检索结果-内蒙古大学图书馆

中国动物传染病学报 2013年第1期21卷 81-86页

作者：刘志刚孙青松姚蓉刘冰心晁行周邹忠刘立峰吴彦郑爱芳赵苏红金梅林安庆师范学院生命科学学院安庆246011 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 吉林大学人兽共患病研究所长春130012 武汉科前生物制品有限公司武汉430070

2010年以来中国大部分种鸭和蛋鸭养殖地区相继发生了以减料、产蛋下降和伴有一定死淘率为特征的传染病。该病发病急,传播快,死淘率高,给中国的养禽造成巨大的经济损失,仅2010年给中国的养鸭业造成的损失达50亿元。随着研究的深入,该病... 详细信息

2010年以来中国大部分种鸭和蛋鸭养殖地区相继发生了以减料、产蛋下降和伴有一定死淘率为特征的传染病。该病发病急,传播快,死淘率高,给中国的养禽造成巨大的经济损失,仅2010年给中国的养鸭业造成的损失达50亿元。随着研究的深入,该病被确诊为是由一种新型病毒-鸭坦布苏病毒引起的传染病,本文围绕着该病的流行病学、临床症状、病理变化、病毒生物学特性、病毒检测方法及致病力等方面的研究进展进行综述,旨在为鸭坦布苏病的防控提供科学依据。

关键词：鸭坦布苏病毒分离鉴定生物学特性

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蚊虫乙酰胆碱酯酶的真核表达、纯化及活性测定

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华中农业大学学报 2012年第4期31卷 423-427页

作者：谭烽兰文升崔峰乔传令陈雯莉华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理国家重点实验室北京100101

利用Trizol法从尖音库蚊中提取总RNA,构建cDNA文库,并克隆出乙酰胆碱酯酶外显子序列;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对蚊虫乙酰胆碱酯酶进行真核表达,并利用Ni-琼脂糖对酶进行纯化。采用SDS-PAGE对纯化产物进行检测,结果表明得到了纯... 详细信息

利用Trizol法从尖音库蚊中提取总RNA,构建cDNA文库,并克隆出乙酰胆碱酯酶外显子序列;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对蚊虫乙酰胆碱酯酶进行真核表达,并利用Ni-琼脂糖对酶进行纯化。采用SDS-PAGE对纯化产物进行检测,结果表明得到了纯度较高的乙酰胆碱酯酶。参照Ellman法对酶的活性进行测定,结果显示纯酶的活力为2.219×10-4 mol/(min.g)。

关键词：有机磷农药乙酰胆碱酯酶昆虫杆状病毒表达系统纯化酶生物传感器

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湖北省野生食药用菌资源调查(Ⅰ)

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食用菌学报 2012年第4期19卷 87-90页

作者：徐江边银丙黄浩李泰辉华中农业大学应用真菌研究所湖北武汉430070 广东省微生物研究所、广东省菌种保藏与应用重点实验室、广东省微生物应用新技术公共实验室、广东省华南应用微生物重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070

通过对2010～2011年在湖北省采集的1200余份大型真菌标本进行分类鉴定研究,从中整理出107份已鉴定可食用和药用的大型真菌标本,共58属95种,其中食用菌44种,药用菌23种,食药兼用型28种,湖北省首次报道的种类45种。

关键词：食用菌药用菌湖北省真菌资源

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杆状病毒介导RNAi抑制棉铃虫细胞色素P450 CYP9A14基因的转录

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华中农业大学学报 2012年第4期31卷 450-456页

作者：陈爱华孙修炼赵秀云华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物学国家重点实验室武汉430070 中国科学院武汉病毒研究所/农业与环境微生物学重点实验室武汉430071

采用实时荧光定量PCR,测定棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)细胞色素P450 CYP9A14基因在氯氰菊酯抗性棉铃虫中肠里的表达量,结果表明抗性棉铃虫是敏感棉铃虫中肠表达量的17倍。将棉铃虫中肠P450 CYP9A14基因的一个490bp反向重... 详细信息

采用实时荧光定量PCR,测定棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)细胞色素P450 CYP9A14基因在氯氰菊酯抗性棉铃虫中肠里的表达量,结果表明抗性棉铃虫是敏感棉铃虫中肠表达量的17倍。将棉铃虫中肠P450 CYP9A14基因的一个490bp反向重复片段以双链RNA干扰(double-stranded RNA interference,dsRNAi)的方法重组到棉铃虫核型多角体病毒(helicoverpa nuclear polyhedrosis virus,HaNPV)中,结果表明以该重组病毒注射氯氰菊酯抗性棉铃虫体内后,幼虫中肠CYP9A14基因的转录水平显著下降。

