检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2019年第5期50卷 1064-1072页

作者：彭忠梁婉艾伟诚王斐华琳汤细彪陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室武汉430070

本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌(Pm)的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖(LPS)基因分型、多位点序列分型(MLST)对2013年12月—2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、... 详细信息

本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌(Pm)的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖(LPS)基因分型、多位点序列分型(MLST)对2013年12月—2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、气管、肝等样品中分离鉴定的Pm进行基因型分析,并对23种主要毒力基因进行检测。结果表明,当前在我国猪群中流行的Pm的荚膜基因型为A(48.85%)、D(42.75%)、F(2.67%),优势基因型为A和D;LPS基因型为L3(25.00%)和L6(75.00%)型,优势基因型为L6;MLST基因型为ST3(21.25%)、ST10(27.50%)、ST11(42.50%)、ST12(2.50%)、ST16(2.50%)、ST74(1.25%)及ST75(2.50%),优势基因型为ST3、ST10和ST11。如果将荚膜基因型、LPS基因型和MLST基因型组合起来看,当前在我国猪群中流行的Pm的主要基因型为荚膜:脂多糖:MLST基因型A:L3:ST3(20.00%)、A:L6:ST10(26.25%)及D:L6:ST11(42.50%)。毒力基因检测的结果发现部分毒力基因的分布表现出一定的"基因型偏好性"。结果提示,D:L6:ST11是我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌的主要基因型,可能与我国猪群中由多杀性巴氏杆菌导致的呼吸道疾病密切相关。

关键词：猪多杀性巴氏杆菌荚膜基因型脂多糖基因型 MLST基因型毒力基因

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仔猪吃初乳前后血清差异蛋白的鉴定和分析

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中国兽医学报 2019年第8期39卷 1577-1580,1590页

作者：徐守兴卢炳州刘华南王国庆吴斌张克山郑海学刘湘涛华中农业大学动物医学学院农业微生物学国家重点实验室预防兽医学湖北省重点实验室湖北武汉430070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

通过SDS-PAGE方法对仔猪吃初乳前后血清进行检测,找到差异蛋白后,利用LC-MS/MS技术对差异蛋白条带进行鉴定,并使用生物信息学手段对鉴定的蛋白进行GO和KEGG分析。结果显示,仔猪吃初乳前后有很明显的差异蛋白条带,共鉴定出338个蛋白,GO和... 详细信息

通过SDS-PAGE方法对仔猪吃初乳前后血清进行检测,找到差异蛋白后,利用LC-MS/MS技术对差异蛋白条带进行鉴定,并使用生物信息学手段对鉴定的蛋白进行GO和KEGG分析。结果显示,仔猪吃初乳前后有很明显的差异蛋白条带,共鉴定出338个蛋白,GO和KEGG分析结果表明,差异蛋白的功能主要和生长发育和免疫保护相关。这为进一步研究初乳调控仔猪生长发育和免疫调控奠定基础。

关键词：仔猪初乳血清差异蛋白鉴定分析

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多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的原核表达及免疫原性

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中国兽医学报 2019年第6期39卷 1151-1156页

作者：王斐张洪峰梁婉彭忠陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室湖北武汉430070

为研究多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的免疫原性,本试验利用PCR从牛源A型多杀性巴氏杆菌HB01基因组中扩增了TbpA的编码基因tbpA,并将其克隆至原核表达载体pET-30α(+)上,转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,rTbp... 详细信息

为研究多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的免疫原性,本试验利用PCR从牛源A型多杀性巴氏杆菌HB01基因组中扩增了TbpA的编码基因tbpA,并将其克隆至原核表达载体pET-30α(+)上,转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,rTbpA蛋白成功表达。Western blot证实该蛋白能够与抗多杀性巴氏杆菌HB01血清发生阳性反应。将rTbpA免疫小鼠后,分别于免疫后14,28 d采血,利用ELISA试验检测血清中的抗体滴度,结果显示血清中的抗rTbpA蛋白的IgG抗体显著升高(P<0.05)。感染试验结果显示,免疫rTbpA蛋白能够保护70%的小鼠抵抗多杀性巴氏杆菌的致死性攻击,并且病理切片结果表明,免疫小鼠的肺部损伤相对于对照组小鼠显著降低。本试验为筛选新型的多杀性巴氏杆菌免疫原性蛋白提供依据。

关键词：牛源A型多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白克隆表达小鼠

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捻转血矛线虫病的研究进展

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中国动物传染病学报 2019年第3期27卷 107-111页

作者：李芳芳张挺周彩显冯新港杜爱芳索勋李祥瑞朱兴全胡敏农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院武汉430070 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 浙江省动物预防医学重点实验室浙江大学动物科学学院杭州310029 中国农业大学动物医学院北京100193 南京农业大学动物医学院南京210095 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

