检索结果-内蒙古大学图书馆

华南农业大学学报 2008年第4期29卷 75-78页

作者：孔令辰侯佳蕾蒋文泓聂飞敖艳华廖明任涛农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院广东广州510642 广东省农业厅广东广州510500

参考新城疫病毒融合基因(fusion gene,F gene)序列,设计了2对能够特异性地识别F基因上的6个区域的引物,并以此建立了一种简单、快速、有效的环介导逆转录等温扩增(RT-LAMP)方法检测NDV.试验结果表明:该方法用时短(2 h内完成)、特异性好... 详细信息

参考新城疫病毒融合基因(fusion gene,F gene)序列,设计了2对能够特异性地识别F基因上的6个区域的引物,并以此建立了一种简单、快速、有效的环介导逆转录等温扩增(RT-LAMP)方法检测NDV.试验结果表明:该方法用时短(2 h内完成)、特异性好而且灵敏度高,最小检测限可达100 pg;对人工发病样品进行鸡胚分离和RT-LAMP检测,二者的阳性符合率高达93.5%;同时采用镁离子沉淀对检测结果进行可视化处理,方便利用肉眼直接观察.

关键词：环介导逆转录等温扩增技术新城疫病毒快速检测

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一株肉鸽新城疫强毒的分离鉴定

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中国畜牧兽医 2010年第4期37卷 201-204页

作者：杨丽云阮二垒陈芳艳王林川华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室广州510642 华南农业大学动物科学学院广州510642

用SPF鸡胚从病死鸽的内脏组织中分离到一株新城疫病毒(命名为GD-09株),该病毒能使鸡红细胞发生凝集,且这种凝集能被鸡新城疫标准阳性血清所抑制。经测定,其鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种的致病指数(ICPI)分别为57.6 h、1.74... 详细信息

用SPF鸡胚从病死鸽的内脏组织中分离到一株新城疫病毒(命名为GD-09株),该病毒能使鸡红细胞发生凝集,且这种凝集能被鸡新城疫标准阳性血清所抑制。经测定,其鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种的致病指数(ICPI)分别为57.6 h、1.74,表明该新城疫病毒为强毒。通过分析其融合蛋白(F)发现,F蛋白多肽裂解位点为112RRQRRF117,符合NDV强毒株裂解位点氨基酸序列。F基因分型及氨基酸同源性比较发现,GD-09株属于基因Ⅵ型,与La sota、F48E9、B1、V4等传统毒株同源性较低,与鸽源NDV同源性较高。

关键词：鸽鸽Ⅰ型副黏病毒 F基因

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我国鸭肝炎病毒分离株基因组的测定与分析

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华南农业大学学报 2009年第1期30卷 74-80页

作者：马秀丽宋敏训于可响廖明辛朝安农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院广东广州510642 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023

对我国鸭病毒性肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)分离株YZ和CL的全基因组进行了序列测定分析.结果表明,2分离株的基因组全长分别为7 713 nt和7 709 nt,包括626 nt的5′UTR、6 747 nt的ORF、314 nt的3′UTR以及23 nt和19 nt的poly(A)... 详细信息

对我国鸭病毒性肝炎病毒(Duck hepatitis virus,DHV)分离株YZ和CL的全基因组进行了序列测定分析.结果表明,2分离株的基因组全长分别为7 713 nt和7 709 nt,包括626 nt的5′UTR、6 747 nt的ORF、314 nt的3′UTR以及23 nt和19 nt的poly(A)尾.结构蛋白VP0含有保守的四肽CPRP,VP3的N端存在一段约20个氨基酸的碱性氨基酸富集区域;VP1缺少RGD(Arg-Gly-Asp)基序.DHV2分离株存在3个不相关的2A蛋白基序,其中2A1蛋白类似口蹄疫病毒属的2A蛋白,2A2蛋白与AIG1蛋白(拟南芥)和GTPase更为相似,2A3蛋白则与副肠孤病毒属的2A2蛋白类型相似;2C蛋白含有保守基序EPxxxxxxGxxGxGK(S/T)、QxxxxxDDxxQ和KGxxxxSxxxxxS/T.3C蛋白含有催化三联体H38-D69-C144;3D蛋白包含KDELR、DxxxxD、GxxSGxxxTxxxNx、YGDD和FLKR等RNA聚合酶的特征基序.基于多聚蛋白、VP1、2C和3C蛋白的进化关系分析结果均表明,DHV分离株与副肠孤病毒属的遗传关系最近,但占据一个清晰的独立遗传谱系,应将DHV单独划属.

