检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2007年第5期23卷 806-811页

作者：颜邦芬陈锃张书环林祥梅陈颖钰晁彦杰李德学宋念华陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所北京100029 湖北省动物疫病诊断中心武汉430064

以牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）基因组DNA为模板,PCR扩增gG基因,克隆到T载体pMD18-T,经限制性酶切分析及序列测定鉴定正确后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-KG。SDS-PAGE和Western blot分析表明,该基因在大肠杆菌BL21（DE3）中呈可... 详细信息

以牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）基因组DNA为模板,PCR扩增gG基因,克隆到T载体pMD18-T,经限制性酶切分析及序列测定鉴定正确后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-KG。SDS-PAGE和Western blot分析表明,该基因在大肠杆菌BL21（DE3）中呈可溶性及包涵体两种形式表达,重组蛋白质具有免疫学活性。包涵体蛋白经提纯、变性、复性后,作为包被抗原建立了gG-ELISA诊断方法。应用该方法与进口试剂盒（IDEXX）平行检测380份血清样品,两种方法的符合率为92%（351/380）。对6份病毒分离阳性血清的检测均为阳性,对非相关病原的阳性血清及中监所的阴性血清检测均为阴性,表明所建立的IBRVgG抗体的ELISA检测具有良好的灵敏度与特异性。对1248份奶牛血清样本进行了检测,进口牛群的IBRV抗体阳性率平均为21.7%,湖北本地中国黑白花奶牛的抗体阳性率在不同牧场之间变化很大,范围为0.0%-41.5%。

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒 gG基因 ELISA 原核表达

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棉浆黑液生物处理系统中嗜碱细菌的多样性

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武汉大学学报（理学版） 2007年第4期53卷 491-496页

作者：文金丽缪礼鸿王璐谢福莉李友国姚斌武汉工业学院生物与制药工程系湖北武汉430023 华中农业大学生命科学技术学院/农业微生物国家重点实验室湖北武汉430070 中国农业科学院饲料研究所北京100081

以棉浆黑液为细菌分离培养基,从某化纤厂黑液生物处理系统中分离到16株嗜碱细菌,对其形态及生理生化等特征的研究结果表明,所分离的嗜碱细菌以产芽孢的革兰氏阴性细菌占优势,在个体形态和生理生化特性方面具有丰富的多样性.扩增rDNA限... 详细信息

以棉浆黑液为细菌分离培养基,从某化纤厂黑液生物处理系统中分离到16株嗜碱细菌,对其形态及生理生化等特征的研究结果表明,所分离的嗜碱细菌以产芽孢的革兰氏阴性细菌占优势,在个体形态和生理生化特性方面具有丰富的多样性.扩增rDNA限制性分析(ARDRA)结果表明,棉浆黑液中的嗜碱细菌分为2大类群,不同菌株之间的酶切图谱具有较大的差异.测定黑液生物处理系统中6株占优势的嗜碱细菌的16S rDNA序列,与国际上已报道的细菌的16S rDNA序列进行比较,结果表明:它们的序列与芽孢杆菌属(Bacillus)或副球菌属(Paracoccus)中的参比菌株的同源性达到98%以上.以16S rDNA序列为基础的Bacillus属嗜细菌的系统发育分析结果显示,其中3个菌株与***和***的相似性大于99%.

关键词：棉浆黑液嗜碱细菌生物多样性

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炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)检测质粒的构建及其应用

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微生物学杂志 2007年第3期27卷 38-41页

作者：吕和平闵勇杨东明郑应华李旭武轶北京生物医药研究所北京100091 华中农业大学农业微生物国家重点实验室湖北武汉430070

根据炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)毒性质粒pX01和pX02上的2个毒力相关基因cya和capA的序列特点,以pIJ2925为出发载体,采用一步重叠延伸PCR技术(One-step Overlap Extension PCR,简称OOE-PCR)构建了包含cya基因和capA基因保守区DNA片段的炭疽检测质粒pBIB2006。采用复合PCR对模拟炭疽危险品进行分析,结果表明pBIB2006可以为炭疽芽胞杆菌的检测提供准确、安全和方便的阳性参照品,从而为检测炭疽芽胞杆菌和炭疽芽胞杆菌灭活疫苗提供了便利。

