检索结果-内蒙古大学图书馆

首届全国食用菌中青年专家学术交流会

作者：李安政林芳灿农业微生物国家重点实验室华中农业大学应用真菌研究所农业微生物国家重点实验室华中农业大学应用真菌研究所

香菇Lentinula edodes是一种异宗结合的食用蕈菌,具有由两个不连锁的交配型因子(A和B)控制的四极性交配系统。尽管这种观点已经得到公认,但由于交配型因子仍未被克隆测序,故对其分子基础仍缺乏了解。本研究利用简并引物 PCR获得了一条... 详细信息

香菇Lentinula edodes是一种异宗结合的食用蕈菌,具有由两个不连锁的交配型因子(A和B)控制的四极性交配系统。尽管这种观点已经得到公认,但由于交配型因子仍未被克隆测序,故对其分子基础仍缺乏了解。本研究利用简并引物 PCR获得了一条与香菇HL01菌株B2交配型因子共分离的DNA片段(773bp)。序列分析显示该片段属于信息素受体,表明香菇中B因子的遗传基础与两种模式簟菌裂褶菌Schizophyllum commune和盔盖鬼伞Coprinus cinereus是一样的。据我们所知,这是有关香菇中B交配型因子克隆的首次报道。

关键词：香菇 B交配型因子保守基因序列简并PCR,信息素受体

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猪乙脑病毒HW株的全基因组克隆及分析

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华中农业大学学报 2006年第2期25卷 117-119页

作者：付文鹏陈建军岳桂平熊东海徐涤平杨在清华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北出入境检验检疫局武汉430022 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所武汉430064

流行性乙型脑炎（Japanese encephalitis virus,JEV）是一种中枢系统人畜共患急性传染病，由蚊为媒介传播，以高热和狂暴或沉郁等神经症状为特征，猪患乙型脑炎的主要症状表现为怀孕母猪流产，产死胎或弱仔，公猪则患睾丸炎，仔猪呈神... 详细信息

流行性乙型脑炎（Japanese encephalitis virus,JEV）是一种中枢系统人畜共患急性传染病，由蚊为媒介传播，以高热和狂暴或沉郁等神经症状为特征，猪患乙型脑炎的主要症状表现为怀孕母猪流产，产死胎或弱仔，公猪则患睾丸炎，仔猪呈神经症状，使养猪业遭受巨大损失。[第一段]

关键词：日本乙型脑炎病毒全基因组克隆

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牛型分枝杆菌MPB70蛋白胶乳凝集方法的建立及应用

牛型分枝杆菌MPB70蛋白胶乳凝集方法的建立及应用

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第二届中国奶牛发展大会

作者：钦博万学济胡巧云喻正军晁彦杰郭爱珍陈焕春谭亚娣华中农业大学动物医学院农业微生物国家重点实验室武汉 430070 武汉市蔬菜科学研究所武汉 430065

牛结核病是严重危害奶牛养殖业和人类食品安全的B类传染病,而现行的PPD皮试方法在特异性敏感性方面都存在不足。为了研究新型诊断试剂,提高诊断的特异性和敏感性,本研究用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提纯蛋白建... 详细信息

牛结核病是严重危害奶牛养殖业和人类食品安全的B类传染病,而现行的PPD皮试方法在特异性敏感性方面都存在不足。为了研究新型诊断试剂,提高诊断的特异性和敏感性,本研究用大肠杆菌工程菌表达了牛型分枝杆菌特异性抗原MPB70并提纯蛋白建立了牛结核病乳胶凝集试验(LAT)诊断方法。MPB70是一种牛型分枝杆菌特异性分泌,而卡介苗BCG缺失的蛋白质,热稳定性好,用此蛋白建立的乳胶凝集方法具有良好的敏感性、特异性以及较长的保存期,检测70份临床奶牛血清,与皮内变态反应和间接血凝方法相比较分别具有71.4％和88.6％的符合率。该方法还可能鉴别诊断自然感染和疫苗免疫接种。本研究建立的牛型分枝杆菌MPB70蛋白乳胶凝集试验诊断方法将分子生物学手段和经典试验方法有机结合,为临床快速检测牛结核病血清特异性抗体水平提供了行之有效的方法。

