检索结果-内蒙古大学图书馆

2023年贵州省六盘水市部分地区蜱传立克次体调查

中国血吸虫病防治杂志 2024年第2期36卷 154-158页

作者：李丹尼李娅于永慧欧阳譞熊小路金山焦俊内蒙古农业大学兽医学院、农业部动物临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010018 北京微生物流行病研究所、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 贵州省六盘水市人民医院肾内科贵州六盘水553000

目的了解贵州省六盘水市部分地区蜱携带立克次体感染率,为当地蜱传立克次体病防控工作提供参考依据。方法 2023年4—6月在贵州省六盘水市盘州市大山镇高兴村捕捉牛、羊体表寄生蜱,采用形态学和分子生物学方法对蜱种进行鉴定。采用巢式... 详细信息

目的了解贵州省六盘水市部分地区蜱携带立克次体感染率,为当地蜱传立克次体病防控工作提供参考依据。方法 2023年4—6月在贵州省六盘水市盘州市大山镇高兴村捕捉牛、羊体表寄生蜱,采用形态学和分子生物学方法对蜱种进行鉴定。采用巢式PCR法检测蜱携带的立克次体,包括斑点热群立克次体、柯克斯体属、无形体属、埃立克体属和东方体属,扩增的阳性片段测序后与Gen Bank已知序列进行同源性比对。结果共采集200只蜱,经鉴定均为微小扇头蜱。巢式PCR联合测序鉴定出蜱携带敬信立克次体暂定种(40.50%)、贝氏柯克斯体(1.50%)和柯克斯体共生菌(27.00%),未检测出无形体、埃立克体及东方体。结论贵州省六盘水市部分地区微小扇头蜱携带敬信立克次体暂定种、贝氏柯克斯体和柯克斯体共生菌;当地有关部门需加强家畜和人群蜱传立克次体感染监测,减少蜱传立克次体病危害。

关键词：微小扇头蜱立克次体敬信立克次体暂定种贝氏柯克斯体柯克斯体共生菌六盘水市

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猴痘病毒的研究进展概述

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病毒学报 2024年第1期40卷 169-182页

作者：王雪琛李涛王慧王凤雪内蒙古农业大学兽医学院农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室呼和浩特010018 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

猴痘是由猴痘病毒引起的一种人兽共患疾病。猴痘病毒因1958年从带有痘疹的食蟹猴体内分离出而得名。20世纪猴痘病毒多分布于非洲中、西部的热带雨林地区。进入21世纪后,随着世界贸易及人口流通的增加,猴痘在世界范围内日益流行并造成人... 详细信息

猴痘是由猴痘病毒引起的一种人兽共患疾病。猴痘病毒因1958年从带有痘疹的食蟹猴体内分离出而得名。20世纪猴痘病毒多分布于非洲中、西部的热带雨林地区。进入21世纪后,随着世界贸易及人口流通的增加,猴痘在世界范围内日益流行并造成人际间快速传播,造成其他非流行猴痘国家迅速暴发猴痘疫情。猴痘对人类生命安全构成重大威胁,更对全球猴痘疫情的防控提出挑战。本文就猴痘病毒的流行病学、生物学特性、将猴痘病毒应用于不同动物模拟研究猴痘病毒学、免疫学与病理学机制而建立的实验动物模型及疫苗和药物的预防的研究现状进行介绍,为积极防范猴痘疫情、加快研发出特异性针对猴痘的疫苗或药物提供帮助。

关键词：猴痘猴痘病毒人兽共患疾病流行病学特征预防措施

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粪类圆线虫虾青素金属蛋白酶基因的克隆、表达及定位分析

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中国兽医学报 2023年第1期43卷 98-105页

作者：张碧瀛单嘉男覃裴溪周涛勋周焕胡敏华中农业大学、动物医学院、农业微生物学国家重点实验室武汉湖北430070

虾青素金属蛋白酶是一种广泛存在于多种动物体内的金属蛋白酶,研究表明该蛋白酶在寄生线虫的入侵和生长发育过程中发挥重要作用。但目前对粪类圆线虫虾青素金属蛋白酶(Ss-AST-1)还所知甚少,研究旨在对该酶编码基因(Ss-ast-1)进行鉴定和... 详细信息

