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食品科学 2023年第11期44卷 233-243页

作者：蒋同李龙岩张菊梅谢新强吴清平广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510000 华南农业大学食品学院广东广州510642 广东环凯生物科技有限公司广东广州510663 广东科环生物科技有限公司广东广州510525

代谢综合征是一种慢性全身性代谢障碍疾病,患病人数逐年增加,其患病率受年龄、性别、饮食习惯等影响。研究指出代谢综合征与胰岛素抵抗、肥胖、氧化应激、炎症等密切相关。近年来,通过宏基因组、扩增子测序等组学手段发现肠道菌群与代... 详细信息

代谢综合征是一种慢性全身性代谢障碍疾病,患病人数逐年增加,其患病率受年龄、性别、饮食习惯等影响。研究指出代谢综合征与胰岛素抵抗、肥胖、氧化应激、炎症等密切相关。近年来,通过宏基因组、扩增子测序等组学手段发现肠道菌群与代谢综合征密切相关,而益生菌作为调节肠道微生态平衡的一种手段,通过调节肠道菌群及其代谢产物改善氧化应激、降低促炎因子分泌、调节糖脂代谢,进而可改善代谢综合征。本文系统归纳了代谢综合征的病理机制和肠道菌群与代谢综合征之间的关联性,详细阐述了益生菌改善代谢综合征的关键分子靶点和具体作用通路,旨在为益生菌作为代谢综合征治疗新策略和靶向挖掘具有改善代谢综合征的健康功能微生物提供理论参考。

关键词：代谢综合征益生菌氧化应激炎症肠道菌群

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互补交配型配对诱导蛹虫草有性子实体形成

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菌物学报 2023年第1期42卷 344-352页

作者：冯德龙胡惠萍雍天乔刘远超肖春黄龙花谢意珍吴清平黄山风景区管理委员会园林局安徽黄山245800 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

前期我们获得了优良性状蛹虫草Cordyceps militaris野生菌株W141436,其子实体虫草素含量高达3.72 mg/kg干重,子实体多糖高达6.7 g/100 g干重,但在大规模应用中发现它发生退化。针对蛹虫草人工栽培退化问题,我们提出蛹虫草子实体形成是... 详细信息

前期我们获得了优良性状蛹虫草Cordyceps militaris野生菌株W141436,其子实体虫草素含量高达3.72 mg/kg干重,子实体多糖高达6.7 g/100 g干重,但在大规模应用中发现它发生退化。针对蛹虫草人工栽培退化问题,我们提出蛹虫草子实体形成是有性生殖过程,其两种交配型发生交配是蛹虫草子实体形成的必要条件。本文基于交配型基因分子标记研究了优良性状蛹虫草野生菌株W141436的退化机制。具体地,采用单孢子分离的方法对蛹虫草野生分离株W141436的子囊孢子进行分离,得到了72个单孢菌株。进一步采用PCR方法对单孢菌株及亲本菌株进行了交配型基因类型鉴定。在72个单孢菌株中,28株为Mat1-1类型交配基因型,31株为Mat1-2类型交配基因型,13株含有与亲本相同的交配型基因。根据鉴定结果,对2株Mat1-1型(SP28、SP33)和2株Mat1-2型(SP15、SP32)菌株进行了栽培实验。结果表明,形成子实体的栽培用亲本菌株同时含有Mat1-1和Mat1-2两种交配类型基因,即只有含不同交配型基因的菌株具有发育为子实体的能力,而含同种交配型基因的菌株则不能发育为子实体。本研究为防止蛹虫草在大规模种植中退化提供了理论依据。

关键词：蛹虫草交配型基因分子标记退化机制

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植物乳杆菌拮抗致病大肠杆菌机制与应用研究进展

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现代食品科技 2023年第12期39卷 310-319页

作者：杨广珠张淑红李滢刘鸣陈维张菊梅王涓吴清平华南农业大学食品学院广东广州510642 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

大肠杆菌(Escherichia coli)是最为常见的食源性病原菌之一,随着致病大肠杆菌严峻的耐药性形势出现,防控致病大肠杆菌成为一个难题。植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)是一种具有良好的抑菌效果及提升机体免疫功能作用的益生菌... 详细信息

