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赤霉病菌拮抗菌Bacillus subtilis AF0907抗菌物质研究

中国生物防治学报 2015年第3期31卷 378-385页

作者：胡晓丹王建伟李孝敬祭芳史建荣徐剑宏南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室/江苏省转基因安全评价公共服务中心南京210014 江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心南京210014

菌株AF0907是从土壤中分离到的1株对小麦赤霉病菌具有显著拮抗作用的枯草芽孢杆菌,该菌株不仅对小麦赤霉病菌具有很好的拮抗活性,对其他多种植物病原菌都具有很好的拮抗效果。为了明确菌株AF0907对赤霉病菌的抑菌机理,本研究首先使用平... 详细信息

菌株AF0907是从土壤中分离到的1株对小麦赤霉病菌具有显著拮抗作用的枯草芽孢杆菌,该菌株不仅对小麦赤霉病菌具有很好的拮抗活性,对其他多种植物病原菌都具有很好的拮抗效果。为了明确菌株AF0907对赤霉病菌的抑菌机理,本研究首先使用平板对持法对拮抗物质进行定位,结果表明该菌分泌的拮抗物质主要位于细胞上清液中。采用不同饱和度的硫酸铵沉淀细胞上清液,确定了60%的硫酸铵饱和度是沉淀该拮抗物质的最佳条件;分别研究了温度、p H值、蛋白酶K、氯仿对该拮抗物质活性的影响,结果表明该拮抗物质在低温下比较稳定,在60℃以上的高温下,活性迅速降低;在酸性或碱性条件下不稳定;该拮抗物质分别加入蛋白酶K和氯仿作用后拮抗活性分别下降了60.68%、80.07%,因此,初步判断该拮抗物质为蛋白质。利用DEAE-52离子交换柱层析法分离纯化了该拮抗蛋白并进行了SDS-PAGE电泳,结果显示该拮抗蛋白的分子量为48 k Da;利用PPSQ-31A蛋白自动测序仪测定拮抗蛋白N-末端15个氨基酸序列为:His-Glu-Phe-Pro-Thr-Tyr-Lys-His-Met-Tyr-Gln-Val-Met-His-Leu。

关键词：小麦赤霉病菌枯草芽孢杆菌拮抗菌拮抗蛋白

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Delftia sp.T3-6菌株及其粗酶液对2',6'-甲乙基-2-氯乙酰苯胺的降解

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环境科学学报 2014年第6期34卷 1396-1402页

作者：侯颖王飞李静泉董维亮崔中利南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室南京210095 河南科技大学食品与生物工程学院洛阳471003 江西农业大学生物科学与工程学院南昌330045

研究了Delftia sp.T3-6菌株对2’,6’-甲乙基-2-氯乙酰苯胺(CMEPA)的降解特性,以及该菌株胞内酶对CMEPA的酶促特性.结果表明,菌株T3-6对CMEPA有很好的降解性能.反应12 h内,随着CMEPA浓度的增加,反应速度加快;当CMEPA浓度达到500 mg·... 详细信息

研究了Delftia sp.T3-6菌株对2’,6’-甲乙基-2-氯乙酰苯胺(CMEPA)的降解特性,以及该菌株胞内酶对CMEPA的酶促特性.结果表明,菌株T3-6对CMEPA有很好的降解性能.反应12 h内,随着CMEPA浓度的增加,反应速度加快;当CMEPA浓度达到500 mg·L-1时,菌体的降解活性受到一定程度的抑制;在菌体接种量为0.5%~5%的范围内,接种量越大,CMEPA的降解转化速率越快.菌株T3-6降解CMEPA的最适温度为30℃,且其在pH 7~10的范围内对500 mg·L-1CMEPA的降解率均可达50%以上.T3-6菌株对CMEPA降解起催化作用的活性酶为胞内酶,该酶的最适反应温度和pH分别为25℃和8.0;该酶的温度稳定性较差,需在20℃以下贮存;但其在4℃下,pH 6~9的缓冲液中均可保持很好的稳定性.

