检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学 2018年第1期42卷 53-56页

作者：李倩刘鹏张彦张超黄文华郑玉玲王洪权姜永强军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的应用Ampliseq技术,建立可同时检测金黄色葡萄球菌(***)、表皮葡萄球菌(***)、肺炎克雷伯菌(***)、单核细胞增生李斯特菌(***)4种常见血流感染病原体的目标片段特异性富集结合二代测序的方法,为准确、快速检测血流感染提供有效的依... 详细信息

目的应用Ampliseq技术,建立可同时检测金黄色葡萄球菌(***)、表皮葡萄球菌(***)、肺炎克雷伯菌(***)、单核细胞增生李斯特菌(***)4种常见血流感染病原体的目标片段特异性富集结合二代测序的方法,为准确、快速检测血流感染提供有效的依据。方法构建模拟临床样本评价该法的最低检出限(LOD),与实际掺入菌量比较,评价其灵敏度和特异性。结果与结论 Ampliseq法的灵敏度为95.38%,特异性为95.45%,Kappa值为0.839~1.000,LOD均可达到101数量级CFU/ml。该法可在15 h内在同一反应体系内快速检测4种常见血流感染病原体,灵敏度和特异性均较好。

关键词：血流感染 Ampliseq 二代测序目标序列富集

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田鼠型鼠疫菌血液存活能力的改变对豚鼠毒力的影响

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军事医学 2018年第7期42卷 545-549页

作者：纪宇欣周亚洲李璐杨瑞馥王效义军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因。方法通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血... 详细信息

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因。方法通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血清共孵育,分别测定了鼠疫菌在活性血清和补体失活血清中的存活能力。结果田鼠型鼠疫菌在小鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力明显高于在豚鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力。在小鼠和豚鼠血清中鼠疫菌存活能力明显高于在两种动物补体灭活血清中的存活能力。结论布氏田鼠型鼠疫菌在豚鼠血液中的存活能力下降导致了其对豚鼠低毒。在同一种动物血清中,灭活补体不仅不能使鼠疫菌血清存活能力提高反而使血清存活能力降低。

关键词：布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌小鼠豚鼠血清补体

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上海口岸截获的粉蝇属DNA条形码鉴定及系统发育研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第1期26卷 41-46页

作者：杜鹃邓耀华张子龙赵彤言李深伟田桢干上海国际旅行卫生保健中心上海200335 上海浦东国际机场海关上海201202 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

使用传统形态学分类方法进行干制标本的物种鉴定通常比较困难。本文按照《国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定操作规程》对上海口岸截获的粉蝇属干制标本进行DNA条形码研究。经BOLD System v4比对,结果显示所得序列分别属于5个种:粗野粉... 详细信息

使用传统形态学分类方法进行干制标本的物种鉴定通常比较困难。本文按照《国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定操作规程》对上海口岸截获的粉蝇属干制标本进行DNA条形码研究。经BOLD System v4比对,结果显示所得序列分别属于5个种:粗野粉蝇Pollenia rudis、伪粗野粉蝇***、游荡粉蝇***、匈牙利粉蝇***和Pollenia sp.。引入1条COⅠ序列作为外群对全部序列构建系统发育树(NJ树),结果显示不同物种各自聚为一支。因此,COⅠ条形码技术可以弥补传统形态学分类方法的不足,提高蝇类干制标本鉴定的成功率。

关键词： COⅠ基因 DNA条形码粉蝇属国境口岸

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寨卡病毒蛋白结构与功能研究进展

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微生物学通报 2018年第8期45卷 1787-1793页

作者：程梦丽李晓峰秦成峰安徽医科大学安徽合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

2015年以来,南美暴发大规模寨卡疫情,因其与新生儿小头症等严重神经发育疾病密切相关,被世界卫生组织列为国际关注的突发公共卫生事件。与其他虫媒黄病毒类似,寨卡病毒为单股正链RNA病毒,其基因组编码的3种结构蛋白构成病毒颗粒,7种非... 详细信息

