检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学与毒理学杂志 2021年第2期35卷 132-138页

作者：樊永正雍政苏瑞斌军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室北京100850 联勤保障部队第991医院湖北襄阳441000

阿片类药物通过作用于阿片受体,激活与受体偶联的G蛋白和(或)β-抑制蛋白等信号通路而发挥镇痛和麻醉等效应,但同时阿片类药物致呼吸抑制(OIRD)则是临床常见的严重问题。目前通常采用阿片受体拮抗剂纳洛酮等改善OIRD,但纳洛酮可能会拮... 详细信息

阿片类药物通过作用于阿片受体,激活与受体偶联的G蛋白和(或)β-抑制蛋白等信号通路而发挥镇痛和麻醉等效应,但同时阿片类药物致呼吸抑制(OIRD)则是临床常见的严重问题。目前通常采用阿片受体拮抗剂纳洛酮等改善OIRD,但纳洛酮可能会拮抗阿片类药物的镇痛作用,甚至带来许多不可预知的不良反应。近年来,使用非阿片类药物直接和(或)间接调节呼吸中枢,在改善OIRD的同时不影响阿片类药物的镇痛已成为一种新的研究思路。本文围绕近年来研究报道较多的α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-恶唑丙酸受体调节剂、5-羟色胺受体激动剂、磷酸二酯酶4抑制剂、胶质细胞抑制剂、烟碱乙酰胆碱受体激动剂和钾离子通道阻滞剂等非阿片类药物展开综述。

关键词：阿片受体呼吸抑制阿片类药物

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菊淀粉型巴戟天寡糖抗创伤后应激障碍行为学评价

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中国药理学与毒理学杂志 2021年第1期35卷 27-35页

作者：王运慧尹勇玉姚俊祺刘文刚袁瑾张黎明李云峰军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 中国人民解放军医学院北京100853 军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所北京100850

目的用大鼠和小鼠创伤后应激障碍(PTSD)模型评价菊淀粉型巴戟天寡糖(IOMO)对场景恐惧行为和焦虑行为的影响。方法建立大鼠单次延长应激(SPS)模型和小鼠不可逃避足底电击(FS)模型,实验分组均为正常对照组、模型组、模型+舍曲林(Ser)组和... 详细信息

目的用大鼠和小鼠创伤后应激障碍(PTSD)模型评价菊淀粉型巴戟天寡糖(IOMO)对场景恐惧行为和焦虑行为的影响。方法建立大鼠单次延长应激(SPS)模型和小鼠不可逃避足底电击(FS)模型,实验分组均为正常对照组、模型组、模型+舍曲林(Ser)组和模型+不同剂量IOMO组。在大鼠SPS模型中,于造模后每天1次ig给予IOMO 12.5,25和50 mg·kg^(-1)或Ser 15 mg·kg^(-1),连续给药16 d;在小鼠FS模型中,于造模后每天1次ig给予IOMO 25和50 mg·kg^(-1)或Ser 15 mg·kg^(-1),连续给药15 d。以场景恐惧实验评价恐惧行为,以开场实验(OFT)和高架十字迷宫实验(EPMT)评价焦虑样行为。结果在大鼠SPS模型上,与正常对照组相比,模型组大鼠在场景恐惧实验中僵住时间显著增加(P<0.01),在OFT中进入中央区的潜伏期显著延长(P<0.05)、累计次数显著减少(P<0.01),在EPMT中开臂区停留时间百分比和进入次数百分比显著降低(P<0.05);与模型组相比,模型+IOMO 50 mg·kg^(-1)组和模型+Ser 15 mg·kg^(-1)组上述变化均可显著逆转(P<0.05)。在小鼠FS模型上,模型组小鼠在场景恐惧中僵住时间显著高于正常对照组(造模后第10天,P<0.01;第15天,P<0.05),在OFT中进入中央区的潜伏期显著延长,且累计次数和时间显著减少(P<0.05);模型+IOMO 50 mg·kg^(-1)组上述变化显著逆转(P<0.05,P<0.01)。结论IOMO慢性给药可显著降低SPS模型大鼠和FS模型小鼠场景恐惧的表达,缓解焦虑样行为,具有抗PTSD活性。

