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中国植物病理学会2012年学术年会

作者：周菊芳曲林宁王利平王国平洪霓华中农业大学植物科学技术学院/湖北省作物病害检测和安全控制实验室农业微生物学国家重点实验室

樱桃坏死锈斑病毒(cherry necrotic rusty mottle virus,CNRMV)为线形病毒科(Flexiviridae)凹陷病毒属(Foveavirus)的暂定种,基因组全长约为8.4 kb的+ssRNA病毒。CNRMV主要在北美、欧洲、新西兰和亚洲的日本有发生报道。已发现CNRMV能... 详细信息

樱桃坏死锈斑病毒(cherry necrotic rusty mottle virus,CNRMV)为线形病毒科(Flexiviridae)凹陷病毒属(Foveavirus)的暂定种,基因组全长约为8.4 kb的+ssRNA病毒。CNRMV主要在北美、欧洲、新西兰和亚洲的日本有发生报道。已发现CNRMV能侵染李属(Prunus)植物中的甜樱桃(Prunus avium)和樱花(*** L.),感病植株叶片表现褐色坏死斑和锈状褪绿斑等症状,该病毒能通过嫁接传播,尚未发现传播该病毒的昆虫介体。目前尚无该病毒的血清学试剂市售,对该病毒的检测多采用RT-PCR技术。本研究于2011年从我国山东烟台随机采集了3份酸樱桃(*** L.)和9份甜樱桃样品,采用RT-PCR方法从2份酸樱桃和1份表现褪绿斑

关键词：抗血清原核表达制备及应用

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芋病毒病田间调查及毒氟磷对芋病毒病的防治效果

芋病毒病田间调查及毒氟磷对芋病毒病的防治效果

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第六届全国水生蔬菜学术及产业化研讨会

作者：王彦芬 Syeda Araber Kazmi 曲林宁王国平刘玉平洪霓华中农业大学植物科学技术学院，湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室，武汉，430070 华中农业大学植物科学技术学院，湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室，武汉，430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉市蔬菜科学研究所

对芋病毒病及类似病害症状进行调查，其症状表现主要分为羽状花叶、叶片向上卷曲并伴有黄化或花叶、脉间黄化、明亮褪绿黄斑、褪绿斑点(斑驳)及叶片皱缩和叶缘黄化。采用RT-PCR和PCR技术对随机采集的32份表现症状的鄂芋一号样品进行了... 详细信息

对芋病毒病及类似病害症状进行调查，其症状表现主要分为羽状花叶、叶片向上卷曲并伴有黄化或花叶、脉间黄化、明亮褪绿黄斑、褪绿斑点(斑驳)及叶片皱缩和叶缘黄化。采用RT-PCR和PCR技术对随机采集的32份表现症状的鄂芋一号样品进行了芋花叶病毒(DSMV)和芋杆状病毒(TaBV)2种病毒的检测，检出率均为68.8％。同时.利用30％毒氟磷可湿性粉剂500倍液和1 000倍液对芋病毒病进行田间药效试验，第一次施药后10 d调查.毒氟磷可湿性粉刺500倍液和1 000倍液的防治效果分另11为30.9％和24.9％;第二次施药后15 d调查，500倍液和1 000倍液防治效果分别为72.8％和59.4％。田间药剂试验结果表明，毒氟磷可湿性粉剂500倍液比1 000倍的防治效果好，从田间芋头长势可看出，毒氟磷对芋头生长有明显的促进作用。

关键词：芋病毒病防治效果毒氟磷

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柑橘溃疡病菌抗铜相关基因copA和copB的克隆及原核表达

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植物病理学报 2011年第3期41卷 247-252页

作者：王君叶刚马燕侠王国平洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

以柑橘溃疡病菌DNA为模板,对抗铜相关基因copA和copB进行了PCR扩增和克隆,获得了大小分别为1 782 bp和1 095 bp的目标片段。构建了这2个基因的原核表达载体(pET-copA和pET-copB),并在大肠杆菌[Escherichia coliBL21(DE3)]中成功诱导表... 详细信息

以柑橘溃疡病菌DNA为模板,对抗铜相关基因copA和copB进行了PCR扩增和克隆,获得了大小分别为1 782 bp和1 095 bp的目标片段。构建了这2个基因的原核表达载体(pET-copA和pET-copB),并在大肠杆菌[Escherichia coliBL21(DE3)]中成功诱导表达。利用原核表达的融合蛋白免疫大耳白兔,制备了抗copA和copB原核表达蛋白的多克隆抗体。用间接ELISA法测定了所制备的多克隆抗体的效价均为1∶6 400。用所制备的抗体分别对copA和copB的原核表达产物进行Western blot分析的结果显示,在相应位置产生了较强的免疫反应条带,表明所制备抗体能特异性地与相应的抗原发生免疫反应。

