检索结果-内蒙古大学图书馆

环境科学 2011年第1期32卷 240-246页

作者：段晓芹郑金伟张隽杭宝建何健李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从石油污染土壤中分离到1株能以3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)为唯一碳源生长的细菌,命名为BA3.根据其生理生化特征和16S rDNA序列相似性分析,将该菌鉴定为鞘脂菌属(Sphingobium sp.).该菌株在60 h内对100 mg.L-1的3-苯氧基苯甲酸的降解率达到9... 详细信息

从石油污染土壤中分离到1株能以3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)为唯一碳源生长的细菌,命名为BA3.根据其生理生化特征和16S rDNA序列相似性分析,将该菌鉴定为鞘脂菌属(Sphingobium sp.).该菌株在60 h内对100 mg.L-1的3-苯氧基苯甲酸的降解率达到99%.降解3-苯氧基苯甲酸的最适温度为30℃,pH值为7.0,降解速率与初始接种量呈正相关.拟除虫菊酯类杀虫剂水解酶基因pytH为本实验室克隆到的一个新的菊酯水解酶基因,通过PCR从菊酯降解菌株JZ-2总DNA扩增了pytH,将pytH定向克隆到pBBRMCS-5载体上,构建重组质粒pPYTH,在辅助质粒pRK600的帮助下,通过三亲接合将pPYTH转移到3-PBA降解菌株Sphingobium ***3中,获得工程菌Sphingobium ***3-pytH;甲氰菊酯的降解实验表明,菌株JZ-2在48 h内对50 mg.L-1的甲氰菊酯降解率仅为60%左右,工程菌BA3-pytH相同条件下对50 mg.L-1的甲氰菊酯降解率达到95%以上,同时对甲氰菊酯的降解中间产物3-PBA也能较快降解,不会对菊酯的降解产生反馈抑制.工程菌BA3-pytH因其对甲氰菊酯和其降解中间产物3-PBA的快速降解能力,比原始菌株JZ-2在菊酯污染土壤生物修复应用中更具有优势.

关键词： 3-苯氧基苯甲酸生物降解鞘脂菌菊酯水解酶基因基因工程菌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多功能农药降解基因工程菌株m-CDS-1环境释放安全评价

引用

微生物学报 2008年第11期48卷 1479-1485页

作者：蒋建东李荣郭新强陈凯李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

【目的】为了评价多功能农药降解基因工程菌株m-CDS-1的环境释放中间试验水平的安全性。【方法】通过农药检测、平板计数、Most probable number-PCR(MPN-PCR)和Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)等方法在江苏大丰进行了... 详细信息

【目的】为了评价多功能农药降解基因工程菌株m-CDS-1的环境释放中间试验水平的安全性。【方法】通过农药检测、平板计数、Most probable number-PCR(MPN-PCR)和Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)等方法在江苏大丰进行了工程菌株m-CDS-1田间降解农药效果、定殖动态和对土壤微生物群落结构影响的研究。【结果】投加1.01×107CFU/g干土的工程菌株m-CDS-1在30d时均能完全降解10.71mg/kg的甲基对硫磷和1.29mg/kg的呋喃丹。平板计数表明工程菌株m-CDS-1在土壤中快速下降;MPN-PCR检测结果显示,在4d,15d和30d时,0～10cm混合土壤中该工程菌株的数目分别为2.15±0.98×106CFU/g干土,3.70±4.66×104CFU/g干土和检测不出。工程菌株m-CDS-1的投加不会对土壤可培养三大微生物菌群数量产生显著影响;基于细菌16S rDNA V3区的DGGE分析结果表明,施加农药对细菌菌落结构有显著影响,4d,11d,30d时农药施用区与空白对照区的图谱相似性分别为17.16%,49.81%和75.01%,但到60d时的相似性为98.62%。工程菌株m-CDS-1释放在前期对细菌群落结构有一定影响,4d,11d和30d工程菌株释放区相对于空白的相似性分别为49.57%,38.30%和83.30%。在60d时,空白、施药和施菌小区的图谱相似性都在90%以上。【结论】工程菌株m-CDS-1不仅可同时高效降解甲基对硫磷和呋喃丹,仍保持了实验室内的原有特性,而且不会成为优势菌群长期在土壤环境中存在,也不会对土壤微生物群落结构造成长期影响。

