗅觉行为测试,验证该嗅觉风洞应用于蚊虫驱避剂筛选的可行性。结果研制的蚊虫嗅觉风洞主要分为气路控制系统和行为筛选系统两部分;不同温度、湿度、风速等环境因素测试结果显示,温度(30±2)℃、湿度(40±3)%、风速0.2 m/s为嗅觉风洞对蚊虫嗅觉行为测试的最佳因素;未使用驱避剂时,风洞内人手臂对埃及伊蚊的引诱率为(44.1±23.1)%,小鼠对致倦库蚊的引诱率为(35.6±5.1)%,均明显高于空白对照(P<0.05)。4种商业化驱避剂对埃及伊蚊的引诱率分别为(4.4±0.4)%、(2.7±0.2)%、(3.6±1.2)%和(3.6±1.2)%,对致倦库蚊的引诱率分别为0%、0%、(3.8±3.3)%和(3.8±1.6)%,与对照组相比,使用驱避剂后人手臂和小鼠对蚊虫的引诱能力明显降低,均存在显著性差异(P<0.05)。结论研制出一套蚊虫嗅觉风洞,通过2种蚊虫对现有商业化驱避剂的嗅觉行为测试,验证了该嗅觉风洞的性能,可用于蚊虫驱避剂的筛选和评价。

关键词：蚊虫嗅觉风洞驱避剂筛选

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蜱传脑炎病毒跨过血脑屏障的体外实验

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微生物学报 2019年第3期59卷 578-586页

作者：康晓平李裕昌吴晓燕魏婧靖郝淮杰姜涛军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

【目的】构建蜱传脑炎病毒(Tick-borne encephalitis virus,TBEV)跨血脑屏障研究的体外细胞模型,研究2种不同细胞的TBEV培养物在病毒跨过血脑屏障中的主要差异,从而为进一步TBEV跨血脑屏障的分子机制研究奠定基础。【方法】利用人脑微... 详细信息

【目的】构建蜱传脑炎病毒(Tick-borne encephalitis virus,TBEV)跨血脑屏障研究的体外细胞模型,研究2种不同细胞的TBEV培养物在病毒跨过血脑屏障中的主要差异,从而为进一步TBEV跨血脑屏障的分子机制研究奠定基础。【方法】利用人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular endothelial cells,hCMEC/D3)构建体外血脑屏障的细胞模型。用BHK-21细胞中培养的蜱传脑炎病毒感染人脑微血管内皮细胞,检测TBEV在hCMEC/D3中的复制增殖情况;将TBEV加入体外血脑屏障模型的上层微孔中,用实时荧光定量PCR和噬斑测定的方法检测跨过血脑屏障的病毒量;将感染TBEV的人单核细胞加入血脑屏障模型的上层微孔中,观察渗漏进下层孔中的淋巴细胞,并用实时荧光定量PCR和噬斑测定的方法检测跨过血脑屏障的病毒量。利用伊文思蓝标记的白蛋白确定血脑屏障细胞的渗透率变化。【结果】实时荧光定量PCR和病毒滴度测定结果表明,TBEV不能在hCMEC/D3细胞中复制增殖,也不能直接跨过血脑屏障;然而,人单核细胞THP-1感染TBEV后,尽管单核细胞不能直接携带TBEV跨过血脑屏障,但THP-1中产生的病毒却能跨过血脑屏障模型进入下层孔中,并引起血脑屏障渗透率的增高。【结论】单核细胞有助于TBEV跨过血脑屏障。

关键词：蜱传脑炎病毒血脑屏障单核细胞

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基于SARIMA模型的南京地区蚊虫侵害的预测研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2022年第1期42卷 108-111页

作者：孙燕群张守刚陆墨原张艳潘衍宇王冲吴起新姚美雪李成国南京市疾病预防控制中心南京医科大学附属南京疾病预防控制中心江苏南京210003 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 东南大学公共卫生学院江苏南京210009 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206 徐州医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系江苏徐州221004

目的:基于南京地区蚊虫侵害密度,建立季节性差分自回归移动平均模型预测方法,为进一步防控蚊媒病和开展爱国卫生运动提供新的思路和方法。方法:应用季节性差分自回归移动平均模型对2019年蚊虫密度进行预测。结果:拟合后的预测模型为ARIM... 详细信息

目的:基于南京地区蚊虫侵害密度,建立季节性差分自回归移动平均模型预测方法,为进一步防控蚊媒病和开展爱国卫生运动提供新的思路和方法。方法:应用季节性差分自回归移动平均模型对2019年蚊虫密度进行预测。结果:拟合后的预测模型为ARIMA(2,1,0)(1,1,0)_(12),模型残差序列为白噪声,模型预测拟合后R^(2)=0.907。结论:模型预测的拟合效果较好,说明ARIMA模型适用于开展蚊虫侵害预测研究。