关键词：棉铃虫杆状病毒基因转录抗药性

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结核分枝杆菌复合群四重PCR检测方法的建立及应用

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中国人兽共患病学报 2012年第4期28卷 333-337页

作者：程实陈伟陈颖钰陈军苗北平郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物科技动物医学院武汉430070 武汉市结核病防治研究所武汉430030

目的本文旨在建立一种能快速鉴定结核分枝杆菌复合群不同成员的多重PCR方法。方法针对结核分枝杆菌复合群4个特异性基因16sRNA、IS6110、RV2652、RV3873设计引物,通过筛选优化引物浓度、退火温度、Mg2+浓度和dNTP浓度,确定了最佳反应条... 详细信息

目的本文旨在建立一种能快速鉴定结核分枝杆菌复合群不同成员的多重PCR方法。方法针对结核分枝杆菌复合群4个特异性基因16sRNA、IS6110、RV2652、RV3873设计引物,通过筛选优化引物浓度、退火温度、Mg2+浓度和dNTP浓度,确定了最佳反应条件。结果扩增产物的大小分别为824bp、621bp、418bp和254bp,能特异性检测并鉴别出非结核分枝杆菌(824bp 1条带)、卡介苗(824bp和621bp 2条带)、牛分枝杆菌(824bp、621bp和254bp 3条带)和结核分枝杆菌(4条带)。检测灵敏度达到125fg。对42份牛结核菌素皮内变态反应阳性牛的肺淋巴结样本和115份肺结核病人的痰液样品进行了检测,其检出率或准确率明显高于传统方法。结论成功建立了多重PCR方法,能快速、准确地对结核分枝杆菌群进行种、型鉴别。

关键词：结核结核分枝杆菌牛分枝杆菌多重PCR 鉴别诊断

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弗氏志贺菌ΔlysA突变株的构建及SILAC技术的应用尝试

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军事医学 2012年第5期36卷 345-350页

作者：李月玥刘先凯冯尔玲王恒樑陈福生朱力华中农业大学食品科技学院武汉430070 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的构建弗氏2a志贺菌301株赖氨酸营养缺陷型突变株,为将细胞培养条件下稳定同位素标记(SILAC)技术应用于志贺菌蛋白质组学研究奠定基础。方法采用λ-Red重组系统对弗氏2a志贺菌301株lysA基因进行缺失,对野生株和突变株进行基本的表型... 详细信息

目的构建弗氏2a志贺菌301株赖氨酸营养缺陷型突变株,为将细胞培养条件下稳定同位素标记(SILAC)技术应用于志贺菌蛋白质组学研究奠定基础。方法采用λ-Red重组系统对弗氏2a志贺菌301株lysA基因进行缺失,对野生株和突变株进行基本的表型测评和毒力评价,并利用双向电泳技术比较二者在全菌蛋白表达谱上的差异,最后将突变株分别在含有12C6-赖氨酸和13C6-赖氨酸的培养基中培养,根据双向电泳胶图取对应蛋白点进行胶内酶切及MALDI-TOF/TOF分析。结果成功构建了301 lysA基因缺失突变株,蛋白鉴定结果显示所取对应蛋白点为同一蛋白,在质谱图上轻重同位素峰位移为6 amu。结论本研究所构建的赖氨酸营养缺陷型突变株适合进行SILAC分析。

关键词：志贺菌,弗氏赖氨酸营养缺陷型突变株基因缺失 λ-Red重组系统双向电泳 SILAC

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烟草赤星病高效生防拮抗菌的筛选

烟草赤星病高效生防拮抗菌的筛选

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首届农业生态与环境安全学术研讨会暨第四届生物资源与环境调控学术研讨会

作者：陈守文王昌军彭建祁高富华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉43070 湖北省烟草研究所武汉430030

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芋病毒病田间调查及毒氟磷对芋病毒病的防治效果

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长江蔬菜 2012年第16期 108-110页

作者：王彦芬 Syeda Amber Kazmi 曲林宁王国平刘玉平洪霓华中农业大学植物科学技术学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉市蔬菜科学研究所

对芋病毒病及类似病害症状进行调查,其症状表现主要分为羽状花叶、叶片向上卷曲并伴有黄化或花叶、脉间黄化、明亮褪绿黄斑、褪绿斑点(斑驳)及叶片皱缩和叶缘黄化。采用RT-PCR和PCR技术对随机采集的32份表现症状的鄂芋一号样品进行了芋... 详细信息

