检索结果-内蒙古大学图书馆

军事医学 2019年第11期43卷 834-838页

作者：王宇航郑玉玲黄文华律清宇孔德聪江华姜永强刘鹏军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨磷脂酶A2对不同病原菌的杀菌作用,并以猪链球菌为模式菌,研究荚膜对磷脂酶A2杀菌作用的影响。方法通过体外实验比较磷脂酶A2对不同病原菌的杀菌活性,并构建了猪链球菌cps基因缺失突变株,通过体外杀菌实验、血中存活实验观察荚... 详细信息

目的探讨磷脂酶A2对不同病原菌的杀菌作用,并以猪链球菌为模式菌,研究荚膜对磷脂酶A2杀菌作用的影响。方法通过体外实验比较磷脂酶A2对不同病原菌的杀菌活性,并构建了猪链球菌cps基因缺失突变株,通过体外杀菌实验、血中存活实验观察荚膜对磷脂酶A2杀菌作用的影响。结果磷脂酶A2对革兰阳性菌的杀菌率高于革兰阴性菌。获得了猪链球菌cps基因缺失突变株,并证实磷脂酶A2可有效地杀灭猪链球菌05ZYH33菌株,但杀死荚膜缺失的猪链球菌突变株需要更高的剂量。尽管含有荚膜的菌株在血中的存活能力更强,但在血中加入磷脂酶A2后存活能力明显减弱。结论磷脂酶A2对革兰阳性菌有较好的杀菌活性,磷脂酶A2可能通过结合猪链球菌荚膜来提高其杀菌能力。

关键词：磷脂酶A2 猪链球菌荚膜血中存活

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田鼠型鼠疫菌血液存活能力的改变对豚鼠毒力的影响

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军事医学 2018年第7期42卷 545-549页

作者：纪宇欣周亚洲李璐杨瑞馥王效义军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因。方法通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血... 详细信息

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌对小鼠强毒而对豚鼠低毒的原因。方法通过将布氏田鼠型鼠疫菌201菌株分别与豚鼠和小鼠抗凝血共孵育,然后用稀释平板计数法测定其在两种动物全血中的存活能力;通过与两种活性血清和两种56℃灭活补体的血清共孵育,分别测定了鼠疫菌在活性血清和补体失活血清中的存活能力。结果田鼠型鼠疫菌在小鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力明显高于在豚鼠全血、活性血清和灭活补体血清中的存活能力。在小鼠和豚鼠血清中鼠疫菌存活能力明显高于在两种动物补体灭活血清中的存活能力。结论布氏田鼠型鼠疫菌在豚鼠血液中的存活能力下降导致了其对豚鼠低毒。在同一种动物血清中,灭活补体不仅不能使鼠疫菌血清存活能力提高反而使血清存活能力降低。

关键词：布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌小鼠豚鼠血清补体

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蚊虫气味结合蛋白和气味受体研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第6期38卷 753-757页

作者：谷真毓赵腾李春晓安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京市虫媒病与自然疫源性疾病重点实验室北京100071

防治蚊虫是防控蚊媒传染病的主要措施,化学防治一直是防蚊灭蚊的主要手段。然而随着蚊虫杀虫剂抗药性问题的日益突出,亟待发现新型高效、环境友好的蚊虫防治方法。嗅觉在蚊虫生命活动中起着重要的作用,蚊虫的很多生理行为都依赖于嗅觉,... 详细信息

防治蚊虫是防控蚊媒传染病的主要措施,化学防治一直是防蚊灭蚊的主要手段。然而随着蚊虫杀虫剂抗药性问题的日益突出,亟待发现新型高效、环境友好的蚊虫防治方法。嗅觉在蚊虫生命活动中起着重要的作用,蚊虫的很多生理行为都依赖于嗅觉,比如交配、吸血、产卵等。本文主要针对蚊虫嗅觉相关气味结合蛋白和气味受体的研究现状及进展进行综述,并探讨其在蚊虫驱避和引诱行为中的相关机制和靶点,为蚊媒防治措施的应用及改进提供理论参考。

关键词：蚊虫气味结合蛋白气味受体驱避引诱

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寨卡病毒蛋白结构与功能研究进展

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微生物学通报 2018年第8期45卷 1787-1793页

作者：程梦丽李晓峰秦成峰安徽医科大学安徽合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

2015年以来,南美暴发大规模寨卡疫情,因其与新生儿小头症等严重神经发育疾病密切相关,被世界卫生组织列为国际关注的突发公共卫生事件。与其他虫媒黄病毒类似,寨卡病毒为单股正链RNA病毒,其基因组编码的3种结构蛋白构成病毒颗粒,7种非... 详细信息