关键词：基因工程菌株m—CDS-1 环境释放安全评价农药降解 Most probable number-PCR(MPN-PCR) Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

定向进化提高磺酰脲类除草剂脱毒酯酶SulE的活性

引用

应用与环境生物学报 2020年第5期26卷 1075-1080页

作者：刘斌杨洲刘军委陈乐彭乾何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

磺酰脲除草剂脱毒酯酶SulE对噻磺隆活性极高,但对其他磺酰脲类除草剂活性很低,这限制了在磺酰脲除草剂残留污染生物修复和抗磺酰脲除草剂作物培育中的应用价值.利用Escherichiacoli DH10B (ilvG+)对甲磺隆的敏感性为筛选标记,从sulE基... 详细信息

磺酰脲除草剂脱毒酯酶SulE对噻磺隆活性极高,但对其他磺酰脲类除草剂活性很低,这限制了在磺酰脲除草剂残留污染生物修复和抗磺酰脲除草剂作物培育中的应用价值.利用Escherichiacoli DH10B (ilvG+)对甲磺隆的敏感性为筛选标记,从sulE基因随机突变库中筛选获得了一个酶活性显著提高的突变体mSulE.与野生型相比,突变体mSulE对甲磺隆、甲嘧磺隆、苯磺隆和胺苯磺隆的比酶活分别提高了8.29、8.61、1.50和4.04倍.测序结果表明,突变体mSulE氨基酸序列发生了2处替换,分别为Y81T和S178N.三维结构模拟表明,2个突变位点都在酶活性中心附近,突变体mSulE酶活提高的原因可能是Y81突变为T增加了催化口袋的面积,以及S178突变为N增加了氨基酸残基之间的氢键作用力.综上所述,突变体mSulE对大部分磺酰脲除草剂的活性要高于野生型,在磺酰脲除草剂残留污染生物修复和抗除草剂转基因工程中具有很好的应用前景.(图6表1参30)

关键词：磺酰脲类除草剂酯酶SulE 定向进化酶活性同源建模

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

恶臭假单胞菌DLL-E4对硝基苯酚降解途径关键基因pnpC的突变分析

引用

生态与农村环境学报 2008年第4期24卷 77-82页

作者：沈文静张静曹慧崔中利南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

通过同源重组成功地敲除了恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)DLL-E4菌株的偏三苯酚1,2-双加氧酶基因(pnpC).pnpC插入失活菌株DLL-△pnpCl失去了降解对硝基苯酚(PNP)和对苯二酚(HQ)的能力,而pnpC敲除菌株DLL-△pnpC恢复了利用PNP和HQ的能... 详细信息

通过同源重组成功地敲除了恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)DLL-E4菌株的偏三苯酚1,2-双加氧酶基因(pnpC).pnpC插入失活菌株DLL-△pnpCl失去了降解对硝基苯酚(PNP)和对苯二酚(HQ)的能力,而pnpC敲除菌株DLL-△pnpC恢复了利用PNP和HQ的能力,但是降解速率降低.在不同硫酸铵分级梯度下PNP和邻苯二酚分别诱导的DLL-E4和DLL-△pnpC粗酶液对邻苯二酚的降解活性存在明显差异,表明恶臭假单胞菌DLL-E4中除pnpC参与PNP降解代谢过程外,还存在另一个双加氧酶替代了敲除的pnpC的功能,使得DLL-△pnpC代谢PNP的过程得以继续.

关键词：恶臭假单胞菌DLL-FA 偏三苯酚1,2-双加氧酶基因对硝基苯酚基因敲除降解

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中度嗜盐菌Halomonas ***-1耐盐相关DNA片段的克隆

引用

应用与环境生物学报 2006年第3期12卷 375-378页

作者：洪青徐剑宏王云端武俊张晓舟李顺鹏南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

通过固体亚硝基胍诱变获得了Halom ***-1的盐敏感突变株BYS-1M.以pBBR1MCS-2为载体在***5α中构建了BYS-1的基因文库.以文库菌***5α(pBBR-X)为供体菌、***803(pRK2013)为辅助菌、BYS-1M为受体菌进行三亲接合,筛选到了恢复耐盐性能的接... 详细信息