关键词：牛型分枝杆菌牛结核病 MPB70蛋白胶乳凝集法快速检测

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间接ELISA检测牛分支杆菌抗体方法的建立及初步应用

间接ELISA检测牛分支杆菌抗体方法的建立及初步应用

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第二届中国奶牛发展大会

作者：张桂荣谭亚娣万学济陈颖钰吴波晁彦杰吕文钦博郭爱珍陈焕春华中农业大学动物医学院农业微生物国家重点实验室湖北武汉 430070 武汉市蔬菜科学研究所湖北武汉 430065

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,用基因工程方法表达的牛分支杆菌特异性抗原MPB83,MPB70和CFP1O与ESAT-6的融合蛋白(CFP10-ESAT-6)建立了检测牛分支杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。探讨了牛血... 详细信息

针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,用基因工程方法表达的牛分支杆菌特异性抗原MPB83,MPB70和CFP1O与ESAT-6的融合蛋白(CFP10-ESAT-6)建立了检测牛分支杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。探讨了牛血清白蛋白(BSA)对ELISA的影响并对二抗稀释液进行了改进。对不同感染背景奶牛场共215头奶牛的检测显示,TST和ELISA的符合率在41.8％-72.3％之间。对于其中的两个结核污染牛场,ELISA检出率分别为68.4％和28.6％,而TST为58.2％和5.7％,ELISA的敏感性比TST高;将两种检测方法结合起来,结核严重污染牛场的检出率可显著提高到85.7％。对无结核污染牛场的检测显示,ELISA比TST特异性可能更高。研究结果显示,本ELISA方法可初步用于发展中国家结核严重污染牛场的接测。

关键词：牛结核病结核分支杆菌特异性抗原牛血清白蛋白间接ELISA检测

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日本血吸虫22．6kD基因重组抗原的研究

日本血吸虫22．6kD基因重组抗原的研究

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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会

作者：付媛张雪娟赵俊龙何永强刘恩勇陈志权卢福庄彭公宽冯尚连李晓华浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江省农业科学院畜牧兽医研究所华中农业大学农业微生物学国家重点实验室浙江省进出口检验检疫局湖北省兽疫防治站湖北省潜江市畜牧局浙江省农业科学院畜牧兽医研究所湖北省潜江市畜牧局浙江省农业科学院畜牧兽医研究所湖北省潜江市畜牧局

为了得到重组的日本血吸虫22．6 kD膜相关蛋白,本研究设计了一对引物,以日本血吸虫mRNA 为模板,RT-PCR方法克隆了576 bp的Sj22．6 kD片段,测序结果表明该片段与已公布的Sj22．6基因序列 (U75510)同源性达到99％,将该基因片段克隆人原核... 详细信息

为了得到重组的日本血吸虫22．6 kD膜相关蛋白,本研究设计了一对引物,以日本血吸虫mRNA 为模板,RT-PCR方法克隆了576 bp的Sj22．6 kD片段,测序结果表明该片段与已公布的Sj22．6基因序列 (U75510)同源性达到99％,将该基因片段克隆人原核表达载体pGEX-KG并在大肠杆菌BL21 codon plus中表达,SDS-PAGE结果显示表达的融合蛋白分子量约48 kD,Western blot检测证实该重组抗原有良好的免疫原性,该研究为进一步研制日本血吸虫分子诊断试剂奠定了基础。

关键词：日本血吸虫 Sj22．6 kD 克隆表达

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B交配型因子对香菇双核体核型分离比的影响

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Acta Genetica Sinica 2005年第12期32卷 1301-1304页

作者：程水明林芳灿湖北黄岗师范学院黄岗436100 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室应用真菌研究所武汉430070