2015年以来,南美暴发大规模寨卡疫情,因其与新生儿小头症等严重神经发育疾病密切相关,被世界卫生组织列为国际关注的突发公共卫生事件。与其他虫媒黄病毒类似,寨卡病毒为单股正链RNA病毒,其基因组编码的3种结构蛋白构成病毒颗粒,7种非结构蛋白参与病毒复制生活周期的调控。在全球科学家的共同努力下,寨卡病毒蛋白结构与功能的研究取得了突破性进展,极大地促进研究者对病毒复制与致病机制的认识,也为疫苗和药物研发提供了重要科学依据和潜在靶标。本文将对寨卡病毒蛋白的结构与功能的最新研究进展作一综述,并讨论当前面临的挑战和机遇。

关键词：寨卡病毒结构蛋白非结构蛋白结构

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贝氏柯克斯体九里株Ⅱ相突变体的克隆与鉴定

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生物技术通讯 2019年第2期30卷 170-174页

作者：何泽民孙志会于永慧罗声栋王益清王景林姜永强宋立华病原微生物生物安全国家重点实验室军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 解放军总医院第五医学中心临床研究管理中心北京100039

目的:克隆分离国内贝氏柯克斯体九里株Ⅱ相突变体,并利用基因组测序方法进行鉴定,为贝氏柯克斯体研究提供参考依据。方法:用半固体平板法克隆分离贝氏柯克斯体,对随机选择的克隆株CB01进行全基因组测序分析,将测序结果与国外贝氏柯克斯... 详细信息

目的:克隆分离国内贝氏柯克斯体九里株Ⅱ相突变体,并利用基因组测序方法进行鉴定,为贝氏柯克斯体研究提供参考依据。方法:用半固体平板法克隆分离贝氏柯克斯体,对随机选择的克隆株CB01进行全基因组测序分析,将测序结果与国外贝氏柯克斯体不同克隆株的基因组进行比较分析。结果:CB01的基因组全长2.024 Mb,包含1个1.987 Mb的环状染色体和1个37.321 kb的质粒。与九里株Ⅰ相菌(RSA 493克隆)基因组相比,CB01多出5个重复序列,有1个25 997 bp的删除区,23个单核苷酸多态性位点(SNP)差异。与九里株Ⅱ相菌(RSA 439克隆)基因组相比,CB01同样多出5个重复序列,但仅有6个SNP差异。CB01与RSA 439的CBU_0533基因序列完全相同,可解释CB01缺失O抗原从而成为Ⅱ相菌。结论:贝氏柯克斯体九里株Ⅱ相菌克隆CB01与国外Ⅱ相菌RSA 439高度同源,CB01可用做国内贝氏柯克斯体研究用参考菌株。

关键词：贝氏柯克斯体 Q热全基因组测序适应性变异

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加巴喷丁体内外抗RSV感染的作用

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免疫学杂志 2018年第5期34卷 378-384页

作者：时艳婷谷宏婧杨晓岚段跃强赵忠鹏周娅杨鹏辉王希良宁夏医科大学基础医学院银川750004 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所/病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨加巴喷丁对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的抗病毒作用。方法体外实验通过MTS、TCID50、q RT-PCR方法检测不同浓度加巴喷丁对RSV感染的抑制作用,包括细胞活力、病毒复制及细胞因子的变化。体内实验选取4~6周... 详细信息

目的探讨加巴喷丁对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的抗病毒作用。方法体外实验通过MTS、TCID50、q RT-PCR方法检测不同浓度加巴喷丁对RSV感染的抑制作用,包括细胞活力、病毒复制及细胞因子的变化。体内实验选取4~6周龄C57BL/6小鼠,随机分为空白对照组、RSV感染组、低剂量及高剂量加巴喷丁处理组,连续腹腔注射给药,每日观察体质量变化,HE染色观察小鼠肺部的病理变化,q RT-PCR方法检测肺部病毒载量。结果 1、2、5、10 mmol/L不同浓度加巴喷丁显著增加RSV感染A549细胞的活力;5、10 mmol/L浓度的加巴喷丁可显著降低RSV感染A549细胞的病毒载量,10 mmol/L的加巴喷丁可显著抑制病毒的复制,减少CCL3、CCL5、CXCL2及TNF-α、IL-6、IL-8等趋化因子和炎性因子表达,促进干扰素IFN-α、IFN-β表达;动物实验表明90μg、180μg的加巴喷丁处理组可减轻RSV感染小鼠的体质量变化、改善肺部病理损伤和降低病毒载量。结论加巴喷丁可通过抑制病毒复制,调节趋化因子及炎性因子释放,促进干扰素分泌的方式发挥体内抗病毒作用,对RSV感染的C57BL/6小鼠有一定的治疗作用,可改善肺部病理,为进一步临床应用提供实验依据。