关键词：蚊虫侵害季节性差分自回归移动平均预测

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腺病毒IgM抗体AlphaLISA快速检测方法

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军事医学 2021年第2期45卷 119-123页

作者：陈萱荆红波张力文郑玉玲律清宇姜永强军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 北京市顺义区疾病预防控制中心北京101300

目的建立一种腺病毒IgM抗体的均相光激化学发光免疫快速检测方法(AlphaLISA)。方法通过筛选小鼠抗人IgM单克隆抗体标记受体微球、链霉亲和素偶联供体微球和生物素化腺病毒抗原的最适比例,构建腺病毒IgM抗体均相AlphaLISA快速检测体系;... 详细信息

目的建立一种腺病毒IgM抗体的均相光激化学发光免疫快速检测方法(AlphaLISA)。方法通过筛选小鼠抗人IgM单克隆抗体标记受体微球、链霉亲和素偶联供体微球和生物素化腺病毒抗原的最适比例,构建腺病毒IgM抗体均相AlphaLISA快速检测体系;采用呼吸道感染样品对该检测体系进行评价,并与间接免疫荧光方法比较。结果与结论该法重复性较好,批内和批间变异系数均小于5%,与间接免疫荧光方法相比总符合率为87.21%,且不与其他常见呼吸道病原体的IgM抗体发生交叉反应。该法用于腺病毒IgM抗体的快速检测,可为早期确诊腺病毒感染提供可行方案。

关键词：均相光激化学发光免疫分析技术人腺病毒 IgM抗体

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1994年印度苏拉特鼠疫暴发的回顾性基因溯源研究

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军事医学 2021年第10期45卷 757-761,765页

作者：秦婧靓杨超郑宏源张湘莉兰武雅蓉崔玉军杨瑞馥赵光宇宋亚军安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 深圳市疾病预防控制中心深圳518055

目的明确1994年苏拉特鼠疫疫情中分离的鼠疫耶尔森菌系统发育地位及基因组特征,为进一步研究此次疫情暴发的起因提供线索。方法利用比较基因组学方法,将已发表的两株苏拉特暴发株基因组与366个鼠疫全球代表菌株的基因组进行变异鉴定和... 详细信息

目的明确1994年苏拉特鼠疫疫情中分离的鼠疫耶尔森菌系统发育地位及基因组特征,为进一步研究此次疫情暴发的起因提供线索。方法利用比较基因组学方法,将已发表的两株苏拉特暴发株基因组与366个鼠疫全球代表菌株的基因组进行变异鉴定和系统发育重建,并对苏拉特菌株的基因组特征进行解析。结果苏拉特鼠疫菌很可能是20世纪广泛使用的鼠疫减毒活疫苗株EV76的后代。但两株苏拉特基因组中均存在长度为102 kb的毒力岛(称作pgm位点),该毒力岛在其他已知的EV76疫苗及实验室保藏株中缺失。结论引发1994年苏拉特疫情的菌株属于鼠疫菌EV76种系,其引发疫情的能力可能与携带pgm位点有关。

关键词：苏拉特鼠疫鼠疫耶尔森菌减毒活疫苗系统发育学比较基因组学

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1996-2014年中国HIV-1毒株CRF01_AE亚型传播簇和传播网络研究

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中华流行病学杂志 2019年第1期40卷 84-88页

作者：王晓林贾磊李韩平刘永健韩婧婉李天一李敬云李林军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的了解我国HIV-1毒株CRF01_AE亚型在省内和省际的传播规律和风险因素,为实施精准干预提供参考依据。方法收集我国19个省份1996-2014年已有的2094条CRF01_AEpol区基因序列,利用PhyML3.0软件构建系统进化树,确定传播簇,利用Cytoscape3.... 详细信息

目的了解我国HIV-1毒株CRF01_AE亚型在省内和省际的传播规律和风险因素,为实施精准干预提供参考依据。方法收集我国19个省份1996-2014年已有的2094条CRF01_AEpol区基因序列,利用PhyML3.0软件构建系统进化树,确定传播簇,利用Cytoscape3.6.0软件构建传播网络,结合背景信息分析传播风险。结果发现82个传播簇,包含255条序列(12.18%,255/2094),省内传播簇数量和包含序列数(61个,173条)明显多于跨省传播簇(21个,82条)。传播簇中男男性传播人群的成簇比例随时间上升趋势明显,由1996-2008年的2.41%(2/83)上升为2013-2014年的23.61%(72/305)(χ^2=27.800,df=1,P=0.000)。跨省传播簇的男男性传播人群比例明显高于省内传播簇,由1996-2008年的0.67%(2/297)上升为2013-2014年的6.36%(30/472),具有随时间的上升趋势(χ^2=20.276,df=1,P=0.000)。跨省传播簇中男男性传播的比例(86.59%,71/82)明显高于省内传播簇(56.65%,98/173),差异有统计学意义(χ^2=22.792,P=0.000)。含2种及以上传播途径的跨省传播簇的比例(33.33%,7/21)明显高于省内传播簇(13.11%,8/61),差异有统计学意义(χ^2=4.273,P=0.039)。传播网络分析发现,跨省传播簇内高传播风险人群比例(51.22%,42/82)明显高于省内传播簇(26.59%,46/173),差异有统计学意义(χ^2=14.932,P=0.000)。跨省传播簇以男男性传播人群为主。结论我国HIV-1毒株CRF01_AE亚型存在复杂的传播网络,跨省传播簇快速增长,其中高风险传播者对HIV-1亚型的大范围传播起到重要作用,应深入进行传播网络研究以指导精准干预。