大肠杆菌(Escherichia coli)是最为常见的食源性病原菌之一,随着致病大肠杆菌严峻的耐药性形势出现,防控致病大肠杆菌成为一个难题。植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)是一种具有良好的抑菌效果及提升机体免疫功能作用的益生菌,其可通过多种不同的作用机制拮抗致病大肠杆菌,是一种极具开发潜力的新型抗菌物质。该研究系统综述了植物乳杆菌拮抗致病大肠杆菌的研究进展,从代谢活性物质、增强黏膜屏障、竞争粘附和肠道免疫调节多角度剖析植物乳杆菌在体内外拮抗大肠杆菌的作用机制,进而总结植物乳杆菌在畜禽/水产养殖业、食品加工制造业及临床治疗中的应用模式,以期对益生菌在食品安全防控应用提供参考。

关键词：植物乳杆菌致病大肠杆菌抑制应用

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植物乳植杆菌类胡萝卜素生物合成关键基因LpispA的功能鉴定

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现代食品科技 2024年第2期40卷 131-138页

作者：李舒丽谢卓婷沈润泽郭丽琼林俊芳陈谋通叶志伟华南农业大学食品学院广东广州510642 广东省微生态制剂工程技术研究中心广东广州510642 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

类胡萝卜素具有抗氧化和抗肿瘤等多种重要生理活性。与化学合成法和植物提取法相比较,利用微生物法合成新型的、高价值的类胡萝卜素,具有食用安全和经济可行等优势。植物乳植杆菌作为天然C_(30)类胡萝卜素来源的几种细菌之一,其类胡萝... 详细信息

类胡萝卜素具有抗氧化和抗肿瘤等多种重要生理活性。与化学合成法和植物提取法相比较,利用微生物法合成新型的、高价值的类胡萝卜素,具有食用安全和经济可行等优势。植物乳植杆菌作为天然C_(30)类胡萝卜素来源的几种细菌之一,其类胡萝卜素生物合成途径却尚未被阐明清楚。该论文基于转录组数据对一株海洋源植物乳植杆菌中的LpispA基因进行克隆、绘制系统进化树,并构建了类胡萝卜素合成功能互补的大肠杆菌表达系统pAC-BETA∆E-ispA,再采用紫外可见光谱法和反相高效液相色谱法验证产物成分。结果表明,植物乳植杆菌LpispA与桃色欧文氏菌的亲缘关系最近;构建的大肠杆菌工程菌株pAC-BETA∆E-ispA的β-胡萝卜素(C_(40))产量为0.05 mg/g DCW。因此,LpispA在大肠杆菌功能互补表达系统中成功表达了Geranylgeranyl Pyrophosphate(GGPP)合成酶的活性,也即说明LpispA在细菌类胡萝卜素合成途径中可作为类胡萝卜素合成多功能酶,共同参与C_(30)和C_(40)类胡萝卜素的合成。该研究为植物乳植杆菌类胡萝卜素生物合成机制研究和利用植物乳植杆菌作为类胡萝卜素补充剂的应用奠定了实验基础。

关键词：类胡萝卜素植物乳植杆菌 LpispA基因互补表达

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人源札幌病毒抗原多样性及遗传进化研究进展

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微生物学报 2023年第9期63卷 3350-3359页

作者：孟洛冰薛亮高珺珊张菊梅吴清平广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070 华南理工大学生物科学与工程学院广东广州510641

人源札幌病毒(human sapovirus,HuSaV)是全球范围内引起散发性急性胃肠炎和相关疫情的重要病原,尤其对婴幼儿及免疫缺陷患者等高危人群存有致死的危险,人源札幌病毒具有丰富的抗原和遗传多样性,其抗原多样性及免疫原性主要位于P2亚结构... 详细信息

人源札幌病毒(human sapovirus,HuSaV)是全球范围内引起散发性急性胃肠炎和相关疫情的重要病原,尤其对婴幼儿及免疫缺陷患者等高危人群存有致死的危险,人源札幌病毒具有丰富的抗原和遗传多样性,其抗原多样性及免疫原性主要位于P2亚结构域,并且衣壳蛋白免疫原性是人源札幌病毒疫苗研发的理论基础。由于人源札幌病毒可以耐受高衣壳突变而不失去病毒功能使它得以迅速进化,其在宿主体内进化过程中存在连续的氨基酸突变,且突变主要在VP1的P结构域内积累,少见于非结构蛋白和VP2中。序列和结构的改变使得人源札幌病毒逃脱先前存在的群体免疫,有必要进一步探索人源札幌病毒的免疫逃逸机制及其拮抗宿主的免疫应答。因此,本文针对人源札幌病毒在基因组特征、抗原多样性特点、遗传进化机制等领域的研究进展进行了系统综述,并对未来研究中亟待解决的科学问题进行了展望。