关键词：炭疽芽胞杆菌 cya基因 capA基因 OOE—PCR

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胶体金化学发光免疫分析检测猪胸膜肺炎

胶体金化学发光免疫分析检测猪胸膜肺炎

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第五届全国化学生物学学术会议

作者：胡德红董飞梁建功韩鹤友华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室

＜正＞猪胸膜肺炎（Porcine Pleuropneumonia）是由胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus Pleuropneum oniae,简称 APP）引起的以胸膜肺炎和出血性坏死性肺炎为特征的一种高度传染性和致死性的呼吸系统疾病,该病是国际上公认的猪的五大疾... 详细信息

＜正＞猪胸膜肺炎（Porcine Pleuropneumonia）是由胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus Pleuropneum oniae,简称 APP）引起的以胸膜肺炎和出血性坏死性肺炎为特征的一种高度传染性和致死性的呼吸系统疾病,该病是国际上公认的猪的五大疾病之一。APP 可产生4种 Apx 毒素,即

关键词：猪传染性胸膜肺炎化学发光免疫分析

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量子点与蛋白质相互作用研究

量子点与蛋白质相互作用研究

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第五届全国化学生物学学术会议

作者：胡德红武红敏梁建功韩鹤友华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室

＜正＞量子点,又称无机半导体纳米晶体,通常由ⅡB-ⅥA 族（如 CdSe,CdTe,CdS,ZnSe 等）或ⅢB—ⅤA 族（如 InP,InAs 等）元素组成。与传统有机荧光染料及荧光蛋白相比,量子点具有宽带激发、窄带发射、量子产率高、抗光漂白能力强等优... 详细信息

＜正＞量子点,又称无机半导体纳米晶体,通常由ⅡB-ⅥA 族（如 CdSe,CdTe,CdS,ZnSe 等）或ⅢB—ⅤA 族（如 InP,InAs 等）元素组成。与传统有机荧光染料及荧光蛋白相比,量子点具有宽带激发、窄带发射、量子产率高、抗光漂白能力强等优点。近几年来,量子点已作为荧光探针被广泛地用于生物标记及成像分析。由于目前所使用的绝大多数量子点均含有重金属镉

关键词：量子点蛋白质相互作用生物效应

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日本血吸虫22.6ku膜相关蛋白基因的克隆及原核表达

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华中农业大学学报 2007年第3期26卷 357-360页

作者：付媛张雪娟赵俊龙何永强刘恩勇卢福庄江涛冯尚连浙江省农业科学院畜牧兽医研究所杭州310021 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 浙江省进出口检验检疫局杭州310012 湖北省兽疫防治站武汉430064

为了得到重组的日本血吸虫22.6 ku膜相关蛋白,研究设计了1对引物,以日本血吸虫mRNA为模板,用RT-PCR方法克隆了576 bp的22.6 ku膜相关蛋白基因片段,测序结果表明,该片段与已公布的Sj22.6基因序列(U75510)同源性达到99%。将该基因片段插... 详细信息

为了得到重组的日本血吸虫22.6 ku膜相关蛋白,研究设计了1对引物,以日本血吸虫mRNA为模板,用RT-PCR方法克隆了576 bp的22.6 ku膜相关蛋白基因片段,测序结果表明,该片段与已公布的Sj22.6基因序列(U75510)同源性达到99%。将该基因片段插入原核表达载体pGEX-KG构建了原核表达质粒pGEX-Sj22.6,在大肠杆菌BL21 codn plus中表达获得了约48 ku的融合蛋白,经Western-blot检测,该重组蛋白具有良好的免疫原性。

关键词：日本血吸虫 22.6ku膜相关蛋白克隆表达

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硝基呋喃唑酮残留标志物-3-氨基-2-唑烷基酮的合成及表征

硝基呋喃唑酮残留标志物-3-氨基-2-唑烷基酮的合成及表征

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湖北省化学化工学会第十一届分析化学专业年会

作者：韩敏健刘欣甄程炜梁建功韩鹤友华中农业大学理学院华中农业大学化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室

硝基呋喃类抗生素为一类广谱抗生素,包括呋喃唑酮,呋喃西林,呋喃妥因和呋喃它酮。由于该类抗生素及其代谢物可诱导有机体基因突变,具有很强的致癌作用,已被欧盟、美国等多个国家禁止使用。鉴于该类化合物具有良好的抗菌性能,很多养殖户... 详细信息

硝基呋喃类抗生素为一类广谱抗生素,包括呋喃唑酮,呋喃西林,呋喃妥因和呋喃它酮。由于该类抗生素及其代谢物可诱导有机体基因突变,具有很强的致癌作用,已被欧盟、美国等多个国家禁止使用。鉴于该类化合物具有良好的抗菌性能,很多养殖户仍然继续使用, 因此,建立该类化合物及其代谢物的快速高灵敏检测方法十分必要。但硝基呋喃类代谢物合

