检索结果-内蒙古大学图书馆

应用与环境生物学报 2017年第1期23卷 41-45页

作者：聂啟玉邵宗泽宋旗李嘉晖余晨李光玉喻子牛张吉斌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心生命科学技术学院武汉430070 国家海洋局第三海洋研究所海洋生物遗传资源重点实验室厦门361005

独岛枝芽胞杆菌(Virgibacillus dokdonensis)1A00493分离自深海,对水稻细菌性病害水稻黄单胞菌和严重危害植物根部的南方根结线虫都具有较好的拮抗效果.根据我国2012年最新公布的微生物农药毒理试验行业标准,通过小鼠急性经口毒性试验... 详细信息

独岛枝芽胞杆菌(Virgibacillus dokdonensis)1A00493分离自深海,对水稻细菌性病害水稻黄单胞菌和严重危害植物根部的南方根结线虫都具有较好的拮抗效果.根据我国2012年最新公布的微生物农药毒理试验行业标准,通过小鼠急性经口毒性试验、急性经呼吸道毒性试验和急性注射毒性试验,评价*** 1A00493发酵液对哺乳动物的生物安全性.对于3种染病途径的毒性评价分别采用灌胃、鼻腔滴注、静脉注射方式一次性给药,观察小鼠的临床表现并测定小鼠的体重和脏器系数.结果显示:*** 1A00493发酵液各剂量不同给药方式的处理小鼠均未出现明显中毒症状及死亡现象,且对小鼠的生长发育无不良影响.小鼠体重变化与对照相比较并没有显著性区别(P>0.05),脏器系数的测定结果与对照组比较差异不显著(P>0.05),各脏器解剖没有出现病变.因此*** 1A00493发酵液对小鼠安全无毒副作用,可应用于农业生产中病害的防治.

关键词：枝芽胞杆菌发酵液小鼠急性毒性生物安全性

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拟康宁木霉T-51菌株生物学特性及其生物防治潜力

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植物保护学报 2022年第3期49卷 946-955页

作者：尤佳琪杜然顾卫红李超汉李国庆宋荣浩上海市农业科学院园艺研究所上海201106 华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070 上海市农业科学院生态环境保护研究所上海201403

为进一步扩宽拟康宁木霉Trichoderma koningiopsis T-51菌株的生防应用范围,该研究测定T-51菌株菌丝生长、产孢和分生孢子萌发的最适温度、光照和碳氮源条件及其对灰葡萄孢Botrytis cinerea菌核的重寄生能力和对12种植物病原真菌的生防... 详细信息

为进一步扩宽拟康宁木霉Trichoderma koningiopsis T-51菌株的生防应用范围,该研究测定T-51菌株菌丝生长、产孢和分生孢子萌发的最适温度、光照和碳氮源条件及其对灰葡萄孢Botrytis cinerea菌核的重寄生能力和对12种植物病原真菌的生防潜力。结果表明,拟康宁木霉T-51菌株在26℃下菌丝生长最快,生长速度达到2.5 cm/d,在20℃光照条件下产孢量最大,达到1.64×109个/皿,26~28℃光照条件下适宜T-51菌株分生孢子萌发;供试氮源中硫酸铵和硝酸铵适宜T-51菌株菌丝生长、产孢和分生孢子萌发,供试碳源中葡萄糖和可溶性淀粉适宜T-51菌株菌丝生长和分生孢子萌发,果糖和乳糖适宜T-51菌株产孢;T-51菌株能够重寄生灰葡萄孢菌核,当分生孢子悬浮液浓度为1×108个/mL时,重寄生效果最好;T-51菌株对核盘菌属Sclerotinia和丝核菌属Rhizoctonia植物病原真菌重寄生能力较强,对镰刀菌Fusarium spp.、暹罗刺盘孢菌Colletotrichum siamense、桃褐腐病菌Monilinia fructicola和稻瘟菌Magnaporthe oryzae等也有一定重寄生能力。表明T-51菌株在防治不同植物病害方面都有一定的应用潜力。

关键词：拟康宁木霉T-51 生物学特性重寄生温度光照氮源碳源

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利用PCR介导的基因置换技术构建阿维链霉菌bkdF~-突变株