捻转血矛线虫病是由主要寄生于反刍动物皱胃的捻转血矛线虫引起的一种重要的寄生线虫病,在我国草地牧区普遍流行,可引起宿主消瘦、贫血等慢性消耗性症状,严重感染甚至可引起死亡,给我国养殖业带来巨大的经济损失。由于基层养殖人员常常... 详细信息

捻转血矛线虫病是由主要寄生于反刍动物皱胃的捻转血矛线虫引起的一种重要的寄生线虫病,在我国草地牧区普遍流行,可引起宿主消瘦、贫血等慢性消耗性症状,严重感染甚至可引起死亡,给我国养殖业带来巨大的经济损失。由于基层养殖人员常常忽视寄生线虫病的危害,缺乏基本的防控常识和驱虫意识,从而错过了预防和治疗该病的最佳时机,最终导致动物大批感染,极大的降低了动物的品质和养殖的经济效益。本文从捻转血矛线虫的形态和生活史着手,介绍了捻转血矛线虫病的危害和症状、诊断和治疗、防控方法及感染和致病的相关分子机制研究进展,希望能为该病的防控提供一定的指导。

关键词：捻转血矛线虫病感染致病分子机制防控

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一种固定化复合菌剂的特性及净水性能研究

一种固定化复合菌剂的特性及净水性能研究

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2019年全国河湖环境污染治理与水生态修复产学研高峰论坛

作者：梁宏王新孙宏吴逸飞姚晓红沈琦汤江武葛向阳华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430030 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所浙江杭州310021

为探明采用包埋法制备的固定化复合菌剂ADH1-BSK9的特性及净水性能,采用活菌计数法分析了该固定化体系的载菌量,固定化复合菌剂的释放、贮存特性,并采用扫描电子显微镜表征其内部结构.以河道水为水源,在模拟实验条件下分析了固定化菌剂... 详细信息

为探明采用包埋法制备的固定化复合菌剂ADH1-BSK9的特性及净水性能,采用活菌计数法分析了该固定化体系的载菌量,固定化复合菌剂的释放、贮存特性,并采用扫描电子显微镜表征其内部结构.以河道水为水源,在模拟实验条件下分析了固定化菌剂的净水性能,并通过不同投加量实验确定固定化复合菌剂的最佳用量,利用PCR-DGGE分析固定化复合菌剂在实验水体中的定殖能力.结果显示,该固定化菌剂的最大载菌量约为5.1 ×109cfu·g-1,电镜显示不同载菌量的固定化菌剂内部存菌量有着明显的差异,在连续释放30天后,释放量衰减了 1-2个数量级,具有良好的缓释性能,在常温保藏11个月后仍具有较高的活性.通过模拟净水试验确定固定化复合菌剂最佳用量为0.333g·L-1,固定化菌剂的去除效率优于游离菌剂.DGGE分析结果显示该固定化复合菌剂能成功定殖于实验水体中.结果表明固定化复合菌剂ADH1-BSK9的具备良好的载菌、缓释和贮存特性和良好的净水性能,具有较高的应用价值.

关键词：包埋固定化复合菌剂净水性能 DGGE

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应用DTBIA技术快速检测柑橘黄龙病菌研究

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园艺学报 2018年第8期45卷 1605-1612页

作者：丁芳王清廉徐国亮周佳乐曾继吾严翔夏长秀郭俊刘永忠洪霓王国平彭抒昂 John S Hartung 华中农业大学植物科学技术学院、湖北省作物病虫害检测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室武汉430070 广东农业科学院果树研究所广州510640 江西省赣州市柑橘研究所江西赣州341000 云南省农业科学院热带亚热带经济作物研究所云南瑞丽678600 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 美国农业部分子植物病理学实验室马里兰20705

柑橘黄龙病病原菌为韧皮部限制性寄生菌Candidatus Liberibacter,迄今为止尚未成功获得离体纯培养。因此基于特异性抗体的高通量血清学检测技术迄今尚未开发。本实验室前期研究利用异源表达重组黄龙病菌外膜蛋白Omp_(CLas)免疫动物,制... 详细信息

柑橘黄龙病病原菌为韧皮部限制性寄生菌Candidatus Liberibacter,迄今为止尚未成功获得离体纯培养。因此基于特异性抗体的高通量血清学检测技术迄今尚未开发。本实验室前期研究利用异源表达重组黄龙病菌外膜蛋白Omp_(CLas)免疫动物,制备并获得了特异性多克隆抗体(Anti-Omp_(CLas)-Pab)。本研究利用直接组织印迹免疫法(Direct tissue blot immunoassay,DTBIA)技术对获得的多克隆抗体的检测效果进行了初步评价,证实该抗体可以特异性识别中国不同地理来源的柑橘黄龙病菌分离物;柑橘叶柄、叶片中脉、枝条、根部、果梗和种子中均存在黄龙病菌,其中根部和种子中的病菌含量相对较低,枝条和叶片中脉中的含量较高。该多克隆抗体的获得为后续快速检测试剂盒或试纸条的研发奠定了基础。

