检索结果-内蒙古大学图书馆

华中农业大学学报 2016年第6期35卷 11-16页

作者：杜改利汪方奎胡甜王莉陈雯莉华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

利用荧光显微镜观察节旋藻CB001和CB002的菌丝形态,同时对其16SrDNA序列以及在液体和固体培养条件下的磷脂脂肪酸特征进行系统分析。显微成像观察表明,CB001和CB002均属于钝顶节旋藻(Arthrospira platensis),具有运动能力;磷脂脂肪酸特... 详细信息

利用荧光显微镜观察节旋藻CB001和CB002的菌丝形态,同时对其16SrDNA序列以及在液体和固体培养条件下的磷脂脂肪酸特征进行系统分析。显微成像观察表明,CB001和CB002均属于钝顶节旋藻(Arthrospira platensis),具有运动能力;磷脂脂肪酸特征分析结果显示,磷脂脂肪酸16∶0、16∶1w7c、18∶1w9c、18∶2w6c、14∶0anteiso和16∶1w7calcohol可能是节旋藻的代表性脂肪酸;18∶1w5c和16∶3w6c分别为CB001和CB002的特有磷脂脂肪酸组分;同时,不同培养方式对CB001和CB002磷脂脂肪酸组成模式具有极其显著的影响。

关键词：蓝细菌系统发育磷脂脂肪酸分析节旋藻

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猴金属硫蛋白α域(MT-α cDNA)突变体的构建、表达及工程菌对重金属的吸附

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环境科学学报 2008年第9期28卷 1763-1770页

作者：路延笃黄巧云陈雯莉雷磊何小川蔡鹏梁巍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业部亚热带农业资源与环境重点开放实验室武汉430070

采用PCR技术和同尾酶手段,构建了猴金属硫蛋白(mMT)α域的串连体,并构建了表达MTα串连体的工程菌,获得了表达二聚串连体(MTα2)、三聚串连体(MTα3)、五聚串连体(MTα5)的工程菌.结果表明,工程菌在0.1mmol·L-1IPTG诱导3h后表达量... 详细信息

采用PCR技术和同尾酶手段,构建了猴金属硫蛋白(mMT)α域的串连体,并构建了表达MTα串连体的工程菌,获得了表达二聚串连体(MTα2)、三聚串连体(MTα3)、五聚串连体(MTα5)的工程菌.结果表明,工程菌在0.1mmol·L-1IPTG诱导3h后表达量最高.Cd2+浓度为0.5mmol·L-1时,对照菌pGEX-2T/BL21生长受到严重胁迫,工程菌表现出较强的抗性,MTαn/BL21(n=2、3、5)生长几乎不受到胁迫;Cd2+浓度为1.0mmol·L-1时,MTα5/BL21表现出较强的耐受能力.Cd2+浓度为0.5mmol·L-1时,工程菌对镉的富集能力明显高于对照,其中富集能力最强的是MTα3/BL21(76%).与对照pGEX-2T/BL21相比,MT/BL21对锌吸附能力显著提高,而转化有MTα串连体基因的工程菌对锌的吸附能力没有提高,说明工程菌对Cd2+的吸附特异性增强.结构预测显示,MTα、MTα2、MTα3的二级结构中α螺旋依次增加,推测突变蛋白的疏水性增强,三维结构稳定.MTα4、MTα5二级结构中,α螺旋数目减少,尤其是MTα5,其α螺旋几乎完全遭到破坏,疏水性大为降低.对基因工程菌吸附镉的实验表明,MTα3/BL21对镉具有较高的特异性和富集容量.

关键词：猴金属硫蛋白重金属抗性吸附串连体 SWISS-MODEL

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重组毕赤酵母(Pichia pastoris)高产Lunasin的发酵工艺优化

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中国生物工程杂志 2016年第8期36卷 73-79页

作者：康国凯冯国栋曹坤琳陈正军葛向阳华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

Lunasin是一个最初从大豆中分离,具有43个氨基酸的多肽,具有抗高血压,抗氧化活性,预防癌症,抗炎和降胆固醇的活性。为了实现Lunasin的高效生产,对重组毕赤酵母GS115 LN诱导阶段甲醇补料策略(溶氧反馈补料,指数-恒速补料)以及诱导温度进... 详细信息

Lunasin是一个最初从大豆中分离,具有43个氨基酸的多肽,具有抗高血压,抗氧化活性,预防癌症,抗炎和降胆固醇的活性。为了实现Lunasin的高效生产,对重组毕赤酵母GS115 LN诱导阶段甲醇补料策略(溶氧反馈补料,指数-恒速补料)以及诱导温度进行了优化,并且在此基础上对双碳源(山梨醇、甘露醇)和甲醇混合补料策略以及复合氮源与甲醇混合补料策略进行了优化。研究表明,最优补料策略以及诱导温度分别为指数-恒速补料、24℃,最终在流加1%大豆蛋白胨以及0.02%天冬氨酸条件下,Lunasin表达量最高,达到3.27 g/L,是单一甲醇诱导的1.27倍。

