检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 1998年第1期14卷 65-67页

作者：刘胜旺李一经曹殿军卢景良陈立君中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨市血液病研究所

采用间接ＥＬＩＳＡ方法和流式细胞分检仪（ＦＡＣｓ）检测了人工免疫新城疫油苗后，雏鸡血清中ＩｇＧ抗体含量及胸腺、脾脏和外周血中Ｔ淋巴细胞亚类的变化规律。实验表明，用新城疫油苗免疫后，雏鸡外周血中ＩｇＧ抗体含量明显升高。... 详细信息

采用间接ＥＬＩＳＡ方法和流式细胞分检仪（ＦＡＣｓ）检测了人工免疫新城疫油苗后，雏鸡血清中ＩｇＧ抗体含量及胸腺、脾脏和外周血中Ｔ淋巴细胞亚类的变化规律。实验表明，用新城疫油苗免疫后，雏鸡外周血中ＩｇＧ抗体含量明显升高。其脾脏和外周血中ＣＤ３＋Ｔ和ＣＤ４＋Ｔ细胞逐增，而ＣＤ８＋Ｔ细胞数量则减少。雏鸡胸腺中各亚类Ｔ细胞的变化不明显。提示在新城疫油苗免疫中，体液免疫和细胞免疫都起作用，而且二者具有一定的相关性。

关键词：新城疫油苗 IgG 抗体 T细胞亚类

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鸡新城疫病毒HN基因在重组鸡痘病毒中的表达及其保护性的研究

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中国免疫学杂志 1998年第1期14卷 61-64页

作者：曹殿军刘惠莉王莉林闵平张莹卢景良中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室东北农业大学

利用重组表达质粒ＨＮ－ＰＥＦＬ－２９与鸡痘病毒ＦＰ９共转染鸡胚成纤维细胞，经蚀斑筛选，结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，获得含有外源ＨＮ基因的纯化重组病毒。将筛选到的重组病毒经４次传代，细胞可见明显病变。免疫荧光检测结合Ｗｅ... 详细信息

利用重组表达质粒ＨＮ－ＰＥＦＬ－２９与鸡痘病毒ＦＰ９共转染鸡胚成纤维细胞，经蚀斑筛选，结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，获得含有外源ＨＮ基因的纯化重组病毒。将筛选到的重组病毒经４次传代，细胞可见明显病变。免疫荧光检测结合Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹表明该重组子表达产物主要位于细胞膜上，以糖基化（７４ｋＤ）和非糖基化（６８ｋＤ）２种形式存在，表达产物具有类似于天然ＮＤＶＨＮ蛋白的红细胞吸附活性及神经氨酸酶活性，且这２种活性均可被ＮＤＶＨＮ特异性单抗所抑制。对该表达产物的免疫活性研究表明：用重组病毒免疫４周龄ＳＰＦ鸡的ＥＬＩＳＡ抗体水平和血凝抑制效价均高于ＦＰＶ接种组，但低于ＬａＳｏｔａ弱毒活疫苗接种组。以ＮＤＶ强毒株Ｆ４８Ｅ９攻毒发现：接种重组病毒１０６ｐｆｕ／只时，保护力可达８０％，而１０４ｐｆｕ／只时，保护率仅为６０％，这表明该重组病毒对雏鸡具有一定的保护作用，且该保护作用与接种剂量有一定的相关性。

关键词：新城疫病毒 HN基因重组禽痘病毒

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ST_1肠毒素基因的合成、克隆及其融合蛋白的高效表达

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中国畜禽传染病 1998年第4期20卷 221-222页

作者：刘兴汉王莉林张绍杰初晓白中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

用ＤＮＡ合成仪合成了编码ＳＴ１肠毒素第５８到７２位氨基酸残基的ＤＮＡ片段，并将其与表达融合蛋白的载体ＰＧＥＭＥＸ－１重组，转化受体菌ＪＭ１０９（ＤＥ－３）。筛选出的重组克隆经过１ＰＴＧ４小时诱导，ＳＴ１融合蛋白的产量... 详细信息

用ＤＮＡ合成仪合成了编码ＳＴ１肠毒素第５８到７２位氨基酸残基的ＤＮＡ片段，并将其与表达融合蛋白的载体ＰＧＥＭＥＸ－１重组，转化受体菌ＪＭ１０９（ＤＥ－３）。筛选出的重组克隆经过１ＰＴＧ４小时诱导，ＳＴ１融合蛋白的产量超过超过细菌蛋白总量的４０％，最高达５９．９％。

关键词： ST1肠毒素基因重组融合蛋白高效表达

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重组牛白细胞介素-2生物活性单位的测定及其理化性质的分析