关键词：抗铜基因 PCR 原核表达 Western blot 柑橘溃疡病菌

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盾壳霉小RNA相关通路基因的功能研究

盾壳霉小RNA相关通路基因的功能研究

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中国植物病理学会2011年学术年会

作者：曾丽斯谢甲涛姜道宏付艳苹程家森湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学

微小RNA（miRNA,microRNA）是由具有发夹结构的初级转录本（pri-miRNA）经过一系列加工过程而产生的一种非编码小RNA,广泛存在于高等和低等生物体内,通过剪切靶标mRNA直接切除或抑制其翻译调控基因表达。Dicer酶在miRNA的加工过程中起... 详细信息

微小RNA（miRNA,microRNA）是由具有发夹结构的初级转录本（pri-miRNA）经过一系列加工过程而产生的一种非编码小RNA,广泛存在于高等和低等生物体内,通过剪切靶标mRNA直接切除或抑制其翻译调控基因表达。Dicer酶在miRNA的加工过程中起重要作用,AGO蛋白则是小RNA行使功能的RNA诱导沉默复合体（RNA inducedsilencing complex,RISC）中的重要成员。目前研究表明miRNA在动植物的生长发育等过程中起重要的调控作用,有关上述小RNA通路相关基因在动植物以及部分真菌中的功能也有研究报道,但在核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）的生防菌盾壳霉（Coniothyriumminitans）中这些基因的功能均不明确,本文对盾壳霉中的AGO、DCL1及DCL2基因的功能进行了相关研究。首先通过RT-PCR检测了AGO、DCL1和DCL2基因在盾壳霉中的表达情况,发现这些基因在盾壳霉的生长和产孢等阶段均有表达。根据同源重组的原理构建了这三个基因的敲除载体,通过农杆菌介导转化盾壳霉分生孢子,经PCR和Southern杂交验证分别得到了3个AGO基因敲除转化子,4个DCL1基因敲除转化子和8个DCL2基因敲除转化子,RT-PCR检测结果表明这些敲除转化子中相关基因均无表达。进一步研究表明,在PDA培养基上生长时,敲除转化子所形成的菌落形态、菌丝形态和孢子形态等方面与野生菌株ZS-1相比均无显著差异。但是,它们的生长速度和产孢量均显著高于野生菌株ZS-1;AGO基因敲除转化子的寄生腐烂菌核能力强于野生菌株ZS-1,而DCL1和DCL2基因敲除转化子的寄生腐烂菌核能力要显著低于野生ZS-1;上述研究结果初步表明AGO、DCL1和DCL2基因对盾壳霉的生长、孢子发育和寄生菌核能力等具有一定的调控作用,有关这些基因在盾壳霉中的详细功能,如在调控盾壳霉的小RNA加工及行使功能等方面的作用有待于进一步研究。

关键词：盾壳霉小RNA AGO DCL1 DCL2

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真菌DNA病毒SsHADV-1侵染性克隆的研究

真菌DNA病毒SsHADV-1侵染性克隆的研究

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中国植物病理学会2011年学术年会

作者：于晓李博付艳苹谢甲涛程家森李国庆易先宏姜道宏湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学

核盘菌中的SsHADV-1是真菌中首次报道的ssDNA病毒,证实了真菌可以为DNA病毒复制和增殖提供所需的物质和场所,为研究DNA病毒与真菌寄主互作提供了全新的系统。为了深入研究病毒和寄主的相互关系需要建立该病毒的反向遗传学体系,近来我们... 详细信息

核盘菌中的SsHADV-1是真菌中首次报道的ssDNA病毒,证实了真菌可以为DNA病毒复制和增殖提供所需的物质和场所,为研究DNA病毒与真菌寄主互作提供了全新的系统。为了深入研究病毒和寄主的相互关系需要建立该病毒的反向遗传学体系,近来我们通过构建侵染性克隆载体转染真菌原生体的方法获得了成功。

关键词：侵染性克隆 SsHADV-1 核盘菌 DNA

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我国梨树腐烂病菌遗传多样性的RAPD分析及SCAR标记

我国梨树腐烂病菌遗传多样性的RAPD分析及SCAR标记

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中国植物病理学会2011年学术年会

作者：程栎菁洪霓王利平王国平华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

梨树腐烂病是梨树上为害最为严重的病害之一,该病在我国的发生普遍。我国梨树种植地域广泛,种质十分丰富,且存在大量的具有地方特色的品种,在梨产业发展中形成了明显的地域特色区种植。由于不同地域环境及种植条件差异较大,加之近些年... 详细信息

梨树腐烂病是梨树上为害最为严重的病害之一,该病在我国的发生普遍。我国梨树种植地域广泛,种质十分丰富,且存在大量的具有地方特色的品种,在梨产业发展中形成了明显的地域特色区种植。由于不同地域环境及种植条件差异较大,加之近些年品种更新较快,使得梨腐烂的为害加重,其发生特点也出现了新的变化。为明确我

关键词：梨树腐烂病

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超低温处理对梨茎尖培养及潜隐病毒脱除的影响

超低温处理对梨茎尖培养及潜隐病毒脱除的影响

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中国植物病理学会2011年学术年会

作者：唐敏王国平吴官维洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

＜正＞目前植物病毒脱除方法包括茎尖培养、热处理、化学处理及超低温处理等,超低温处理技术是近年来新兴的脱毒方法。该方法相比传统的热处理和化学处理等方法,具有操作简单、快速、成本低廉等优点。超低温保存（Cryopreservation）常...