通过探明A或B交配型因子对双核体回收核型的影响,探讨了香菇双核体经原生质体形成和再生后两个成员核偏分离现象的遗传基础。结果表明,B因子或某些假定的与B因子连锁的基因明显影响去双核化后核的存活力,而A因子对此无明显影响。B因子... 详细信息

通过探明A或B交配型因子对双核体回收核型的影响,探讨了香菇双核体经原生质体形成和再生后两个成员核偏分离现象的遗传基础。结果表明,B因子或某些假定的与B因子连锁的基因明显影响去双核化后核的存活力,而A因子对此无明显影响。B因子的特异性与分离自两类异核体(A≠B≠和A=B≠)回收的成员核的存活比例密切相关。可以根据这种功能将B因子排成一个分级的序列。两个参试菌株中的4个B因子的特异性顺序为B1>B3>B4>B2。

关键词：香菇 B交配型因子原生质体偏分离

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香菇交配型因子偏分离现象的遗传分析

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自然科学进展 2005年第4期15卷 486-490页

作者：程水明林范学徐学锋李安政林芳灿华中农业大学应用真菌研究所农业微生物学国家重点实验室

以28个香菇菌株为材料,用统计学方法分析了菌丝原生质体单核体和孢子单核体的交配型比例.结果表明,菌丝原生质体单核体的两种交配型不呈预期的1:1之比的有17个,占总数的60.71％;孢子单核体的4种交配型不呈预期的1:1:1:1之比,占总数的4... 详细信息

以28个香菇菌株为材料,用统计学方法分析了菌丝原生质体单核体和孢子单核体的交配型比例.结果表明,菌丝原生质体单核体的两种交配型不呈预期的1:1之比的有17个,占总数的60.71％;孢子单核体的4种交配型不呈预期的1:1:1:1之比,占总数的47.06％.在两类交配型偏分离中,野生菌株的偏离程度均低于栽培菌株;正反亲本结实结果显示,无论在双核菌丝体所产生的F1代担孢子中,还是在由其F1代重组型担孢子配制而成的双核菌丝体所产生的F2代担孢子中,均以与相应双核菌丝体交配型相同的两种亲本型担孢子数量居多.在双-单杂交中,当受体交配型不同时,供体先导核可能相同,也可能不同,表明供体的核迁移既受B因子控制,也与细胞质有关.杂交双核体裂解后受体核比例显著偏多,表明细胞质中存在着与核选择有关的因子.

关键词：交配型因子遗传分析分离现象原生质体单核体孢子单核体统计学方法担孢子菌丝体香菇菌株栽培菌株偏离程度野生菌株孢子数量 F1代细胞质双核偏分离 F2代 B因子比例预期亲本杂交受体供体结实

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亚洲香菇Lentinula edodes系统发育学地位的重新评估与遗传多样性分析

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自然科学进展 2005年第10期15卷 1204-1210页

作者：徐学锋李安政程水明林范学林芳灿华中农业大学应用真菌研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070

测定了60个中国野生香菇菌株的rDNA的内转录间区(ITS)序列,结合GenBank已有的48个其他地区不同种的菌株的序列数据,构建Lentinula属内的系统发育树。结果将该属分成了两大支共7个谱系,西半球一支2个谱系,东半球一支5个谱系,聚类结果与... 详细信息