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中国畜禽传染病 1998年第2期20卷 79-82页

作者：金红李祥瑞于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

本研究对大肠杆菌表达的重组牛白细胞介素－２的生物活性单位进行了测定。以已标定的人白细胞介素－２为标准品，ＭＴＴ比色法测出重组牛白细胞介素－２的生物活性单位约为４×１０６ｕ／Ｌ菌液。同时，以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测出表... 详细信息

本研究对大肠杆菌表达的重组牛白细胞介素－２的生物活性单位进行了测定。以已标定的人白细胞介素－２为标准品，ＭＴＴ比色法测出重组牛白细胞介素－２的生物活性单位约为４×１０６ｕ／Ｌ菌液。同时，以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测出表达的重组牛白细胞介素－２分子量约为１５．５ＫＤ。理化性质分析结果表明，重组牛白细胞介素－２生物活性酸碱适应范围约为２～１０；对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的作用敏感，而对核酸酶的作用则不敏感；重组牛白细胞介素－２对温度变化敏感，表现为不耐高温。

关键词：重组牛白细胞介素-2 生物活性理化性质

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禽流感病毒分离株A/Chicken/Xinjiang/1/96(H14N5)NP基因序列分析

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中国畜禽传染病 1998年第6期20卷 336-339页

作者：邓国华于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

对ＲＴＰＣＲ扩增的禽流感病毒Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｘｉｎｊｉａｎｇ／１／９６（Ｈ１４Ｎ５）分离株核蛋白基因进行了序列分析。结果表明：所克隆的基因包含了全部核蛋白阅读框架，编码区为１４９４个核苷酸。比较性研究表明，该毒... 详细信息

对ＲＴＰＣＲ扩增的禽流感病毒Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｘｉｎｊｉａｎｇ／１／９６（Ｈ１４Ｎ５）分离株核蛋白基因进行了序列分析。结果表明：所克隆的基因包含了全部核蛋白阅读框架，编码区为１４９４个核苷酸。比较性研究表明，该毒株与Ａ／Ｍａｌａｒｄ／Ａｓｔｒａｋｈａｎ（Ｇｕｒｊｅｖ）／２６３／８２（Ｈ１４Ｎ５）有很高的同源性，而与人流感病毒株有较大，显示出明显的禽流感病毒特征。

关键词：禽流感病毒核蛋白基因序列分析

来源：评论

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猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)CH-la株N基因的分子克隆、序列测定及其比较分析

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中国畜禽传染病 1998年第4期20卷 217-220页

作者：仇华吉童光志郭宝清王柳张绍杰王玫于力刘宝全中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

根据已发表的ＰＲＲＳＶＩＡＦ－ｅｘｐ９１株的核酸序列，设计了一对特异性引物，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增了ＰＲＲＳＶＣＨ－ｌａ株的Ｎ基因，经补平和磷酸化后，克隆到ｐＵＣ１８ＳｍａＩ位点上。经电泳分析、酶切和ＰＣＲ鉴定证实后，进... 详细信息

根据已发表的ＰＲＲＳＶＩＡＦ－ｅｘｐ９１株的核酸序列，设计了一对特异性引物，用ＲＴ－ＰＣＲ扩增了ＰＲＲＳＶＣＨ－ｌａ株的Ｎ基因，经补平和磷酸化后，克隆到ｐＵＣ１８ＳｍａＩ位点上。经电泳分析、酶切和ＰＣＲ鉴定证实后，进行序列测定。序列分析表明ＣＨ－ｌａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株（美洲型）Ｎ基因核苷酸同一性为９３．２％，氨基酸同一性高达９６．７％，而与ＬＶ株（欧洲株）核苷酸同一性为６３％，氨基酸同一性仅为５９％。其推导氨基酸残基分子量为１３．３ｋＤａ。根据ＣＨ－ｌａ株Ｎ基因推导的氨基酸残基缺少欧洲型毒株ＬＶ特有的两个氨基酸片段，表明ＣＨ－１ａ株与ＩＡＦ－ｅｘｐ９１株同源性高于它与ＬＶ株的同源性，而且ＣＨ－１ａ株与鼠乳糖脱氢酶增高症病毒（ＬＤＶ）在进化关系上比ＬＶ株与ＬＤＶ更密切。ＣＨ－１ａ株Ｎ基因推导的氨基酸残基Ｎ－端１／２段约２６％是由Ａｒｇ、Ｌｙｓ和Ｈｉｓ这３种氨基酸组成的，其疏水性侧像图与ＬＶ株和ＶＲ－２３３２株（美洲型）几乎相同，这表明两种基因型的核衣壳蛋白（Ｎ蛋白）具有一定的保守性。由于Ｎ蛋白是ＰＲＲＳＶ所有结构蛋白中免疫原性比较强的病毒蛋白，是现行血清学试验的抗原基础，因此Ｎ基因的分子克隆为研制ＰＲＲ?