关键词：残留标志物合成及表征烷基酮呋喃唑酮

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量子点电致化学发光研究

量子点电致化学发光研究

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湖北省化学化工学会第十一届分析化学专业年会

作者：盛宗海韩鹤友梁建功华中农业大学理学院华中农业大学化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室

近年来,量子点作为一种新型电致化学发光试剂受到了人们广泛关注。与传统电致化学发光试剂如鲁米诺、光泽精、联吡啶钌相比,量子点具有更加优异的性质:(1)其发光波长可以通过量子点组成和尺寸大小来调节;(2)量子点接受能量范围宽,同一... 详细信息

近年来,量子点作为一种新型电致化学发光试剂受到了人们广泛关注。与传统电致化学发光试剂如鲁米诺、光泽精、联吡啶钌相比,量子点具有更加优异的性质:(1)其发光波长可以通过量子点组成和尺寸大小来调节;(2)量子点接受能量范围宽,同一电位可使多种量子点同时发光;(3)发光效率高,稳定性好;(4)量子点还是一种良好的发光共振能量转移

关键词：电致化学发光量子点

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四种牛分枝杆菌特异性蛋白融合表达及在牛结核病诊断中的临床应用

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中国奶牛 2007年第10期 16-20页

作者：吴波张书环邓铨涛项杰陈军刘朝陈鑫宋念华陶淑珍黄继根韩永佩赵波林祥梅陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北省武汉市结核病防治院(所) 武汉430083 湖北省动物疫病诊断中心武汉430064 武汉市动物防疫检疫站武汉430015 武汉市奶业管理办公室武汉430015 湖北省宜昌市夷陵区畜牧局宜昌443100 宜昌市夷陵区奶牛养殖技术服务中心宜昌443100 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所北京100029

以原核表达的MPB70-MPB83-CFP10-ESAT-6融合蛋白作为诊断抗原,建立牛结核病抗体检测间接ELISA(iELISA)。该iELISA与导致常见牛病的非相关抗原无交叉反应。用iELISA检测90份健康牛血清,确定样本阴阳性临界值(S/P)为0.17。与商品化胶体金... 详细信息

以原核表达的MPB70-MPB83-CFP10-ESAT-6融合蛋白作为诊断抗原,建立牛结核病抗体检测间接ELISA(iELISA)。该iELISA与导致常见牛病的非相关抗原无交叉反应。用iELISA检测90份健康牛血清,确定样本阴阳性临界值(S/P)为0.17。与商品化胶体金试剂条(ICG)平行检测150份临床奶牛血清样本,结果与ICG的符合率为93.33%(140/150)。以结核菌素皮内试验(TST)为参考方法,检测了华中地区四个奶牛场的560头中国荷斯坦奶牛和90份进口奶牛结核阴性血清,结果iELISA与TST的总符合率为87.32%(489/560)。对其中22头奶牛进行鼻拭子分菌检验,4头分菌阳性奶牛的血清抗体检测也为阳性,iELISA与细菌培养的总符合率为77.27%(17/22)。以TST为参考方法,iELISA的敏感性和特异性分别为72.37%和89.67%。

关键词： iELISA 融合蛋白牛结核病 MPB70 MPB83 CFP10 ESAT-6

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斑贝链霉菌接合转移系统的构建及透明颤菌血红蛋白基因的表达对其次级代谢的影响

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微生物学通报 2006年第5期33卷 59-64页

作者：凌华云闵勇熊伟吕和平喻子牛郑应华华中农业大学微生物国家重点实验室武汉430070 北京生物医药研究所北京100091

以pSET152和pHZ1358为出发质粒,通过供体大肠杆菌ET12567(pUZ8002)和S17-1接合转移斑贝链霉菌(Streptomycesbambergiensis),构建和优化了接合转移体系。采用OOE-PCR技术构建含ermEp*与vhb结构基因融合片段的整合型表达载体pBIB2005,转化ET12567(pUZ8002)后,属间接合转移至斑贝链霉菌。通过PCR、CO结合差光谱验证vhb基因在斑贝链霉菌中整合表达。摇瓶发酵显示VHb蛋白能改善菌体对氧的需求,一定程度上促进细胞生长,提高抗生素产量。

关键词：斑贝链霉菌接合转移 vhb基因 OOE-PCR CO结合差光谱

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