检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2005年第1期45卷 19-22页

作者：高轶静钟增涛郑会明王卉朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验... 详细信息

群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验证明该检测菌株能检测纳摩尔浓度的自体诱导物 ,利用该菌株对 3株不同华癸根瘤菌(Mesorhizobiumhuakuii)进行自体诱导物活性检测 ,发现该 3株华癸根瘤菌均能产生自体诱导物 ,其表达量与菌体密度成正相关 ,但 3株菌在相同培养条件下自体诱导物的表达量存在差异 ,结果表明自体诱导物在种内水平上存在一定的多样性 ;同时发现高pH条件能大大降低自体诱导物的稳定性。

关键词：群体感应自体诱导物华癸根瘤菌

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甲苯降解菌JB-1的分离、鉴定与降解特性

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应用与环境生物学报 2010年第1期16卷 118-121页

作者：冷玲张迹李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从南京石化废水处理池的活性污泥中分离到1株能以甲苯为唯一碳源生长的细菌,命名为JB-1.根据其生理生化特征和16SrDNA(GenBank Accession No. EU869278)序列相似性分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株在18h内能完全... 详细信息

从南京石化废水处理池的活性污泥中分离到1株能以甲苯为唯一碳源生长的细菌,命名为JB-1.根据其生理生化特征和16SrDNA(GenBank Accession No. EU869278)序列相似性分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株在18h内能完全降解346.4mg/L的甲苯.降解甲苯的最适温度为30℃,pH为7.0,降解速率与初始接种量呈正相关.甲苯降解途径是通过甲苯双加氧酶形成顺甲苯二氢二醇,再经邻苯二酚2,3双加氧酶开环降解.

关键词：甲苯生物降解假单胞菌属甲苯双加氧酶邻苯二酚2,3双加氧酶代谢途径

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中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128自体诱导物合成酶基因的克隆及对生理功能的影响

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微生物学报 2008年第10期48卷 1314-1318页

作者：曲媛杨梦华郑会明钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

【目的】从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因,从而研究该基因在Sinorhizobium sp.1128群体感应系统中的作用。【方法】利用基因序列同源性比对以及分子克隆的方法,从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆... 详细信息

【目的】从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因,从而研究该基因在Sinorhizobium sp.1128群体感应系统中的作用。【方法】利用基因序列同源性比对以及分子克隆的方法,从中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128中克隆自体诱导物合成酶基因;利用大肠杆菌异源表达、C18反相薄层层析(TLC)的方法研究该基因的特性;通过中间片段融合的方法缺失该基因,并通过结瘤实验研究该基因对Sinorhizobium sp.1128生理功能的影响。【结果】以草木樨中华根瘤菌Sinorhizobium medicae WSM419自体诱导物合成酶基因Smed_1560序列设计引物,通过PCR扩增在Sinorhizobium sp.1128中寻找到一新的自体诱导物合成基因,命名为traI2。该基因在大肠杆菌Escherichia coli DH5α中表达后能产生两种自体诱导物分子。在Sinorhizobium sp.1128中将该基因缺失,自体诱导物活性下降;回复突变后,自体诱导物活性得到恢复,结瘤实验结果表明该基因能影响根瘤菌的结瘤效率。【结论】中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128群体感应系统是一个复杂的交互系统,它对结瘤的生理功能具有一定的影响。

关键词： Sinorhizobium sp.1128 群体感应自体诱导物合成酶

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富集液中六六六(γ-BHC)脱氯基因的克隆、表达及降解试验

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微生物学报 2005年第1期45卷 44-47页

作者：张国顺洪青马爱芝张晓舟李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液 ,其对六六六 4种异构体的降解效果均为10 0 % ,但至今未能获得纯培养。根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了 4 71bp... 详细信息

从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液 ,其对六六六 4种异构体的降解效果均为10 0 % ,但至今未能获得纯培养。根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了 4 71bp的基因片段 ,命名为linN ,测序结果表明linN与报道的脱氯基因linA和linA2的同源性达 99% ,与linA1的同源性达 97%。将linN定向克隆到pET 2 9α表达载体中 ,转化至E .coliBL2 1,经IPTG诱导后可表达分子量约 17kD的蛋白 ,表达产物占菌体总蛋白的 30 %左右 ;诱导后转化子的降解能力明显提高 ,粗酶也有很好的降解效果。

关键词：富集液六六六脱氯基因克隆和表达

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硝基苯降解菌的分离鉴定及降解特性

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应用与环境生物学报 2011年第2期17卷 243-246页

作者：卢文翔闫新张迹李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从化工厂污水处理池污泥中分离到一株能高效降解硝基苯的菌株XY-1,通过形态观察、生理生化特征和16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株能以硝基苯为唯一碳源、氮源和能源生长,硝基苯初始浓度为200 m... 详细信息

从化工厂污水处理池污泥中分离到一株能高效降解硝基苯的菌株XY-1,通过形态观察、生理生化特征和16SrDNA序列同源性分析,将该菌株鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株能以硝基苯为唯一碳源、氮源和能源生长,硝基苯初始浓度为200 mg/L时,20 h降解率可达97%.该菌在温度25～35℃、pH 7.0～9.0范围内均能高效降解硝基苯,并且对对氯硝基苯、对氯苯胺也有良好的降解效果.测序分析表明,克隆到了该菌中的硝基苯还原酶基因,推测该菌的降解途径是硝基苯部分还原途径.

