检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2021年第11期41卷 2091-2100页

作者：周艳荣郝婉君卫莹李洋柯文婷肖少波方六荣华中农业大学动物医学学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是严重危害世界养猪业的重要病原。PRRSV对原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)和传代猪肺泡巨噬细胞系(immortalized porcine alveolar macrophage,IPAM)均易感,但在感染早期,PRRSV在IPAM中的感染率显著高于PAM。为了揭示这2种细胞在PRRSV感染后的应答差异,本研究运用Illumina高通量测序技术对PRRSV感染的IPAM和PAM进行转录组测序,结果表明,PRRSV感染PAM和IPAM后能够诱导相似的免疫应答,但PAM的免疫应答反应更强;与代谢相关的基因在PRRSV感染的IPAM中差异更显著。进一步分析发现,PRRSV感染IPAM后下调细胞周期相关基因的表达水平,导致细胞周期停滞在G0/M期,从而促进PRRSV增殖;IPAM抗原递呈相关基因的缺失或低丰度表达可能是IPAM中免疫应答水平较低的原因;Nod-like receptor(NLR)、Toll-like receptor(TLR)、Target of rapamycin(TOR)、adenosine 5'monophosphate-activated protein kinase(AMPK)和phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B(PI3K-Akt)等信号通路在PRRSV感染的PAM和IPAM中激活状态不同,可能导致了PRRSV在这2种细胞中的增殖差异。本研究结果为深入了解PRRSV感染原代和传代PAM后的应答差异补充了有用的数据。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒比较转录组学 PAM IPAM

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环介导等温扩增技术改进及在动物病原检测中的应用

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中国兽医科学 2022年第5期52卷 633-639页

作者：陈秋慧李政志张海艳严蕊杨晶涵陈洁陈曦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 武汉市农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

环介导等温扩增(LAMP)技术是一种能在恒温设备下对靶基因进行扩增的技术,具有精确、快速、简单及低成本的优点,已广泛应用于食品安全、医疗卫生及农业现场检测等多个领域。本文主要从环介导等温技术的原理、反应体系改进、产物检测方法... 详细信息

环介导等温扩增(LAMP)技术是一种能在恒温设备下对靶基因进行扩增的技术,具有精确、快速、简单及低成本的优点,已广泛应用于食品安全、医疗卫生及农业现场检测等多个领域。本文主要从环介导等温技术的原理、反应体系改进、产物检测方法的改进、LAMP与其他技术的联用,以及目前LAMP在动物病原检测方面的应用进行了分析,并展望了LAMP技术的应用前景,以期为同仁提供参考。

关键词：环介导等温扩增环引物 Bst DNA聚合酶 LAMP体系动物病原检测

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免疫层析技术及应用的研究进展

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中国兽医学报 2021年第1期41卷 192-198页

作者：李雨芮刘晓雅张文劲陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

免疫层析技术是一类以纳米级标记物探针作为示踪和标记物的检测技术。此类技术除了具有操作简易、反应迅速和时耗较短等特点外,还兼具低成本和高特异性,尤其适用于临场检测。免疫层析技术的发展随着时代需求也在不断加速和更新,现以经... 详细信息

免疫层析技术是一类以纳米级标记物探针作为示踪和标记物的检测技术。此类技术除了具有操作简易、反应迅速和时耗较短等特点外,还兼具低成本和高特异性,尤其适用于临场检测。免疫层析技术的发展随着时代需求也在不断加速和更新,现以经典的胶体金免疫层析技术为基础,综述时间分辨与镧系元素荧光免疫层析、荧光微球免疫层析、量子点免疫层析、纳米模拟酶免疫层析及结合新技术的免疫层析的原理、研究进展和临床应用,并对免疫层析技术的未来发展做出展望。

关键词：胶体金免疫层析荧光标记侧向免疫层析

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细菌性脑膜炎概述

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中国感染控制杂志 2022年第1期21卷 97-103页

作者：彭忠李春辉陈焕春王湘如华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 中南大学湘雅医院医院感染控制中心湖南长沙410008

社区获得性细菌性脑膜炎依然是一种在世界范围内具有较高发病率和病死率的感染性疾病,也是一种需要被紧急救治的疾病。早期准确诊断、及时治疗以及提前预防是有效降低细菌性脑膜炎发病率的关键因素。本文对引起细菌性脑膜炎的主要病原... 详细信息

