检索结果-内蒙古大学图书馆

H5N1亚型禽流感病毒对鸡的致病性研究进展

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华南农业大学学报 2006年第3期27卷 1-5页

作者：廖明曹伟胜罗开健任涛张桂红徐成刚辛朝安农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院广东广州510642

对鸡感染H5N1亚型禽流感病毒(AIV)后的临床表现、大体病变、病理组织学、生理生化指标、细胞免疫功能、病毒的组织分布和细胞凋亡的研究进展进行概述,探讨了该病毒对鸡高致病性的分子基础.

关键词：禽流感病毒 H5N1亚型致病性

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我国部分地区近年来新城疫病毒流行株分子生物学特征的研究

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华南农业大学学报 2006年第3期27卷 89-92页

作者：任涛敖艳华曹伟胜张桂红罗开健徐成刚廖明农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院广东广州510642

参考GenBank中的新城疫病毒（NDV）的基因序列，在F基因的3’端相对保守区设计1对引物，利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近几年来分离并保存的24株新城疫病毒毒株的F基因进行了扩增，其扩增长度为450bp．测序结果表... 详细信息

参考GenBank中的新城疫病毒（NDV）的基因序列，在F基因的3’端相对保守区设计1对引物，利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近几年来分离并保存的24株新城疫病毒毒株的F基因进行了扩增，其扩增长度为450bp．测序结果表明：近十几年来，我国流行的新城疫毒株主要为基因Ⅶ型，其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区（112～117）强毒株的氨基酸序列特征，并从分子水平上进一步证明我国最近流行的NDV主要为基因Ⅶ型NDV强毒株．

关键词：新城疫病毒 F基因基因Ⅶ型强毒株

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鸡γ-干扰素基因的克隆与序列分析

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华南农业大学学报 2006年第4期27卷 86-89页

作者：敖艳华任涛孔令辰农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院广东广州510642

为了研究鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因的功能并进一步探究其在控制家禽传染病方面的应用,根据GenBank已发表的ChIFN-γcDNA基因序列自行设计引物,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从伴刀豆球蛋白A(Co-nA)刺激培养鸡脾淋巴细胞中提... 详细信息

为了研究鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)基因的功能并进一步探究其在控制家禽传染病方面的应用,根据GenBank已发表的ChIFN-γcDNA基因序列自行设计引物,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从伴刀豆球蛋白A(Co-nA)刺激培养鸡脾淋巴细胞中提取的总RNA中扩增得到ChIFN-γ,然后连接到pMD18-T载体上并转化到Top10感受态细胞中,获得阳性重组质粒并进行正确性序列测序.核甘酸序列结果表明,试验得到了长为513 bp的ChIFN-γ基因,与原鸡(Gu llus)IFN-γ的同源性可高达100%,其含有1个495 bp的开放性阅读框架,编码164个氨基酸,推测其成熟蛋白的相对分子质量约为18 000.

关键词：鸡γ-干扰素克隆序列分析

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H5亚型禽流感病毒分离株对金刚烷胺耐药性的鉴定

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华南农业大学学报 2006年第4期27卷 82-85页

作者：曹伟胜徐成刚任涛罗开健张桂红廖明农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院广东广州510642

对1株H5亚型禽流感病毒(AIV)分离株进行了金刚烷胺耐药性的鉴定.应用RT-PCR获得了AIV 178株的M基因,序列分析显示M2蛋白有S31N的点突变;动物试验发现该毒株对200 mg/L金刚烷胺饮水途径给药仍有抗性.结果表明AIV 178分离株具有对金刚烷... 详细信息

对1株H5亚型禽流感病毒(AIV)分离株进行了金刚烷胺耐药性的鉴定.应用RT-PCR获得了AIV 178株的M基因,序列分析显示M2蛋白有S31N的点突变;动物试验发现该毒株对200 mg/L金刚烷胺饮水途径给药仍有抗性.结果表明AIV 178分离株具有对金刚烷胺的耐药性,而且M2蛋白的第31位氨基酸突变可能与此有关.

