检索结果-内蒙古大学图书馆

检验医学 2019年第4期34卷 300-304页

作者：李静刘雪超孙惠敏崔冰漪刘秀玮唐山市中医医院免疫发光科河北唐山063000 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 唐山市中医医院肺系病科河北唐山063000

目的探讨医院感染细菌性肺炎的病原谱和耐药情况,分析患者感染30 d内死亡的危险因素。方法回顾性分析2017年1—12月唐山市中医医院医院感染细菌性肺炎患者的临床资料,分析病原菌分布及耐药情况。采用Logistic回归分析和Cox回归分析评估... 详细信息

目的探讨医院感染细菌性肺炎的病原谱和耐药情况,分析患者感染30 d内死亡的危险因素。方法回顾性分析2017年1—12月唐山市中医医院医院感染细菌性肺炎患者的临床资料,分析病原菌分布及耐药情况。采用Logistic回归分析和Cox回归分析评估相关危险因素。结果患者年龄、重症监护病房(ICU)入住>7 d、接受有创机械性通气>7 d是患者发生多重耐药(MDR)菌感染的独立危险因素;患者年龄、肺部肿瘤及合并机体其他部位感染是细菌性肺炎患者30 d内死亡的独立危险因素。结论明确了医院感染细菌性肺炎患者发生MDR及30 d内死亡的危险因素,为临床制定相应预防、治疗措施提供了理论依据。

关键词：医院感染细菌性肺炎危险因素多重耐药菌死亡

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两质粒系统重配甲型H1N1流感病毒株的研究

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免疫学杂志 2018年第4期34卷 353-358页

作者：周珊珊杨晓岚孙芳程晋霞谷宏婧段跃强杨鹏辉王希良安徽医科大学研究生院合肥230601 军事医学科学院微生物流行病研究所免疫学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建两质粒冷适应流感病毒拯救系统,提高流感病毒的重配效率。方法本研究通过构建克隆载体pfastbac△plh HTB,将流感病毒A/Ann Arbor/6/60(H2N2)6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS)的双向转录表达元件定向克隆入此载体,获得pfast... 详细信息

目的构建两质粒冷适应流感病毒拯救系统,提高流感病毒的重配效率。方法本研究通过构建克隆载体pfastbac△plh HTB,将流感病毒A/Ann Arbor/6/60(H2N2)6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS)的双向转录表达元件定向克隆入此载体,获得pfastbac△plh HTBP6。同时将流感病毒A/California/7/2009(H1N1)表面基因(HA、NA)双向转录表达元件定向克隆入p ENTR-1A质粒,获得p ENTR-1AP2。将2个重组质粒共转染MDCK/COSI细胞,细胞上清接种10日龄SPF鸡胚,收取尿囊液,血凝实验筛选阳性株,并进行全面鉴定。结果本研究利用两质粒系统成功重配甲型H1N1流感病毒株,命名为TRG A/California/07/2009(H1N1)Vca,重配病毒株传代后HA效价为2~8,形态符合流感病毒典型特征,大小80~120 nm,具有冷适应、温度敏感表型。结论两质粒流感病毒拯救系统为高效重配流感疫苗株提供了新策略。

关键词：反向遗传学两质粒系统流感病毒

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基于FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法

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安徽医科大学学报 2018年第5期53卷 739-745页

作者：罗森丁朋晓李涛王琴王慧遵义医药高等专科学校病原生物与免疫教研室遵义563006 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的利用FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法。方法构建针对破伤风毒素和B型肉毒毒素的双荧光标记底物的重组表达质粒,表达并纯化荧光标记底物重组蛋白;利用A型肉毒毒素轻链(ALc),B型肉毒毒素轻链(BLc)... 详细信息

目的利用FRET技术构建破伤风毒素和B型肉毒毒素酶类抑制剂高通量体外筛选方法。方法构建针对破伤风毒素和B型肉毒毒素的双荧光标记底物的重组表达质粒,表达并纯化荧光标记底物重组蛋白;利用A型肉毒毒素轻链(ALc),B型肉毒毒素轻链(BLc)和破伤风毒素轻链(TLc)分别对目的蛋白进行酶切反应。对基于双荧光标记底物高通量体外筛选方法的条件进行优化。酶动力学参数分别测定TLc和BLc切割底物荧光标记底物的Km和Kcat值。结果设计并成功构建荧光标记底物的重组表达质粒。表达并纯化后获得纯度为90%左右的重组蛋白,命名为CYVAMP。利用ALc、BLc和TLc分别对CYVAMP进行酶切,CYVAMP能被BLc和TLc识别切割而不能被ALc切割。对基于双荧光标记底物高通量体外筛选方法的条件优化得到:CYVAMP较适宜的范围为0.2~32μmol/L,酶标仪滤光片灵敏度设定的较合适的设置范围在65~110;(对于96孔板)动态实时检测间隔时间2 min较为合适,检测持续时间从30 min到120 min较合适。CYVAMP在内肽酶BLc作用下随反应时间变化与荧光值528与485比值作图最大时在1.5左右,最小在0.5左右。酶动力学参数测定得到BLc酶切CYVAMP的Km和Kcat值分别为(17.6±2.6)μmol/L和(4.16±0.28)s-1。TLc酶切CYVAMP的Km和Kcat值分别为(40.8±3.5)μmol/L和(2.65±0.32)s-1。结论成功构建基于FRET技术的分析法能满足对破伤风毒素和B型肉毒毒素的检测及抑制剂的高通量体外筛选所需。