关键词：创伤后应激障碍巴戟天寡糖单次延长应激模型足底电击模型

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鹅膏毒肽的不同靶器官细胞毒性差异及其机制研究

鹅膏毒肽的不同靶器官细胞毒性差异及其机制研究

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：龚梦强高鹏霞徐华马波王莉莉李治吴剑峰谢剑炜军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室长江大学农学院河北科技大学

目的鹅膏毒肽（amanitin,AMA）是全世界范围内蘑菇中毒致死的主要因素,其毒理机制的不完善,导致现有治疗策略缺乏有效性。临床研究结果表明,AMA对心脏、肝脏、肾脏、胃肠道、血液系统及神经系统等器官均有不同程度的损伤。本研究旨在利... 详细信息

目的鹅膏毒肽（amanitin,AMA）是全世界范围内蘑菇中毒致死的主要因素,其毒理机制的不完善,导致现有治疗策略缺乏有效性。临床研究结果表明,AMA对心脏、肝脏、肾脏、胃肠道、血液系统及神经系统等器官均有不同程度的损伤。本研究旨在利用多种人源细胞系探索AMA对不同靶器官毒性差异的机制。材料与方法以不同浓度梯度的α、β、γ-AMA(0.3,1,3,10,30,100μmol·L)处理7种人源细胞,分别为人肝癌细胞HepG2、人脐静脉内皮细胞HUVEC、人神经母细胞瘤SH-SY5Y、人胃癌细胞BGC-823、人心肌细胞AC16、人结直肠癌细胞HCT-8和人非小细胞肺癌细胞A549。采用CCK-8法确定AMA在不同细胞系中的IC50;并通过光镜观察细胞死亡形态,应用不同细胞死亡通路关键效应分子的抑制剂,以明确AMA诱导的细胞死亡方式;应用免疫荧光和免疫印迹法（Western Blot）检测介导AMA摄取的有机阴离子转运多肽（OATP1B3）和Na+-牛磺胆酸共转运多肽（NTCP）的表达水平。结果 CCK-8结果显示,α-AMA对HepG2、HUVEC、SH-SY5Y、BGC-823等毒性敏感细胞系的IC50分别为8μmol·L、6μmol·L、9μmol·L、8μmol·L;对AC16、HCT-8、A549等毒性不敏感细胞系的IC50均大于100μmol·L。光镜结果显示,α-AMA处理后细胞发生皱缩,形成凋亡小体,且泛caspase抑制剂Z-VAD-FMK(50μmol·L)能逆转α-AMA细胞毒性,提示AMA导致细胞的死亡方式可能为凋亡。免疫荧光分析及Western Blot结果显示,敏感细胞系OATP1B3和NTCP的蛋白表达水平显著高于不敏感细胞系。结论 AMA对不同细胞系的毒性存在显著差异,其机制可能与OATP1B3和NTCP的表达水平不同相关。

关键词：鹅膏毒肽细胞毒性细胞死亡方式凋亡转运多肽

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高内涵筛选技术在检测食品中基因毒性物质的应用研究

高内涵筛选技术在检测食品中基因毒性物质的应用研究

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中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：高鹏霞龚梦强李治马波徐华王莉莉谢剑炜军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室河北科技大学长江大学农学院

目的针对复杂食品基质中基因毒性物质的体外测试方法目前仍较匮乏,本研究应用高内涵筛选(high-content screening,HCS)技术,构建可筛查基因毒性物质的生物标志物组合分析盘,实现对食品中基因毒性物质的筛查检测。材料和方法采用HCS技术... 详细信息