关键词：加巴喷丁呼吸道合胞病毒抗病毒细胞因子

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TFPR1通过激活树突状细胞并促进其成熟发挥佐剂功能

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军事医学 2018年第2期42卷 101-104页

作者：李悄王月鹏朱青宁秀哲孙维来周育森寇志华安徽医科大学北京微生物流行病研究所合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究树突状细胞(DC)在重组蛋白TFPR1发挥佐剂功能中的作用。方法在无菌条件下取4~5周龄雄性BALB/c小鼠的骨髓细胞,小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-CSF)与重组白介素4(rm IL-4)诱导分化6 d后,加入TFPR1共孵育24 h,并以LP... 详细信息

目的研究树突状细胞(DC)在重组蛋白TFPR1发挥佐剂功能中的作用。方法在无菌条件下取4~5周龄雄性BALB/c小鼠的骨髓细胞,小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rm GM-CSF)与重组白介素4(rm IL-4)诱导分化6 d后,加入TFPR1共孵育24 h,并以LPS处理为阳性对照、PBS为阴性对照,普通光学显微镜观察DC形态变化,罗丹明标记鬼笔环肽(TRITC Phalloidin)和DAPI共染色后,激光共聚焦显微镜观察细胞肌动蛋白和细胞核的分布情况,流式细胞术检测细胞表面CD40、CD80、CD86、MHCⅡ的表达水平,ELISA检测细胞培养上清中的细胞因子。结果在普通光镜和共聚焦显微镜下,加入TFPR1的DC与加入PBS的阴性对照DC相比具有显著的不同,而和加入LPS的阳性对照相似:光镜下发现大多数TFPR1处理的DC伪足变短直至消失,并变成圆形、悬浮于培养基中;激光共聚焦显微镜观察发现TFPR1处理的DC肌动蛋白由分布于细胞两极转至均匀分布于细胞膜上,从形态学上表明TFPR1可促进DC成熟;流式细胞术检测到TFPR1处理的DC表面CD40、CD80、CD86、MHCⅡ的表达量上调,进一步证明TFPR1具有促进DC成熟的作用。ELISA检测发现TFPR1处理的DC可产生高水平的IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子。结论 TFPR1不但能促进DC成熟,且能激活DC产生细胞因子,说明DC在TFPR1的佐剂功能中发挥重要作用。

关键词： TFPR1 树突状细胞佐剂作用机制

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大肠杆菌htrA突变株构建及其在鼠疫拟菌颗粒疫苗制备中的应用

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军事医学 2018年第7期42卷 539-544页

作者：李璐刘万兵周亚洲纪宇欣周冬生杨瑞馥王效义安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的基于乳酸乳球菌和鼠疫耶尔森菌F1抗原,制备鼠疫拟菌颗粒疫苗。方法基于λ-Red一步重组技术,构建BL-21大肠杆菌htr A基因缺失突变株;将鼠疫菌F1抗原基因和PA基因克隆至p ET-28a(+)质粒中构建F1-PA融合蛋白表达载体,将此载体分别导入... 详细信息

目的基于乳酸乳球菌和鼠疫耶尔森菌F1抗原,制备鼠疫拟菌颗粒疫苗。方法基于λ-Red一步重组技术,构建BL-21大肠杆菌htr A基因缺失突变株;将鼠疫菌F1抗原基因和PA基因克隆至p ET-28a(+)质粒中构建F1-PA融合蛋白表达载体,将此载体分别导入到BL-21大肠杆菌野生株和其htr A基因缺失突变株中构建F1-PA融合蛋白表达菌株; SDS-PAGE电泳分析F1-PA融合蛋白表达;镍柱亲和层析纯化包涵体蛋白,梯度稀释透析法复性F1-PA融合蛋白;乳酸乳球菌经热酸处理制备拟菌颗粒;革兰染色和透射电镜分析拟菌颗粒的形态;拟菌颗粒分别与F1-PA融合蛋白或F1蛋白共孵育制备拟菌颗粒疫苗。结果 F1-PA融合蛋白在大肠杆菌野生株和htr A缺失突变株中均以包涵体形式表达。拟菌颗粒对F1-Pa融合蛋白的吸附能力明显高于对F1蛋白的吸附能力。F1-PA融合蛋白在大肠杆菌htr A突变株中的表达量明显高于在野生株中的表达量。结论大肠杆菌htr A突变株用于表达F1-PA融合蛋白优于野生株。借助于肽聚糖锚钩蛋白,可将鼠疫菌F1抗原结合到乳酸乳球菌拟菌颗粒上制备鼠疫拟菌颗粒疫苗。