关键词：鸭病毒性肝炎病毒(DHV) 分离株基因组测序基因组分析

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猪瘟病毒检测用寡核苷酸芯片探针的筛选

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中国兽医杂志 2007年第1期43卷 15-17页

作者：杨林李守军张桂红罗玉钧廖明王升启华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京海淀100850

猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一类动物传染病,给养猪业造成的危害非常严重。目前猪瘟的诊断依靠一些常规诊断技术,存在所需时间长、工作量大、难以统一技术操作规范等缺点,不能满足快速检疫、诊断的需要。随着分子生物学研究的进... 详细信息

猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一类动物传染病,给养猪业造成的危害非常严重。目前猪瘟的诊断依靠一些常规诊断技术,存在所需时间长、工作量大、难以统一技术操作规范等缺点,不能满足快速检疫、诊断的需要。随着分子生物学研究的进一步深入,基因芯片技术以其高通量、微量化、污染少、可多基因多标本平行检测等特点在动物疫病诊断方面显示出强大的优势。在基因芯片检测中寡核苷酸芯片在杂交效率、质量控制和适应性等方面要明显好于eDNA芯片。本研究通过开展特异引物和探针的设计、靶基因扩增和克隆、芯片杂交与反应条件优化等试验,旨在筛选出敏感性好、特异性高的探针用于猪瘟病毒检测基因芯片的制备,同时检测所设计的寡核苷酸探针对模板的灵敏度和特异性,为建立猪瘟病毒基因芯片诊断技术平台奠定基础。[第一段]

关键词：寡核苷酸探针寡核苷酸芯片猪瘟病毒病毒检测筛选基因芯片技术诊断技术动物传染病

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应用寡核苷酸芯片检测猪口蹄疫病毒的初步研究

应用寡核苷酸芯片检测猪口蹄疫病毒的初步研究

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中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会

作者：杨林张桂红钟植文廖明王升启华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室军事医学科学院放射医学研究所

本研究根据口蹄疫病毒基因组序列保守区,设计合成2对引物,通过RT-PCR方法筛选出特异引物,用Cy3标记下游引物5’端:针对这个基因片段,设计合成4条寡核苷酸探针,开展靶基因扩增和克隆、阳性质粒构建、芯片杂交与反应条件优化、以及芯片灵... 详细信息

本研究根据口蹄疫病毒基因组序列保守区,设计合成2对引物,通过RT-PCR方法筛选出特异引物,用Cy3标记下游引物5’端:针对这个基因片段,设计合成4条寡核苷酸探针,开展靶基因扩增和克隆、阳性质粒构建、芯片杂交与反应条件优化、以及芯片灵敏度和特异性分析等实验研究,建立FMDV的基因芯片检测方法,同时应用该芯片检测了现地标本39份,证明该芯片的灵敏度高、特异好,可以准确地检测出猪口蹄疫病毒,为建立猪病基因芯片诊断技术平台奠定基础。

关键词：猪口蹄疫病毒基因芯片寡核苷酸芯片初步研究

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副鸡嗜血杆菌PCR检测方法的建立

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广东畜牧兽医科技 2009年第1期34卷 28-30页

作者：张欢侯佳蕾张彦红罗晶璐任涛华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室广东广州510642

参照GenBank中已发表的副鸡嗜血杆菌血凝素(HA)基因设计合成了一对引物,预计扩增片段大小约为412bp。利用这对引物,通过对PCR反应体系和反应条件的优化,建立了针对副鸡嗜血杆菌的PCR检测方法。结果表明,该方法敏感性较高,最低可检出1.7&... 详细信息

参照GenBank中已发表的副鸡嗜血杆菌血凝素(HA)基因设计合成了一对引物,预计扩增片段大小约为412bp。利用这对引物,通过对PCR反应体系和反应条件的优化,建立了针对副鸡嗜血杆菌的PCR检测方法。结果表明,该方法敏感性较高,最低可检出1.7×104CFU/mL的副鸡嗜血杆菌,对副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌在相同反应条件下未扩增出任何片段,说明该方法具有较好的特异性。

关键词：副鸡嗜血杆菌 PCR检测

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当前禽病出现的新特点及防治

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家禽科学 2007年第2期 3-4页

作者：张桂红华南农业大学兽医学院农业部养禽与禽病防治重点开放实验室广东广州510642

我国规模化养禽是从80年代开始起步，到目前为止已成为世界养禽第一大生产国和消费国。尽管在集约化饲养过程中，新产品、新技术及新的防控措施有效地控制和消灭了部分禽病的发生。但与世界第一养禽大国不符的是我国禽肉和禽蛋的出口量... 详细信息