目的针对复杂食品基质中基因毒性物质的体外测试方法目前仍较匮乏,本研究应用高内涵筛选(high-content screening,HCS)技术,构建可筛查基因毒性物质的生物标志物组合分析盘,实现对食品中基因毒性物质的筛查检测。材料和方法采用HCS技术,选用关联不同DNA损伤修复途径的生物标志物γ-H2AX、p-H3、p53和Rad51构建组合分析盘。将12种具有不同作用机制的基因毒性模型化合物(DNA加合物、纺锤体毒剂、激酶抑制剂、核苷类似物)分别暴露A549细胞、Rad51-EGFP-SW480细胞和HepG2细胞,对暴露后的生物标志物p53、Rad51以及γ-H2AX和p-H3进行了检测并考察其量效关系。将建立的生物标志物组合盘,应用于食品基质中基因毒性物质的检测。选择了茶、咖啡、西红柿汁、小白菜汁和菠菜汁等五种食品基质,用无血清无抗生素的培养基按1∶10、1∶100、1∶1000梯度稀释后直接暴露或与基因毒性模型化合物共同暴露上述三种细胞,考察食品基质对四种生物标志物的检测影响,以及该标志物组合盘是否适用于食品中潜在基因毒性物质的筛查检测。结果 DNA损伤修复生物标志物γ-H2AX和DNA修复生物标志物Rad51这两个指标的检测结果呈现相同的变化趋势,致染色体断裂化合物和激酶抑制剂均能引起两者的升高,且呈现剂量依赖效应,两者组合考察可提高基因毒性筛查的准确度;γ-H2AX和p53蛋白具相关性,对于多数基因毒性化合物,p53的最低检测有效浓度低于γ-H2AX和Rad51的最低有效浓度,组合考察p53提高了筛查的灵敏度;纺锤体毒剂则引起p-H3的升高,激酶抑制剂引起p-H3的降低,均呈现剂量依赖效应,将γ-H2AX与p-H3组合可有效区分毒作用模式不同的基因毒性化合物。食品基质对检测生物标志物γ-H2AX、p-H3和p53均无影响。与基因毒性模型化合物共同孵育后可观测到p53、Rad51、γ-H2AX和p-H3荧光强度的增加,表明该生物标志物组合盘可用于检测食品基质中的基因毒性物质。结论基于生物标志物组合盘的HCS技术可应用于检测复杂食品基质中的基因毒性物质,并可区分其主要作用机制及DNA损伤修复途径。

关键词：高内涵筛选基因毒性生物标志物食品筛查

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大麻二酚对口腔颌面部炎性痛的镇痛作用及机制研究

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实用口腔医学杂志 2021年第3期37卷 307-311页

作者：宋贤奎谢冠博吴宁李锦韩笑郭红延山西医科大学口腔医学院太原030001 北京军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室神经精神药理学北京市重点实验室

目的:研究大麻二酚(CBD)对口腔颌面部炎性痛的镇痛作用及其可能机制。方法:选取40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组(福尔马林注射诱导炎性痛)、CBD组(30、60 mg/kg)和布洛芬组(n=8),进行口腔颌面部炎性痛造模及给药。以小鼠45 min... 详细信息

目的:研究大麻二酚(CBD)对口腔颌面部炎性痛的镇痛作用及其可能机制。方法:选取40只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组(福尔马林注射诱导炎性痛)、CBD组(30、60 mg/kg)和布洛芬组(n=8),进行口腔颌面部炎性痛造模及给药。以小鼠45 min内累积抓脸时间作为疼痛指标,研究CBD的镇痛作用,并与布洛芬比较。行为学实验后,对唇部组织进行炎性因子的RT-qPCR检测,以及对三叉神经脊束核尾侧亚核(sp5c)的c-Fos表达进行免疫荧光检测。结果:CBD与布洛芬均显著降低二相痛抓脸时间,降低局部炎症因子mRNA水平,下调sp5c的c-Fos阳性神经元表达数目。结论:CBD对口腔颌面部炎性痛具有镇痛效果,其机制可能与下调局部损伤组织炎性因子表达和提高内源性大麻素含量、以及抑制疼痛信号上行传导有关。

关键词：口腔颌面部炎性痛大麻二酚布洛芬内源性大麻素系统炎性因子

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核酸适配体在质谱中的应用与展望

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分析化学 2020年第11期48卷 1439-1451页