关键词： Lunasin 重组毕赤酵母高密度发酵工艺优化

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单交换法构建鱼腥蓝细菌ftsZ的gfp原位标记菌株

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华中农业大学学报 2016年第6期35卷 30-36页

作者：牛天彩胡胜陈雯莉王莉华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

利用单交换法将gfp整合到鱼腥蓝细菌PCC 7120基因组上,构建ftsZ-gfp的翻译融合菌株,并观察了FtsZ蛋白的亚细胞定位。结果表明:通过同源重组,gfp与基因组中唯一完整的ftsZ融合,既保证了ftsZ基因的正常表达又能准确反映ftsZ蛋白的亚细胞定... 详细信息

利用单交换法将gfp整合到鱼腥蓝细菌PCC 7120基因组上,构建ftsZ-gfp的翻译融合菌株,并观察了FtsZ蛋白的亚细胞定位。结果表明:通过同源重组,gfp与基因组中唯一完整的ftsZ融合,既保证了ftsZ基因的正常表达又能准确反映ftsZ蛋白的亚细胞定位,并且实验周期短、操作方便,是研究蛋白质亚细胞定位的一种简单有效的方法。

关键词：鱼腥蓝细菌PCC 7120 单交换 FtsZ GFP

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苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫的研究进展

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植物保护学报 2004年第4期31卷 418-424页

作者：余子全周燚孙明喻子牛华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

植物寄生线虫是一类重要的植物病原生物,给农业生产造成巨大的损失。传统方法防治植物寄生线虫都存在一定的局限性。研究发现苏云金芽胞杆菌对线虫有毒杀活性,为防治植物寄生线虫寻找到了一条新途径。文章介绍了苏云金芽胞杆菌防治植物... 详细信息

植物寄生线虫是一类重要的植物病原生物,给农业生产造成巨大的损失。传统方法防治植物寄生线虫都存在一定的局限性。研究发现苏云金芽胞杆菌对线虫有毒杀活性,为防治植物寄生线虫寻找到了一条新途径。文章介绍了苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫的研究现状,着重阐述了苏云金芽胞杆菌的杀线虫晶体蛋白及其基因、杀线虫机制等方面的研究进展,并探讨了其中存在的问题及其对策。

关键词：植物寄生线虫苏云金芽胞杆菌防治晶体蛋白病原生物农业生产损失基因发现

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参与紫云英共生固氮的1个上调表达结瘤素基因AsB6的分离与鉴定

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华中农业大学学报 2010年第2期29卷 169-174页

作者：吴梅丑敏霞李一星陈大松李友国华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

基于接种华癸中慢生根瘤菌(Mesorhizobiumhuakuii)7653R的紫云英(Astragalus sinicusL.)感染根与未接种对照根在转录水平上的差异,利用抑制差减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),建立了紫云英结瘤固氮过程中的差异表达cDNA文库,共获得527个有效克隆,其中增强或特异性表达的上调文库中包含341个克隆,抑制表达的下调文库包含186个克隆。对其中的1个上调表达cDNA克隆AsB6利用RACE(rapid amplification of cDNAends)方法获得了其基因全长序列,利用BLAST在线软件和GenBank,Gen-Bank EST和Tigr Porcine EST等数据库进行同源序列比较,表明AsB6与苜蓿的β-酮酯酰合成酶及依赖于SAM(S-adenosgl methiomine,S-腺苷蛋氨酸)的羧甲基转移酶具有66%的同源性,同时利用实时荧光定量PCR研究了该基因的时空表达特征。结果显示,接种根瘤菌7653R后,在紫云英感染根和根瘤中该基因的表达量显著增强,且在接种后根瘤形成早期和固氮中晚期表达量相对较高。推测其可能与根瘤菌前期感染和根瘤形成、根瘤代谢功能有关。

关键词：抑制差减杂交紫云英上调基因 β-酮酯酰合成酶共生固氮

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植物响应寄生线虫侵染机制的研究进展

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生物技术通报 2021年第7期37卷 25-34页

作者：邓苗苗郭晓黎华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

植物寄生线虫(plant parasitic nematode,PPN)是一类重要的植物病原物,它们分布广泛,适应性强,通过与寄主植物建立长期、稳定的寄生关系对粮食作物、园艺作物以及森林植物构成严重危害。其中,根结线虫(root-knot nematode,RKN)和孢囊线... 详细信息

植物寄生线虫(plant parasitic nematode,PPN)是一类重要的植物病原物,它们分布广泛,适应性强,通过与寄主植物建立长期、稳定的寄生关系对粮食作物、园艺作物以及森林植物构成严重危害。其中,根结线虫(root-knot nematode,RKN)和孢囊线虫(cyst nematode,CN)是影响最大研究最多的2类定居型植物内寄生线虫,其侵染方式、取食细胞的形成及繁殖方式等存在很多差异,导致这两种PPNs在侵染植物后会对寄主产生多种不同的影响。近年来在线虫抗病基因克隆、效应蛋白作用机制、寄主响应等方面取得了大量研究进展。本文将对CNs和RKNs与植物互作的机理进行概括总结,主要从寄主抗病基因、线虫分泌蛋白以及植物激素响应3个方面侧重比较CNs和RKNs之间存在的差异,并对相关理论研究结果在线虫防治中的潜在应用进行展望。