社区获得性细菌性脑膜炎依然是一种在世界范围内具有较高发病率和病死率的感染性疾病,也是一种需要被紧急救治的疾病。早期准确诊断、及时治疗以及提前预防是有效降低细菌性脑膜炎发病率的关键因素。本文对引起细菌性脑膜炎的主要病原菌及其流行病学、细菌性脑膜炎的发生机制以及该病的诊断、治疗和预防现状进行综述,为进一步认识细菌性脑膜炎的发生发展及防控治疗提供参考。

关键词：细菌性脑膜炎病原学流行病学发生机制诊断治疗疫苗

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2株Cluster 3鹅源坦布苏病毒的分离鉴定及其致病性研究

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中国畜牧兽医 2025年第4期52卷 1750-1762页

作者：陈作鑫陈宇欣潘彦林黄允真李林林董嘉文向勇徐志宏孙敏华张俊勤黄淑坚廖明广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东省动物疫病野外科学观测研究站广州510640 佛山大学生命科学与工程学院佛山528225 仲恺农业工程学院动物科技学院广州510225 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

【目的】明确Cluster 3鹅源坦布苏病毒(Tembusu virus, TMUV)基因组变异情况及其对鹅的致病性,为Cluster 3 TMUV的防控提供参考。【方法】利用BHK-21细胞对感染TMUV的鹅肝脏组织样品进行病毒分离,通过RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、... 详细信息

【目的】明确Cluster 3鹅源坦布苏病毒(Tembusu virus, TMUV)基因组变异情况及其对鹅的致病性,为Cluster 3 TMUV的防控提供参考。【方法】利用BHK-21细胞对感染TMUV的鹅肝脏组织样品进行病毒分离,通过RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、透射电镜观察进行鉴定,并测定分离株的生长曲线。对分离株完成全基因组扩增后,使用ModelFinder、MrBayes等软件对其进行遗传进化分析,并对分离株的E蛋白进行氨基酸突变位点分析;测定分离株病毒滴度后,攻毒30日龄鹅,观察鹅各组织器官临床剖检病变及组织病理变化,使用实时荧光定量PCR检测鹅各组织脏器中的病毒载量。【结果】RT-PCR成功鉴定得到2份TMUV核酸阳性病料,接种至BHK-21细胞后,60 h即可观察到明显病变。将3代病毒液IFA检测可观察到明显红色荧光,透射电镜可观察到直径约50 nm、有囊膜的病毒粒子。从发病鹅肝脏组织成功分离得到2株TMUV,分别命名为JM3与JM1205。病毒一步生长曲线结果显示,JM3和JM1205株分别在培养60和48 h时病毒滴度最高。全基因扩增结果显示,JM3和JM1205株基因组全长均为10 994 bp。遗传进化树显示,JM3和JM1205株均为Cluster 3 TMUV成员,与Cluster 3 TMUV鸡源分离株CTLN遗传距离最近。氨基酸突变位点分析结果显示,与GenBank中最早上传的TMUV毒株MM1775株相比,JM3和JM1205株的E蛋白存在多个氨基酸位点突变,其中V157A突变可能与TMUV毒力增强相关。攻毒后1 d后鹅开始出现排绿色稀粪症状,攻毒后7 d开始出现神经症状。JM3组在攻毒后14 d仍持续排毒,JM1205组排毒持续至攻毒后11 d。攻毒后6 d,鹅出现体重增长减缓、下降的情况,至10 d开始恢复缓慢上升。剖检发现攻毒组鹅出现不同程度的脾脏肿大、胰脏坏死、肝脏发白、大脑充血;此外JM3株攻毒组鹅出现卵巢出血、心包积液;JM1205株攻毒组鹅出现心脏出血。攻毒后各时间点脾脏病毒载量均最高,在攻毒后3 d达到峰值,随后逐渐下降。【结论】本研究自广东地区养鹅场分离得到2株Cluster 3 TMUV:JM3和JM1205,2株分离株均对鹅有致病性,可在鹅体内多个器官复制,引起鹅共济失调、体重下降等症状。

关键词：坦布苏病毒(TMUV) 分支3 分离鉴定鹅致病性

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一例猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒2型和猪链球菌血清2型混合感染的诊断及防控