作者：杨捷威王晨钰罗黎郭磊谢剑炜军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室中央民族大学药学院河北医科大学公共卫生学院

核酸适配体(简称适配体)是一类重要的"化学抗体"型功能性生物分子,基于适配体的质谱技术在提供分子质量及结构特征等基础上,兼具了针对靶分子的高选择性及亲和富集特点,从而提供出高特异、高灵敏信息。本文综述了近年来适配... 详细信息

核酸适配体(简称适配体)是一类重要的"化学抗体"型功能性生物分子,基于适配体的质谱技术在提供分子质量及结构特征等基础上,兼具了针对靶分子的高选择性及亲和富集特点,从而提供出高特异、高灵敏信息。本文综述了近年来适配体在质谱分析中的应用进展,重点评述了适配体在质谱分子相互作用表征中的应用、适配体作为离线型和在线亲和材料用于质谱分析测定等现状,其中结合多种质谱新技术,通过创建或结合多种前处理或在线一体化信号增强方式,特别是适配体功能化纳米材料的应用,在相互作用表征、痕量靶分子选择性提取和高灵敏检测等质谱分析测定方面是研究的重点。最后,本文对适配体在质谱研究中的应用前景进行了展望。

关键词：适配体质谱相互作用表征纳米材料功能化评述

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常用失眠动物模型及其睡眠结构特征研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2020年第5期34卷 389-394页

作者：王洛萱李劲草张有志军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

失眠症是最为常见的睡眠障碍,以入睡和睡眠维持困难及日间功能障碍为主要表现。失眠症的病理生理研究和镇静催眠药物的非临床评价需以适当的动物模型为基础。本文以模型动物睡眠结构为重点,从心理应激、特殊睡眠环境和药物模型3个方面... 详细信息

失眠症是最为常见的睡眠障碍,以入睡和睡眠维持困难及日间功能障碍为主要表现。失眠症的病理生理研究和镇静催眠药物的非临床评价需以适当的动物模型为基础。本文以模型动物睡眠结构为重点,从心理应激、特殊睡眠环境和药物模型3个方面归纳常用失眠模型。现有失眠动物模型存在一定的局限性,在镇静催眠药物研究中应当灵活选择多种造模方法,以用更接近失眠临床表现的动物模型评价药物作用。

关键词：失眠睡眠剥夺动物模型睡眠结构

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nr1h4调控转基因斑马鱼模型建立及相关研究

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中国药物警戒 2022年第8期19卷 873-880页

作者：刘彩萍朝宝冯元州孙岚骆媛杨景峰董武王永安李月廷赵宝全大学第一临床医学院北京100700 北京中医药大学附属中西医结合医院北京100039 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850 内蒙古自治区毒物监控及毒理学重点实验室内蒙古民族大学动物科技学院内蒙古通辽028000

目的建立法尼醇X受体(FXR,基因名称nr1h4)组织特异性荧光标记转基因斑马鱼模型,为胆汁酸代谢相关药物筛选及安全预警提供可视化检测动物模型。方法在UCSC网站查找斑马鱼nr1h4基因调控序列,并利用Promoter 2.0软件对其进行优化,设计引物... 详细信息

