检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2025年第3期52卷 1281-1294页

作者：于凡淞赵梦莹熊丽雯郭爱珍陈颖钰胡长敏陈建国华中农业大学动物医学院农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

【背景】牛呼吸疾病综合征(bovine respiratory disease complex,BRDC)是由多病原和多因素互作引起的以支气管肺炎为主的牛呼吸系统疾病。引起BRDC的细菌性病原主要有溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)、多杀性巴氏杆菌(Pasteu... 详细信息

【背景】牛呼吸疾病综合征(bovine respiratory disease complex,BRDC)是由多病原和多因素互作引起的以支气管肺炎为主的牛呼吸系统疾病。引起BRDC的细菌性病原主要有溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)、睡觉嗜组织菌(Histophilus somni,Hs)等。【目的】了解我国引起BRDC相关的Mh、Pm分布和血清型种类。【方法】自2022年7月到2024年1月间,通过PCR技术对来自河南、湖南、湖北、浙江、安徽、山东、宁夏、甘肃、贵州、黑龙江、内蒙古等16个地区的54个牧场共698头牛的698份样本(鼻拭子359份、气管拭子321份,肺脏组织18份)进行溶血性曼氏杆菌及多杀性巴氏杆菌的检测,对阳性样品进行细菌分离和血清型鉴定。【结果】溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌检测为阳性的样本量分别为15/698和72/698,阳性检出率分别为2.15%(95%CI:1.2%-3.5%)及10.32%(95%CI:8.2%-12.8%),二者混合感染有5/698份,阳性率为0.72%(95%CI:0.2%-1.7%)。PCR检测后进一步对阳性样品进行细菌分离,共获得8株溶血性曼氏杆菌,其中A1型1株,A2型3株,A6型4株,多位点序列分型(multi locus sequence typing,MLST)结果为ST1型5株(5/8),均为血清型A1和A6型;ST2型3株(3/8),为血清型A2型;21株多杀性巴氏杆菌,其中A:L3型17株,A:L6型4株,MLST分型结果为ST1型和ST7型,ST1型17株(17/21),均为A:L3型;ST7型4株(4/21)为A:L6型。【结论】通过对部分地区具有呼吸道症状的病牛进行细菌分离鉴定,对牛呼吸疾病综合征主要致病的细菌性病原进行分型以及生物学特性分析,确定了病原流行的优势血清型、毒力基因和耐药基因等,为相关疫苗的制备提供了基础,为防控该病提供了理论依据。

关键词：牛呼吸疾病综合征溶血性曼氏杆菌多杀性巴氏杆菌细菌分离 PCR鉴定

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致犊牛腹泻常见病毒的检测及风险因素分析

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华中农业大学学报 2025年第1期44卷 174-182页

作者：何艳飞覃城皇徐肖文冼茵儿项志杰陈颖钰郭爱珍农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室/华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心/湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

为了解犊牛腹泻主要病毒的流行现状和优势毒株,2021年11月至2023年10月间,运用RT-PCR技术对来自湖北、湖南、河南、广西、贵州、甘肃、山东和内蒙古等地41个牧场的264头腹泻犊牛的264份样品(58份肛拭子、15份肠组织和191份粪便)进行了... 详细信息

为了解犊牛腹泻主要病毒的流行现状和优势毒株,2021年11月至2023年10月间,运用RT-PCR技术对来自湖北、湖南、河南、广西、贵州、甘肃、山东和内蒙古等地41个牧场的264头腹泻犊牛的264份样品(58份肛拭子、15份肠组织和191份粪便)进行了牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的检测,进一步对以上3种病毒在不同地区、年龄、季节和品种的分布进行了分析。结果显示,BRV、BCoV和BVDV的个体阳性检出率分别为14.02%(95%CI:8.44~16.68)、10.23%(95%CI:6.85~14.53)和12.12%(95%CI:10.06~18.80),78.05%(95%CI:62.39~89.44)的牧场为犊牛腹泻病毒阳性场,29.27%(95%CI:16.13~45.54)的牧场存在有混合感染,BRV与BCoV是最为常见的混合感染组合,检出率为3.42%(95%CI:1.32~5.88)。BRV在我国北方地区、冬季和≤5周龄的犊牛中检出率较高,BCoV在我国北方地区和夏冬季节检出率高,而BVDV在各地区、年龄、品种等方面,检出率无显著差异。结果表明3种病毒在我国11个省份地区的41个牧场的腹泻犊牛中普遍存在,BRV和BCoV是导致犊牛腹泻的主要病毒,并且其流行情况受到地区、季节和年龄的影响,这提示在防控措施中应该考虑这些因素。

关键词：犊牛腹泻 BRV BCoV BVDV 检测风险因素分析

来源：评论

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猫TNF-α蛋白的原核表达及阻断活性单克隆抗体的制备

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中国兽医学报 2024年第8期44卷 1667-1673页

作者：王阅李佳康李秋燕曹胜波叶静曹龙龙周登元华中农业大学动物科学技术学院与动物医学院湖北武汉430070 农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 武汉科前生物股份有限公司湖北武汉430040

为制备针对猫TNF-α的具有阻断活性的单克隆抗体,本研究基于可溶性猫TNF-α(sTNFα)基因成功构建、表达及纯化了重组质粒pET-28a-sTNFα,并进一步对重组蛋白诱导表达的条件进行摸索和优化,鉴定其生物活性;其次将猫TNF-α重组蛋白作为免... 详细信息