关键词： FRET 肉毒毒素破伤风毒素高通量筛选

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1-辛烯-3-醇对我国稻田区主要媒介蚊种的引诱作用研究

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寄生虫与医学昆虫学报 2019年第2期26卷 88-91页

作者：李春晓阎婷董言德褚宏亮黄谊赵彤言军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 江苏省疾病预防控制中心江苏南京210009 湖南省疾病预防控制中心湖南长沙410005

1-辛烯-3-醇对蚊虫等吸血昆虫具有广谱引诱作用。本研究通过调配引诱剂中1-辛烯-3-醇的含量,测试不同1-辛烯-3-醇浓度下引诱剂对我国稻田区主要媒介蚊种三带喙库蚊和中华按蚊的现场引诱效果。目的在于提高现有捕蚊装置对三带喙库蚊和中... 详细信息

1-辛烯-3-醇对蚊虫等吸血昆虫具有广谱引诱作用。本研究通过调配引诱剂中1-辛烯-3-醇的含量,测试不同1-辛烯-3-醇浓度下引诱剂对我国稻田区主要媒介蚊种三带喙库蚊和中华按蚊的现场引诱效果。目的在于提高现有捕蚊装置对三带喙库蚊和中华按蚊的引诱能力。结果显示,6.3%~20%1-辛烯-3-醇粉剂均可显著提高捕获器对两种蚊虫的捕获效率,其中15%的浓度可提高三带喙库蚊和中华按蚊的捕获效果达3倍以上,引诱效果明显,具有良好应用前景。

关键词： 1-辛烯-3-醇三带喙库蚊中华按蚊引诱剂

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腺病毒41型感染致儿童腹泻一例临床表现及病毒基因组学特征分析

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中国病原生物学杂志 2018年第11期13卷 1236-1242页

作者：王媛媛裴广倩赵飞扬范航张湘莉兰何鮦鮦王云飞米志强安小平黄勇陈名武童贻刚安徽医科大学安徽合肥230000 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室中国科学技术大学附属第一医院安徽省立医院

目的针对消化道疑似感染病例,采用高通量测序技术筛查病原体,并测定其全基因组序列,阐明其基因组及进化特征。方法通过对原因不明腹泻患儿的粪便进行病原体高通量基因测序,然后拼接其全基因组序列,采用最大似然法(选择bootstrap为1000)... 详细信息

目的针对消化道疑似感染病例,采用高通量测序技术筛查病原体,并测定其全基因组序列,阐明其基因组及进化特征。方法通过对原因不明腹泻患儿的粪便进行病原体高通量基因测序,然后拼接其全基因组序列,采用最大似然法(选择bootstrap为1000)绘制主要抗原蛋白六邻体(hexon)、五邻体(penton)和纤维突蛋白(fiber)的进化树,分析进化特征;运用Recombination Detection Program version 4(RDP4)软件进行序列重组分析;使用软件CLC Genomics Workbench 9.0分析突变位点。结果患儿临床表现主要为发热、呕吐、腹泻伴抽搐,通过对腹泻患儿的粪便样品高通量测序,使用本实验室高通量测序数据分析程序检出41型腺病毒(HAdV-41)。进一步测序和拼接获得该病毒全基因组序列,其基因组全长34 138bp。序列比对显示该病毒核苷酸序列与已报道序列的最高同源性为99%(Human adenovirus 41isolate NIVD103),属于腺病毒F亚属。对该病毒六邻体、五邻体和纤维突蛋白进行进化分析,其六邻体与HAdV-41isolate NIVD103,HAdV-41isolate SH/2015/D16亲缘关系较近,五邻体与HAdV-41isolate NIVD103,HAdV-41isolate SH/2015/D16,HAdV41isolate SH/2015/D240,HAdV-41isolate SH/2015/D381亲缘关系较近,纤维突蛋白与五邻体相似;对全基因组序列进行重组分析,未发现明显的重组迹象,但突变分析显示引起此例腹泻的病毒株基因组有多处突变。结论从一例腹泻患儿粪便中检出的病原体为新的41型腺病毒,该病毒基因组与以往发现的41型腺病毒有较大差异,其流行态势、致病性及免疫原性值得关注。