目的建立法尼醇X受体(FXR,基因名称nr1h4)组织特异性荧光标记转基因斑马鱼模型,为胆汁酸代谢相关药物筛选及安全预警提供可视化检测动物模型。方法在UCSC网站查找斑马鱼nr1h4基因调控序列,并利用Promoter 2.0软件对其进行优化,设计引物,利用PCR方法调取斑马鱼nr1h4调控序列,构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点,将pTol2-nr1h4-EGFP质粒与pCS-TP转座酶mRNA共同注入斑马鱼受精卵单细胞,筛选出在肝脏和肠道中特异性表达的荧光个体,通过遗传学筛选,建立Tg(-1.6nr1h4-EGFP)斑马鱼品系。将受精后第4天的Tg(-1.6nr1h4-EGFP)斑马鱼幼鱼随机分为空白对照组、溶媒对照组、甘氨酸-β-鼠胆酸组、奥贝胆酸组以及低、中、高浓度(10、20、40μg·mL)熊去氧胆酸组、胆宁片组、大黄酸组和芦荟大黄素组,连续给药4 d,观察各组转基因斑马鱼不同时间的荧光强度及发育情况,并对荧光强度进行分析。结果成功建立了Tg(-1.6nr1h4-EGFP)荧光标记转基因斑马鱼品系,绿色荧光于体节期开始在斑马鱼腹部表达,受精后第4天(4dpf)主要集中在肝脏和肠道表达。与空白对照组相比,甘氨酸-β-鼠胆酸组转基因斑马鱼在各给药时间的荧光表达水平均显著降低(4dpf:P<0.01;5~7dpf:P<0.0001),奥贝胆酸组在各给药时间荧光均显著增强(P<0.0001),溶媒组荧光表达水平与对照组无显著差异,表明了该模型的有效建立。与空白对照组相比,低浓度的熊去氧胆酸组和芦荟大黄素组转基因斑马鱼在给药第2~4天荧光表达水平逐渐增强(P<0.0001),中浓度的熊去氧胆酸组和芦荟大黄素组在各给药时间荧光均显著增强(P<0.0001),高浓度的芦荟大黄素组在给药第2~4天荧光逐渐增强(5~6dpf:P<0.001;7dpf:P<0.05),高浓度的熊去氧胆酸组荧光表达水平与空白组无显著差异;低浓度的胆宁片组和大黄酸组转基因斑马鱼在各给药时间的荧光表达水平与空白组无显著差异,中浓度的胆宁片组在各给药时间荧光均显著增强(4dpf和7dpf:P<0.0001;5dpf和6dpf:P<0.001),高浓度的胆宁片组在各给药时间荧光依旧显著增强(P<0.0001),中浓度的大黄酸组在给药第2~4天荧光逐渐增强(5dpf:P<0.0001;6dpf:P<0.001;7dpf:P<0.01),而高浓度的大黄酸组在给药第2~4天荧光开始减弱(P<0.0001)。结论Tg(-1.6nr1h4-EGFP)斑马鱼模型为胆汁酸药物机制研究、药物筛选和安全性评价提供了新的动物模型;低、中浓度的熊去氧胆酸,中、高浓度的胆宁片,中浓度的大黄酸和各浓度的芦荟大黄素均能够通过上调斑马鱼肝脏和肠道FXR促进胆汁酸转运,而高浓度的熊去氧胆酸对FXR无明显作用,高浓度的大黄酸抑制FXR表达。

关键词：法尼醇X受体转基因斑马鱼模型胆宁片芦荟大黄素大黄酸熊去氧胆酸奥贝胆酸甘氨酸-β-鼠胆酸

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蛋白降解靶向嵌合体药物(PROTAC)的非临床评价策略分析

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中国药理学与毒理学杂志 2021年第1期35卷 65-71页

作者：韩俊源李亚娟王海学王全军军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒物药物与毒理学国家重点实验室国家北京药物安全评价研究中心北京100850 国家药品监督管理局药品审评中心北京100022

蛋白降解靶向嵌合体(PROTAC)将靶向蛋白募集到E3泛素连接酶进行泛素化标记,然后通过泛素-蛋白酶体途径将其降解,从而将过表达和突变的致病蛋白清除。本文基于已有的文献报道,总结PROTAC药物研发进展,针对其存在的相对分子质量较大、生... 详细信息

蛋白降解靶向嵌合体(PROTAC)将靶向蛋白募集到E3泛素连接酶进行泛素化标记,然后通过泛素-蛋白酶体途径将其降解,从而将过表达和突变的致病蛋白清除。本文基于已有的文献报道,总结PROTAC药物研发进展,针对其存在的相对分子质量较大、生物利用度低、稳定性和血管穿透能力差等问题提出应对策略,并从药理药效、代谢和安全性评价等方面对该类药物的非临床评价研究需要考虑的问题进行分析,为制定PROTAC药物非临床评价研究方案提供参考。