虾青素金属蛋白酶是一种广泛存在于多种动物体内的金属蛋白酶,研究表明该蛋白酶在寄生线虫的入侵和生长发育过程中发挥重要作用。但目前对粪类圆线虫虾青素金属蛋白酶(Ss-AST-1)还所知甚少,研究旨在对该酶编码基因(Ss-ast-1)进行鉴定和表达分析,为进一步研究其功能奠定基础。利用生物信息学方法对Ss-ast-1基因进行序列分析,通过转录组数据分析Ss-ast-1在各个发育阶段的转录水平,转基因技术进行虫体内表达定位分析。通过体外原核表达重组蛋白,Western blot分析其抗原性。采用免疫荧光组织化学方法对Ss-AST-1在粪类圆线虫幼虫体内的定位进行研究。结果显示:Ss-ast-1基因全长1905 bp,编码634个氨基酸;转录组分析该基因在iL3期的表达水平最高。定位分析表明该蛋白在虫卵细胞的细胞核和细胞质均有表达;体外表达重组蛋白的大小约67.5 kDa,Western blot分析表明多克隆抗体可以较好的识别全虫蛋白中的Ss-AST-1。免疫荧光结果显示Ss-AST-1在幼虫体内表达并分布幼虫的头部和体壁。Ss-ast-1属于虾青素金属蛋白酶家族,其可能在寄生虫入侵过程中发挥作用,为进一步探究粪类圆线虫蛋白功能奠定了良好的基础。

关键词：粪类圆线虫虾青素金属蛋白酶原核表达显微注射

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痘苗病毒蛋白D8纳米抗体的原核表达及结合活性分析

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中国兽医学报 2024年第8期44卷 1728-1734页

作者：田婧婧杨晓岚李涛王慧范瑞文山西农业大学动物医学学院山西太谷030801 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

利用SUMO标签制备痘苗病毒(vaccinia virus,VACV)蛋白D8的纳米抗体,并分析其与抗原是否具有结合活性。设计并合成序列,构建原核表达质粒pKMD-SUMO-D8,将其转化大肠杆菌(Escherichia coli,***)BL21(DE3)感受态细胞并诱导表达;纯化带有Hi... 详细信息

利用SUMO标签制备痘苗病毒(vaccinia virus,VACV)蛋白D8的纳米抗体,并分析其与抗原是否具有结合活性。设计并合成序列,构建原核表达质粒pKMD-SUMO-D8,将其转化大肠杆菌(Escherichia coli,***)BL21(DE3)感受态细胞并诱导表达;纯化带有His标签和SUMO标签的抗体Anti-SUMO-D8,之后利用SUMO蛋白酶切除His标签和SUMO标签,进一步获得Anti-D8;最后,应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及间接免疫荧光试验(IFA)对其结合活性进行检测并分析。结果显示,成功构建了原核表达质粒pKMD-SUMO-D8和重组菌株,在30℃条件下,终浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导表达菌株4 h时,Anti-SUMO-D8表达量最佳;获得了高纯度的Anti-SUMO-D8和Anti-D8纳米抗体;间接ELISA结果显示,Anti-SUMO-D8和Anti-D8与抗原均具有结合活性;在相同条件下,Anti-D8与VACV及E8L的结合活性高于Anti-SUMO-D8。间接IFA结果显示,VACV侵染48 h后,试验组部分细胞核在荧光显微镜下可见绿色荧光。利用SUMO标签可高效制备VACV蛋白D8的纳米抗体,且制备的纳米抗体具有一定的结合活性。本研究结果为纳米抗体的制备提供了新思路,也为深入研究VACV蛋白D8纳米抗体的生物学功能奠定了基础。

关键词：痘苗病毒纳米抗体 SUMO 结合活性

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河南省和湖北省部分地区鸡球虫分离株对磺胺氯吡嗪钠耐药性调查

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动物医学进展 2023年第4期44卷 125-129页

作者：耿天天罗莉妍王雅乐申邦方瑞胡敏赵俊龙周艳琴华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070

为了解河南省和湖北省鸡球虫对磺胺氯吡嗪钠的耐药现状,选取河南省18个地区和湖北省17个地区的地方分离株进行鸡体笼养试验,以抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)来评价各虫株耐药性。研究结果显示,在所研究的93株鸡球虫分离株中,河... 详细信息

为了解河南省和湖北省鸡球虫对磺胺氯吡嗪钠的耐药现状,选取河南省18个地区和湖北省17个地区的地方分离株进行鸡体笼养试验,以抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)来评价各虫株耐药性。研究结果显示,在所研究的93株鸡球虫分离株中,河南省共计虫株52株,湖北省共计虫株41株。在河南省52株分离虫株中,有25株对磺胺氯吡嗪钠完全耐药(ACI<160),16株中度耐药(160≤ACI≤180),11株敏感(ACI>180);在湖北省共计41株鸡球虫分离虫株中,有9株完全耐药,9株中度耐药,23株敏感。研究结果为河南省和湖北省鸡球虫的耐药性提供了数据支撑。

