检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2020年第12期40卷 2316-2319页

作者：彭清洁刘心晁金杨莉陈鸣薛凯丽张淏云朱杰朱小洁陈颖钰胡长敏陈曦郭爱珍华中农业大学动物医学学院湖北武汉430070 国家肉牛产业技术体系疾病控制功能研究室湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

犊牛腹泻是危害犊牛健康的重要疾病之一,可由多种病原引起。2019年3-4月份,内蒙古某规模化牛场28.5%(100/350)的犊牛发生严重腹泻。发病后该场兽医利用土霉素、氟尼辛葡甲胺注射液、樟脑磺酸钠、碳酸氢钠进行治疗,病情稳定一段时间后复... 详细信息

犊牛腹泻是危害犊牛健康的重要疾病之一,可由多种病原引起。2019年3-4月份,内蒙古某规模化牛场28.5%(100/350)的犊牛发生严重腹泻。发病后该场兽医利用土霉素、氟尼辛葡甲胺注射液、樟脑磺酸钠、碳酸氢钠进行治疗,病情稳定一段时间后复发。经研究室临床诊断和实验室检测,最终确诊该场犊牛腹泻的主要病原为牛轮状病毒,同时伴有多种其他病毒和大肠杆菌的混合感染。本研究就该病例进行了诊断报告,以及为临床犊牛腹泻的防控提供病例参考和技术资料。

关键词：犊牛腹泻轮状病毒牛冠状病毒牛病毒性腹泻病毒混合感染

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两株分离自疫苗免疫猪场的PRRSV毒株的遗传演化分析

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中国兽医科学 2019年第7期49卷 847-854页

作者：姚睿玉陈芳洲何启盖杨汉春中国农业大学动物医学院北京100083 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重影响全球养猪业的传染病,疫苗免疫是防控该病的重要措施,但猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)容易发生变异从而降低了免疫预防的效果。本研究从免疫了高致病性PRRS疫苗的发病猪场,分离出2株PRRSV毒株,并测... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重影响全球养猪业的传染病,疫苗免疫是防控该病的重要措施,但猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)容易发生变异从而降低了免疫预防的效果。本研究从免疫了高致病性PRRS疫苗的发病猪场,分离出2株PRRSV毒株,并测定了其全基因组序列,分别命名为:PRRSV/pig/CHN/JTS/201606和PRRSV/pig/CHN/TG/201711。为了探讨临床中分离得到的这2株PRRSV毒株与该场所使用疫苗之间的关系,我们进行了全基因序列的遗传变异和重组分析,结果显示,这2个毒株都以PRRSV-pig-CHN-TJ-200-610(EU860248.1)疫苗毒株为骨架,其中PRRSV/pig/CHN/JTS/201606毒株在ORF1a蛋白的1429-1522 aa区域存在独特的94 aa的缺失,PRRSV/pig/CHN/TG/201711毒株在1013-1132aa区域存在120 aa的缺失。综上,本研究结果表明,PRRSV疫苗株基因组中核苷酸的突变和缺失产生的新毒株是造成猪场疫苗免疫失败的原因。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组遗传变异

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牛支原体免疫学及免疫学诊断研究进展

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中国兽医学报 2019年第9期39卷 1868-1872页

作者：张文劲张文皓唐鑫李雨芮陈曦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

牛支原体是一种能够感染任何年龄牛的致病微生物,导致患牛严重的呼吸系统疾病、生殖系统疾病、角膜炎、乳腺炎及关节炎等。1961年,首次从美国乳腺炎患牛中分离到了牛支原体[1],全球范围内均报道了由牛支原体感染导致奶牛乳房炎所造成的... 详细信息

牛支原体是一种能够感染任何年龄牛的致病微生物,导致患牛严重的呼吸系统疾病、生殖系统疾病、角膜炎、乳腺炎及关节炎等。1961年,首次从美国乳腺炎患牛中分离到了牛支原体[1],全球范围内均报道了由牛支原体感染导致奶牛乳房炎所造成的经济损失案例。在我国,于2008年首次在重症肺炎的患牛中发现了牛支原体[2],并在2011年完成了测序[3],比较基因组学分析表明牛支原体不同分离株之间毒力存在着明显差异[4-7]。

关键词：牛支原体牛支原体病传染病免疫学诊断研究进展

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一例猪瘟混合感染副猪嗜血杆菌和猪蛔虫的案例诊治

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猪业科学 2020年第7期37卷 76-80页

作者：陈晓雨于学祥孙琪库旭钢范盛先何启盖华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心检测实验室湖北武汉430070

2019年11月底,湖北某商品猪场保育猪只出现厌食、消瘦、呼吸困难、咳嗽等症状,偶有病猪急性死亡,为查找病因,控制疫情,减少损失,依次通过流行病学调查、病理剖检和实验室检测,最终确定该发病猪场为感染猪瘟病毒,进而继发感染Hps-4混合感... 详细信息

