检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2021年第4期61卷 1002-1015页

作者：刘军委张璇鲍艺萱徐鉴昳邱吉国何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

【目的】分离并鉴定能够降解除草剂丁草胺的厌氧微生物菌株,研究其厌氧降解丁草胺的特性和代谢途径,为深入研究丁草胺厌氧降解机制提供依据。【方法】以丁草胺为碳源作为选择压力从水稻田土壤中富集驯化丁草胺降解菌,利用16S rRNA基因... 详细信息

【目的】分离并鉴定能够降解除草剂丁草胺的厌氧微生物菌株,研究其厌氧降解丁草胺的特性和代谢途径,为深入研究丁草胺厌氧降解机制提供依据。【方法】以丁草胺为碳源作为选择压力从水稻田土壤中富集驯化丁草胺降解菌,利用16S rRNA基因系统发育分析结合菌株培养特征对降解菌株进行初步鉴定,利用液相色谱-时间飞行质谱(LC-TOF-MS)检测菌株降解丁草胺的代谢产物。【结果】筛选到一株降解丁草胺的厌氧细菌,命名为BAD-20,初步鉴定为嗜蛋白质菌属(Proteiniphilum),菌株BAD-20降解丁草胺的最适条件为温度30–35℃、pH 7.5–8.0和0–0.5%NaCl,在有氧条件下该菌不能降解丁草胺。最适条件下,菌株BAD-20在10 d降解90%的20 mg/L丁草胺。菌株BAD-20还能降解甲草胺、乙草胺、丙草胺,降解效率从高到低依次为甲草胺>乙草胺>丙草胺>丁草胺,对这些氯乙酰胺除草剂的降解动力学符合一级动力学方程。鉴定到2个丁草胺降解代谢产物,分别是N-(2,6-二乙基苯基)-N-(丁氧甲基)乙酰胺(DEPBMA)和N-(2,6-二乙基苯基)乙酰胺(DEPA),表明菌株BAD-20降解丁草胺的起始步骤为脱氯,随后脱去N-丁氧甲基。【结论】本研究富集分离到一株降解丁草胺的厌氧细菌嗜蛋白质菌属(Proteiniphilum)BAD-20,为深入研究丁草胺厌氧降解机制及研发含丁草胺废水厌氧生物处理技术提供依据。

关键词：丁草胺厌氧降解富集分离嗜蛋白质菌属降解特性代谢产物

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赭曲霉毒素A降解菌株的筛选及脱毒酰胺水解酶的基因克隆和表达

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微生物学通报 2023年第7期50卷 2837-2847页

作者：刘斌全思语张豪宋卓琳黄明珠何健陈雪岚江西师范大学生命科学学院江西南昌330022 江西师范大学国家淡水鱼加工技术研发专业中心江西南昌330022 南京农业大学生命科学学院农业农村部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

【背景】赭曲霉毒素A (ochratoxin A, OTA)是一种可以致癌的真菌毒素,其污染严重影响食品安全,危害人类健康。生物降解法去除OTA污染是近些年的研究热点,发掘高效的OTA降解脱毒酶资源具有重要的意义。【目的】筛选高效的OTA降解菌株并... 详细信息

【背景】赭曲霉毒素A (ochratoxin A, OTA)是一种可以致癌的真菌毒素,其污染严重影响食品安全,危害人类健康。生物降解法去除OTA污染是近些年的研究热点,发掘高效的OTA降解脱毒酶资源具有重要的意义。【目的】筛选高效的OTA降解菌株并从中克隆降解基因,为生物脱毒方法的开发提供基因和酶资源。【方法】利用OTA为唯一碳源的筛选培养基从土壤中筛选纯化OTA降解菌株,通过16SrRNA基因序列分析确定其分类地位,利用高效液相色谱(high performanceliquidchromatography,HPLC)分析其降解产物。通过同源序列比对的方法克隆降解基因并与载体pET-29a(+)相连,然后在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。利用Ni2+亲和层析对表达产物进行纯化,研究其对OTA的降解活性和酶学特征。【结果】筛选到一株高效的OTA降解菌株,在12h内能够完全降解1μg/mL的OTA;初步鉴定该菌株属于Niastella,编号为JX-6;菌株JX-6通过酰胺键断裂途径降解OTA生成无毒的OTα;从菌株JX-6中鉴定了一个OTA酰胺水解酶,命名为NcOTase;NcOTase与已报道的OTA酰胺水解酶序列相似性较低,仅为31%–53%;纯化的NcOTase具有OTA水解活性,比酶活为60.3U/mg,活性显著高于大部分已报道的OTA降解酶。【结论】NcOTase是一个高效的OTA降解脱毒酶,在去除食品和饲料中OTA污染方面具有很好的应用前景。