关键词：乙草胺 2’,6’-甲乙基-2-氯乙酰苯胺代尔伏特菌降解特性

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1株饲用木聚糖酶产生菌的分离、鉴定、发酵、酶学性质及应用

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江苏农业科学 2014年第10期42卷 196-200页

作者：郄卫那张兰英何健贺芹南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 江西省南康市第一小学江西南康341400

以木聚糖为唯一碳源,从长期堆放枯枝败叶的土壤中筛选能够高效降解木聚糖的菌株,并对该菌的产酶条件和酶学性质进行研究。分离得到1株酶活性较高且产酶相对稳定的菌株,鉴定为尖孢镰刀菌,命名为Fusarium oxysporum MJ23。研究表明,木聚... 详细信息

以木聚糖为唯一碳源,从长期堆放枯枝败叶的土壤中筛选能够高效降解木聚糖的菌株,并对该菌的产酶条件和酶学性质进行研究。分离得到1株酶活性较高且产酶相对稳定的菌株,鉴定为尖孢镰刀菌,命名为Fusarium oxysporum MJ23。研究表明,木聚糖、酵母粉是该菌的最适培养底物,在最适培养条件下,该菌株所产木聚糖酶活力可达186 U/mL;木聚糖酶的最适作用温度、pH值分别为55℃、6,55℃保温3 h,酶活力仍可维持90%以上;Ca2+、Fe2+、Mn2+、Tween 80和聚乙二醇对木聚糖酶活力有较强促进作用,Cu2+、Zn2+、EDTA、尿素和SDS则会抑制酶活,其中SDS的抑制作用最强。模拟动物体内对饲料中半纤维素组分的消化,木聚糖酶的添加可使猪饲料中木糖生成量提高28%,鸡饲料中木糖生成量提高16%,表明该菌株所产木聚糖酶具有用作饲料添加剂的可能性。

关键词：木聚糖酶酶学性质产酶条件饲料尖孢镰刀菌

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微生物产木聚糖酶研究进展

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江苏农业科学 2014年第7期42卷 387-391页

木聚糖酶是生物技术领域的研究热点。介绍了木聚糖酶的分类、作用机理、高产菌株的种类及获得、工业应用等,以期为指导木聚糖酶工业化生产与应用建立基础。

关键词：木聚糖酶功能分类作用机理高产菌株工业化应用

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三种不同分子标记技术对灵芝单核体多态性的研究

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食品工业科技 2014年第15期35卷 175-179页

作者：徐凯唐传红张劲松杨焱唐庆九刘艳芳赵明文南京农业大学生命科学学院/农业部农业微生物环境工程重点开放实验室江苏南京210095 国家食用菌工程技术研究中心/农业部南方食用菌资源利用重点实验室/上海市农业科学院食用菌研究所上海201403

为了探讨灵芝***原生质体单核体间遗传多态性,为育种材料的筛选提供分子水平依据。运用ISSR、SRAP、RAPD3种分子标记技术对制得的34株灵芝单核体进行了遗传多样性分析和聚类分析。结果显示,三种分子标记技术共扩增出347条条带,多态性条... 详细信息

为了探讨灵芝***原生质体单核体间遗传多态性,为育种材料的筛选提供分子水平依据。运用ISSR、SRAP、RAPD3种分子标记技术对制得的34株灵芝单核体进行了遗传多样性分析和聚类分析。结果显示,三种分子标记技术共扩增出347条条带,多态性条带为308条,多态比率为88.76%,其中ISSR-PCR扩增效果较好,多态性条带和多态比率最高;119-123与其余菌株相异系数最大,或已发生基因突变。根据综合分析结果,在相异系数为0.67时,可以把剩余33株菌株分为两大类群,Ⅱ类含5株菌株,分别为119-180、119-210、119-212、G0119和119-214,剩余的28株菌株为Ⅰ类。研究表明,ISSR、SRAP和RAPD分子标记可用于灵芝单核体多态性研究,这将为育种材料的筛选提供帮助,减少育种工作量和风险。

关键词：灵芝分子标记遗传多态性

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几种除草剂的微生物降解代谢研究

几种除草剂的微生物降解代谢研究

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中国生物工程学会2014年学术年会暨全国生物技术大会

作者：何健陈青王成红杭宝剑张隽李怡李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室

除草剂大量使用在消除杂草危害、提高劳动生产率的同时,也危害生态环境和人类健康,并对作物产生了严重的药害。目前世界上除草剂有600个品种,常用的有近200种。据统计,我国每年除草剂药害面积达3000万亩,其中严重受害500万亩以上,造成... 详细信息