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黑龙江畜牧兽医 2021年第6期 55-59,146页

作者：陈晓雨于学祥孙琪库旭钢范盛先何启盖华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心检测实验室武汉430070

2019年11月底湖北某商品猪场育肥猪只出现咳嗽、喘气、呼吸困难等症状,为了查找病因、控制疫情、减少损失,采用流行病学调查、临床检查、病理剖检和实验室检测方法进行综合诊断,并根据诊断结果及猪场具体问题提出了防控建议。结果表明:... 详细信息

2019年11月底湖北某商品猪场育肥猪只出现咳嗽、喘气、呼吸困难等症状,为了查找病因、控制疫情、减少损失,采用流行病学调查、临床检查、病理剖检和实验室检测方法进行综合诊断,并根据诊断结果及猪场具体问题提出了防控建议。结果表明:该猪场育肥猪感染了猪蓝耳病病毒NADC30-like毒株、猪圆环病毒2型,同时混合感染了血清2型猪链球菌,分离菌对头孢类药物(头孢曲松、头孢喹肟、头孢他啶)、大观霉素及氨苄西林高敏,通过实施综合防控措施后病情得到了有效控制。说明该猪场育肥猪只发病的主要原因为猪蓝耳病病毒NADC30-like毒株和猪圆环病毒2型及猪链球菌血清2型混合感染,应加强防控。

关键词：猪呼吸道疾病综合征猪蓝耳病猪圆环病毒2型育肥猪混合感染疫苗防控

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猪多杀性巴氏杆菌和链球菌混合感染的诊治及防控

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黑龙江畜牧兽医 2021年第9期 78-82,87,164页

作者：阮胜男于学祥孙琪库旭钢何启盖江云波华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心检测实验室武汉430070

为了确定湖北省某规模化猪场病死猪的发病原因,试验调查了猪场大体概况,解剖发病猪采集肺脏、气管等病料,并进行细菌分离、纯化,采用分子生物学方法进行核酸检测及血清型鉴定,利用药敏试验分析分离菌对常用抗菌药物的耐药性并提出防治... 详细信息

为了确定湖北省某规模化猪场病死猪的发病原因,试验调查了猪场大体概况,解剖发病猪采集肺脏、气管等病料,并进行细菌分离、纯化,采用分子生物学方法进行核酸检测及血清型鉴定,利用药敏试验分析分离菌对常用抗菌药物的耐药性并提出防治方案。结果表明:从样品中未检测到病毒核酸,仅检测到细菌核酸,经测定该猪场病死猪混合感染了猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)和猪链球菌(Streptococcus suis,SS),其中Pm的荚膜多糖基因型为D型,SS为血清9型;分离株Pm-D和SS-9对氧氟沙星、强力霉素、恩诺沙星、头孢拉定较敏感。根据药敏试验结果并结合该猪场情况提出综合防控意见,采用后发病猪病情得到有效控制。说明毒力较强的细菌原发致病可造成较大危害,药敏试验对于细菌性疾病的快速治疗和预防起到了至关重要的作用。

关键词：多杀性巴氏杆菌猪链球菌混合感染耐药诊断防控

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结核分枝杆菌感染中凋亡相关microRNA的研究进展

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中国兽医学报 2021年第7期41卷 1425-1430页

作者：苏莉竺婷婷师红铃郭爱珍陈颖钰华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学国家动物结核病专业实验室(武汉) 湖北武汉430070

结核病是由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC)引起的慢性消耗性人兽共患传染病。机体为抵御结核分枝杆菌感染,通过产生一系列免疫应答将其清除。细胞凋亡是其中重要的一个环节,通过主动程序性死亡,破坏结... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC)引起的慢性消耗性人兽共患传染病。机体为抵御结核分枝杆菌感染,通过产生一系列免疫应答将其清除。细胞凋亡是其中重要的一个环节,通过主动程序性死亡,破坏结核分枝杆菌在细胞内的存活。microRNA(miRNA)是一类非编码的小RNA,在转录后水平调节凋亡相关基因的表达最终影响病原与宿主互作的动态平衡。

关键词：结核分枝杆菌细胞凋亡 microRNA

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表达非洲猪瘟病毒p54蛋白重组伪狂犬病病毒的构建及鉴定

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中国畜牧兽医 2021年第11期48卷 4182-4191页