关键词：鸡球虫耐药性磺胺氯吡嗪钠,鸡体笼养试验

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基于我国特色温水鱼类细胞的污染物毒性筛查技术研究

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生态毒理学报 2025年

作者：陶慧娴王英英许玉洁陈桂兰许玫英梅承芳曾国驱五邑大学环境与化学工程学院广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室中国水产科学研究院珠江水产研究所农业农村部渔药创制重点实验室广东省水产动物免疫技术重点实验室

鱼类急性毒性测试在化学品水生毒性评价中广泛应用，随着新化学品数量的持续增长和大量使用，传统毒性测试周期长、通量低和易引发动物伦理争议等缺陷日益凸显。基于鱼类细胞的高通量毒性筛选技术为解决相关问题提供了新方案。本研究基... 详细信息

鱼类急性毒性测试在化学品水生毒性评价中广泛应用，随着新化学品数量的持续增长和大量使用，传统毒性测试周期长、通量低和易引发动物伦理争议等缺陷日益凸显。基于鱼类细胞的高通量毒性筛选技术为解决相关问题提供了新方案。本研究基于我国特色温水鱼类细胞——鲤鱼上皮瘤细胞系（EPC）和草鱼肝细胞系（L8824），提出一种新的高通量毒性筛选方法，使用3种细胞活力检测方法研究评估了持久性有机污染物、内分泌干扰物、药物和个人护理品等11种典型环境污染物的细胞毒性，并进一步探讨了体内外毒性效应的相关性。结论如下所述。（1）细胞模型间毒性响应的差异：比较半数效应浓度(EC50)保守值，78%的受试污染物对EPC细胞的EC50值比L8824细胞更低，表明EPC细胞对于文中受试物质敏感性高于L8824；（2）细胞活力检测终点与毒性作用机制的关系：最敏感的活力终点可以指示受试物质的毒性机制，如MIT、CSP，但细胞本身的特性可能会影响其对受试物质毒性的响应；（3）毒性等级预测的准确率：EPC和L8824细胞定性受试物质毒性准确率>90%，50%以上污染物的体内外毒性等级划分一致，L8824对非甾体抗炎药的毒性预测与体内高度吻合（差异倍数约为1，等级完全一致）；（4）体内外相关性：体内外毒性差异倍数一般在5倍以内，细胞模型对82%的受试物质毒性敏感性普遍低于实验鱼，并且在识别有毒物质时尤为明显。EPC和L8824细胞与体内毒性相关性良好(R2EPC=0.734 vs. R2L8824=0.697)，是具有潜力的实验鱼替代对象，溶酶体活性指标与体内毒性相关性最强(R2EPC=0.756 vs. R2L8824=0.735)；（5）细胞模型适用性评价：EPC细胞与体内毒性相关性系数更高，是极具潜力的替代模型，L8824细胞对非甾体抗炎药类物质的响应突出，但其靶向适用性需进一步验证；（6）展望：一方面，建立本土鱼类细胞库并推进商品化进程（如稀有鮈鲫），另一方面，通过低血清驯化细胞模型、使用低吸附的孔板材料和开发多维度检测指标等措施优化暴露实验条件，最重要的是整合新路径方法学，制定综合测试策略以尽快实现体外替代的目标。本研究为环境污染物的快速、高效、伦理友好的毒性筛查提供了有价值的数据支持和方法基础。

关键词：持久性有机污染物内分泌干扰物药物和个人护理品 EPC L8824 细胞毒性

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鳖源铜绿假单胞菌的分离鉴定及多位点序列与全基因组分析

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微生物学报 2022年第7期62卷 2751-2767页

作者：何宏港吴悠刘乃瑜王至诚刘静霞罗毅华中农业大学水产学院农业农村部淡水生物繁育重点实验室/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室华中农业大学湖北武汉430070

【目的】查明引起湖北仙桃某中华鳖养殖场中华鳖发病死亡的病原及其特征。【方法】本研究分离患病中华鳖的病原,并结合形态特征、生理生化试验、16SrRNA基因鉴定,鉴定分离菌株;通过人工回归感染试验、药敏试验、全基因组测序与分析对分... 详细信息