除草剂大量使用在消除杂草危害、提高劳动生产率的同时,也危害生态环境和人类健康,并对作物产生了严重的药害。目前世界上除草剂有600个品种,常用的有近200种。据统计,我国每年除草剂药害面积达3000万亩,其中严重受害500万亩以上,造成巨大的农业损失。相比较杀虫剂,除草剂的环境行为研究特别是微生物降解方面的研究还很少。

关键词：除草剂微生物降解甲磺隆代谢研究

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几种除草剂的微生物降解代谢研究

几种除草剂的微生物降解代谢研究

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第六届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：何健陈青王成红杭宝剑张隽李怡李顺鹏农业部农业环境微生物重点开放实验室南京农业大学生命科学学院 210095 南京

除草剂大量使用在消除杂草危害、提高劳动生产率的同时,也危害生态环境和人类健康,并对作物产生了严重的药害.目前世界上除草剂有600个品种,常用的有近200种.据统计,我国每年除草剂药害面积达3000万亩,其中严重受害500万亩以上,造成巨...

除草剂大量使用在消除杂草危害、提高劳动生产率的同时,也危害生态环境和人类健康,并对作物产生了严重的药害.目前世界上除草剂有600个品种,常用的有近200种.据统计,我国每年除草剂药害面积达3000万亩,其中严重受害500万亩以上,造成巨大的农业损失.相比较杀虫剂,除草剂的环境行为研究特别是微生物降解方面的研究还很少.大量的生态学研究结果表明：微生物降解代谢是土壤和水体环境中除草剂消失的主要因素.但大部分除草剂的微生物降解代谢途径、参与的酶和基因还不清楚.因此研究除草剂的微生物降解代谢对于阐明除草剂环境行为和生态毒理具有非常重要的意义,同时除草剂降解基因资源在构建抗除草剂转基因作物有巨大应用价值,2012年全球种植了1.7亿公顷的转基因农作物,其中具有抗除草剂性状的占比超过80％,其中绝大多数都是抗草甘膦的性状.

关键词：

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几种除草剂的微生物降解代谢研究

几种除草剂的微生物降解代谢研究

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第十二届全国土壤微生物学术研讨会暨第五届全国微生物肥料生产技术研讨会

作者：何健陈青王成红杭宝剑张隽李怡李顺鹏农业部农业环境微生物重点开放实验室南京农业大学生命科学学院南京210095

在除草剂的微生物降解代谢方面取得了以下进展:1.从生产除草剂的工厂污泥及除草剂污染土壤中富集分离到能降解磺酞脉类除草剂、氯代乙酞胺类除草剂、酞胺类除草剂、麦草畏、杀草丹和氟乐灵等除草剂的细菌菌株20余株;2.二苯醚类化合物是... 详细信息

在除草剂的微生物降解代谢方面取得了以下进展:1.从生产除草剂的工厂污泥及除草剂污染土壤中富集分离到能降解磺酞脉类除草剂、氯代乙酞胺类除草剂、酞胺类除草剂、麦草畏、杀草丹和氟乐灵等除草剂的细菌菌株20余株;2.二苯醚类化合物是很多除草剂和菊醋类农药的合成中间体，也是这些农药的降解代谢产物;3.代谢产物分析表明菌株Sphingomonas sp. DC-6降解乙草胺的代谢途径为:乙草胺脱烷基转化为2-氯-N-(2-甲基-6-乙基苯基)乙酸胺(CMEPA)，然后酸胺断裂生成2-甲基-6-乙基-苯胺(MEA)。通过基因组分析和鸟枪法克隆，从该菌株中克隆到负责乙草胺脱烷基的N-脱烷基酶基因(cndA)和负责CMEPA酰胺键断裂的酞胺酶基因cmeH。CndA是三组份Type Iva型Rieske非血红素铁氧化酶，其活性依赖于铁氧还蛋白和铁氧还蛋白还原酶。4.利用鸟枪法从Paracoccus sp. FLN-7基因组中克隆到酰胺酶基因ampA,AmpA能降解乐果、氧化乐果、氯苯胺灵、苯胺灵、氟虫脲、除虫脲、氟铃脲和敌稗等多种酰胺类农药。 5.从细菌Hansschlegelia zhihuaiae S113基因组克隆到一个酯酶基因sulEo。SulE降解谱广，可将噻吩磺隆、甲磺隆、氯嗜磺隆、苄嗜磺隆、胺苯磺隆等磺酰脲除草剂的酯键水解，生成相应的无除草活性酸产物。SulE分子量较小，具有较宽的pH和温度耐受范围，且其催化活性不需要任何辅因子。将SulE导入到酵母菌S. cerevisiaeBY4741可显著提高该菌对噻吩磺隆和甲磺隆的耐受性，表明SulE在抗除草剂转基因工程具有应用潜力。