作者：何兴林邹忠龚文孝张宇飞李成飞徐婷陈焕春金梅林华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 武汉科前生物股份有限公司武汉430070

试验旨在构建能高效表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的重组伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)。通过无缝克隆构建含有PRV TK基因同源臂和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的PRV通用转移载体pCAGIG-TK_((l+r)),参... 详细信息

试验旨在构建能高效表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的重组伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)。通过无缝克隆构建含有PRV TK基因同源臂和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的PRV通用转移载体pCAGIG-TK_((l+r)),参考China/2018/AnhuiXCGQ株基因序列,优化合成E183L基因,并连入通用转移载体,构建重组中间转移质粒pCAGIG-TK_((l+r))-p54;重组质粒ScaⅠ酶切线性化后经脂质体介导转染BHK-21细胞,6 h后感染0.1个感染复数(MOI)PRV变异株,出现病变后通过空斑挑选和PCR鉴定纯化重组PRV,进一步通过Western blotting和间接免疫荧光试验(IFA)检测外源蛋白表达,并对重组病毒的遗传稳定性和增殖特性进行研究。结果显示,转染重组质粒pCAGIG-TK_((l+r))-p54的BHK-21细胞24 h后可观察到绿色荧光,说明重组质粒成功转入BHK-21细胞;纯化后的重组病毒表达绿色荧光蛋白且含有ASFV E183L基因,Western blotting和IFA结果证实重组PRV在BHK-21细胞中能表达p54外源蛋白,在26 ku处呈现特异性条带,且能与ASFV阳性血清发生特异性反应,免疫原性较好;重组病毒在BHK-21细胞上连续传代20次均能检测到ASFV E183L基因,遗传稳定性较好;一步生长曲线显示,重组病毒与亲本病毒的增殖特性差异不大,且二者的最高病毒滴度分别为10^(7.34)/0.1 mL和10^(7.61)/0.1 mL,外源片段的插入不影响重组病毒在细胞上的增殖能力。本研究成功获得了表达ASFV p54蛋白的重组病毒rPRV-p54,为进一步研究p54蛋白的免疫原性及开发非洲猪瘟多基因重组PRV载体疫苗奠定了基础。

关键词：非洲猪瘟病毒(ASFV) 伪狂犬病病毒(PRV) p54蛋白

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脑心肌炎病毒样颗粒疫苗的制备及免疫保护效果评价

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中国兽医学报 2025年第5期 994-1001页

作者：张艳芳朱琼付杰方耀辉靳佳音张丹娜邓菲曹胜波华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室中国科学院武汉病毒研究所病毒学国家重点实验室

脑心肌炎是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)引起的一种以脑炎、心肌炎为主要临床特征的人畜共患传染病。为探索有效的预防措施，本研究利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统，将EMCV的P12A和3C基因插入到pFastBacDual穿梭... 详细信息

脑心肌炎是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)引起的一种以脑炎、心肌炎为主要临床特征的人畜共患传染病。为探索有效的预防措施，本研究利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统，将EMCV的P12A和3C基因插入到pFastBacDual穿梭载体中，构建重组杆状病毒Ac-P12A-3C,并大量表达和纯化了EMCV病毒样颗粒(EMCV-VLPs),透射电镜观察显示，EMCV-VLPs能正确组装约30 nm的病毒样颗粒。小鼠免疫和攻毒试验表明，该病毒样颗粒免疫可有效抵抗EMCV的攻击，保护率高达100%。组织病理切片结果显示，与PBS攻毒组相比，VLP免疫组的组织病理损伤显著减轻，且组织中的病毒载量也明显降低。仔猪免疫试验结果显示，该病毒样颗粒可以诱导仔猪产生良好的体液免疫反应，二免后中和抗体滴度可达1∶320～1∶640,且免疫过程中未观察到明显的副反应。本研究初步验证了病毒样颗粒疫苗的免疫原性和安全性，为研制基于EMCV-VLPs的亚单位疫苗奠定了基础，并为脑心肌炎的防控提供了新的策略。

关键词：脑心肌炎病毒(EMCV) 病毒样颗粒(VLPs) 免疫原性体液免疫杆状病毒-昆虫细胞表达系统中和抗体亚单位疫苗

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