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农业生物技术学报 2005年第5期13卷 127-133页

作者：熊伟梁运祥朱浩君闵勇吕和平郑应华华中农业大学农业微生物国家重点实验室北京生物医药研究所武汉430070 北京100091 北京生物医药研究所

PCR介导的基因置换技术是一种利用λ噬菌体Red重组系统在微生物中进行基因中断的新方法。实验利用该方法快速构建基因中断载体,并成功地置换了阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)bkdF基因。先合成1对长度分别为58和59nt的引物,其5’... 详细信息

PCR介导的基因置换技术是一种利用λ噬菌体Red重组系统在微生物中进行基因中断的新方法。实验利用该方法快速构建基因中断载体,并成功地置换了阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)bkdF基因。先合成1对长度分别为58和59nt的引物,其5’端的39nt序列分别与bkdF基因两侧同源,3’端则分别与安普霉素抗性标记盒(aac(3)Ⅳ+oriT)两侧序列一致。以该引物扩增的PC R产物电转化能表达λRed重组酶且含有目标质粒的大肠杆菌(***)菌株B W25113/pIJ790/pX W1224,获得了阳性重组质粒pX W1230。将该质粒中的大小为4.0kb B glⅡ目的片段插入基因置换载体pH Z1351,再接合转移至阿维链霉菌B JBM9903,筛选得到表型为ApraRThioS的接合子。PCR验证并对发酵产物进行H PLC和MS分析,证实该接合子为bkdF-突变株。

关键词： PCR介导的基因置换 Red重组阿维链霉菌支链α酮酸脱氢酶基因(bkdF) 基因中断

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纳米金兔抗猪IgG化学发光探针的制备及表征

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分析科学学报 2008年第3期24卷 254-258页

作者：胡德红马玉琴董飞韩鹤友华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学理学院化学生物学研究所农业微生物学国家重点实验室武汉430070

采用还原法制备了尺寸大小分别为4、14、30、41 nm的纳米金,优化了不同尺寸的纳米金兔抗猪IgG化学发光探针的制备条件.采用紫外-可见吸收光谱、透射电子显微镜和化学发光的方法对该探针进行了表征.结果表明纳米金兔抗猪IgG化学发光探针... 详细信息

采用还原法制备了尺寸大小分别为4、14、30、41 nm的纳米金,优化了不同尺寸的纳米金兔抗猪IgG化学发光探针的制备条件.采用紫外-可见吸收光谱、透射电子显微镜和化学发光的方法对该探针进行了表征.结果表明纳米金兔抗猪IgG化学发光探针具有很好的单分散性和稳定性.本研究为纳米金兔抗猪IgG化学发光探针的应用奠定了基础.

关键词：纳米金兔抗猪IgG 化学发光探针制备表征

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羊口疮病毒ORF125基因编码蛋白的结构预测及其在真核表达质粒转染细胞中的定位

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畜牧兽医学报 2014年第8期45卷 1375-1380页

作者：孔汉金张克山刘永杰尚佑军刘湘涛吴斌华中农业大学农业微生物国家重点实验室动物医学院武汉430070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046

旨在预测羊口疮病毒(ORFV)ORF125蛋白结构及其在真核表达质粒转染细胞中的定位。设计引物PCR扩增ORF125基因,并将其定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体,经酶切鉴定及序列测定后得到阳性重组表达质粒pEGFP—ORF125。利用DNAStar和MEGA4.0元... 详细信息

旨在预测羊口疮病毒(ORFV)ORF125蛋白结构及其在真核表达质粒转染细胞中的定位。设计引物PCR扩增ORF125基因,并将其定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体,经酶切鉴定及序列测定后得到阳性重组表达质粒pEGFP—ORF125。利用DNAStar和MEGA4.0元件分析不同毒株间ORF125基因的遗传进化关系,接着通过在线Expasy工具预测其二级结构并与Bcl-2家族成员进行比较。利用脂质体介导法转染山羊皮肤成纤维细胞(GSFs),经DAPI染色后在激光共聚焦显微镜下观察ORF125的亚细胞定位。结果显示:本次克隆的ORFV ORF125基因与国外公布的其他羊口疮毒株核苷酸水平相似性为97.1%~98.1%,与同属另外2株羊伪牛痘病毒相比,核苷酸相似性分别为84.1%(GQ329669)和85.6%(GQ329670);蛋白二级结构预测分析发现ORF125与Bcl-2家族成员α-螺旋位置相近,预测空间结构有很大的相似性;激光共聚焦显微镜观察发现ORF125在GSFs细胞质中呈弥散性分布。结果提示,羊口疮病毒ORF125基因非常保守,预测与Bcl-2蛋白有着相似的功能,重组质粒pEGFP-ORF125构建成功,ORF125基因在GSFs中得到表达,定位于细胞质中。