关键词：柑橘黄龙病菌快速检测 DTBIA 多克隆抗体特异性

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产志贺毒素大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_PHB05的生物学特性及全基因组分析

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中国兽医科学 2018年第4期48卷 428-437页

作者：陈义宝孙二超杨斓童贻刚宋娇阳吴斌农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌，是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌，从湖北桌规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆... 详细信息

产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌，是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌，从湖北桌规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆茵噬茵体，命名为vB_EcoM_PHB05。采用双层平板法筛选并纯化得到一株噬菌体．采用透射电镜观察噬菌体颗粒：使用Ion Torrent测序平台进行噬菌体全基因组测序，同时对噬菌体最佳感染复数（MOI）、一步生长曲线、裂解谱等生物学特性进行研究。结果表明，噬茵体vB_EcoM_PHB05在电镜下可见有一正多面体立体对称头部（直径约72nm），含收缩性尾部（尾长约45nm，尾宽20nm）．为肌尾科噬菌体；提取基因组，酶切鉴定该噬菌体核酸类型为双链DNA；其最佳感染复数为0．1；一步生长曲线试验结果显示，噬菌体vB_EcoM_PHB05潜伏期约为20min，平均裂解量约58PFU／cell；基因测序结果表明．该噬菌体全基因组全长147659bp，G＋C含量37．5％。噬菌体vB_EcoM_PHB05除对本身宿主茵产志贺毒素大肠杆菌（Escherichia coli034）产生裂解外，还裂解其它产志贺毒素大肠杆菌和沙门茵。噬菌体vB_EcoM_PHB05为一株广谱烈性噬菌体，其基因组中不合耐药基因及毒力基因，具有开发为抗产志贺毒素大肠杆菌制剂的潜力。

关键词：产志贺毒素大肠杆菌噬菌体分离鉴定生物学特征全基因组测序基因组分析

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基于RAPD标记分析葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的遗传多样性

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华中农业大学学报 2018年第5期37卷 32-39页

作者：张蕊于琳李国庆张静华中农业大学植物科学技术学院/湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室/农业微生物学国家重点实验室武汉430070 广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析。结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA... 详细信息

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析。结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA条带为多态性条带,多态性条带比率(PPB)为77.8%。多态性信息含量(PIC)值变化范围在0.47~0.84,平均值为0.72,观测等位基因数(Na)的均值为2.000 0、有效等位基因数(Ne)的均值为1.357 7、Nei’s基因多样性指数(H)的均值为0.227 5,Shannon信息指数(I)的均值为0.363 1。UPGMA聚类分析表明,遗传相似系数变化范围在0.55~1.00,以遗传相似系数0.70为阈值时,可分为5个类群(A、B、C、D、E),在遗传相似系数0.74处,B类群又可以分为B1和B2两个亚群。分析结果表明,***群体内遗传变异与菌株地理来源、寄主植物有一定相关。

关键词：葡萄孢属类似真菌 Amphobotrys ricini RAPD 遗传多样性 UPGMA

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基于RAPD标记分析葡萄孢属类似真菌Amphobotrysricini的遗传多样性

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华中师范大学学报（自然科学版） 2018年第5期37卷 32-39页

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析.结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA... 详细信息

采用RAPD分子标记对我国15个地区2种寄主植物(铁苋菜和蓖麻)上分离得到的葡萄孢属类似真菌Amphobotrys ricini的81个菌株以及来自美国的1个***菌株进行了遗传多样性分析.结果显示:筛选出的8条RAPD引物共扩增出63条DNA带,其中有49条DNA条带为多态性条带,多态性条带比率(PPB)为77.8％.多态性信息含量(PIC)值变化范围在0.47～0.84,平均值为0.72,观测等位基因数(Na)的均值为2.0000、有效等位基因数(Ne)的均值为1.3577、Nei's基因多样性指数(H)的均值为0.2275,Shannon信息指数(I)的均值为***聚类分析表明,遗传相似系数变化范围在0.55～1.00,以遗传相似系数0.70为阈值时,可分为5个类群(A、B、C、D、E),在遗传相似系数0.74处,B类群又可以分为B1和B2两个亚群.分析结果表明,***群体内遗传变异与菌株地理来源、寄主植物有一定相关.

关键词：葡萄孢属类似真菌 Amphobotrysricini RAPD 遗传多样性 UPGMA

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基于竞争法与恒温扩增技术检测相思子毒素的研究

基于竞争法与恒温扩增技术检测相思子毒素的研究

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NCEC2019第十届全国环境化学大会

作者：孙璇高志贤军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所天津300050 天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室天津300050 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所天津300050 天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室天津300050

相思子毒素是目前发现的毒性最大的植物毒素之一，它具有很强的细胞毒性，能使细胞内的蛋白质合成障碍而死亡。因此，在食品安全和军事防御领域，研究相思子毒素具有十分重要的意义。

关键词：相思子毒素竞争法恒温扩增荧光检测

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