关键词：高通量测序腺病毒41型六邻体五邻体纤维突

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lncRNA XLOC006926抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

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免疫学杂志 2018年第5期34卷 412-420页

作者：樊红霞程思杰赵玲娜王科宇严锦刘思齐牛燕张绍庚任明姬杨鹏辉内蒙古医科大学基础医学院呼和浩特010059 中国人民解放军第三0二医院肝胆外科中心北京100039 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所/病原微生物与生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨lnc RNA XLOC006926调控肝癌细胞增殖和转移机制,结合肝癌患者临床病理特征,分析其临床意义。方法利用实时荧光定量PCR方法检测lnc RNA XLOC006926在肝癌细胞系及肝癌患者配对(癌、癌旁)组织(n=88)中的表达水平。进一步通过CCK-... 详细信息

目的探讨lnc RNA XLOC006926调控肝癌细胞增殖和转移机制,结合肝癌患者临床病理特征,分析其临床意义。方法利用实时荧光定量PCR方法检测lnc RNA XLOC006926在肝癌细胞系及肝癌患者配对(癌、癌旁)组织(n=88)中的表达水平。进一步通过CCK-8、克隆形成、划痕及transwell实验检测过表达或抑制lnc RNA XLOC006926对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,同时结合临床信息统计分析其与临床病理特征及患者预后的相关性。结果 lnc RNA XLOC006926在肝癌细胞及肝癌组织中的表达显著降低,过表达lnc RNA XLOC006926后肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,相反抑制lnc RNA XLOC006926后肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力增强。结合患者临床信息分析,lnc RNA XLOC006926的表达量与肿瘤大小(P=0.007)、PVTT(P=0.024)具有显著相关性,其低表达预示着预后较差。结论 lnc RNA XLOC006926在肝癌发生发展中发挥了重要作用,参与调节肝癌细胞的增殖及迁移,有望成为肝癌发生发展的生物标志物和肝癌预防治疗的新靶点。

关键词：肝癌长链非编码RNA 增殖迁移侵袭

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鼠疫耶尔森菌201菌株中重要代谢相关基因特定突变与其小鼠毒力的关系研究

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军事医学 2018年第11期42卷 850-855页

作者：宋凯吕瑞辰冯欢肖丽生颜焱锋谭亚芳崔玉军杨瑞馥宋亚军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 东部战区疾病预防控制中心南京210002 兰州大学生命科学学院兰州730000 青海省鼠疫防控及研究重点实验室西宁811062

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌) 201株asp A和gln K的单核苷酸多态性位点(SNP)及fyu A三碱基缺失与小鼠毒力的关系。方法通过基于自杀载体p DS132同源重组的无痕突变技术,分别构建了鼠疫菌201株的asp A和gln K基因的SNP位... 详细信息

目的探讨布氏田鼠型鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌) 201株asp A和gln K的单核苷酸多态性位点(SNP)及fyu A三碱基缺失与小鼠毒力的关系。方法通过基于自杀载体p DS132同源重组的无痕突变技术,分别构建了鼠疫菌201株的asp A和gln K基因的SNP位点突变株(201-asp ATTG和201-gln KCCA)以及fyu A的GCA突变株(201-fyu AGCAdel)。随后采用腹股沟皮下注射方式对小鼠攻毒,通过生存曲线确定以上基因中的突变对小鼠毒力是否具有显著影响。结果生存曲线结果显示,201-asp ATTG和201-gln KCCA两株突变菌与野生型对小鼠毒力无明显差异; 201-fyu AGCAdel突变株在2周内不能对小鼠致死,与野生型毒力存在显著差异,且其质粒回补株对小鼠毒力恢复到野生型水平。结论该研究中所涉及的asp A和gln K的SNP突变不能使鼠疫菌201株对小鼠明显减毒,asp A和gln K的特定位点突变导致的蛋白活性差异可能与鼠疫菌201株对小鼠毒力无关,而fyu A的GCA缺失可导致鼠疫菌对小鼠的毒力明显下降,有必要对其内在机制进行深入研究。