关键词：真菌毒素赭曲霉毒素A 生物降解酰胺水解酶酶活性

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1株伏马毒素B_(1)降解真菌的筛选及降解特性分析

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食品科学 2023年第14期44卷 79-85页

作者：白青云高红侠胡俊强于阳光邱涵张宇航徐剑宏淮阴工学院生命科学与食品工程学院江苏淮安223003 江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地农业农村部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(南京)江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏南京210014 南京农业大学生命科学学院农业农村部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

为筛选能够降解伏马毒素B_(1)(fumonisin B_(1),FB_(1))的真菌,将伏马毒素污染严重的玉米样品磨碎处理,采用富集培养的筛菌方法获得目的菌株,将所得菌株命名为FDS-2,对其进行菌种鉴定、生长特性与降解特性分析,并探究该菌株对FB_(1)的... 详细信息

为筛选能够降解伏马毒素B_(1)(fumonisin B_(1),FB_(1))的真菌,将伏马毒素污染严重的玉米样品磨碎处理,采用富集培养的筛菌方法获得目的菌株,将所得菌株命名为FDS-2,对其进行菌种鉴定、生长特性与降解特性分析,并探究该菌株对FB_(1)的初步降解途径。根据FDS-2的培养特征、显微特征以及rRNA-ITS序列特征构建的系统进化树,该菌被鉴定为棘状外瓶霉(Exophiala spinifera)。菌株的最适生长与降解条件为30℃、pH 5.0,在此条件下,菌株可在48h内将250μg的FB_(1)降解完全。通过降解物质定位实验,确定FDS-2中降解活性物质是位于细胞内的降解酶。使用液相色谱-质谱分析降解产物,确定初步降解途径为FDS-2首先把FB_(1)降解成为水解FB_(1)。本研究为粮食和饲料中伏马毒素的生物降解提供了菌种资源和理论基础。

关键词：伏马毒素B_(1) 生物降解棘状外瓶霉降解途径

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哈尼梯田稻鲤共作与单养模式下福瑞鲤肠道菌群结构比较研究

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微生物学报 2022年第4期62卷 1473-1484页

作者：聂志娟徐钢春邵乃麟王保战高建操徐跑何健南京农业大学生命科学学院农业农村部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214128

【目的】分析不同养殖模式的福瑞鲤肠道菌群结构组成和群落特征。【方法】通过16S rRNA高通量测序技术,分析比较哈尼梯田稻鲤共作、传统池单养、水泥池单养模式下的福瑞鲤肠道菌群的结构组成和丰度差异。【结果】梯田稻鲤组(RCIC)、传... 详细信息

【目的】分析不同养殖模式的福瑞鲤肠道菌群结构组成和群落特征。【方法】通过16S rRNA高通量测序技术,分析比较哈尼梯田稻鲤共作、传统池单养、水泥池单养模式下的福瑞鲤肠道菌群的结构组成和丰度差异。【结果】梯田稻鲤组(RCIC)、传统池鲤组(YPIC)和水泥池鲤组(HPIC)分别获得了2345、238和118个OTU。RCIC组的Sobs指数及PD指数最高,显著高于YPIC组(P<0.05),极其显著高于HPIC组(P<0.01);池塘单养模式下,两组之间多样性指数也存在显著差异,YPIC组大于HPIC组(P<0.05)。含量大于10%优势菌门:RCIC组主要为变形菌门(39.39%)、梭杆菌门(38.55%)和厚壁菌门(15.4%);YPIC组为变形菌门(21.87%)、梭杆菌门(58.27%);HPIC组为变形菌门(46.63%)、梭杆菌门(53.14%)。变形菌和梭杆菌为3组福瑞鲤肠道样品的优势菌群,其中的鲸杆菌属(Cetobacterium)、气单胞菌属(Aeromonas)为核心优势菌属。LEfSe线性判别分析(LDA>3)显示17个具有差异的标记菌属,其中Romboutsia、Clostridium_sensu_stricto_1、Enterobacter、Paraclostridium、Methylobacterium、norank_f__norank_o__Chloroplast、Edwardsiella、Epulopiscium为RCIC组具有的差异标记菌属。【结论】不同养殖模式的福瑞鲤既有固有菌群,也塑造差异显著的肠道菌群组成结构。稻梯田鲤肠道菌群丰富度和多样性显著增加,且具有更多的有益差异标记菌属,获得更健康的肠道菌群群落特征。