通过固体亚硝基胍诱变获得了Halom ***-1的盐敏感突变株BYS-1M.以pBBR1MCS-2为载体在***5α中构建了BYS-1的基因文库.以文库菌***5α(pBBR-X)为供体菌、***803(pRK2013)为辅助菌、BYS-1M为受体菌进行三亲接合,筛选到了恢复耐盐性能的接合子HR-23,提取接合子HR-23的重组质粒pHR23,酶切确定其插入的耐盐相关DNA片段大小分为5.4 kb.该片段为Halom ***-1耐盐相关基因的克隆奠定了基础.

关键词：中度嗜盐菌耐盐相关DNA片段克隆

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

阿特拉津降解菌SA1的分离鉴定及其降解特性研究

引用

微生物学报 2007年第3期47卷 544-547页

作者：代先祝蒋建东顾立锋李荣李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

为进行阿特拉津（AT）污染的生物修复,从AT降解混合菌群中,经长期的交替液体摇瓶培养和平板划线分离,筛选到一株能完全降解AT的菌株SA1.经生理生化特征及16S rDNA序列分析,将该菌鉴定为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）.与已报道的AT降解... 详细信息

为进行阿特拉津（AT）污染的生物修复,从AT降解混合菌群中,经长期的交替液体摇瓶培养和平板划线分离,筛选到一株能完全降解AT的菌株SA1.经生理生化特征及16S rDNA序列分析,将该菌鉴定为假单胞菌属（Pseudomonas sp.）.与已报道的AT降解菌Pseudomonas ***不同,SA1能以AT为唯一碳源、氮源和能源生长,培养基中添加铵盐不抑制SA1的降解功能,而添加葡萄糖时,累积的氰尿酸会被快速降解.SA1生长的最适温度为37℃,最适pH值为***1的静息细胞在10℃～40℃或pH值4～11时均能高效降解AT,比ADP降解具有更广的pH和温度范围,表明SA1降解菌株具有广阔的应用前景.SA1中AT降解基因为保守的atzABCD,并含有IS1071的tnpA基因片段,传代过程中降解基因会以一定频率丢失.

关键词：阿特拉津生物降解分离鉴定降解特性基因转移

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

氯氰菊酯降解菌的筛选鉴定及其降解特性研究

引用

生态与农村环境学报 2009年第3期25卷 69-72页

作者：张丽萍徐莲吴莹林栋青刘欣沈标南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从农药厂废水排放13附近的污泥中分离到1株能降解氯氰菊酯的细菌LQ-3。根据其形态、生理生化特征和16SrDNA（GenBank Accession ***222585）序列分析，将该菌株鉴定为Starkeyasp．。LQ-3菌株只能以共代谢方式降解氯氰菊酯，在有酵母粉... 详细信息

从农药厂废水排放13附近的污泥中分离到1株能降解氯氰菊酯的细菌LQ-3。根据其形态、生理生化特征和16SrDNA（GenBank Accession ***222585）序列分析，将该菌株鉴定为Starkeyasp．。LQ-3菌株只能以共代谢方式降解氯氰菊酯，在有酵母粉、蛋白胨、葡萄糖等营养物质存在的条件下，5d内对20mg·L^-1氯氰菊酯的降解率达到72．1％。LQ-3菌株降解氯氰菊酯的最适温度为30℃左右，pH值为7～8。LQ-3菌株还能降解功夫菊酯、甲氰菊酯、联苯菊酯和溴氰菊酯。酶的定域试验表明，LQ-3菌株降解氯氰菊酯的酶属于胞外酶。

关键词：氯氰菊酯生物降解 Starkeya sp.LQ-3 降解特性酶的定域

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

中度嗜盐菌Halomonas sp. BYS-1启动子的克隆和测序

引用

应用与环境生物学报 2005年第6期11卷 729-732页

作者：洪青张忠辉张晓舟徐剑宏李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

提取了中度嗜盐菌***1的基因组DNA,以甲基对硫磷水解酶基因(mpd)为报告基因,以启动子探针pUCmpd为载体,通过鸟枪法在***5α中构建了BYS1的启动子文库.通过筛选获得了17个阳性克隆,编号为P1～P17.测定了阳性克隆的甲基对硫磷水解酶(MPH)... 详细信息