关键词：羊口疮病毒 ORF125序列分析亚细胞定位基因结构

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处理猪场沼液的微藻筛选及其净化效果评价

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中国畜牧杂志 2019年第2期55卷 112-117页

作者：孙宏张恒吴逸飞沈琦李园成汤江武葛向阳浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江杭州310021 华中农业大学农业微生物国家重点实验室湖北武汉430030

本研究旨在筛选可高效降解猪场沼液污染物并具有产蛋白和油脂潜力的微藻藻种,探讨其对不同稀释浓度沼液的处理效果。通过对沼液原位富集筛选,分离获得4株微藻,分别命名为CS-1、CS-2、CS-3和CS-4,分析不同微藻的生长及油脂、蛋白质产率... 详细信息

本研究旨在筛选可高效降解猪场沼液污染物并具有产蛋白和油脂潜力的微藻藻种,探讨其对不同稀释浓度沼液的处理效果。通过对沼液原位富集筛选,分离获得4株微藻,分别命名为CS-1、CS-2、CS-3和CS-4,分析不同微藻的生长及油脂、蛋白质产率。结果表明:藻株CS-3的生物量产率、蛋白产率、油脂产率和细胞内油脂含量均高于其余藻株(P<0.05),因而选取藻株CS-3为目标藻株,经过18S rDNA鉴定属于小球藻属(Chlorella sp.);比较不同微藻对沼液的处理效果,藻株CS-3对硝酸盐氮、总氮、总磷和化学需氧量等水质指标的去除效果最好,去除率分别达到94.5%、90.0%、94.8%和46.1%;在光照强度3000lux、温度25℃、曝气强度2.0L/min的条件下,CS-3对6倍和4倍稀释的猪场沼液处理效果较好,经过10 d处理,总氮的去除率分别为96.4%和94.4%,氨氮的去除率为98.4%和98.2%,总磷的去除率为100%和96.2%。以上表明,小球藻CS-3在沼液处理中具有应用前景,且其对沼液的净化效果受沼液稀释倍数的影响。

关键词：沼液微藻水质净化油脂产量

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适用于猪场沼液处理的好氧反硝化菌筛选及其脱氮特性评价

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中国畜牧杂志 2019年第6期55卷 113-120页

作者：孙宏吴逸飞张恒沈琦姚晓红王新汤江武葛向阳浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江杭州310021 华中农业大学农业微生物国家重点实验室湖北武汉430030

试验旨在筛选适合于猪场沼液处理的好氧反硝化菌。从活性污泥中分离获得 16 株好氧反硝化菌,其中菌株 ZH-14 的总氮(TN)和硝酸盐氮的去除效果最好,分别达到 50.73%和 99.99%。该菌株经过平板形态观察、功能基因和 16S rDNA 基因分析,鉴... 详细信息

试验旨在筛选适合于猪场沼液处理的好氧反硝化菌。从活性污泥中分离获得 16 株好氧反硝化菌,其中菌株 ZH-14 的总氮(TN)和硝酸盐氮的去除效果最好,分别达到 50.73%和 99.99%。该菌株经过平板形态观察、功能基因和 16S rDNA 基因分析,鉴定为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)。结果表明:菌株 ZH-14 在硝酸钾为唯一氮源培养基中生长时,48 h 后硝酸盐氮与 TN 的降解率分别为 100%和41.76%;以亚硝酸钠为唯一氮源培养时,亚硝酸盐氮降解率为 99.24%;以氨氮为唯一氮源培养时,氨氮的降解率达 94.1%;使用菌株 ZH-14 处理畜禽沼液,当其接种终浓度为 107 CFU/mL 时,经过 48 h 处理,氨氮、硝酸盐氮和化学需氧量的去除率分别为 54.4%、97.7%和 77.9%。综上表明,菌株 ZH-14 具有较强的反硝化和处理猪场沼液的能力,具有良好的应用开发前景。