2019年11月底,湖北某商品猪场保育猪只出现厌食、消瘦、呼吸困难、咳嗽等症状,偶有病猪急性死亡,为查找病因,控制疫情,减少损失,依次通过流行病学调查、病理剖检和实验室检测,最终确定该发病猪场为感染猪瘟病毒,进而继发感染Hps-4混合感染,并伴随蛔虫感染导致。通过筛选敏感药物治疗,优化生产管理,成功控制了此次疫情。该案例对此次疫情进行了分析总结,就加强生物安全建设,优化养殖管理,实现生产质量可控提供了参考建议。也为猪瘟混合感染呼吸系统细菌性疾病的防控提供参考。

关键词：保育猪混合感染诊断防控

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表达H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-optiHA的构建及生物学特性

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中国兽医学报 2019年第7期39卷 1303-1309,1335页

作者：范桂芳徐守兴杨斓宋文博华琳吴斌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 预防兽医学湖北省重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

为研发针对猪流感病毒流行毒株和猪伪狂犬病病毒变异毒株更为有效的基因工程疫苗,本研究以变异伪狂犬病病毒基因缺失毒株(rPRVΔTKΔgI/gE)为载体,采用同源重组的方法,成功构建了表达经密码子优化的H1N1亚型猪流感病毒HA基因的重组病毒r... 详细信息

为研发针对猪流感病毒流行毒株和猪伪狂犬病病毒变异毒株更为有效的基因工程疫苗,本研究以变异伪狂犬病病毒基因缺失毒株(rPRVΔTKΔgI/gE)为载体,采用同源重组的方法,成功构建了表达经密码子优化的H1N1亚型猪流感病毒HA基因的重组病毒rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA。对获得的重组病毒在多种细胞上的增殖特性、一步生长曲线、遗传稳定性以及对小鼠的安全性等生物学特性进行了研究。结果表明,构建的rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA重组病毒能够稳定表达HA蛋白,并且经过优化后,目的基因的表达量有明显提高。该重组病毒在ST、PK-15、Vero和BHK-21细胞上的增殖滴度均高于10-7.0/0.1mL,对PK-15细胞的敏感性最高。一步生长曲线结果表明,重组病毒的增殖特性未受影响。连续传代20代后,该重组病毒依然具有较好的遗传稳定性,并且对小鼠安全性良好。本研究为重组病毒rPRV-optiHA的进一步研究与应用奠定了基础。

关键词： PRV变异毒株猪流感病毒 HA基因生物学特性

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基于PCV3-Cap蛋白间接ELISA检测方法的建立及临床应用

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畜牧兽医学报 2019年第2期50卷 454-460页

作者：王俊伟陈芳洲库旭钢李畅何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

为了建立一种敏感和特异的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法,对PCV3-Cap蛋白抗原表位预测发现其抗原表位多聚集在C端(羧基端),而N端前33氨基酸为核定位序列。以截断N端前120个氨基酸后的PCV3ORF2序列为靶基因,设计引物。以PCV3阳性病料... 详细信息

为了建立一种敏感和特异的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法,对PCV3-Cap蛋白抗原表位预测发现其抗原表位多聚集在C端(羧基端),而N端前33氨基酸为核定位序列。以截断N端前120个氨基酸后的PCV3ORF2序列为靶基因,设计引物。以PCV3阳性病料为模板,PCR扩增截短的ORF2基因,并将其克隆至pET-30a载体构建重组质粒,并转染至大肠杆菌*** BL21感受态细胞,获得重组菌后选择最佳诱导表达条件,采用Ni-NTA亲和层析柱纯化表达产物。以纯化后的重组Cap蛋白作为包被抗原,建立PCV3间接ELISA (indirectELISA)诊断方法,并初步用于临床样品检测。结果:从阳性病料中扩增出大小为285bp的PCV3ORF2基因片段,重组质粒经双酶切和测序鉴定构建成功。采用1mmol·L-1 IPTG诱导,在37℃条件下培养6h重组菌,重组蛋白获最佳表达。Western blot结果表明,该重组蛋白与PCV3阳性血清具有较好的反应原性。ELISA的最佳包被抗原质量浓度为1μg·mL-1,待检血清最佳稀释度为1∶20,酶标抗体最佳工作浓度为1∶5 000。阳性判定值为S/P≥0.273。批内和批间系数均小于10%,表明该方法具有较好的重复性。PCV2阳性血清用本方法检测为阴性,表明该方法有较好的特异性。检测采集的439份临床猪血清,PCV3抗体阳性检出率为60.59%(266/439)。结果表明,本研究建立了一种快速、简便、敏感、特异的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法。

关键词：猪圆环病毒3型 ORF2基因 Cap蛋白原核表达 ELISA检测

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关于当前人间新型冠状病毒肺炎疫情防控对我国养牛企业生产影响及其应对措施建议

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中国奶牛 2020年第2期 5-9页

作者：郭爱珍彭清洁胡长敏陈颖钰曹永强李家奎华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 武汉科前生物股份有限公司武汉430070 随州市弘大畜牧有限责任公司随州441300