2015年以来,南美暴发大规模寨卡疫情,因其与新生儿小头症等严重神经发育疾病密切相关,被世界卫生组织列为国际关注的突发公共卫生事件。与其他虫媒黄病毒类似,寨卡病毒为单股正链RNA病毒,其基因组编码的3种结构蛋白构成病毒颗粒,7种非结构蛋白参与病毒复制生活周期的调控。在全球科学家的共同努力下,寨卡病毒蛋白结构与功能的研究取得了突破性进展,极大地促进研究者对病毒复制与致病机制的认识,也为疫苗和药物研发提供了重要科学依据和潜在靶标。本文将对寨卡病毒蛋白的结构与功能的最新研究进展作一综述,并讨论当前面临的挑战和机遇。

关键词：寨卡病毒结构蛋白非结构蛋白结构

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1株T1样噬菌体vB＿EcoS＿IME18的分离鉴定及其受体分析

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食品科学 2019年第8期40卷 79-86页

作者：李萍林洪童贻刚王静雪中国海洋大学食品科学与工程学院山东青岛266003 军事科学院军事医学研究所微生物流行病研究所病原微生物安全国家重点实验室北京100071

以大肠杆菌BL21为指示菌分离得到1株噬菌体vB_EcoS_IME18(IME18),通过电镜观察噬菌体形态,并测定其最佳感染复数、一步生长曲线、裂解谱和体外杀菌效果;使用Illumina MiSeq测序仪完成噬菌体全基因组测序,利用比较基因组学分析噬菌体基... 详细信息

以大肠杆菌BL21为指示菌分离得到1株噬菌体vB_EcoS_IME18(IME18),通过电镜观察噬菌体形态,并测定其最佳感染复数、一步生长曲线、裂解谱和体外杀菌效果;使用Illumina MiSeq测序仪完成噬菌体全基因组测序,利用比较基因组学分析噬菌体基因组特征;通过筛选噬菌体抗性株分析其耐受原因,利用受体基因沉默突变实验、噬菌体斑点实验和噬菌体吸附实验验证噬菌体受体。结果表明,噬菌体IME18具有二十面体头部和非收缩性尾部,属于长尾噬菌体科,Tunavirinae亚科,T1类噬菌体;噬菌体IME18的最佳感染复数为0.01,潜伏期为5 min,裂解期50 min,爆发量高达223 PFU/cell;在体外,噬菌体IME18能在90 min内有效杀死处于对数期的BL21;噬菌体IME18基因组全长50 354 bp,G+C含量为45.6%;蛋白Fhu A、Ton B在噬菌体IME18的吸附和侵染过程中发挥重要作用。

关键词：大肠杆菌噬菌体鉴定噬菌体受体

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寨卡病毒EDⅢmRNA疫苗的设计与免疫保护效果评价

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科学通报 2024年第33期69卷 4917-4927页

作者：田颖武媚李凯周超张蓉蓉周航宇叶青秦成峰黄升海李晓峰安徽医科大学基础医学院合肥230000 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国医学科学院北京协和医学院系统医学研究所北京100005

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是虫媒黄病毒属的重要成员,因其在2015年的南美寨卡疫情中导致大量新生儿小头症而备受关注,目前尚无获批上市的寨卡病毒疫苗.与传统疫苗相比,mRNA疫苗在安全性、有效性和产能方面优势明显,代表未来全新的疫苗... 详细信息

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是虫媒黄病毒属的重要成员,因其在2015年的南美寨卡疫情中导致大量新生儿小头症而备受关注,目前尚无获批上市的寨卡病毒疫苗.与传统疫苗相比,mRNA疫苗在安全性、有效性和产能方面优势明显,代表未来全新的疫苗形式.本研究选取寨卡病毒FSS13025株包膜蛋白E的Ⅲ区(EDⅢ)作为免疫原,设计构建包含EDⅢ编码序列、非编码区和poly(A)尾的重组质粒,通过体外转录和加帽反应获得EDⅢ-mRNA转录体,其转染至HEK293TN细胞后能表达特异的目的抗原并能分泌至胞外.进一步利用微流控技术将EDⅢ-mRNA转录体制备成脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP),以间隔3周加强一次的免疫方案分别将5和20μg的EDⅢ-mRNA经肌肉注射至BALB/c小鼠.酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和空斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)的结果显示,该分子可刺激小鼠产生剂量依赖性的高水平的E蛋白特异IgG抗体与寨卡病毒中和抗体,并产生Th1细胞偏向的分泌型IFN-γ、TNF-α和IL-2细胞因子.攻毒保护试验结果显示,免疫组小鼠的病毒血症和主要脏器中的病毒RNA载量相较于磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)对照组小鼠均明显降低,其中孕鼠大脑及胎鼠大脑未检测到病毒核酸,体现出良好的免疫保护和垂直传播阻断效果.本研究设计的编码寨卡病毒E蛋白Ⅲ区的mRNA-LNP疫苗可为寨卡病毒疫苗提供新的候选.