关键词：哈尼梯田稻-鲤综合种养菌群结构肠道高通量测序

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定向进化提高磺酰脲类除草剂脱毒酯酶SulE的活性

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应用与环境生物学报 2020年第5期26卷 1075-1080页

作者：刘斌杨洲刘军委陈乐彭乾何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

磺酰脲除草剂脱毒酯酶SulE对噻磺隆活性极高,但对其他磺酰脲类除草剂活性很低,这限制了在磺酰脲除草剂残留污染生物修复和抗磺酰脲除草剂作物培育中的应用价值.利用Escherichiacoli DH10B (ilvG+)对甲磺隆的敏感性为筛选标记,从sulE基... 详细信息

磺酰脲除草剂脱毒酯酶SulE对噻磺隆活性极高,但对其他磺酰脲类除草剂活性很低,这限制了在磺酰脲除草剂残留污染生物修复和抗磺酰脲除草剂作物培育中的应用价值.利用Escherichiacoli DH10B (ilvG+)对甲磺隆的敏感性为筛选标记,从sulE基因随机突变库中筛选获得了一个酶活性显著提高的突变体mSulE.与野生型相比,突变体mSulE对甲磺隆、甲嘧磺隆、苯磺隆和胺苯磺隆的比酶活分别提高了8.29、8.61、1.50和4.04倍.测序结果表明,突变体mSulE氨基酸序列发生了2处替换,分别为Y81T和S178N.三维结构模拟表明,2个突变位点都在酶活性中心附近,突变体mSulE酶活提高的原因可能是Y81突变为T增加了催化口袋的面积,以及S178突变为N增加了氨基酸残基之间的氢键作用力.综上所述,突变体mSulE对大部分磺酰脲除草剂的活性要高于野生型,在磺酰脲除草剂残留污染生物修复和抗除草剂转基因工程中具有很好的应用前景.(图6表1参30)

关键词：磺酰脲类除草剂酯酶SulE 定向进化酶活性同源建模

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二硝基苯胺类除草剂微生物降解研究进展

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微生物学通报 2020年第1期47卷 282-294页

作者：曹敏何健倪海燕江西师范大学生命科学学院江西南昌330022 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

二硝基苯胺类除草剂是一类广谱、高效且广泛使用的除草剂,微生物的降解代谢作用是其在环境中消解的最主要因素。分离筛选除草剂的高效降解菌株、分析其降解途径并阐明其微生物降解机制,可为除草剂残留污染的微生物降解修复提供理论依据... 详细信息

二硝基苯胺类除草剂是一类广谱、高效且广泛使用的除草剂,微生物的降解代谢作用是其在环境中消解的最主要因素。分离筛选除草剂的高效降解菌株、分析其降解途径并阐明其微生物降解机制,可为除草剂残留污染的微生物降解修复提供理论依据和优良的降解菌株、降解基因和酶资源。本文简述了二硝基苯胺类除草剂的微生物降解菌株、降解代谢途径和降解基因/酶的研究进展,为进一步研究该类除草剂的微生物降解及其污染生物修复提供理论依据和资源。

关键词：二硝基苯胺类除草剂微生物降解降解资源生物修复

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禾谷镰刀菌拮抗菌Bacillus amyloliquefaciens AX-3的分离鉴定及拮抗物质的鉴定

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中国生物防治学报 2020年第1期36卷 125-134页

作者：徐丽梅赫丹王刚徐圣佳史建荣徐剑宏南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业农村部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室/农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(南京)/江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心/江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所南京210014