【目的】查明引起湖北仙桃某中华鳖养殖场中华鳖发病死亡的病原及其特征。【方法】本研究分离患病中华鳖的病原,并结合形态特征、生理生化试验、16SrRNA基因鉴定,鉴定分离菌株;通过人工回归感染试验、药敏试验、全基因组测序与分析对分离菌株的致病性和耐药性进行研究;通过多位点序列分型(multilocus sequence type,MLST)分析,对分离菌株的流行情况进行探究。【结果】从患病中华鳖肝脏等部分分离到3株优势菌株HX8、FG10和GC20,16SrRNA基因同源性和生化特征分析鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。回归感染试验证实该菌株是引起本次中华鳖患病的病原菌。3株分离株的药敏实验结果基本一致,均对诺氟沙星、恩诺沙星等8种抗生素敏感,对氟苯尼考、多西环素、磺胺异恶唑等6种抗生素耐药。MLST鉴定表明,3株分离株均属于序列型(sequencetype,ST)252型,eBURST分析进一步显示ST252型与一些ST共同构成了克隆复合体(clonal complexes,CC)CC252,且ST252是CC252的原始序列型(founder ST)。全基因组测序结果显示,FG10的全基因组大小为5.65 Mb,GC含量为65.3%,共预测到5956个编码序列(CDS),GenBank登录号为JAJGXC000000000。通过与毒力因子数据库(the virulence factor database,VFDB)比对,预测到873个毒力相关因子,主要与黏附、分泌系统以及毒素等相关。通过与耐药基因数据库(the comprehensive antibiotic resistance database,CARD)比对,结果显示FG10中含有喹诺酮类、碳青霉烯类、肽类等抗生素的耐药相关基因。【结论】本研究分离获得了中华鳖的病原细菌铜绿假单胞菌,MLST分析推测了其流行情况,基因组数据揭示了其毒力及耐药基因,为防控水产养殖中铜绿假单胞菌感染提供了一定的参考依据。

关键词：中华鳖铜绿假单胞菌分离鉴定多位点序列分型全基因组毒力及耐药

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基于16S rDNA高通量测序技术分析受水灾影响猪场水样的菌群特征

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畜牧兽医学报 2023年第5期54卷 2092-2100页

作者：洪勃孙琪李栋凡于学祥库旭钢何启盖华中农业大学动物医学院武汉430070 农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心武汉430070

2021年7月,河南省部分地区突发特大水灾,致使受灾区域内的猪场损失惨重,本研究旨在探究水灾发生后猪场水样中存在的病原菌,为猪场防控可能出现的疾病提供技术支撑。通过实地采样和委托采样的方式,获得了26个受灾猪场中的48份水样,包括1... 详细信息

2021年7月,河南省部分地区突发特大水灾,致使受灾区域内的猪场损失惨重,本研究旨在探究水灾发生后猪场水样中存在的病原菌,为猪场防控可能出现的疾病提供技术支撑。通过实地采样和委托采样的方式,获得了26个受灾猪场中的48份水样,包括19份猪饮用水、22份场内积雨水和7份废弃污水,采用菌落计数和高通量测序技术,对样品的细菌总数和菌群丰度进行分析研究,同时对采集的水样开展消毒剂杀菌试验。结果发现:饮用水、积雨水和污水中的平均含菌量分别为1.55×10^(5)、1.88×10^(8)和3.70×10^(9)CFU·mL^(-1),其中污水中的细菌总数最多,其次为积雨水,饮用水中的细菌总数最少,但远超国家饮用水的安全标准。本研究在不同种类的水样中均检测到了链球菌属、埃希氏杆菌属、弓形杆菌属、不动杆菌属和假单胞菌属等潜在的致病菌属,以及嗜低温弓形杆菌、猪链球菌、大肠杆菌、鲍曼不动杆菌和豚鼠气单胞菌等致病菌。杀菌试验显示,氯制剂终浓度达到2500mg·L^(-1),作用30 min即可杀灭积雨水和污水中所有的细菌。本研究发现,水灾后养猪场内的水样中含有多种致病菌,规模化猪场可选用含氯消毒剂对场内污染的水体进行消杀,以确保人和猪群的健康安全。

关键词： 16S rDNA 猪场洪水细菌

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2020—2022年湖北省生猪屠宰场伪狂犬病病毒的分离鉴定及遗传进化分析

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畜牧兽医学报 2023年第7期54卷 2972-2981页

作者：陈宏建曹艳樊杰甘荣萱宋文博喻盛炜杨婷赵艳霞魏春燕谢锐华琳彭忠吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