关键词：猪病生殖-呼吸道综合征 PRRSV N基因分子克隆

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H14亚型禽流感病毒核蛋白基因的扩增与克隆

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中国畜禽传染病 1998年第3期20卷 132-135页

作者：邓国华于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

本研究直接从浓缩的鸡胚尿囊液中提取Ｈ１４禽流感病毒的ＲＮＡ，并根据已发表的Ａ型流感病毒株的核苷酸序列，设计一对引物，采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术成功地扩增了ＡＩＶ的核蛋白（ＮＰ）基因，以ｐＵＣ１１９为... 详细信息

本研究直接从浓缩的鸡胚尿囊液中提取Ｈ１４禽流感病毒的ＲＮＡ，并根据已发表的Ａ型流感病毒株的核苷酸序列，设计一对引物，采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术成功地扩增了ＡＩＶ的核蛋白（ＮＰ）基因，以ｐＵＣ１１９为载体，以大肠杆菌ＪＭ８３为受体菌，并通过限制性分析证实。

关键词： RT-PCR 核蛋白基因禽流感病毒克隆

来源：评论

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中国鸡传染性支气管炎病毒的变异

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中国畜禽传染病 1998年第6期20卷 321-323页

作者：江国托刘思国康丽娟步志高王秀荣卢景良王永坤中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

同ＩＢＶ参考株比较，中国ＩＢＶ流行株血清型内和血清型间在基因型和组织嗜性上均已发生变异；研究首次表明ＩＢＶ血清型、基因型及组织嗜性间存在有规律的相关性；病毒免疫原Ｓ１基因的点突变在一定程度上可影响病毒的免疫原性。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒变异

来源：评论

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禽流感病毒A/***/Eng-Q/983/79/(H7N1)血凝素基因的全序列分析

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中国畜禽传染病 1998年第5期20卷 257-259页

作者：陈化兰于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

对反转录－聚合酶链反应扩增克隆的Ｈ７亚型禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ａｆｒｉ．Ｓｔａｒ／Ｅｎｇ－Ｑ／９８３／７９／（Ｈ７Ｎ１）的血凝素（ＨＡ）基因进行了核苷酸序列分析。结果，克隆的ＨＡ基因共１７０７ｂｐ，包括完整的阅读框... 详细信息

对反转录－聚合酶链反应扩增克隆的Ｈ７亚型禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ａｆｒｉ．Ｓｔａｒ／Ｅｎｇ－Ｑ／９８３／７９／（Ｈ７Ｎ１）的血凝素（ＨＡ）基因进行了核苷酸序列分析。结果，克隆的ＨＡ基因共１７０７ｂｐ，包括完整的阅读框架；同源性分析表明该毒株起源于欧亚群系；ＨＡ裂解位点只有一个碱性氨基酸，显示典型的低致病力特征。Ｈ７亚型ＡＩＶＨＡ基因的克隆成功为分子诊断和基因工程疫苗的研制奠定了基础。

关键词： H7亚型流感病毒血凝素基因序列分析家禽

来源：评论

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禽流感RT-PCR诊断法的建立

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中国畜禽传染病 1998年第2期20卷 105-107页

作者：崔尚金陈化兰唐秀英邓国华田国斌于康震中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物，并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ，建立了逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－... 详细信息

根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物，并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ，建立了逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＩＶＲＮＡ的方法。应用此法对鸡胚培养的ＡＩＶ尿囊液、ＳＰＦ感染鸡粪便进行了检测，并与琼脂扩散试验和电镜技术作了对比。特异性试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）、传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）、传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、减蛋综合征病毒（ＥＤＳ－７６Ｖ）等的感染鸡胚尿囊液作为对照。结果表明，ＡＩＶ尿囊液ＲＴ－ＰＣＲ全部阳性，ＳＰＦ感染鸡粪便８７份，ＲＴ－ＰＣＲ检出６９份阳性，样品处理浓缩后琼脂扩散检出１１份，电镜检测了２３份样品，仅检出２份阳性。非特异性对照样品经ＲＴ－ＰＣＲ检测全部阴性。将ＡＩＶ感染鸡胚尿囊液作１０倍系列连续稀释，可检出稀释度为１０－２的病毒尿囊液。ＲＴ－ＰＣＲ最早检出时间为感染后第３天，而琼扩和电镜均是７天。该法具有高度的特异性和灵敏性，且节约时间（只需８小时左右）。

关键词：禽 RT-PCR 诊断流行性感冒

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