关键词：禽流感病毒 H5N1亚型金刚烷胺耐药性

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动物疫病基因芯片诊断技术的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2006年第9期 18-19页

作者：杨林廖明华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室

基因芯片(Gene Chip)又称DNA芯片或DNA微阵列(DNA microarray),是将大量的DNA片段按预先设计的排列方式固化在载体表面,并以此作为探针,在一定的条件下,与样品中待检测的靶基因片段杂交,通过检测杂交信号,实现对靶基因的存在、含量及变... 详细信息

基因芯片(Gene Chip)又称DNA芯片或DNA微阵列(DNA microarray),是将大量的DNA片段按预先设计的排列方式固化在载体表面,并以此作为探针,在一定的条件下,与样品中待检测的靶基因片段杂交,通过检测杂交信号,实现对靶基因的存在、含量及变异等信息的快速检测.它是分子生物学和微细加工技术(micro fabrication technology)相结合的产物.自从1996年美国Affymetrix公司成功地制作出世界上首批用于药物筛选和实验室试验用的生物芯片,并制作出芯片系统,此后世界各国在芯片研究方面快速前进,不断有新的突破.它是生物芯片(Biochip)中发展最成熟应用最广泛的一类.我国这方面的研究虽然起步较晚,但其潜在的应用价值和巨大的市场已经引起我国政府和科学工作者的高度重视.

关键词：基因芯片诊断技术动物疫病 DNA微阵列微细加工技术杂交信号通过检测 DNA芯片

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猪流感疫苗研究进展

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动物医学进展 2009年第6期30卷 70-74页

作者：孔维立刘志刚亓文宝焦培荣张桂红华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室广东广州510642

猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性高度传染性疾病,可引起病猪高热、食欲不振、呼吸困难、孕猪流产、延迟出栏等,同时该病常继发其他细菌病感染,严重危害养猪业的发展。由于该病具有重要的公共卫生意义,因此研制安全有效的疫苗尤其重... 详细信息

猪流感是由猪流感病毒引起的一种急性高度传染性疾病,可引起病猪高热、食欲不振、呼吸困难、孕猪流产、延迟出栏等,同时该病常继发其他细菌病感染,严重危害养猪业的发展。由于该病具有重要的公共卫生意义,因此研制安全有效的疫苗尤其重要。目前对猪流感疫苗的研究热点主要集中在表位疫苗和利用反向遗传构建弱毒疫苗。论文针对国内外猪流感疫苗的研究情况做了系统描述,包括灭活疫苗、弱毒疫苗、DNA疫苗、载体疫苗等,旨在为新型疫苗的研制提供参考。

关键词：猪流感表位疫苗 DNA疫苗载体疫苗

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H1N2亚型猪流感病毒NS1的原核表达及抗原性分析

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黑龙江畜牧兽医 2011年第6期 22-25页

作者：孔维立齐海涛曹楠亓文宝焦培荣张桂红华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室广东广州510642

为了进一步监控猪流感病毒对猪群的感染情况,研究对H1N2亚型猪流感病毒NS1基因进行RT-PCR扩增,并将其克隆到表达载体pET-30a(+)上构建重组质粒pET-NS1获得纯化产物,结果表明:NS1蛋白能够高效表达,与预期分子质量大小相符;经Western-blo... 详细信息

为了进一步监控猪流感病毒对猪群的感染情况,研究对H1N2亚型猪流感病毒NS1基因进行RT-PCR扩增,并将其克隆到表达载体pET-30a(+)上构建重组质粒pET-NS1获得纯化产物,结果表明:NS1蛋白能够高效表达,与预期分子质量大小相符;经Western-blot分析,NS1蛋白能很好地与猪流感活病毒产生血清反应,而不能与灭活疫苗产生血清反应;被检血清稀释度为1∶640时,ELISA检测阳性血清的OD490值约为阴性血清的3倍,差异明显。说明NS1蛋白具有良好的血清学反应特异性。

关键词：猪流感病毒 NS1 原合表达抗原性分析

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新城疫病毒F蛋白免疫活性片段的原核表达

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中国兽医科学 2008年第5期38卷 374-379页

作者：敖艳华陈晓春廖明蒋文泓聂飞任涛华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室广东广州510642 广东省农业厅广东广州510500