关键词：根结线虫孢囊线虫抗病基因效应蛋白激素

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鱼腥蓝细菌PCC 7120 all 3555基因超表达和缺失突变体的构建及表型

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华中农业大学学报 2013年第6期32卷 21-26页

作者：李之萌王莉陈雯莉华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

在鱼腥蓝细菌PCC 7120中,all3555是一个乙酰羟酸合成酶的编码基因,为研究该基因在鱼腥蓝细菌PCC 7120的生长和环境适应过程中的作用,构建了该基因的超表达和缺失突变菌株,结果显示该基因缺失后鱼腥蓝细菌PCC 7120仍可继续生长,但对NaCl... 详细信息

在鱼腥蓝细菌PCC 7120中,all3555是一个乙酰羟酸合成酶的编码基因,为研究该基因在鱼腥蓝细菌PCC 7120的生长和环境适应过程中的作用,构建了该基因的超表达和缺失突变菌株,结果显示该基因缺失后鱼腥蓝细菌PCC 7120仍可继续生长,但对NaCl胁迫的敏感性有一定程度提高,而超表达该基因则会提高鱼腥蓝细菌PCC 7120对氧化胁迫和NaCl胁迫的抗性,表明all3555对鱼腥蓝细菌PCC 7120的正常生长影响较小,但对菌株的抗氧化胁迫和抗NaCl胁迫等有重要作用。

关键词：鱼腥蓝细菌乙酰羟酸合成酶 all3555 氧化胁迫 NaCl胁迫基因超表达缺失突变体

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1株广谱拮抗植物病原真菌的芽孢杆菌HNA3的鉴定及其活性成分分析

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华中农业大学学报 2013年第3期32卷 21-27页

作者：徐菱菱王丽陈龙男谢福莉李友国华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

采用形态观察、16S rDNA序列和部分特异基因排列分析鉴定从植物根际土壤中分离的1株根际细菌HNA3;采用平板对峙试验和抑菌率计算方法测定其对供试植物病原真菌的拮抗谱和拮抗能力;通过摇瓶发酵和酸沉淀方法研究相关抗菌活性物质的产生... 详细信息

采用形态观察、16S rDNA序列和部分特异基因排列分析鉴定从植物根际土壤中分离的1株根际细菌HNA3;采用平板对峙试验和抑菌率计算方法测定其对供试植物病原真菌的拮抗谱和拮抗能力;通过摇瓶发酵和酸沉淀方法研究相关抗菌活性物质的产生条件及其分离方法;采用表面活性检测和有关功能编码基因的序列分析初步鉴定抗菌活性物质成分的性质。结果表明:HNA3菌株为1种解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefa-ciens;BPY(牛肉膏蛋白胨酵母粉)培养基是适合HNA3生长和产生相关抗菌活性物质的适宜培养基;活性物质存在于发酵除菌液中,可通过酸沉淀方法分离获得。活性物质具有较高的稳定性和抗逆性,属于脂肽类物质。本研究结果表明HNA3具有较广谱的拮抗植物病原真菌的能力,具备研发成为一种表面喷施型微生物杀菌剂的特性和应用前景。

关键词：芽孢杆菌HNA3 植物病原真菌抗菌活性稳定性脂肽

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产生伴胞晶体的芽胞杆菌CTC菌株的16S-23SrRNA间隔区分析

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华中农业大学学报 2005年第2期24卷 169-175页

作者：谭珊娜孙明喻子牛华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

根据能形成伴胞晶体的特征,芽胞杆菌CTC菌株被鉴定为苏云金芽胞杆菌幕虫亚种。但该菌株明显不同于典型的苏云金芽胞杆菌,因为其伴胞晶体蛋白并不是由杀虫晶体蛋白基因编码,而是编码细胞表面S 层蛋白基因的产物,且伴胞晶体蛋白没有检测... 详细信息

根据能形成伴胞晶体的特征,芽胞杆菌CTC菌株被鉴定为苏云金芽胞杆菌幕虫亚种。但该菌株明显不同于典型的苏云金芽胞杆菌,因为其伴胞晶体蛋白并不是由杀虫晶体蛋白基因编码,而是编码细胞表面S 层蛋白基因的产物,且伴胞晶体蛋白没有检测到对昆虫的毒性。本研究基于对CTC菌株及参照菌的16S-23SrRNA间隔区、编码S 层蛋白的基因进行扩增并测序,从系统发育水平检测到CTC菌株明显与苏云金芽胞杆菌幕虫亚种典型菌株T02存在差异,表明芽胞杆菌CTC菌株更接近蜡状芽胞杆菌。

关键词： CTC菌株 16S-23S rRNA间隔区伴胞晶体

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