为制备针对猫TNF-α的具有阻断活性的单克隆抗体,本研究基于可溶性猫TNF-α(sTNFα)基因成功构建、表达及纯化了重组质粒pET-28a-sTNFα,并进一步对重组蛋白诱导表达的条件进行摸索和优化,鉴定其生物活性;其次将猫TNF-α重组蛋白作为免疫原进行小鼠免疫、细胞融合、阻断活性杂交瘤细胞的筛选和腹水制备,并对获得的单克隆抗体进行鉴定。结果显示,成功构建了pET-28a-sTNFα质粒并通过大肠杆菌系统表达出具有生物活性的猫TNF-α重组蛋白,相对分子质量为34 kDa,半数细胞活性抑制质量浓度为1.22μg/L;成功筛选出3株具有阻断活性的单克隆抗体(A6-B7-9、H5-E2-94和C8-A10-100),Western blot检测显示3株单抗均能与TNF-α特异性结合,效价可达1∶512000,3株单抗在质量浓度为100 mg/L时,对TNF-α的拮抗效果最强。本研究筛选了猫TNF-α的阻断活性抗体,以期为由猫TNF-α介导的相关疾病的防治提供新型的安全的有效的候选药物。

关键词：肿瘤坏死因子-α 单克隆抗体阻断活性重组蛋白表达猫

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牛支原体兔体攻毒模型的建立

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畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 1268-1277页

作者：武文英夏青胡萌婕赵逸轩王琛张宇豪郝成武贺笋郭爱珍陈建国陈颖钰华中农业大学动物科学技术学院动物医学院武汉430070 华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 华中农业大学农业微生物资源发掘与利用国家重点实验室武汉430070 天康生物制药有限公司乌鲁木齐830011

牛支原体是引起牛呼吸疾病综合征(bovine respiratory disease, BRD)的重要病原之一,对养牛业造成了不可估量的经济损失。牛支原体对大多数抗生素都具有耐药性,目前没有较好的药物可以进行治疗,因此疫苗免疫是最有效的防控方法。缺乏小... 详细信息

牛支原体是引起牛呼吸疾病综合征(bovine respiratory disease, BRD)的重要病原之一,对养牛业造成了不可估量的经济损失。牛支原体对大多数抗生素都具有耐药性,目前没有较好的药物可以进行治疗,因此疫苗免疫是最有效的防控方法。缺乏小动物评价模型是牛支原体疫苗研发的重要制约因素之一。建立小动物攻毒模型,为后续疫苗的研究与制备提供一定的研究基础,并降低后续试验的科研成本。为建立牛支原体小动物感染模型,本研究以2月龄日本大耳白兔作为研究对象,分为4组:1)单独攻击HB0801株牛支原体,2)注射地塞米松后攻击HB0801株牛支原体,3)攻击HB0801株牛支原体后注射KLH和巯基乙酸盐培养基;4)空白对照组。通过PCR检测牛支原体排菌情况,检测血清中抗体水平,第31天后取肺制作病理切片。研究结果显示,注射地塞米松后攻击HB0801株牛支原体组的牛支原体检出率和抗体均最高,牛支原体检出率为42.11%,91.67%的动物被检测为抗体阳性。显著高于其它各组。除空白对照组外,其它攻毒组均出现了肺泡壁增厚,巨噬细胞浸润以及肺部不同程度的纤维素性渗出,符合牛支原体导致的间质性肺炎的病变特征。本研究建立了牛支原体HB0801株攻毒日本大耳白兔的感染及评价模型,地塞米松造成免疫抑制后攻毒HB0801株具有最好的造模效果。

关键词：牛支原体动物模型兔地塞米松

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单个B细胞抗体制备技术研究进展

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中国兽医杂志 2023年第8期59卷 82-87页

作者：杨郑欣李琰张晓茜李芳韬赵启祖李文涛朱元源中国兽医药品监察所、国家/WOAH猪瘟参考实验室北京海淀100081 华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 湖北洪山实验室湖北武汉430070

单克隆抗体在疾病预防、诊断和治疗方面具有重要意义,尤其在免疫机制研究方面具有突出贡献。随着单克隆抗体制备技术的发展,单个B细胞抗体制备技术成为新一代快速制备单克隆抗体的方法。该技术利用每个B细胞仅可产生一种特异性抗体的特... 详细信息

单克隆抗体在疾病预防、诊断和治疗方面具有重要意义,尤其在免疫机制研究方面具有突出贡献。随着单克隆抗体制备技术的发展,单个B细胞抗体制备技术成为新一代快速制备单克隆抗体的方法。该技术利用每个B细胞仅可产生一种特异性抗体的特性,直接筛选出分泌特异性抗体的B细胞,对其表达抗体重链和轻链的基因进行克隆和体外表达,从而获得特异性单克隆抗体。相较传统抗体制备技术,该技术具有快速、高效、产量高等优点,且表达的抗体具有天然构象,不仅可用于病原微生物相关抗原的抗体开发、病毒跨种传播机制等研究,还在抗肿瘤治疗、抗自身免疫病等方面发挥重要作用。本文主要对单个B细胞抗体制备过程和应用现状进行综述,以期为单克隆抗体制备技术的发展和完善提供参考,促进其更好地应用于相关领域。

关键词：单个B细胞抗体克隆制备

来源：评论

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