我国规模化养禽是从80年代开始起步，到目前为止已成为世界养禽第一大生产国和消费国。尽管在集约化饲养过程中，新产品、新技术及新的防控措施有效地控制和消灭了部分禽病的发生。但与世界第一养禽大国不符的是我国禽肉和禽蛋的出口量还不到生产总量的1％，而美国、巴西、台湾等出口量已达20％-30％，即便是泰国，在2003年发生高致病性禽流感期间，其禽肉出口量还占总生产量的35％。分析其原因，重大疫病依然是困扰我国养禽业生产、出口的关键问题。目前，危害我国养禽业的禽病有将近80种，而传染病即占60多种。危害巨大，是目前致死禽类、引起生产性能下降，增加高死淘率的主要原因。本文仅就目前禽病流行的新特点及防治措施做一简要的综述。

关键词：禽病防治高致病性禽流感养禽业出口量生产国饲养过程防控措施

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IBV H52疫苗株主要结构蛋白基因信息给我们的启示

IBV H52疫苗株主要结构蛋白基因信息给我们的启示

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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会

作者：曹伟胜廖明任涛罗开健张桂红袁少华辛朝安农业部养禽与禽病防治重点开放实验室华南农业大学兽医学院(广州)

本研究利用RT-PCR分别获取了一株国内和一株国外的商品化IBV H52活疫苗株的主要结构蛋白基因及基因组3'端非编码区的基因片段,并分别克隆测序及序列信息分析.结果表明:办内的这株H52疫苗的S1基因、M基因、N基因和3'UTR的基因信... 详细信息

本研究利用RT-PCR分别获取了一株国内和一株国外的商品化IBV H52活疫苗株的主要结构蛋白基因及基因组3'端非编码区的基因片段,并分别克隆测序及序列信息分析.结果表明:办内的这株H52疫苗的S1基因、M基因、N基因和3'UTR的基因信息均明显不同于国外的H52疫苗株和已报道的H52株的基因信息,在亲缘关系上国内的H52株更靠近于M41株,在系统发生树上两者也处于同一分支.这个结果提示有必要建立IBV疫苗株的基因信息档案.

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 M基因 N基因 3'UTR 疫苗基因信息差异

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H5和H7亚型禽流感多重RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立

H5和H7亚型禽流感多重RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：孔令辰任涛敖艳华华南农业大学兽医学院禽病学教研室农业部养禽与禽病防治重点开放实验室

本研究参考GenBank公开的基因组序列,设计针对AIV的NP基因、片段大小为250bp的AIV通用引物和分别针对AIV H5和H7亚型的HA基因分别设计了特异性引物,扩增片段大小为541bp和309bp,通过对引物浓度、退火温度和Ex Taq酶用量等反应条件进行... 详细信息

本研究参考GenBank公开的基因组序列,设计针对AIV的NP基因、片段大小为250bp的AIV通用引物和分别针对AIV H5和H7亚型的HA基因分别设计了特异性引物,扩增片段大小为541bp和309bp,通过对引物浓度、退火温度和Ex Taq酶用量等反应条件进行优化后建立了H5和H7亚型AIV的多重RT-PCR检测方法。特异性和敏感性试验表明该方法具有较高的特异性、敏感性和重复性,应用该多重RT—PCR检测方法对人工发病临床样品进行RT—PCR检测,并与病毒鸡胚分离法作比较,结果表明,AIV—H5亚型棉拭子多重RT—PCR检测结果与鸡胚分离结果符合率约为86.9%;AIV—H7亚型的符合率约为85.7%。

关键词：高致病性禽流感 H5亚型 H7亚型多重RT-PCR方法诊断

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几株野生鸟类来源的Ⅰ型禽副粘病毒分子生物学特征的研究

几株野生鸟类来源的Ⅰ型禽副粘病毒分子生物学特征的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：敖艳华任涛孔令辰华南农业大学兽医学院禽病学教研室农业部养禽与禽病防治重点开放实验室

参考GenBank中的Ⅰ型禽副粘病毒(Avian paramyxovirus,APMV-1)序列,在F基因的3'端相对保守区设计1对引物,利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近两年来从广州和深圳两个地区分离的4种鸟类来源共10株Ⅰ型禽副粘病毒毒... 详细信息

参考GenBank中的Ⅰ型禽副粘病毒(Avian paramyxovirus,APMV-1)序列,在F基因的3'端相对保守区设计1对引物,利用RT-PCR方法对华南农业大学兽医学院禽病学教研室近两年来从广州和深圳两个地区分离的4种鸟类来源共10株Ⅰ型禽副粘病毒毒株的F基因进行了扩增,其扩增长度约为450bp。测序结果表明:广州株与NDV的基因Ⅵ型有高度的同源性,1个深圳株与Ⅶ型有较高的同源性,其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区(112-117)强毒株的氨基酸序列特征;其它4个深圳株均与基因Ⅰ型有很高的同源性,其氨基酸序列均符合F蛋白裂解位点区(112-117)弱毒株的氨基酸序列特征。

关键词： Ⅰ型禽副粘病毒 F基因序列分析基因型

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