关键词：耶尔森菌,鼠疫多态性,单核苷酸毒力突变

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驻西非3例华人特殊疟疾病例诊疗体会

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传染病信息 2019年第5期32卷 466-471页

作者：涂波储芳许彪田园左曙青赵光宇郑俊杰陈威巍中国人民解放军总医院第五医学中心感染性疾病诊疗与研究中心北京100039 中国人民解放军总医院青少年肝病诊疗与研究中心北京100039 中国人民解放军总医院重症医学中心北京100039 中国人民解放军总医院卫勤部北京100039 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所流行病学与病原微生物研究室长春130122 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

疟疾是对全球健康影响最大的传染病,西非是疟疾的高流行地区。本文通过报道我国援塞拉利昂军事医学专家组在塞拉利昂诊治的3例疟疾患者的经验和体会,以期为临床医生在诊治类似疾病时提供参考、借鉴。

关键词：疟疾疟原虫西非诊疗体会

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基于荚膜多糖基因wzc可变区序列的肺炎克雷伯菌荚膜分型

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军事医学 2018年第8期42卷 637-640页

作者：王灿李璞媛苑鑫童贻刚高明明刘慧莹秦艳红米志强柏长青安徽医科大学解放军307临床学院北京100071 解放军307医院呼吸与危重症医学科北京100071 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的对分离培养的肺炎克雷伯菌菌株进行荚膜分型以判断不同荚膜型在其中的分布。方法对来源于北京地区的肺炎克雷伯菌菌株参照编码肺炎克雷伯菌荚膜多糖基因中一段wzc基因可变区(CD1-VR2-CD2)序列设计引物,运用PCR法扩增目的片段并进行... 详细信息

目的对分离培养的肺炎克雷伯菌菌株进行荚膜分型以判断不同荚膜型在其中的分布。方法对来源于北京地区的肺炎克雷伯菌菌株参照编码肺炎克雷伯菌荚膜多糖基因中一段wzc基因可变区(CD1-VR2-CD2)序列设计引物,运用PCR法扩增目的片段并进行测序,与已发表的荚膜型或NCBI数据库上比对测序结果,最终确定荚膜型别。结果在实验室保存的231株肺炎克雷伯菌中,有210株可用此法进行荚膜分型(分型率为90. 9%);在分出的40种不同的荚膜型中,K47为最常见的荚膜型别,占17. 1%(36/210);其次为K15型,占10. 5%(22/210),其他为K1和K2型,分别占5. 7%(12/210)和6. 6%(14/210)。结论基于荚膜多糖基因wzc可变区序列进行分型的方法操作简单,更有利于不同实验室之间的结果相互比较。另外,K47、K15、K1和K2型为临床肺炎克雷伯杆菌常见的荚膜型。

关键词：肺炎克雷伯菌荚膜分型聚合酶链反应

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金黄色葡萄球菌肠毒素B精制免疫球蛋白对小鼠中毒模型的免疫救治效果研究

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生物技术通讯 2019年第6期30卷 756-761页

作者：韩慧李敏杨晓岚段跃强谷宏婧范铁炯李鑫杨鹏辉刘媛闫芳郑源强石艳春赵忠鹏内蒙古自治区分子生物学重点实验室内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010058 病原微生物生物安全国家重点实验室军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 上海赛伦生物技术股份有限公司上海201707 解放军总医院第五医学中心北京100039 山西农业大学动物科技学院山西太谷030800

目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F(ab′)2制品,为SEB中毒的救治提供候选药。方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达... 详细信息

目的:研制金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)精制免疫球蛋白,即马抗SEB免疫球蛋白F(ab′)2制品,为SEB中毒的救治提供候选药。方法:利用传统的发酵和纯化工艺制备天然SEB纯品,并建立小鼠实验动物模型;利用分子克隆和蛋白质纯化技术,克隆、表达、纯化重组SEB,加入适量弗氏佐剂充分乳化,免疫马匹,测定免疫马匹血清中和抗体效价后采血,分离血清,按照成熟的生产工艺制备治疗性抗体成品;对成品进行安全性检测及免疫救治效果评价。结果:纯化的天然SEB经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为0.5μg/kg;纯化的重组SEB表达量超过2 mg/mL,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度大于90%,对小鼠腹腔注射的半数致死量为50μg/kg;免疫马匹血清中和抗体效价达2000 U/mL以上时,采血并制备F(ab′)2成品,经SDS-PAGE和HPLC法测定纯度在80%以上,中和抗体效价超过2500 U/mL;安全性符合现行《中国药典》要求;对SEB中毒动物模型有很好的免疫救治效果。结论:建立了SEB精制免疫球蛋白制品生产工艺,制备的成品符合现行《中国药典》要求,为SEB中毒的救治提供了候选药。

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B 免疫球蛋白动物模型

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