关键词：硝基苯生物降解假单胞菌属基因克隆污水处理

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农药杀螟硫磷酶促降解的研究

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应用与环境生物学报 2006年第3期12卷 395-398页

作者：张忠辉洪青武俊汪婷李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从长期受农药杀螟硫磷污染的土壤中分离到一株高效降解菌株,研究了其最适产酶条件:培养温度为30℃,培养液起始pH为7.0,培养时间为30 h.从该降解菌中提取的粗酶液在pH 7.5和30℃时显示最大的降解活性,其米氏常数Km为2.92×10-4mol/L... 详细信息

从长期受农药杀螟硫磷污染的土壤中分离到一株高效降解菌株,研究了其最适产酶条件:培养温度为30℃,培养液起始pH为7.0,培养时间为30 h.从该降解菌中提取的粗酶液在pH 7.5和30℃时显示最大的降解活性,其米氏常数Km为2.92×10-4mol/L,最大降解速率为2 422.79 nmolm in-1mg-1.

关键词：杀螟硫磷酶促降解产酶条件酶的性质

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孔雀石绿降解菌Arthrobacter sp.M6的分离及降解特性

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应用与环境生物学报 2010年第4期16卷 581-584页

作者：房桂华李联泰李荣朱建春洪青李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从活性污泥中分离得到一株能以孔雀石绿为唯一碳源和能源生长的细菌M6,根据其形态、生理生化特性以及16S rRNA基因序列相似性分析结果,将其初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.).该菌株在12h内对20mg/L的孔雀石绿降解率高于80%;降解孔... 详细信息

从活性污泥中分离得到一株能以孔雀石绿为唯一碳源和能源生长的细菌M6,根据其形态、生理生化特性以及16S rRNA基因序列相似性分析结果,将其初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.).该菌株在12h内对20mg/L的孔雀石绿降解率高于80%;降解孔雀石绿的最适pH为7.0,最适温度为30℃,降解速率与初始接种量呈正相关.研究结果对于孔雀石绿的生物降解以及含孔雀石绿废水的处理具有重要意义.

关键词：孔雀石绿生物降解节杆菌属降解特性废水处理

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重金属镉抗性菌株的筛选及其对镉活化作用的研究

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生态学杂志 2005年第11期24卷 1357-1360页

作者：夏娟娟盛下放江春玉南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过在培养基中加入一定浓度的Cd2+,从土壤中分离筛选出2株具有较强镉抗性及产酸能力的细菌JL-4和JC-9.经初步鉴定,JL-4和JC-9分别属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.)和黄单胞菌属(Xanthomonas sp.).将菌株JL-4和JC-9接种到添加不溶性镉(100m... 详细信息

通过在培养基中加入一定浓度的Cd2+,从土壤中分离筛选出2株具有较强镉抗性及产酸能力的细菌JL-4和JC-9.经初步鉴定,JL-4和JC-9分别属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.)和黄单胞菌属(Xanthomonas sp.).将菌株JL-4和JC-9接种到添加不溶性镉(100mg·L-1)的培养液中28℃培养48 h,接菌处理比不接菌对照培养液中有效镉含量分别增加1 392.3%和1 410.8%,培养液pH分别降低了2.87和3.18.将JL-4和JC-9分别接入含不同浓度重金属镉(100、200mg·kg-1)的土壤中28℃培养20 d,接菌处理比不接菌对照土壤中有效镉含量分别增加17.02%～100%(JL 4)和36.17%～61.80%(JC-9).菌株JL-4和JC-9的最适生长温度均为28℃,最适pH值分别为7和8.除对镉具有抗性外,两菌株对重金属铅、铜、镍、锌也具有一定抗性.

关键词：重金属污染镉菌株筛选活化

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百脉根根瘤菌群体感应相关基因的克隆与表达

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微生物学报 2006年第6期46卷 1007-1010页

作者：杨梦华钟增涛朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在实验室的纯培养条件下,检测不到百脉根根瘤菌自体诱导物的产生,但是通过基因序列同源性比对分析发现,百脉根根瘤菌基因组中至少含有4种自体诱导物合成酶基因;将其中一个自体诱导物合成酶基因ml4543克隆到大肠杆菌表达载体pET30a,构建... 详细信息

在实验室的纯培养条件下,检测不到百脉根根瘤菌自体诱导物的产生,但是通过基因序列同源性比对分析发现,百脉根根瘤菌基因组中至少含有4种自体诱导物合成酶基因;将其中一个自体诱导物合成酶基因ml4543克隆到大肠杆菌表达载体pET30a,构建得到能异源表达该基因的大肠杆菌重组菌株;对该大肠杆菌重组菌株进行自体诱导物检测发现,该合成酶基因在大肠杆菌中能合成至少3种自体诱导物因子。

关键词：群体感应自体诱导物合成酶百脉根根瘤菌大肠杆菌重组表达

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耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达

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应用与环境生物学报 2008年第4期14卷 534-538页

作者：董晨曹娟张迹沈标南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启... 详细信息

高温α-淀粉酶是发酵行业用量最大的酶类,为了实现高温α-淀粉酶基因的高效表达,本研究比较了不同启动子对地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中表达的影响.分别用强启动子P43和地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子构建了表达载体pP43NMK-amy和pUBC19-amy,并在枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis1A752S中进行表达.结果表明,与地衣芽孢杆菌的耐高温α-淀粉酶基因自身启动子相比,采用P43启动子的耐高温α-淀粉酶其表达水平提高了8.9倍.而且在枯草芽孢杆菌***1A752S中分泌表达的α-淀粉酶仍具有耐高温的特性,酶反应的最适温度为90℃,表明酶的热稳定性由蛋白质本身的氨基酸序列决定的.

关键词：耐高温α-淀粉酶基因启动子P43 amy启动子高效表达

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