关键词：蛋白降解靶向嵌合体(PROTAC) 非临床评价

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胆碱能M受体调控细胞周期蛋白依赖性激酶5及其在敌敌畏诱导SH-SY5Y细胞毒性损伤中的作用

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中国药理学与毒理学杂志 2020年第3期34卷 179-187页

作者：杨培周琥王丽韫王永安军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

目的研究胆碱能M受体(主要为M1受体)参与SH-SY5Y细胞周期依赖性蛋白激酶5(Cdk5)调控及其在敌敌畏(DDVP)诱导SH-SY5Y细胞毒性损伤中的作用。方法①应用免疫荧光结合共聚焦显微镜检测胆碱能M1受体及Cdk5在SH-SY5Y细胞中的分布和表达。②... 详细信息

目的研究胆碱能M受体(主要为M1受体)参与SH-SY5Y细胞周期依赖性蛋白激酶5(Cdk5)调控及其在敌敌畏(DDVP)诱导SH-SY5Y细胞毒性损伤中的作用。方法①应用免疫荧光结合共聚焦显微镜检测胆碱能M1受体及Cdk5在SH-SY5Y细胞中的分布和表达。②细胞对照组、氧化震颤素(Oxo-M)组(1×10-4mol·L-1作用48 h)、罗考唯亭(Rosc)组(培养结束前1 h加入Rosc 1×10-4mol·L-1)、Rosc+Oxo-M组(Rosc 1×10-4mol·L-1预处理1 h后,再加入Oxo-M 1×10-4mol·L-1作用至48 h),应用MTT比色法检测细胞存活率,Western印迹法检测Cdk5表达。③细胞对照组、DDVP组(1×10-5mol·L-1作用48 h)、Rosc组(培养结束前1 h加入1×10-4mol·L-1)、Rosc+DDVP组(Rosc 1×10-4mol·L-1预处理1 h后,再加入DDVP1×10-5mol·L-1作用至48 h),用MTT比色法检测细胞存活率,Western印迹法检测Cdk5表达,流式细胞术膜联蛋白Ⅴ-碘化丙啶双染法检测细胞凋亡率,TUNEL法检测细胞凋亡。结果①激光共聚焦显微镜结果表明,SH-SY5Y细胞中M1受体与Cdk5均有分布和表达。②Oxo-M 1×10-4mol·L-1处理SH-SYSY细胞48 h,细胞存活率为(59.1±7.3)%,与细胞对照组相比显著降低(P<0.05),Cdk5表达显著升高(P<0.05);Rosc 1×10-4mol·L-1处理SH-SYSY细胞1 h,Cdk5表达显著降低(P<0.05);Rosc+Oxo-M组细胞存活率为(84.5±20.9)%,与Oxo-M组相比明显升高(P<0.05),Cdk5表达明显降低(P<0.05)。③DDVP1×10-5mol·L-1处理SH-SYSY细胞48 h,细胞存活率为(68.6±4.1)%,与细胞对照组相比显著降低(P<0.05),Cdk5表达显著升高(P<0.05);Rosc+DDVP细胞存活率为(84.4±8.8)%,与DDVP组相比显著升高,Cdk5表达显著降低(P<0.05)。流式细胞术结合TUNEL染色结果显示,DDVP处理SH-SYSY细胞48 h,细胞凋亡率为(64.1±8.4)%,与细胞对照组相比明显升高(P<0.05),TUNEL阳性细胞增多;而Rosc+DDVP组细胞凋亡率为(34.4±9.5)%,与DDVP组相比明显降低(P<0.05),TUNEL阳性细胞减少。结论 Oxo-M和DDVP可通过增强Cdk5活性引起SH-SY5Y细胞损伤,提示抑制Cdk5活性可显著降低由Oxo-M和DDVP引发的细胞毒作用。

关键词：胆碱能M受体细胞周期依赖性蛋白激酶5 细胞凋亡神经毒性

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