提取了中度嗜盐菌***1的基因组DNA,以甲基对硫磷水解酶基因(mpd)为报告基因,以启动子探针pUCmpd为载体,通过鸟枪法在***5α中构建了BYS1的启动子文库.通过筛选获得了17个阳性克隆,编号为P1～P17.测定了阳性克隆的甲基对硫磷水解酶(MPH)活性,结果表明,P3中mpd基因的启动子活性最强,它的酶活高达2554.3U/mg,而P17中mpd基因的启动子活性最弱,它的酶活只有68.3U/mg.对P3、P8、P17克隆中的重组质粒的插入片段进行了测序和在线启动子预测.

关键词：中度嗜盐菌启动子克隆测序

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Rhizobium sp.W33对不同植物吸收铜和根际分泌物的影响

引用

环境科学学报 2014年第8期34卷 2077-2084页

作者：陈生涛何琳燕李娅袁彤彤盛下放黄智农业部农业环境微生物重点开放实验室南京农业大学生命科学学院南京210095

通过盆栽试验,采用1株植物促生细菌Rhizobium sp.W33接种黑麦草、狼尾草、高羊茅、紫花苜蓿、猪屎豆、油菜和印度芥菜等7种不同植物,考察了Cu胁迫下菌株对植物生物量、Cu含量和根际土壤中分泌物的影响,并筛选根瘤菌-植物联合修复重金属... 详细信息

通过盆栽试验,采用1株植物促生细菌Rhizobium sp.W33接种黑麦草、狼尾草、高羊茅、紫花苜蓿、猪屎豆、油菜和印度芥菜等7种不同植物,考察了Cu胁迫下菌株对植物生物量、Cu含量和根际土壤中分泌物的影响,并筛选根瘤菌-植物联合修复重金属污染土壤的组合体系,以期初步探明细菌-植物联合修复重金属污染土壤的机制.结果表明,接种Rhizobium sp.W33后,有5种植物的干重增加了11%~56%,增加幅度为印度芥菜>黑麦草>高羊茅>狼尾草>油菜,紫花苜蓿和猪屎豆的干重下降.黑麦草、狼尾草、高羊茅和猪屎豆根内Cu含量接近或超过1000mg·kg-1,Cu大量积累在植物根部.Rhizobium sp.W33能够显著促进黑麦草吸收Cu(p<0.05),并提高其对Cu的富集系数和转移系数,增加根部和地上部的Cu总量.苹果酸是供试植物-细菌联合修复Cu污染土壤的主要有机酸种类,接种根瘤菌W33后黑麦草、狼尾草根际的苹果酸和水溶性糖含量降低,过氧化氢酶活性增加,其中,苹果酸、水溶性糖含量与黑麦草中Cu含量呈显著相关性(p<0.05).因此,根瘤菌W33-黑麦草联合体系修复重金属Cu污染土壤的效果最好,具有应用于重金属Cu污染土壤稳定修复的潜力.

关键词：根瘤菌联合修复铜根际分泌物

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

生物膜中水平基因转移及其促成的生物强化作用

引用

应用与环境生物学报 2006年第3期12卷 441-444页

作者：李蒙英沈标李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室

阐述了生物膜系统中与降解基因有关的水平基因转移的研究进展,表明生物膜中致密的群落结构增加了细菌间水平基因转移的效率.近年发展起来的研究策略和新的分子生物学方法使人们能对自然和人工模拟状态下的水平基因转移进行更精细的分析... 详细信息

阐述了生物膜系统中与降解基因有关的水平基因转移的研究进展,表明生物膜中致密的群落结构增加了细菌间水平基因转移的效率.近年发展起来的研究策略和新的分子生物学方法使人们能对自然和人工模拟状态下的水平基因转移进行更精细的分析,降解基因在环境中的水平传播促进了难降解有机物的生物降解,尤其是携带降解基因的接合质粒向原位细菌种群中的转移在生物强化中具有巨大的潜力.

关键词：生物膜水平基因转移生物强化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：