对芋病毒病及类似病害症状进行调查,其症状表现主要分为羽状花叶、叶片向上卷曲并伴有黄化或花叶、脉间黄化、明亮褪绿黄斑、褪绿斑点(斑驳)及叶片皱缩和叶缘黄化。采用RT-PCR和PCR技术对随机采集的32份表现症状的鄂芋一号样品进行了芋花叶病毒(DsMV)和芋杆状病毒(TaBV)2种病毒的检测,检出率均为68.8%。同时,利用30%毒氟磷可湿性粉剂500倍液和1 000倍液对芋病毒病进行田间药效试验,第一次施药后10 d调查,毒氟磷可湿性粉剂500倍液和1 000倍液的防治效果分别为30.9%和24.9%;第二次施药后15 d调查,500倍液和1 000倍液防治效果分别为72.8%和59.4%。田间药剂试验结果表明,毒氟磷可湿性粉剂500倍液比1 000倍的防治效果好,从田间芋头长势可看出,毒氟磷对芋头生长有明显的促进作用。

关键词：芋病毒病防治效果毒氟磷

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深海独岛枝芽孢杆菌A493产活性物质特性与发酵条件优化研究

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化学与生物工程 2012年第9期29卷 26-31页

作者：陈莉张少博黄典邵宗泽孙风芹王雪飞喻子牛张吉斌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心湖北武汉430070 国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室福建厦门361005

以一株抗菌谱较窄并且稳定拮抗水稻黄单胞菌的深海独岛枝芽孢杆菌(***)A493为研究对象,研究了其产活性物质特性及发酵条件的优化。A493产抗菌活性物质可以耐受100℃的高温,在pH值4～10和紫外照射环境中活性稳定,可以通过3kDa的超滤管,... 详细信息

以一株抗菌谱较窄并且稳定拮抗水稻黄单胞菌的深海独岛枝芽孢杆菌(***)A493为研究对象,研究了其产活性物质特性及发酵条件的优化。A493产抗菌活性物质可以耐受100℃的高温,在pH值4～10和紫外照射环境中活性稳定,可以通过3kDa的超滤管,对蛋白酶不敏感,只能溶解于水和甲醇。酸沉淀和硫酸铵沉淀实验结果排除了活性物质是脂肽类物质的可能性,初步研究显示该活性物质可能是极性较强的水溶性活性小分子新化合物。确定A493最佳发酵条件为:接种菌龄12h、接种量1%、发酵时间48h、发酵温度28℃、培养转速180r·min-1、250mL锥形瓶中的装液量为70mL。优化后,其单位体积发酵液抑菌效果提高了18.7%,活性物质对水稻黄单胞菌的抑菌效价相当于15.6μg·mL-1的标准链霉素。

关键词：深海独岛枝芽孢杆菌水稻黄单胞菌理化特性发酵条件优化

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2型猪链球菌Fbps基因敲除突变体的构建及毒力分析

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生物技术通讯 2012年第5期23卷 694-697页

作者：谢文龙骈亚亚吴凯郑玉玲姜永强陈福生华中农业大学食品科技学院湖北武汉430070 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:敲除2型猪链球菌(SS2)强毒株05ZYH33中的Fbps基因,研究该基因敲除对菌株生物活性及毒力的影响,为深入探讨猪链球菌致病机制提供实验基础。方法:从05ZYH33基因组中扩增Fbps基因上、下游同源臂,从pSET1质粒中扩增氯霉素抗性基因Cm,... 详细信息

目的:敲除2型猪链球菌(SS2)强毒株05ZYH33中的Fbps基因,研究该基因敲除对菌株生物活性及毒力的影响,为深入探讨猪链球菌致病机制提供实验基础。方法:从05ZYH33基因组中扩增Fbps基因上、下游同源臂,从pSET1质粒中扩增氯霉素抗性基因Cm,通过重叠PCR的方法将3个片段整合后连接到温敏自杀载体pSET4s上,电转入05ZYH33感受态细胞,通过改变培养温度实现双交换和质粒丢失,最后经抗性筛选获得敲除株05ZYH33ΔFBPS,分析敲除株的生物学性状,以CD1小鼠作为体外感染模型对突变株和野生株进行毒力比较。结果:PCR分析和测序结果均显示Fbps基因敲除成功,动物实验结果显示Fbps基因敲除后05ZYH33的毒力有所下降。结论:与野生株相比,突变株对小鼠的毒力有所降低。

关键词： 2型猪链球菌 Fbps基因基因敲除

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