关键词：寨卡病毒 mRNA疫苗 E蛋白Ⅲ区免疫原性免疫保护

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副溶血弧菌耐热直接溶血素DAS-ELISA检测方法的建立

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中国人兽共患病学报 2022年第8期38卷 666-672页

作者：白雪欣胡宸艺金志颖万伟李月王菁李岩伟高姗王景林安徽医科大学基础医学院合肥230032 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的建立副溶血弧菌耐热直接溶血素的双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法。方法本研究通过PCR技术扩增副溶血弧菌耐热直接溶血素基因序列,并将其克隆至pET-28a载体后进行原核表达,对表达蛋白进行纯化... 详细信息

目的建立副溶血弧菌耐热直接溶血素的双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法。方法本研究通过PCR技术扩增副溶血弧菌耐热直接溶血素基因序列,并将其克隆至pET-28a载体后进行原核表达,对表达蛋白进行纯化和鉴定,随后用高纯度的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,得到抗体后利用分子互作测定抗体的亲和力,并利用该抗体建立检测副溶血弧菌耐热直接溶血素的DAS-ELISA方法。通过棋盘法对该方法的反应条件进行优化,建立标准曲线,并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。结果本实验制备的多克隆抗体亲和力可达1×10^(-8),使用该高亲和力抗体建立的DAS-ELISA方法灵敏度为78 ng/mL,定量范围为78~312 ng/mL;与创伤弧菌溶细胞毒素(Vibrio vulnificus hemolysin,VVH)、产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringensαtoxin,CPA)以及产气荚膜梭菌ε毒素(epsilon toxin,ETX)均无交叉反应;利用扇贝、花蛤和魁蚶制备海鲜模拟样本,在上述3种模拟样本内添加重组蛋白构建标准曲线,评价本方法复杂基质中检出能力时发现灵敏度均并未发生改变;同时在上述3种模拟样本中添加菌液上清评价本方法检测天然毒素能力,检出率为100%。结论成功构建了一种用于副溶血弧菌耐热直接溶血素检测的DAS-ELISA方法,该方法特异性强、灵敏度高,适用于复杂基质检测,有望开发成副溶血弧菌耐热直接溶血素快速诊断试剂盒,具有良好的应用前景。

关键词：耐热直接溶血素多克隆抗体 DAS-ELISA

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加巴喷丁体内外抗RSV感染的作用

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免疫学杂志 2018年第5期34卷 378-384页

作者：时艳婷谷宏婧杨晓岚段跃强赵忠鹏周娅杨鹏辉王希良宁夏医科大学基础医学院银川750004 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所/病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨加巴喷丁对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的抗病毒作用。方法体外实验通过MTS、TCID50、q RT-PCR方法检测不同浓度加巴喷丁对RSV感染的抑制作用,包括细胞活力、病毒复制及细胞因子的变化。体内实验选取4~6周... 详细信息

目的探讨加巴喷丁对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的抗病毒作用。方法体外实验通过MTS、TCID50、q RT-PCR方法检测不同浓度加巴喷丁对RSV感染的抑制作用,包括细胞活力、病毒复制及细胞因子的变化。体内实验选取4~6周龄C57BL/6小鼠,随机分为空白对照组、RSV感染组、低剂量及高剂量加巴喷丁处理组,连续腹腔注射给药,每日观察体质量变化,HE染色观察小鼠肺部的病理变化,q RT-PCR方法检测肺部病毒载量。结果 1、2、5、10 mmol/L不同浓度加巴喷丁显著增加RSV感染A549细胞的活力;5、10 mmol/L浓度的加巴喷丁可显著降低RSV感染A549细胞的病毒载量,10 mmol/L的加巴喷丁可显著抑制病毒的复制,减少CCL3、CCL5、CXCL2及TNF-α、IL-6、IL-8等趋化因子和炎性因子表达,促进干扰素IFN-α、IFN-β表达;动物实验表明90μg、180μg的加巴喷丁处理组可减轻RSV感染小鼠的体质量变化、改善肺部病理损伤和降低病毒载量。结论加巴喷丁可通过抑制病毒复制,调节趋化因子及炎性因子释放,促进干扰素分泌的方式发挥体内抗病毒作用,对RSV感染的C57BL/6小鼠有一定的治疗作用,可改善肺部病理,为进一步临床应用提供实验依据。

关键词：加巴喷丁呼吸道合胞病毒抗病毒细胞因子

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弗氏枸橼酸杆菌中发现介导bla_(KPC-2)传播的新型质粒及比较基因组学分析