关键词：氧反硝化猪场沼液脱氮性能假单胞菌

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抗猪γ-干扰素单克隆抗体的制备和鉴定

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中国预防兽医学报 2007年第2期29卷 146-149页

作者：余斌张强闫丽萍仇华吉王云峰陈焕春童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

将在大肠埃希氏菌中表达的重组猪γ-干扰素(rpIFN-γ)免疫8周龄BALB/c鼠3次后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按标准程序融合后,以间接ELISA和有限稀释法进行筛选,获得1株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该株单克隆抗体命名... 详细信息

将在大肠埃希氏菌中表达的重组猪γ-干扰素(rpIFN-γ)免疫8周龄BALB/c鼠3次后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按标准程序融合后,以间接ELISA和有限稀释法进行筛选,获得1株能稳定分泌抗猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该株单克隆抗体命名为B11株。经Western blot分析和间接ELISA检测,B11株能与商品化猪IFN-γ标准品产生特异性反应。间接免疫荧光检测显示B11株能与经PMA刺激的猪外周血单个核细胞产生特异性荧光。抗体亚型鉴定结果表明,B11株为IgG1型,且轻链为κ链。

关键词：猪γ-干扰素单克隆抗体

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炭疽芽孢杆菌A16R株eag基因缺失突变株构建

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微生物学报 2009年第1期49卷 23-31页

作者：高美琴刘先凯冯尔玲唐恒明朱力陈福生王恒樑华中农业大学食品科技学院武汉430070 军事医学科学院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

【目的】构建炭疽芽孢杆菌A16R株eag基因缺失突变株,为研究eag基因的功能奠定了基础。【方法】本研究以我国人用炭疽杆菌活疫苗A16R株中eag基因为目的缺失基因,根据炭疽芽孢杆菌Ames株基因组序列,利用软件设计了扩增上下游同源臂以及抗... 详细信息

【目的】构建炭疽芽孢杆菌A16R株eag基因缺失突变株,为研究eag基因的功能奠定了基础。【方法】本研究以我国人用炭疽杆菌活疫苗A16R株中eag基因为目的缺失基因,根据炭疽芽孢杆菌Ames株基因组序列,利用软件设计了扩增上下游同源臂以及抗性基因引物,构建了重组质粒,将该重组质粒电击转入炭疽杆菌A16R感受态细胞中,利用同源重组原理筛选到炭疽杆菌A16R株eag基因缺失突变株。在分子水平及蛋白质组学方面对基因缺失突变株进行验证。【结果】成功构建了重组质粒,经同源重组后获得eag基因缺失突变株。PCR鉴定表明目的基因已经丢失;SDS PAGE表明野生株与突变株在93 kDa处有差异蛋白条带,经质谱鉴定分析该条带为目的基因所表达的EA1蛋白;双向电泳结果显示突变株与野生株比较明显缺失3个蛋白点,经质谱分析后确定这3个点都是EA1蛋白。【结论】成功获得炭疽芽孢杆菌A16R株eag基因缺失突变株,为深入研究eag基因的功能奠定了基础,同时也为炭疽芽孢杆菌重要基因功能的研究建立了一个良好的技术平台。

关键词：炭疽芽孢杆菌A16R株同源重组缺失突变体双向电泳

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湖北省野生食药用菌资源调查(Ⅰ)

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食用菌学报 2012年第4期19卷 87-90页

作者：徐江边银丙黄浩李泰辉华中农业大学应用真菌研究所湖北武汉430070 广东省微生物研究所、广东省菌种保藏与应用重点实验室、广东省微生物应用新技术公共实验室、广东省华南应用微生物重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地广东广州510070

通过对2010～2011年在湖北省采集的1200余份大型真菌标本进行分类鉴定研究,从中整理出107份已鉴定可食用和药用的大型真菌标本,共58属95种,其中食用菌44种,药用菌23种,食药兼用型28种,湖北省首次报道的种类45种。

关键词：食用菌药用菌湖北省真菌资源

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