测定了60个中国野生香菇菌株的rDNA的内转录间区(ITS)序列,结合GenBank已有的48个其他地区不同种的菌株的序列数据,构建Lentinula属内的系统发育树。结果将该属分成了两大支共7个谱系,西半球一支2个谱系,东半球一支5个谱系,聚类结果与形态种的划分明显相关。亚洲菌株在东半球的5个谱系中占两席,系统发育关系分析表明这两大谱系所代表的种质资源的地位特殊,不可缺少。谱系Ⅴ的菌株数量明显扩大,覆盖范围的地理空白也得以填补,成为了亚洲香菇的主流谱系之一;谱系Ⅰ的菌株数量庞大,覆盖了绝大部分被研究区域,有进一步分化成两类的趋势。这表明中国(亚洲)是重要的香菇自然群体遗传多样性中心。将谱系Ⅰ分成Ⅰa和Ⅰb 两个亚类,与谱系Ⅴ一起进行亚洲范围内香菇的遗传多样性分析,发现中国东部沿海、西北高原和中国西南及喜马拉雅地区的多样性最为丰富,是亚洲香菇的3个多样性重点保护区域。

关键词：亚洲香菇 ITS序列系统发育遗传多样性遗传多样性分析香菇菌株系统发育学 GenBank 群体遗传多样性

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副猪嗜血杆菌的分离培养和血清型鉴定

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华中农业大学学报 2005年第1期24卷 55-58页

作者：蔡旭旺刘正飞陈焕春吴斌金梅林 Pat Blackall 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 澳大利亚昆士兰州动物研究所

　从全国十多个省市送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到 32株细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定;根据副猪嗜血杆菌 16SrRNA序列设计引物进行PCR扩增, 将 822bp扩增片段连入T 载体后测序, 再与GenBank(M7506... 详细信息

　从全国十多个省市送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到 32株细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定;根据副猪嗜血杆菌 16SrRNA序列设计引物进行PCR扩增, 将 822bp扩增片段连入T 载体后测序, 再与GenBank(M75065 )中的序列进行比对,表明其与国外副猪嗜血杆菌菌株 16SrRNA序列的同源性为 97%以上,确定为副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis, Hps)。将其中的 15株按Kieletein Rapp Gabriedson(KRG)琼脂扩散血清分型方法进行血清型鉴定,结果为血清 5型 3株、血清 4型 4株、血清 13型2株、血清 12型 2株,另外有 4株不能进行分型。该结果表明副猪嗜血杆菌在我国广泛存在。

关键词：副猪嗜血杆菌分离鉴定 PCR 血清型

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中国香菇自然种质的rDNA遗传多样性分析

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菌物学报 2005年第1期24卷 29-35页

作者：徐学锋林范学程水明李安政林芳灿农业微生物国家重点实验室华中农业大学应用真菌研究所山东济宁师范专科学校生物系济宁272125 河南农业大学国家小麦工程技术研究中心郑州450002

测定了全国范围内的59个野生香菇菌株rDNA的ITS区域的序列。所得序列的总长度在723-727个碱基之间,G+C含量也基本稳定在57.5%左右。用Phylip3.6软件包对59个ITS序列进行DNA数据分析。结果表明59个菌株被划分到3个不同的谱系中,其中谱系... 详细信息

测定了全国范围内的59个野生香菇菌株rDNA的ITS区域的序列。所得序列的总长度在723-727个碱基之间,G+C含量也基本稳定在57.5%左右。用Phylip3.6软件包对59个ITS序列进行DNA数据分析。结果表明59个菌株被划分到3个不同的谱系中,其中谱系Ⅰ包括11个菌株,分布较为均衡,涉及东北、西北、西南和东部沿海等地区的8个省份;谱系Ⅱ包括14菌株,以西北、西南的4个省份为主;谱系Ⅲ包括34个菌株,覆盖范围最广,除东北和西北高原地区外,其它均有涉及。地缘关系分析表明以陕、甘为主的西北高原地区的菌株涉及Ⅰ、Ⅱ两个谱系;以闽、浙、赣和台湾为主的东部沿海地区的菌株涉及Ⅰ、Ⅲ两个谱系;而以云、贵、川为主的西南地区的菌株则覆盖到了所有的3个谱系。这三个地区的香菇遗传多样性最丰富,西南地区尤为突出,是香菇种质资源保护与利用的重点区域。

关键词：香菇菌株遗传多样性分析种质资源保护省份谱系野生 DNA 西北高原含量

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