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中华预防医学杂志 2023年第12期57卷 2122-2128页

作者：郭会钱李昕悦陈素明张旺鲍春梅殷喆李伯安潍坊医学院医学检验学院潍坊261053 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 解放军总医院第五医学中心检验科北京100039

目的探讨来自弗氏枸橼酸杆菌的产碳青霉烯酶的新型不相容群组质粒pNY2385-KPC的耐药机制及基因结构特征。方法从宁波市医疗中心李惠利医院急诊病房的发热患者尿液样本中获得1株多药耐药菌。采用16S rRNA基因扩增和平均核苷酸一致性(ANI... 详细信息

目的探讨来自弗氏枸橼酸杆菌的产碳青霉烯酶的新型不相容群组质粒pNY2385-KPC的耐药机制及基因结构特征。方法从宁波市医疗中心李惠利医院急诊病房的发热患者尿液样本中获得1株多药耐药菌。采用16S rRNA基因扩增和平均核苷酸一致性(ANI)进行菌种鉴定;采用全自动细菌鉴定及药敏分析系统检测细菌MIC值;通过“三代”测序方法获得基因组序列,然后通过BLASTP/BLASTN、RefSeq、ConservedDomains、ResFinder、Isfinder等对基因功能进行详细注释及比较基因组学分析。结果弗氏枸橼酸杆菌NY2385携带的质粒pNY2385-KPC为一种新型不相容群组质粒,包含bla_(KPC-2),具有接合转移(Ⅳ型分泌系统)基因,可发生接合转移。NCBI中共检索到同型质粒15个,来源于弗氏枸橼酸杆菌、黏质沙雷菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、肺炎克雷伯菌和植生拉乌尔菌等细菌,为泛宿主质粒。通过对来自弗氏枸橼酸杆菌中6个该新型质粒进行序列比较分析,发现该新型质粒结构具有一定的保守性,具有携带bla_(KPC-2)的Tn6296变体结构,而且质粒pCF1807-3同时具有repApNY2385-KPC和repAIncX8。结论弗氏枸橼酸杆菌中的pNY2385-KPC型质粒均携带bla_(KPC-2)耐药基因,分为repApNY2385-KPC单复制子和repApNY2385-KPC/repAIncX8双复制子两种亚型,属于泛宿主质粒,作为可移动遗传元件促进了bla_(KPC-2)的传播。

关键词：弗氏枸橼酸杆菌多药耐药新型质粒肠杆菌科

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高毒力肺炎克雷伯菌两种金黄地鼠呼吸道感染模型比较研究

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军事医学 2024年第1期48卷 30-35页

作者：张之珺张丽丽吕蒙周冬生杨文慧高波军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所北京100850

目的建立高毒力肺炎克雷伯菌经气溶胶肺递送和滴鼻感染金黄地鼠动物模型,并对比两种模型的构建效果。方法选取4~5周龄雄性金黄地鼠,经气溶胶肺递送和滴鼻两种途径攻毒高毒力肺炎克雷伯菌NTUHK2044,记录金黄地鼠攻毒后14 d的生存状况,计... 详细信息

目的建立高毒力肺炎克雷伯菌经气溶胶肺递送和滴鼻感染金黄地鼠动物模型,并对比两种模型的构建效果。方法选取4~5周龄雄性金黄地鼠,经气溶胶肺递送和滴鼻两种途径攻毒高毒力肺炎克雷伯菌NTUHK2044,记录金黄地鼠攻毒后14 d的生存状况,计算两种途径的半数致死量、存活率,并对呼吸道沉积分布、肺部细菌载量及组织病理进行检测。结果气溶胶肺递送途径攻毒引起金黄地鼠半数死亡剂量(3×10^(4)CFU)低于滴鼻途径(7×10^(5)CFU)。4×10^(6)CFU高毒力肺炎克雷伯菌以气溶胶肺递送途径感染金黄地鼠后,96.46%沉积在肺部并成功定植,主要引起大叶性肺炎,4 d内动物全部死亡;而同等剂量菌液滴鼻后95.62%沉积在口鼻部,随后下移至气管定植,主要引起支气管肺炎,病变程度相对较轻,细菌更易被机体清除,14 d存活率为70%。结论细菌呼吸道感染造模效果受攻毒途径影响,高毒力肺炎克雷伯菌经气溶胶肺递送攻毒主要引起病变严重的大叶性肺炎,滴鼻则主要引起病变较轻的支气管肺炎。上述两种动物模型的成功建立可为肺炎克雷伯菌致病机制研究和药效评价提供关键支撑。

关键词：高毒力肺炎克雷伯菌气溶胶金黄地鼠动物模型

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