盾壳霉是植物病原真菌核盘菌的重寄生真菌,其重寄生作用是利用盾壳霉防治核盘菌的主要机制之一,然而其机制尚不清晰。本研究从核盘菌与盾壳霉互作不同时期的RNAeq数据库中筛选到一个表达显著上升的核盘菌基因,编码一个坏死和乙烯诱导蛋白SsNEP2(Sclerotinia sclerotiorum necrosis and ethylene-inducing protein 2),并初步研究了该基因在核盘菌应答盾壳霉寄生过程中的作用。核盘菌基因SsNEP2全长857bp,含有两个内含子,编码一种含有244个氨基酸的坏死与诱导蛋白,预测含有21个氨基酸的一段信号肽,不含细胞膜脂锚定结合位点和跨膜结构域,推测为分泌蛋白。在盾壳霉寄生核盘菌时,SsNEP2基因的表达量随寄生时间的延长而逐渐上升。核盘菌基因SsNEP2沉默转化子与出发菌株相比,它们的菌丝生长速度、菌落形态、菌核形状和致病力无显著差异。选取其中不同沉默效率的6个沉默转化子分别与盾壳霉ZS-1对峙培养,盾壳霉寄生SsNEP2沉默转化子的菌丝能力受到显著的抑制,并且分生孢子的产量显著降低,而且这种影响与SsNEP2基因沉默的效率显著正相关,初步推测SsNEP2基因沉默可以一定程度上抑制盾壳霉寄生。进一步研究发现盾壳霉在添加了SsNEP2基因沉默转化子发酵液的PDA培养基中的产孢受到显著抑制,但生长速度没有明显区别;而基本培养基中添加沉默转化子发酵液总蛋白对盾壳霉生长和产孢影响不显著。由此推定,盾壳霉可能通过诱导表达寄主核盘菌的SsNEP2基因而创造适合其寄生核盘菌和生长的环境,详细机理研究正在进一步研究。
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