关键词：乳酸乳球菌拟菌颗粒疫苗鼠疫耶尔森菌 F1抗原大肠杆菌htrA突变株

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多耐药B族链球菌基因组序列分析

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军事医学 2019年第1期43卷 63-67页

作者：王益青朱亮孔德聪高薇姚开虎董方宋文琪郑玉玲姜永强刘钢军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 国家儿童医学中心首都医科大学附属北京儿童医院感染内科儿科重大疾病研究教育部重点实验室北京100045 首都医科大学附属北京儿童医院北京市儿科研究所北京100045 首都医科大学附属北京儿童医院检验科北京100045

目的研究中国B族链球菌种群结构并鉴定菌株携带的耐药基因。方法从患儿脑脊液样本中分离B族链球菌临床株,高通量测序获得菌株的全基因组序列。使用分子分型方法对菌株进行血清学分型和MLST分型;使用核心基因组系统演化分析构建种群结构... 详细信息

目的研究中国B族链球菌种群结构并鉴定菌株携带的耐药基因。方法从患儿脑脊液样本中分离B族链球菌临床株,高通量测序获得菌株的全基因组序列。使用分子分型方法对菌株进行血清学分型和MLST分型;使用核心基因组系统演化分析构建种群结构;通过查询耐药数据库鉴定基因组中的耐药基因;序列比对分析耐药基因元件结构;药敏试验测试菌株耐药表型。结果该研究共收集102株B族链球菌基因组,划分为5个克隆群,其中50株B族链球菌携带多耐药基因元件。结论新生儿B族链球菌感染主要由ST17型菌株引起;携带多耐药基因整合接合元件的B族链球菌在中国广泛分布,在临床中应对感染要控制抗生素的使用。

关键词： B族链球菌新生儿感染高通量测序抗生素耐药基因整合接合元件

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我国3个主要民族HIV感染者基因组中人内源性逆转录病毒K113和K115基因分布研究

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军事医学 2018年第11期42卷 845-849页

作者：裴志超韩婧婉王晓林李天一李林李敬云安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的分析人内源性逆转录病毒(HERV) K113和K115基因在我国不同民族HIV感染者基因组中的分布,为进一步研究其与HIV感染和复制的关系奠定基础。方法收集我国广西、云南、四川和河南HIV感染者的血液样本,提取基因组DNA,通过PCR扩增及核酸... 详细信息

目的分析人内源性逆转录病毒(HERV) K113和K115基因在我国不同民族HIV感染者基因组中的分布,为进一步研究其与HIV感染和复制的关系奠定基础。方法收集我国广西、云南、四川和河南HIV感染者的血液样本,提取基因组DNA,通过PCR扩增及核酸电泳检测,判断样本基因组中HERV-K113、HERV-K115基因插入状况。采用2检验和Fisher精确检验分析HERV-K113、HERV-K115基因在不同民族、地区HIV感染者中的分布是否存在差异。结果收集我国汉、彝、壮族3个民族共504份HIV感染者血液样本(汉族238例,彝族175例,壮族91例),基因组中HERV-K113和HERV-K115插入率分别为30. 0%和4. 8%;不同民族HERV-K113插入率分别为39. 6%(壮族)、30. 3%(汉族)和24. 6%(彝族); HERV-K115插入率分别为7. 7%(壮族)、5. 0%(汉族)和2. 9%(彝族)。HERV-K113在不同民族的分布存在显著性差异(P <0. 05)。结论首次阐明HERV-K113、HERV-K115基因在我国不同民族HIV感染者基因组中的频率分布,为进一步研究其与HIV感染及疾病进程的相关性奠定了基础。

关键词：人内源性逆转录病毒 HIV-1 HERV-K113 HERV-K115 民族

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