关键词：人源札幌病毒急性胃肠炎抗原多样性遗传进化

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灵芝孢子粉脂质成分HPLC-ELSD指纹图谱构建及含量测定

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食用菌学报 2023年第6期30卷 52-59页

作者：夏凤娜关小莺陈少丹陈秋颜张一帆杨小兵广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州510070

以16批(S1~S16)不同来源的灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉为材料,构建灵芝孢子粉脂质成分高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)指纹图谱,将S1~S16的HPLC-ELSD指纹图谱数据导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版),指认共有峰和... 详细信息

以16批(S1~S16)不同来源的灵芝(Ganoderma lucidum)孢子粉为材料,构建灵芝孢子粉脂质成分高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)指纹图谱,将S1~S16的HPLC-ELSD指纹图谱数据导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版),指认共有峰和评价相似度,采用HPLC-ELSD测定S1~S16中亚油酸、棕榈酸、油酸和麦角甾醇含量。结果表明:共指认4个共有峰,分别为亚油酸、棕榈酸、油酸和麦角甾醇;除S14外,其他15批灵芝孢子粉中脂质成分HPLC-ELSD指纹图谱相似度高,较为稳定;不同来源的灵芝孢子粉中亚油酸、棕榈酸和油酸的含量差异较大,麦角甾醇含量较为稳定。

关键词：灵芝孢子粉高效液相色谱-蒸发光散射检测脂质成分指纹图谱

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基于响应面分析的高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基的研制及效果评价

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微生物学通报 2023年第9期50卷 4141-4153页

作者：张阳阳万强牛得权苗森蒋富凤刘翔曲晓莹张菊梅蔡芷荷陈博吴清平陕西科技大学食品与生物工程学院陕西西安 710021 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆 526238 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070

[背景]猪水肿病大肠杆菌引发的疾病造成了很大的危害,但现有培养基存在培养密度低的问题.[目的]研制出高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基.[方法]以常用的市售猪水肿培养基为对照,通过单因素试验、爬坡试验(Plackett-Burman,PB)、响... 详细信息

[背景]猪水肿病大肠杆菌引发的疾病造成了很大的危害,但现有培养基存在培养密度低的问题.[目的]研制出高抗原活性猪水肿病大肠杆菌疫苗培养基.[方法]以常用的市售猪水肿培养基为对照,通过单因素试验、爬坡试验(Plackett-Burman,PB)、响应面(Box-Behnken,BB)试验对猪水肿培养基进行响应面优化,得到猪水肿培养基最优配方.以响应面试验得到的培养基培养猪水肿病大肠杆菌,评价不同培养时间点菌株的抗原活性,制作灭活疫苗,进行动物免疫保护试验.[结果]对研制的培养基进行扩大培养验证,发现扩大培养得到的菌株活菌数可达 5×109 CFU/mL以上,约为对照组的 2 倍.制备的灭活疫苗效价可达 1:140 000,并在 9 h时抗原蛋白效价达到最高.[结论]本研究研制出的疫苗培养基显著提高了猪大肠杆菌菌体密度,并可提高菌体抗原活性,为猪水肿病灭活疫苗的制备提供了技术指引.

关键词：猪水肿病响应面法疫苗培养基高抗原活性

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基于响应面法的高抗原活性禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基的研制与效果评价

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微生物学通报 2023年第8期50卷 3515-3525页

作者：刘翔万强苗森牛得权张阳阳蒋富凤曲晓莹张菊梅蔡芷荷陈博吴清平合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥 230601 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆 526238 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070

[背景]禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)引发的禽霍乱疫情造成了巨大的危害,而现有培养基存在培养菌密度较低的问题.[目的]研制高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基.[方法]通过单因素试验、Plackett-Burman试验和响应面分... 详细信息

[背景]禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)引发的禽霍乱疫情造成了巨大的危害,而现有培养基存在培养菌密度较低的问题.[目的]研制高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基.[方法]通过单因素试验、Plackett-Burman试验和响应面分析方法对禽多杀性巴氏杆菌培养基的成分进行调整,并对不同发酵阶段的菌体进行免疫原性测定.最后使用该培养基培养细菌后制备疫苗并通过动物攻毒试验评价其保护效果.[结果]使用研制的培养基培养禽多杀性巴氏杆菌,活菌密度能够在 6 h达到约 1.84×1010 CFU/mL,增菌效果是对照培养基的 2.6 倍;免疫原性测定结果显示在生长平台期菌体的抗原活性最高;攻毒试验表明制备的疫苗能够很好地抵抗禽多杀性巴氏杆菌的侵袭.[结论]研制出了高抗原活性的禽多杀性巴氏杆菌疫苗培养基,为疫苗的生产奠定了基础.