旨在监测湖北省生猪屠宰场中伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的流行情况。采集2020—2022年湖北省4个区域(鄂东、鄂北、鄂西、鄂中)共9个县市不同规模屠宰场的1795份血液样品和2081份肺样品(肺、肺门淋巴结),分别使用靶向PRV gE... 详细信息

旨在监测湖北省生猪屠宰场中伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的流行情况。采集2020—2022年湖北省4个区域(鄂东、鄂北、鄂西、鄂中)共9个县市不同规模屠宰场的1795份血液样品和2081份肺样品(肺、肺门淋巴结),分别使用靶向PRV gE基因的ELISA和PCR方法检测血清中的抗体和肺样品中的病原,同时对阳性样品进行病原分离鉴定、全基因组测序和遗传进化分析。血清学检测结果显示,共有104份样品为阳性,平均阳性检出率为5.79%。病原学检测结果显示,共有82份样品为阳性,平均阳性检出率为3.94%。按不同因素对检出率进行分析,显示抗体和病原都在春季检出率最高,分别为18.57%和9.74%;湖北省东部的抗体检出率最高(10.77%),中部的病原检出率最高(4.93%);A类小型屠宰场的病原和抗体检出率都显著高于其他3个类型,分别为16.28%和6.01%。从病原阳性样品中共分离到PRV 17株,经全基因组和gB、gC、gE基因遗传进化分析结果显示均属于基因Ⅱ型变异株,与Bartha、NIA-3、Becker等早期国外分离株处于不同的遗传进化分支。其中HBXG疑似发生了基因Ⅰ型毒株与基因Ⅱ型毒株的重组,与早期报道的重组病毒HuB1/CHN2017同处于独立的clade2.2遗传分支。综上所述,湖北省屠宰场关联的猪场中主要流行PRV变异毒株,且免疫过疫苗的猪场还在发生疫苗株与野毒的重组与变异,因此本研究对PRV的持续监测与新型疫苗的研发工作有十分重要的意义。

关键词：伪狂犬病病毒生猪屠宰场血清学检测病原学检测遗传进化分析

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副猪嗜血杆菌Flp-FRT双基因敲除方法的建立与优化

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畜牧兽医学报 2022年第1期53卷 219-230页

作者：肖静肖坤雪王翘楚陈焕春蔡旭旺徐晓娟华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070

本研究旨在利用Flp-FRT位点特异性重组系统建立副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)的无抗性标记基因敲除方法,为***的毒力因子、致病机制和基因工程疫苗研究提供有力的遗传操作工具。首先利用λ噬菌体cI857/P_(RM)/P_(R)基因表达调控... 详细信息

本研究旨在利用Flp-FRT位点特异性重组系统建立副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)的无抗性标记基因敲除方法,为***的毒力因子、致病机制和基因工程疫苗研究提供有力的遗传操作工具。首先利用λ噬菌体cI857/P_(RM)/P_(R)基因表达调控系统调控Flp重组酶的表达,实现抗性突变体中抗性基因的消除;然后将Flp表达质粒电转化引入*** CF7066,再自然转化介导同源重组的自杀性质粒获得有抗性标记的基因缺失突变株,调节Flp酶表达并筛选无抗突变株,提高培养温度消除表达Flp酶的温敏质粒;进一步通过筛选突变FRT位点以保证基因敲除的效率。结果表明成功构建了温敏穿梭质粒pSHG5C-Flp,证实了λcI857/P_(RM)/P_(R)表达系统可调控Flp重组酶在***中表达并切除抗性突变株ΔnanH::Kan_(R)中的抗性基因;然后用Flp重组酶表达质粒pSHG5C-Flp电转化*** CF7066,再用自杀性质粒pKF-ΔnanH和pKF-Δapd2对其进行两次连续自然转化,依次在自然转化的初代转化子中筛选并获得了无抗的单基因缺失株ΔnanH和双基因缺失株ΔnanHΔapd,提高培养温度至42℃培养消除了Flp重组酶表达质粒。尽管该系统实现了***两个基因的连续敲除,但敲除第2个基因时的效率明显下降,这很可能源于细菌细胞中Flp重组酶表达的积累,对转化质粒介导的同源重组产生了干扰。因此,作者筛选了突变的FRT位点、构建自杀性质粒pKFM-Δapd进行自然转化,显著提高了自然转化后获得突变株的效率,从而保证了该敲除系统的有效性和稳定性。本研究首次报道了可用于***的无抗性标记双基因缺失突变系统,为其分子致病基因与基因工程疫苗的研究奠定了基础。

关键词：副猪嗜血杆菌表达调控 Flp-FRT 基因敲除无抗缺失

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