关键词：微生物降解代谢菌种分离除草剂生态环境

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灵芝基因组SSR位点分布与分析

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上海农业学报 2014年第5期30卷 32-37页

作者：徐凯张劲松唐传红杨焱唐庆九唐川王天娇赵明文国家食用菌工程技术研究中心/农业部南方食用菌资源利用重点实验室/国家食用菌加工技术研发分中心/上海市农业遗传育种重点实验室/上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 南京农业大学生命科学学院/农业部农业微生物环境工程重点开放实验室南京210095

旨在通过对灵芝基因组SSR位点的统计分析,为担子菌基因组的特征描述、遗传分析及分子标记的筛选提供基础信息。基于数据库中灵芝基因组数据,通过SSR Hunter 1.3软件并结合人工查找的方式分析其SSR数量、组成和位点分布等情况。结果表明... 详细信息

旨在通过对灵芝基因组SSR位点的统计分析,为担子菌基因组的特征描述、遗传分析及分子标记的筛选提供基础信息。基于数据库中灵芝基因组数据,通过SSR Hunter 1.3软件并结合人工查找的方式分析其SSR数量、组成和位点分布等情况。结果表明:灵芝基因组序列总长度为4.19×107bp,13条染色体共存在3 502个SSR位点,SSR碱基总长度为6.92×104bp,占基因组总数的0.17%,平均每隔11.96 kb存在1个SSR位点,三碱基和六碱基SSR所占比例最大,占基因组内SSR位点总数的74.62%,出现较多的基序为(G)n、(C)n、(GA)n、(CT)n、(GAC)n、(TCG)n、(TAATC)n和(GATGAG)n;三核苷酸、五核苷酸和六核苷酸SSR在染色体水平上分布较均匀,而单核苷酸、二核苷酸和四核苷酸SSR分布差异较大。灵芝基因组内SSR分布呈现一定的规律性,基于基因组数据发掘的SSR位点能够为SSR分子标记的开发提供信息,并有助于灵芝高密度遗传图谱的构建、重要功能基因克隆及基因功能的研究等。

关键词：灵芝 SSR 分布位点分析

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Rhodococcus sp.T3-1菌株降解乙草胺的特性

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中国环境科学 2013年第10期33卷 1785-1790页

作者：侯颖王飞董维亮崔中利河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室江苏南京210095 江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045

以乙草胺为唯一碳源，通过摇瓶培养研究了Rhodococcus sp.T3—1对乙草胺的降解特性．结果表明，菌株T3—1降解乙草胺的最适温度为37℃，且其在pH值6～10的范围内对100mg／L乙草胺的降解率均在96％曲7％之间．该菌株在接种量为5％条件下... 详细信息

以乙草胺为唯一碳源，通过摇瓶培养研究了Rhodococcus sp.T3—1对乙草胺的降解特性．结果表明，菌株T3—1降解乙草胺的最适温度为37℃，且其在pH值6～10的范围内对100mg／L乙草胺的降解率均在96％曲7％之间．该菌株在接种量为5％条件下，14h内可将200mg／L的乙草胺降解95.5％：乙草胺的降解速率与乙草胺初始浓度呈负相关，与菌株T3—1的初始接种量呈正相关．菌株T3-1还可以降解丁草胺，但不能降解丙草胺、异丙草胺和毗草胺．

关键词：乙草胺红球菌属降解特性

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