关键词：禽多杀性巴氏杆菌高抗原活性疫苗培养基响应面法

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基于响应面分析的高抗原活性鸭疫里默氏杆菌疫苗培养基的研制及其效果评价

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微生物学通报 2023年第8期50卷 3526-3537页

作者：牛得权万强苗森刘翔张阳阳蒋富凤曲晓莹张菊梅蔡芷荷陈博吴清平合肥工业大学食品与生物工程学院安徽合肥 230601 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070 广东环凯生物科技有限公司广东肇庆 526238 广东省科学院微生物研究所华南应用微生物国家重点实验室广东省微生物安全与健康重点实验室农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广东广州 510070

[背景]鸭疫里默氏杆菌广泛存在于养殖场,引起雏鸭发生传染性浆膜炎,严重危害养鸭业的发展.[目的]提高鸭疫里默氏杆菌发酵培养水平和抗原活性,为鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制提供技术指引.[方法]利用单因素及响应面的试验设计方法,针对... 详细信息

[背景]鸭疫里默氏杆菌广泛存在于养殖场,引起雏鸭发生传染性浆膜炎,严重危害养鸭业的发展.[目的]提高鸭疫里默氏杆菌发酵培养水平和抗原活性,为鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制提供技术指引.[方法]利用单因素及响应面的试验设计方法,针对鸭疫里默氏杆菌进行疫苗培养基的研制,并探究不同发酵时间点该菌的抗原活性,选择抗原活性最高点时制备灭活疫苗,通过动物免疫保护试验评价疫苗免疫效果.[结果]使用研制的疫苗培养基发酵培养鸭疫里默氏杆菌,其活菌数能够达到 4.68×1010 CFU/mL,较市面上该菌专用的培养基提高 2.29 倍.该菌发酵 12 h后抗原活性达到最高,在此时制备的灭活疫苗诱导小鼠产生的抗体水平显著高于商品化灭活疫苗,攻毒保护率达到了 100%.[结论]本研究研制的培养基具有优异的增菌效果,可作为生产鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗抗原的发酵培养基,疫苗生产过程中可选择菌株抗原活性达到最高时收集菌体.

关键词：鸭疫里默氏杆菌疫苗培养基抗原活性响应面

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人诺如病毒重组乳酸菌疫苗的制备及免疫效果评价

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国际病毒学杂志 2024年第1期31卷 1-7页

作者：曹颖雯薛亮徐锐权高珺珊寇晓霞广州市传染性疾病临床快速诊断与预警重点实验室、广州医科大学金域检验学院 510180 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广州510070

目的诺如病毒(norovirus,NoV)是导致人类急性胃肠炎的主要病原体之一,目前仍没有获批上市的NoV疫苗,开发安全有效且便于推广的NoV疫苗具有重要意义.本研究基于乳酸菌表达系统构建在体外表达GⅡ.2型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)主... 详细信息

目的诺如病毒(norovirus,NoV)是导致人类急性胃肠炎的主要病原体之一,目前仍没有获批上市的NoV疫苗,开发安全有效且便于推广的NoV疫苗具有重要意义.本研究基于乳酸菌表达系统构建在体外表达GⅡ.2型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)主要衣壳蛋白(viral protein 1,VP1)的重组乳酸乳球菌,并评价其诱导机体产生黏膜免疫和体液免疫的能力.方法将HuNoV GⅡ.2型VP1基因片段无缝克隆至乳酸菌表达系统中,体外诱导表达目的蛋白VP1,并通过正交试验优化蛋白表达条件.对小鼠进行口服免疫后通过ELISA方法测定其血清和组织中的免疫因子水平.结果构建了一株针对HuNoV GⅡ.2型的新型重组乳酸乳球菌疫苗,口服免疫后可诱导小鼠产生NoV特异性IgG和IgA,并诱导产生黏膜免疫系统的主要效应分子sIgA.结论本研究构建的口服乳酸菌疫苗能够诱导小鼠产生针对NoV的先天性和获得性免疫,并产生对应的免疫分子.与被广泛用于研究的病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗相比,此口服疫苗还具有制备快捷、成本更低、运输方便的优势.

关键词：人诺如病毒口服疫苗乳酸菌 VP1

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