＜正＞目前植物病毒脱除方法包括茎尖培养、热处理、化学处理及超低温处理等,超低温处理技术是近年来新兴的脱毒方法。该方法相比传统的热处理和化学处理等方法,具有操作简单、快速、成本低廉等优点。超低温保存（Cryopreservation）常以液氮为冷源,早期主要用于植物种质资源的长期稳定保存。由于植物茎尖在液氮处理过程中其生长点细胞保持存活状态,而较大的细胞在丧失活性,该技术近些年已成功应用于

关键词：

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杆状DNA病毒在我国栽培芋上的首次发现

杆状DNA病毒在我国栽培芋上的首次发现

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中国植物病理学会2011年学术年会

作者：施世明王国平王利平洪霓华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

芋[Colocasia esculenta(L.)Schott]是天南星科(Araceae)芋属(Colocasia)多年生宿根草本植物。目前世界各国报道的芋病原病毒主要有8种,国内报道的有芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,DsMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)两种。Yang et al.(2003)报道在巴布亚新几内亚等太平洋岛国种植的芋上检测到一种杆状DNA病毒,命名为芋杆状病毒(Taro bacilliformvirus,TaBV)。TaBV为花椰菜花叶病毒科(Caulimoviridae)杆状DNA病毒属(Badnavirus)的一个暂定种。目前杆状DNA病毒属有18个正式种和5个暂定种,代表种是鸭跖草黄斑驳病毒(Commel-

关键词：序列相似性香蕉线条病毒总核酸首次发现 DNA

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核盘菌中发现一种类似双分病毒的真菌病毒

核盘菌中发现一种类似双分病毒的真菌病毒

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中国植物病理学会2011年学术年会

作者：刘立江谢甲涛程家森付艳苹李国庆易先宏姜道宏湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室华中农业大学植物科学技术学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)是重要的作物病原真菌。研究核盘菌病毒可以为由核盘菌引致的作物菌核病防治提供有益的病毒资源。实验室在前期研究中发现核盘菌中存在多种类型的真菌病毒,并首次在核盘菌中报道了真菌DNA病毒(Yu et al... 详细信息

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)是重要的作物病原真菌。研究核盘菌病毒可以为由核盘菌引致的作物菌核病防治提供有益的病毒资源。实验室在前期研究中发现核盘菌中存在多种类型的真菌病毒,并首次在核盘菌中报道了真菌DNA病毒(Yu et al,2010)。本研究自油菜发病残体的菌核中分离获得了一株称为HN-138的菌株。该菌株在PDA上生长与正常菌株相比,菌落形态没有显著差异,均呈均匀放射性扩展,生长速度没有明显差异,但是其形成的菌落菌丝茂盛、气生菌丝发达,不产生菌核。HN-138菌株致病力显著弱于正常菌株,不能形成典型的病斑(48h后统计病斑直径

关键词：核盘菌真菌病毒 dsRNA

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盾壳霉腺苷酸环化酶基因(CmAC)功能初步分析

盾壳霉腺苷酸环化酶基因(CmAC)功能初步分析

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中国植物病理学会2011年学术年会

作者：夏菲谢甲涛程家森李国庆易先宏姜道宏付艳苹湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室华中农业大学植物科学技术学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

盾壳霉(Coniothyrium minitans)是核盘菌的重寄生菌,是作物菌核病的重要生防真菌。本实验室在前期研究中发现T-DNA插入破坏编码Phosphoribosylamidotransferase(PRAT)的基因将导致盾壳霉不能产生分生孢子。PRAT是生物体内嘌呤从头合成... 详细信息

盾壳霉(Coniothyrium minitans)是核盘菌的重寄生菌,是作物菌核病的重要生防真菌。本实验室在前期研究中发现T-DNA插入破坏编码Phosphoribosylamidotransferase(PRAT)的基因将导致盾壳霉不能产生分生孢子。PRAT是生物体内嘌呤从头合成过程中的第一步反应的关键酶。在PDA培养基中添加次黄嘌呤、腺嘌呤和cAMP等均可以促使突变体恢复产孢,同时也发现突变体没有丧失寄生核盘菌的能力,其与核盘菌

关键词：盾壳霉核盘菌环化酶

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