关键词：艾滋病病毒 CRF01_AE亚型传播簇传播网络

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副溶血弧菌密度感应系统调控exsA和exsD的分子机制

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军事医学 2020年第10期44卷 740-745页

作者：仇越杜天钰王迎王霄杨文慧胡凌飞殷喆周冬生王丽张义全江苏大学医学院江苏镇江212013 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 河南大学第一附属医院河南开封475000

目的研究副溶血弧菌密度感应系统核心调控子AphA和OpaR对exsA和exsD的调控机制。方法提取野生株(WT)和调控子基因突变株(ΔaphA或ΔopaR)总RNA,采用引物延伸实验确定exsA和exsD的转录起始位点,并根据WT和突变株中引物延伸产物的丰度,判... 详细信息

目的研究副溶血弧菌密度感应系统核心调控子AphA和OpaR对exsA和exsD的调控机制。方法提取野生株(WT)和调控子基因突变株(ΔaphA或ΔopaR)总RNA,采用引物延伸实验确定exsA和exsD的转录起始位点,并根据WT和突变株中引物延伸产物的丰度,判定AphA和OpaR对exsA和exsD的调控关系;将exsA和exsD的启动子区DNA序列克隆入pHRP309质粒无启动子区的β-半乳糖苷酶基因的上游,构建重组质粒,并将其分别转入WT、ΔaphA和ΔopaR中得到LacZ菌株,用β-半乳糖苷酶检测试剂盒检测并比较各LacZ菌株中β-半乳糖苷酶活性的差异来判断AphA和OpaR对exsA和exsD的调控关系;PCR扩增exsA和exsD的上游调控序列,并表达纯化His-AphA和His-OpaR重组蛋白,利用凝胶阻滞实验(EMSA)探究重组蛋白是否可结合到exsA和exsD的上游调控序列上,并采用DNase I足迹实验鉴定具体的结合位点。结果引物延伸实验结果显示,exsA和exsD各有一个转录起始位点,分别为C(-440)和C(-105)(翻译起始位点为+1),且在低密度生长条件下,AphA可激活它们的转录活性,而在高密度生长条件下,OpaR抑制它们的转录活性,随后的LacZ报告基因融合实验进一步确证了这种调控关系。体外的EMSA和DNaseⅠ足迹实验结果表明,His-AphA和His-OpaR均不能与exsA和exsD启动子DNA序列结合。结论低密度生长时,AphA间接激活exsA和exsD的转录;高密度生长时,OpaR间接抑制exsA和exsD的转录。

关键词：副溶血弧菌密度感应系统 AphA OpaR exsA exsD

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不同蜱种E3泛素连接酶多态性分析

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寄生虫与医学昆虫学报 2021年第3期28卷 177-183页

作者：秦通邢丹张美娜施明杰孙毅蒋宝贵军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室北京100071 中国人民解放军91638部队卫生所北京102202

E3泛素连接酶通过蛋白修饰等泛素化过程在病原体与媒介、宿主互作中发挥着关键作用,而蜱类体内E3泛素连接酶及其功能还未明确,本研究利用高通量测序手段获得了森林革蜱、嗜群血蜱E3泛素连接酶CDS,并通过基因组生物信息学检索获得了长角... 详细信息

E3泛素连接酶通过蛋白修饰等泛素化过程在病原体与媒介、宿主互作中发挥着关键作用,而蜱类体内E3泛素连接酶及其功能还未明确,本研究利用高通量测序手段获得了森林革蜱、嗜群血蜱E3泛素连接酶CDS,并通过基因组生物信息学检索获得了长角血蜱、全沟硬蜱和亚洲璃眼蜱E3泛素连接酶CDS。结果发现,森林革蜱和全沟硬蜱的E3泛素连接酶同属于SH3RF3型;而长角血蜱、嗜群血蜱E3泛素连接酶属于SH3RF2型,亚洲璃眼蜱的E3泛素连接酶介于两者之间可能为中间类型。结果表明,不同蜱类的E3泛素连接酶随系统发育呈现出一定的演化趋势和多态性特征,E3泛素连接酶的多样性及表达情况可能是影响蜱类媒介效能的关键因素之一。

关键词： E3泛素连接酶蜱多态性高通量测序

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