利用已构建的新城疫病毒F基因重组质粒,通过氨基酸序列分析和InsightⅡ基因工作站的MODELER程序和同源模建技术,预测了试验株F蛋白的表面抗原分布位置。设计引物扩增了2段含有多个抗原位点的多肽片段,通过双酶切定向克隆到原核表达载体p... 详细信息

利用已构建的新城疫病毒F基因重组质粒,通过氨基酸序列分析和InsightⅡ基因工作站的MODELER程序和同源模建技术,预测了试验株F蛋白的表面抗原分布位置。设计引物扩增了2段含有多个抗原位点的多肽片段,通过双酶切定向克隆到原核表达载体pET32a,获得了重组质粒pET32a-F1和pET32a-F2以及2个片段串联起来后克隆的重组质粒pET32a-F3。重组质粒经诱导表达并取产物进行分析,结果显示,F1、F2、F3片段均获得了融合表达。Western-blotting证实,表达产物F1、F2和F3与NDV阳性血清均具有免疫反应性。用表达的重组蛋白加免疫佐剂经皮下接种免疫鸡,免疫2次后产生较高的抗体水平,用100 LD50的超强毒株GD-05-2攻击,重组蛋白免疫组鸡可达到约70%的保护率,并可显著抑制排毒。

关键词：新城疫病毒 F蛋白抗原表位原核表达

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H5和H7亚型禽流感多重RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立

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养禽与禽病防治 2007年第5期 6-8页

作者：敖艳华邱筱妍任涛辛朝安华南农业大学兽医学院禽病学教研室农业部养禽与禽病防治重点开放实验室广东广州510640

目前，国家标准及农业行业标准规定禽流感诊断及检验技术包括：病毒分离、免疫荧光、血凝抑制、琼脂扩散和RT—PCR等。其中RT—PCR技术具有敏感、特异、快速并且散毒的危险较小的优点，成为当前诊断禽流感的主要方法之一。本文建立了H5... 详细信息

目前，国家标准及农业行业标准规定禽流感诊断及检验技术包括：病毒分离、免疫荧光、血凝抑制、琼脂扩散和RT—PCR等。其中RT—PCR技术具有敏感、特异、快速并且散毒的危险较小的优点，成为当前诊断禽流感的主要方法之一。本文建立了H5和H7亚型AIV的多重RT—PCR检测方法，并通过条件优化，提高诊断的敏感性和特异性，为H5和H7亚型AIV多重RT—PCR快速诊断试剂盒的研制打下坚实基础，希望能在禽流感的快速鉴别诊断和预警预报工作中发挥重要作用。

关键词： PCR技术诊断方法 H7亚型禽流感 RT 快速鉴别多重 PCR检测方法

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PCR技术在鸟类性别鉴定上的应用

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中国兽医科学 2006年第6期36卷 485-488页

作者：陈武谢淑敏谢高基黄勉陈绚姣廖明广州动物园广东广州510070 华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室广东广州510642

根据鸟类性染色体连锁基因EE0．6在Z、W染色体上长度的不同,通过选择6对不同的引物,同时设置4种不同的反应条件,分别采用PCR技术对丹顶鹤、黑鹳、琉璃金刚鹦鹉、绯红金刚鹦鹉、鞭苔(?)鵼、戴冕鹤、火烈鸟的Z、W染色体上的EE0．6基因进... 详细信息

根据鸟类性染色体连锁基因EE0．6在Z、W染色体上长度的不同,通过选择6对不同的引物,同时设置4种不同的反应条件,分别采用PCR技术对丹顶鹤、黑鹳、琉璃金刚鹦鹉、绯红金刚鹦鹉、鞭苔(?)鵼、戴冕鹤、火烈鸟的Z、W染色体上的EE0．6基因进行了特异性扩增。结果显示,某些引物组合能从雄鸟样品中扩增出1条片段(EE0．6Z,190 bp),而雌性鸟样品则能扩增出2务片段(EE0．6W和EE0．6Z,分别为250 bp和190 bp),但4组引物对6种鸟类EE0．6基N的扩增效果不同。证实,利用PCR技术能对鸟类进行性别鉴定。

关键词： PCR技术鸟类性别鉴定 EE0.6基因

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