自2020年1月以来,新型冠状病毒(简称“新冠”)肺炎疫情在局地爆发,隔离、封锁和交通管制已成为阻断人间传染源传播的重要防控措施。为摸清现阶段这些疫情防控措施对养牛业的影响,我们对全国38个养殖单位进行调查。调查结果显示,交通管... 详细信息

自2020年1月以来,新型冠状病毒(简称“新冠”)肺炎疫情在局地爆发,隔离、封锁和交通管制已成为阻断人间传染源传播的重要防控措施。为摸清现阶段这些疫情防控措施对养牛业的影响,我们对全国38个养殖单位进行调查。调查结果显示,交通管制给绝大部分养牛场饲料、兽药和疫苗等生产物资的供应带来障碍,湖北省尤其严重;并且产品(奶、牛、肉)加工和上市受阻。同时,有可能因牛群防疫计划不能正常实施、牛病不能及时处置等原因导致动物疫病爆发、长期倒奶导致环境污染等次生灾害。据此,我们对相关部门和养殖企业提出了应对措施和政策建议,以期为当前新型冠状病毒肺炎疫情下保持养牛业稳定发展提供数据和政策支持。

关键词：新型冠状病毒养牛业调查控制疾病

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一例夏南牛大肠杆菌与链球菌混合感染的病例报告

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中国奶牛 2020年第5期 32-34页

作者：刘心彭清洁郭爱珍陈曦陈颖钰华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070

本文就一例夏南公牛混合感染大肠杆菌O158与链球菌导致死亡的病例进行了报告分析,提出了大肠杆菌O158与链球菌混合感染的诊断、治疗方法以及防范措施。为临床大肠杆菌O158与链球菌混合感染的识别及处置提供参考,为该病的防治提供支持。

关键词：牛大肠杆菌O158 链球菌病例报告

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猪伪狂犬病病毒TaqMan荧光定量PCR方法的建立

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中国兽医学报 2019年第9期39卷 1667-1673页

作者：刘青芸国师榜周宁华琳陈焕春吴斌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

针对猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gE基因保守区的核苷酸序列设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立并优化了一种可快速、定量检测PRV野毒的TaqMan实时荧光定量PCR方法。应用该方法检测猪常见病毒性病原(猪瘟病毒、猪细小病毒... 详细信息

针对猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gE基因保守区的核苷酸序列设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立并优化了一种可快速、定量检测PRV野毒的TaqMan实时荧光定量PCR方法。应用该方法检测猪常见病毒性病原(猪瘟病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型),PRV gE基因缺失株,以及健康猪的组织,结果均为阴性,证明该方法特异性良好。该检测方法能够检到的阳性质粒模板最低浓度为254 copies/μL,最低病毒浓度为4.22 TCID50/100μL,比常规PCR敏感性高10倍;重复性试验结果表明该方法重复性良好;用TaqMan实时荧光定量PCR方法和常规PCR方法同时检测37份临床样品,其中前者检出阳性病料22份,阳性检出率为59.64%,后者检出阳性病料15份,阳性检出率为40.54%,2种方法的符合率为81.08%。综上所述,该方法的建立为PRV的实验室诊断及流行病学调查提供了快速、准确的检测手段。

关键词：伪狂犬病病毒 gE基因 TaqMan实时荧光定量PCR

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浙江金华地区PCV2分子流行病学调查及遗传变异分析

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中国兽医学报 2019年第10期39卷 1890-1896页

作者：吴明臻江云波敖超杰于学祥库旭钢陈芳洲孙琪吴昊何启盖赵青华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 金华职业技术学院浙江金华321017

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)主要引起猪的多系统功能障碍性疾病,同时,还可侵害猪的免疫系统,造成猪免疫抑制,容易继发细菌及其他病毒感染,大大增加猪群的死亡率。为了解PCV2在浙江金华猪群中的分布与流行状况以及PCV... 详细信息

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)主要引起猪的多系统功能障碍性疾病,同时,还可侵害猪的免疫系统,造成猪免疫抑制,容易继发细菌及其他病毒感染,大大增加猪群的死亡率。为了解PCV2在浙江金华猪群中的分布与流行状况以及PCV2变异规律,对从浙江省金华猪场收集的3 433份血清进行PCR检测,结果显示,2012-2018年PCV2阳性率分别为10.16%,11.95%,8.50%,9.94%,6.19%,5.94%,8.28%,母猪阳性率最高为13.49%。本研究发现在2012年浙江金华地区PCV2优势毒株已经由PCV2b变为PCV2d,且全部为PCV2d-2。将得到的ORF2序列同已知的疫苗序列对比后,发现SH株与浙江金华目前PCV2主流毒株序列一致性最高,但抗原位点比较仍有5处差异,这可能会对疫苗效果产生影响,需要进一步验证。另外只有PCV2d在免疫显性诱饵表位上发生了突变,这可能是PCV2d成为主流的原因。

关键词：猪圆环病毒2型流行病学调查遗传变异分析

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