禾谷镰刀菌Fusarium graminearum可引起小麦赤霉病,该病严重威胁我国小麦的质量安全。本研究从生物防治的角度出发,分离筛选拮抗菌,研究拮抗菌的拮抗特性和拮抗能力。试验采用系列稀释法和平板对峙法从小麦样品中分离筛选获得禾谷镰刀... 详细信息

禾谷镰刀菌Fusarium graminearum可引起小麦赤霉病,该病严重威胁我国小麦的质量安全。本研究从生物防治的角度出发,分离筛选拮抗菌,研究拮抗菌的拮抗特性和拮抗能力。试验采用系列稀释法和平板对峙法从小麦样品中分离筛选获得禾谷镰刀菌拮抗菌AX-3,根据16SrDNA基因、gyrB基因序列构建的系统发育进化树以及生理生化特性结果,菌株AX-3被鉴定为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens。通过平板对峙法测定拮抗谱,结果显示AX-3对多种镰刀菌属病原真菌都具有良好的拮抗特性,抑菌圈半径为17~32 mm,表明AX-3具有广谱的拮抗性能。采用柱层析及制备液相色谱法对AX-3中的拮抗物质进行分离纯化,然后使用高分辨质谱及核磁共振的方法对拮抗物质进行结构鉴定表明,解淀粉芽胞杆菌AX-3产生的一种抗菌物质为macrolactin A。

关键词：禾谷镰刀菌解淀粉芽胞杆菌拮抗物质

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杀草丹降解菌Bacillus sp. T2的筛选、鉴定及降解特性

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应用与环境生物学报 2018年第4期24卷 921-927页

作者：褚翠伟刘斌朱启黎李娜何健周口师范学院生命科学与农学学院周口466001 南京农业大学生命科学学院、农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 江西省南康市教师进修学校赣州341400

为研发稻田除稗剂杀草丹污染环境的生物修复技术和探究杀草丹微生物降解代谢机制,通过微生物驯化与富集技术,从长期施用杀草丹水稻田土样中分离纯化一株能够以杀草丹为唯一碳源生长的高效降解菌株T2,在36 h内对0.4 mmol/L的杀草丹降解... 详细信息

为研发稻田除稗剂杀草丹污染环境的生物修复技术和探究杀草丹微生物降解代谢机制,通过微生物驯化与富集技术,从长期施用杀草丹水稻田土样中分离纯化一株能够以杀草丹为唯一碳源生长的高效降解菌株T2,在36 h内对0.4 mmol/L的杀草丹降解率达到98.3%以上.根据其形态、生理生化特征及16S rRNA基因序列相似性分析,将其初步鉴定为芽孢杆菌属（Bacillus sp.T2）.通过GC-MS鉴定产物为对氯苄硫醇、对氯苯甲醛和对氯苯甲酸;依据产物鉴定结果推测菌株T2通过硫酯键水解的方式起始杀草丹的降解,首先将其转化为对氯苄硫醇,随后进一步被氧化为对氯苯甲醛和对氯苯甲酸,该降解途径可能是一种新的杀草丹微生物降解代谢途径.因此菌株Bacillus sp.T2对杀草丹具有非常高的降解效率,在污染环境的微生物修复方面具有很好的应用前景;本研究结果也为揭示土壤中杀草丹微生物降解代谢过程及机制提供了研究材料和理论依据.

关键词：杀草丹芽孢杆菌菌株筛选鉴定降解特性降解机制

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亚硝酸盐对EBPR工艺除磷效率的影响

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南京农业大学学报 2017年第2期40卷 266-272页

作者：乐星星顾向阳南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

[目的]比较亚硝酸盐对不同进水碳源驯化的强化生物除磷(EBPR)污泥除磷活性的抑制作用,分析亚硝酸盐影响EBPR污泥除磷效率的机制。[方法]采用厌氧-好氧型序批式生物反应器(SBR),分别以乙酸(SBR-1)和丙酸(SBR-2)为进水碳源驯化EBPR污泥,... 详细信息

[目的]比较亚硝酸盐对不同进水碳源驯化的强化生物除磷(EBPR)污泥除磷活性的抑制作用,分析亚硝酸盐影响EBPR污泥除磷效率的机制。[方法]采用厌氧-好氧型序批式生物反应器(SBR),分别以乙酸(SBR-1)和丙酸(SBR-2)为进水碳源驯化EBPR污泥,待反应器达到稳态运行状态后取1个运行周期,定期取样测定混合液中磷酸根和亚硝氮质量浓度的周期变化,比较亚硝酸盐对2种EBPR污泥除磷活性的影响,测定2种EBPR污泥的脱氮活性;通过研究亚硝酸盐对运行周期中聚磷菌胞内聚羟基烷酸(PHA)和糖原合成与分解代谢的影响,分析亚硝酸盐抑制EBPR除磷活性的机制。[结果]以乙酸为进水碳源的SBR-1和以丙酸为进水碳源的SBR-2分别经过8和11 d的驯化期成功实现了稳定的EBPR功能,除磷效率稳定在98%以上;较高浓度的亚硝酸盐对乙酸驯化的EBPR污泥和丙酸驯化的EBPR污泥均可产生抑制作用,其中以丙酸驯化的EBPR污泥对亚硝酸盐更为敏感,在亚硝氮质量浓度大于或等于5 mg·L^(-1)时即会丧失磷的吸收功能;乙酸驯化的EBPR污泥和丙酸驯化的EBPR污泥均有一定的脱氮能力,以乙酸为碳源驯化而成的EBPR污泥其脱氮活性明显高于丙酸驯化而成的EBPR污泥;在亚硝酸盐抑制除磷活性的同时聚磷菌胞内PHA和糖原代谢也受到明显的抑制作用。[结论]与乙酸驯化的EBPR污泥相比,丙酸驯化的EBPR污泥对亚硝酸盐引起的抑制作用更为敏感,以乙酸为进水碳源有利于EBPR工艺的稳定运行。

关键词：强化生物除磷亚硝酸盐糖原聚羟基烷酸

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中度嗜盐菌Halomonas sp. W2的分离和鉴定及其高产四氢嘧啶特性研究

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南京农业大学学报 2017年第1期40卷 109-115页

作者：姚倩倩顾向阳南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

[目的]从含盐环境中富集分离中度嗜盐菌,并进行菌种鉴定,分析确定与耐盐特性相关的主要相容性溶质,探索利用分离菌株合成四氢嘧啶的可行性。[方法]从盐池土中富集分离耐盐或嗜盐的乙酸降解菌,通过生理生化特性测定和16S rDNA序列的分析... 详细信息

[目的]从含盐环境中富集分离中度嗜盐菌,并进行菌种鉴定,分析确定与耐盐特性相关的主要相容性溶质,探索利用分离菌株合成四氢嘧啶的可行性。[方法]从盐池土中富集分离耐盐或嗜盐的乙酸降解菌,通过生理生化特性测定和16S rDNA序列的分析,将所得菌株鉴定至相应的属或种。通过摇瓶试验研究分离菌株耐盐生长的特征,从所得的菌株中提取、分析相容性溶质并测量其含量,初步分析分离菌株耐盐生长的机制。在高盐培养基中诱导嗜盐菌胞内相容性溶质的合成,然后在低渗盐溶液中测定相容性溶质的释放率,之后再将菌体转移至高渗培养基中研究相容性溶质重新合成的效率。[结果]从盐池土中成功分离到一株中度嗜盐菌W2,根据生理生化特性和16S rDNA序列比对结果,菌株W2属于Halomonas属,其16S rDNA序列与Halomonas ventosae Al12~T(AY268080)的相似性最高(99.93%)。菌株W2可耐受的NaCl质量浓度范围为25~200 g·L^(-1),其最适生长所需的NaCl质量浓度为100 g·L^(-1)。在高盐培养基中菌株W2单位质量细胞合成的四氢嘧啶产率达161 mg·g^(-1),占胞内4种相容性溶质总量的70.8%。低渗条件下导致W2菌体内四氢嘧啶释放的最适盐质量浓度为30 g·L^(-1),低渗冲击5 min以后释放率达61.2%,而转入高渗培养基中培养3 h后即可重新合成。[结论]Halomonas sp.W2是一株以四氢嘧啶为主要相容性溶质的中度嗜盐菌,该菌四氢嘧啶的产率较高,而且具有高渗合成、低渗释放的功能,因而在四氢嘧啶的生物合成中具有较好的应用潜力。

关键词：中度嗜盐菌四氢嘧啶细菌泌乳高渗-低渗冲击

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